口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定操作程序的确立

为优化用于口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定的改良Lowry法,进而确立口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量测定的操作程序,探索了有机溶剂破乳剂、酚红以及丙酮沉淀对测定结果影响。结果表明：样品中含酚红和有机溶剂均导致测定值较标准值高;有机溶剂破乳后,水相样经过丙酮沉淀测定值较标准值低;丙酮直接沉淀疫苗后测定蛋白质值与标准值符合度最高,丙酮沉淀回收率随蛋白浓度升高而升高,回收率在90％～100％之间。试验首次确立了改良Lowry法检测口蹄疫灭活疫苗中蛋白质含量的操作程序为丙酮直接沉淀疫苗后测定蛋白质浓度。并成功应用于口蹄疫灭活疫苗蛋白质含量的测定。     

梅花鹿茸水溶性蛋白质的浸提及含量测定

建立考马斯亮蓝显色法(Bradford法)测定梅花鹿茸水溶性蛋白质含量的方法,研究鹿茸不同规格和部位水溶性蛋白含量的变化;比较干燥和超微粉碎加工法对梅花鹿茸水溶性蛋白含量的影响。采用建立的Bradford检测法,以水溶性蛋白含量为指标,对梅花鹿茸的浸提方法,超声波次数,超声波方式进行比较选择,确定最佳浸提条件为0.1 g的鹿茸粉,加入pH 7.4的PBS(0.01 mol/L)4 mL,37℃浸提30 min,4℃冷浸24 h,超声波130 W 4 min处理3次,4℃,6 800 r/min离心8 min。结果表明:梅花鹿茸二杠茸水溶性蛋白为59.275~648.225μg/mL,梅花鹿三杈茸水溶性蛋白为55.878~683.721μg/mL。二杠茸高于三杈茸;烘干二杠茸不同部位的含量变化为粉片高于蜡片,腊片高于纱片和骨片,纱片和骨片相近;冻干茸高于烘干茸;3种超微粉碎鹿茸间水溶性蛋白含量差异不显著。     

酵母源生物饲料蛋白质含量检测方法评估

酵母源生物饲料是以酵母为载体,依托现代生物技术,运用微生物发酵和酶解工艺,而获得的具有特定功能和营养性的饲料和饲料添加剂产品。本试验分别采用了凯氏定氮法、Folin-酚法和考马斯亮蓝法对饲用高活性干酵母、酵母细胞壁多糖和复合酵母进行蛋白质含量的测定。     

一种蛋白质含量测定方法的改进研究

在食品、医药、生物学、生物化学中常用到蛋白质含量的测定,随着分析手段的不断进步,蛋白质含量的测定方法也正在向准确、快速的方向发展。根据蛋白质的性质,测定方法分为两大类:一类是利用蛋白质的共性,如含氮量、肽键和折射率等测定蛋白质含量,通常采用经典的凯氏定氮法[1,2],目前已有采用红外连续消化、自动蒸馏和自动滴定装置的自动凯氏定氮仪;另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性基团、碱性基团和芳香基团测定蛋白质含量,有水杨酸比色法[3]、双缩脲法[4]、皮尼克法、Bradford检测法(考马斯亮蓝染色法)[5]、Lowry检测法(FoLin-…     

浅谈口蹄疫灭活疫苗的生产工艺

灭活疫苗仍然是当前防控口蹄疫使用的主要疫苗,因此研究灭活疫苗生产工艺具有非常重要的现实意义。详细论述了口蹄疫灭活疫苗生产过程,并对近年来生产工艺方面的一些研究进展做了简要介绍。     

用凯氏定氮法测定食品中的蛋白质含量

为了更加精确的运用凯氏定氮法检测分析食品中蛋白质的含量,本文分别用全量凯氏定氮法、微量凯氏定氮法和凯氏自动定氮仪来测定了食品中的蛋白质的含量,结果发现用两种方法对同一样品中的蛋白质含量得出数值高低不同,全量凯氏定氮法的结果更加精确,微量法次之。     

口蹄疫灭活疫苗的生产工艺概述

灭活疫苗仍然是当前防控口蹄疫使用的主要疫苗,因此研究灭活疫苗生产工艺具有非常重要的现实意义.详细论述了口蹄疫灭活疫苗生产过程,并对近年来生产工艺方面的一些研究进展做了简要介绍.     

基于凯氏定氮法测定鸡蛋蛋白质含量的研究分析

文章采用凯氏定氮法检测了市场出售的家养土鸡蛋及养鸡场的洋鸡蛋的蛋白质含量,并比较了两种鸡蛋中蛋清重量。结果表明,每毫升土鸡蛋和洋鸡蛋蛋清的质量无显著差异（P> 0.05）。两种鸡蛋中蛋白质的含量对比为土鸡蛋>洋鸡蛋,土鸡蛋和洋鸡蛋中的蛋白质含量存在显著差异（P <0.05）。4种禽蛋中的蛋白质含量对比为鸽子蛋>鸭蛋>鹅蛋>鹌鹑蛋,并且土鸡蛋蛋白质含量比其他禽蛋中蛋白质含量都要高。     

不同检测方法对牛奶中蛋白质含量的检测研究

在牛奶的营养成分中,蛋白质含量是衡量牛奶质量的核心指标。因此,文章探索两种牛奶中蛋白质含量的检测方法。为比较凯氏定氮法和杜马斯燃烧法测定牛奶中蛋白质含量的准确性,对市面上出售的3种牛奶样品（即全脂纯牛奶、脱脂纯牛奶、发酵乳）进行测定。并讨论了牛奶样品温度对蛋白质含量测定结果的影响,结果表明,牛奶样品的温度对凯氏定氮法、杜马斯燃烧法的蛋白质检测结果没有显著影响。随后,使用凯氏定氮法与杜马斯燃烧法测定了这3种牛奶中蛋白质含量,试验结果显示,这两种方法均能准确测定牛奶样品中的蛋白质含量,检测结果存在显著差异（P <0.05）。3种牛奶中的蛋白质含量对比为全脂纯牛奶>脱脂纯牛奶>发酵乳。凯氏定氮法测定结果的相对误差均小于杜马斯燃烧法的相对误差,这表明凯氏定氮法比杜马斯燃烧法的准确度略高。     

饲料蛋白质测定方法的研究进展

本文对凯氏定氮法、分光光度法、滴定法等在蛋白质测定中的应用,及各种方法的特点和适用条件进行综述.     

猪口蹄疫O型灭活疫苗PD50效检攻毒方式探索

用10 000 TCID50的OR/80株F13细胞毒或用10 000 LD50的OR/80株乳鼠组织毒(ORMF8),通过肌肉注射途径、蹄踵球部或趾间皮内注射途径接种O型口蹄疫抗体阴性架子猪进行攻毒试验,三种途径均不能使试验猪产生规律性发病.     

山羊痘灭活疫苗免疫保护试验

将山羊痘GT4-STV42-56种毒在犊牛睾丸细胞上繁殖,收获毒液,用0.1%甲醛溶液灭活,加适量206佐剂,制成山羊痘油佐剂灭活疫苗.将疫苗以不同剂量皮下免疫接种不同种群的山羊.免疫后21 d,用AV40株强毒进行攻毒保护试验.结果显示,免疫剂量达0.5 mL时,疫苗对内蒙绒山羊的保护率为100%,对广西黑山羊的保护率为80%.实验表明,山羊痘灭活疫苗对山羊的免疫效果确实可靠.     

应用BALB／c小鼠评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力

用不同剂量的口蹄疫灭活疫苗免疫3组雌性BALB／c小鼠，同时设空白对照组，每组8只。免疫后每7d采血一次，用液相阻断ELISA（LPB-ELISA）检测血清抗体水平；第28d用800LD50同源强毒攻击，攻毒后36h，每组随机选取3只BALB／c小鼠，采全血，分别用每只BALg／c小鼠全血注射12只乳鼠，每组共注射36只乳鼠，以乳鼠试验判定BALB／c小鼠的病毒血症和攻毒保护情况。结果表明，免疫组BALB／c小鼠均可产生特异性抗体，保护率分别为75．0％、63．9％、36．1％；对照组小鼠血清抗体为阴性。提示，BALB／c小鼠可以用来评价口蹄疫灭活疫苗的免疫效力。     

新城疫油佐剂灭活疫苗对鸽的免疫试验

用新城疫 (ND)油佐剂灭活疫苗以 1mL/只注射鸽子 ,试验鸽无不良反应 ;以 0 1mL/只免疫鸽子后 ,试验鸽在 2 4天时HI水平从免疫前的 0上升到 2 7 3 ,经ND标准强毒攻击 ,免疫鸽获 6 /6的全保护     

猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗组合与猪口蹄疫O型灭活苗同时分点免疫效果评价

推广猪瘟、高致病性猪蓝耳病疫苗组合与猪O型口蹄疫灭活苗同时分点免疫（三苗两点同步免疫）技术,免疫45 d后随机对规模养猪场及部分散养户68头猪进行了免疫效果评价.结果表明,三苗两点同步免疫临床上无严重的不良反应,且免疫后抗体有效保护率均达70％以上,该技术可在基层动物防疫中大力推广应用.     

应用高效体积排阻色谱法测定市场抽检口蹄疫灭活疫苗中的抗原（146S）含量

应用高效体积排阻色谱法对5批市场抽检口蹄疫灭活疫苗中有效抗原(146S)含量进行检测,并使用口蹄疫O型、A型和亚洲1型抗原测试卡对5批疫苗中的抗原进行鉴别。结果显示高效体积排阻色谱法测定146S标准品浓度与峰面积线性关系良好,5批疫苗均检测到146S特征吸收峰(R2=0.9937,n=7),经计算得到灭活疫苗中有效抗原含量分别为2.05、3.73、2.03、4.87、3.41μg/m L;使用抗原测试卡鉴别了5批疫苗中的抗原类型。结果表明,高效体积排阻色谱法简便、高效,准确度较高,有望在口蹄疫灭活疫苗的质量控制中发挥重要作用。     

口蹄疫疫苗效检模型动物测毒及口蹄疫种毒冻干试验

应用豚鼠作为口蹄疫疫苗效检模型动物检测口蹄疫病毒对模型动物的病原性.用体重400 g左右的豚鼠,将猪O型口蹄疫灭活疫苗效检攻毒毒株ORMF8经后肢蹠部皮内注射途径进行测毒.测毒结果表明,口蹄疫病毒可引起豚鼠出现典型发病,并产生明显病变,ORMF8种毒对豚鼠的毒价可达105.5ID50/0.2 mL.将乳鼠中和试验用种毒OMⅡ按一定比例加入5%蔗糖脱脂牛奶稳定剂进行冷冻真空干燥试验,3次冻干试验结果表明,种毒冻干后病毒含量有一定程度的下降,但下降程度不显著.     

牛冠状病毒灭活疫苗的免疫效力试验

为了评价制备的牛冠状病毒灭活疫苗的免疫效力,试验选用分离鉴定出来的牛冠状病毒(BCV-YC分离株)为制苗种毒,接种HRT-18细胞进行增殖,收集上清液进行超速离心浓缩,最后加入甲醛灭活制成油乳剂灭活疫苗,分别接种小鼠和妊娠母牛。结果表明,疫苗不仅使小鼠具有一定的保护力,而且使妊娠母牛也能产生较高的抗体水平,犊牛攻毒试验证明,产生的母源抗体能使初生犊牛抵抗牛冠状病毒的攻击。说明制备的牛冠状病毒灭活疫苗对抵抗牛冠状病毒感染具有良好的保护性。     

乳牛衣原体病灭活疫苗的研制

将免疫原性稳定的鹦鹉热衣原体SX5菌株灭活，加入油佐剂制备乳牛衣原体病灭活疫苗，并对疫苗的安全性进行了检测。用该疫苗对成年牛和犊牛进行了最小免疫量试验、效力试验和免疫持续期试验；结果表明，最小免疫量分别为3mL和5mL，平均免疫保护率达94．4％。免疫持续期达10个月。疫苗保存期试验表明，在4℃条件下可保存12个月。本动物安全试验和田间小试免疫证明，该疫苗安全性好，乳牛注射疫苗后饮食、产乳量及注苗部位没有明显的异常变化。