增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

为评价增精宝对雄性动物生精作用的影响,采用环磷酰胺致小鼠生精障碍为动物模型,考察不同剂量增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍的保护作用。结果显示,高剂量组对小鼠的附睾、睾丸、储精囊和前列腺均有较显著的促进作用;低剂量组精子总密度和精子活率均差异显著(P<0.05);高剂量组精子活率差异显著(P<0.05);对小鼠睾丸各倍体生精细胞比例的影响,高剂量组小鼠睾丸生精小管较为饱满,管腔内存在大量精子,生精上皮较厚,可见各级生精细胞排列整齐,界膜明显,睾丸间质细胞排列整齐。结论表明,增精宝两种剂量均能够显著促进环磷酰胺导致小鼠生精障碍的保护作用,高剂量组对雄性小鼠的作用尤为显著。     

菟丝子水提液对环磷酰胺致雄性小鼠生殖损伤的保护作用研究

为了探讨菟丝子水提液对环磷酰胺(CP)所致雄性小鼠生殖损伤的保护作用,试验对SPF级KM雄性小鼠腹腔注射CP制作生殖损伤模型,再将其分为CP对照组及高、中、低剂量菟丝子组,各剂量组小鼠灌胃给予菟丝子水提液,观察菟丝子水提液对CP所致生殖损伤小鼠附睾系数、睾丸系数、精子密度、精子活率、精子活力、精子畸形率、睾丸形态的影响。结果表明:与CP对照组比较,高、中、低剂量菟丝子组均可显著提高小鼠附睾系数、睾丸系数、精子密度、精子活率、精子活力,并降低精子畸形率(P0.05)。同时,与CP对照组相比较,高、中、低剂量菟丝子组小鼠睾丸生精上皮明显变厚,生精细胞和间质细胞数量明显增多,管腔内各级精母细胞和精子细胞明显增多。说明菟丝子水提液对CP所致雄性小鼠生殖损伤具有保护作用。     

中药多糖对人工感染大肠杆菌和金黄色葡萄球菌小鼠的免疫增强作用研究

目的:通过测定感染大肠杆菌或金黄色葡萄球菌小鼠服用黄芪多糖、淫羊藿多糖前后的IgG水平、脾脏指数等,探讨黄芪多糖、淫羊藿多糖对小鼠免疫功能的影响。方法:大肠杆菌组:设有空白对照组、黄芪多糖组、淫羊藿多糖组、黄芪-淫羊藿多糖组、黄芪多糖大肠杆菌组、淫羊藿多糖大肠杆菌组、黄芪-淫羊藿多糖大肠杆菌组、空白大肠杆菌组,取80只昆明白雌鼠,平均分为8组,每组10只。金黄色葡萄球菌组的分组同大肠杆菌组。实验期为8 d,分别于第1、4、7天进行腹腔注射,最后一次腹腔注射完毕24 h,处死小鼠,测定体质量、脾脏质量,计算脾脏指数,观察小鼠免疫器官质量的变化;用ELISA法检测小鼠血清中IgG水平的变化。结果:黄芪-淫羊藿多糖金黄色葡萄球菌组比空白金黄色葡萄球菌组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05),黄芪-淫羊藿多糖组比空白对照组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05);黄芪多糖大肠杆菌组、淫羊藿多糖大肠杆菌组比空白大肠杆菌组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05),黄芪-淫羊藿多糖组比空白对照组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05);黄芪多糖组、黄芪-淫羊藿多糖大肠杆菌组、黄芪多糖金黄色葡萄球菌组均能够增加小鼠免疫器官质量。结论:黄芪多糖、淫羊藿多糖对小鼠具有免疫增强作用。     

环磷酰胺致小鼠生精障碍作用研究

为探讨不同剂量环磷酰胺作用不同时间后诱导小鼠生精障碍的作用,将80只雄性ICR系小鼠随机分成20、40、80mg/kg体重环磷酰胺(CTX)处理组和生理盐水对照组,腹腔注射5d,每2d称重1次,2周和4周后分批检测睾丸指数、附睾指数、精子数和精子畸形率,并结合HE染色检测睾丸组织结构变化。结果显示,作用2周时,高剂量的CTX显著影响体重增长,而中低剂量组只有处理后短时间体重降低明显;睾丸的生精指数变化均不显著,但其组织结构发生不同程度的病理变化。作用4周时,只有高剂量组对体重产生显著的作用;生精指数包括睾丸指数、精子数以及精子畸形率,3个组与对照相比均表现出明显差异;睾丸发生病理学病变的程度随剂量的增加而更加明显。采用40mg/kg CTX腹腔注射5d,作用4周后能建立较为理想的小鼠生精障碍模型。     

3-甲基-4-硝基酚对雄性小鼠生殖毒性的研究

目的探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)对雄性小鼠的生殖毒性作用。方法 20只小鼠随机分成阴性对照组和PNMC组(分0.9、9和90mg/kg·bw组),经口灌胃染毒30天,观察睾丸和精子的形态变化。结果染毒组小鼠各剂量睾丸生精细胞发生坏死,曲细精管腔内出现细胞团,精子细胞分化异常,形成均质红染颗粒,睾丸曲细精管生精上皮/直径比值在90mg/kg组明显高于对照组;染毒组小鼠精子畸形率明显高于对照组(P<0.05),并且随着染毒浓度的增加,畸形率有增加的趋势。结论 3-甲基-4-硝基酚不仅可以引起生精细胞坏死和抑制精子形成,还可以诱导精子畸变,从而对生殖系统造成损伤。     

亚急性硒中毒对小鼠精子质量的影响研究

为了研究亚急性硒中毒对小鼠精子质量的影响,试验选用雄性昆明鼠灌胃染毒。高、中、低剂量组分别按照0.135 mg/kg、0.540 mg/kg、2.160 mg/kg剂量浓度灌胃亚硒酸钠溶液,对照组灌胃纯化水,连续攻毒30 d,每隔10 d各组随机选取10只采样,检查睾丸脏器系数、精子密度、精子活率、精子畸形率。随着染硒剂量的增加和时间的延长,各染硒剂量组睾丸脏器系数呈下降趋势,小鼠精子密度和精子活率随染硒剂量的增加逐渐减小,各染硒组小鼠的精子畸形率均有增加,呈现明显的时间-剂量-效应关系。结果表明：亚急性硒中毒可影响雄性小鼠生长发育,阻碍睾丸的发育甚至引起睾丸萎缩,影响精子的生成和发育,降低雄性小鼠的生殖机能。     

DEHP对雄性小鼠生殖功能的影响

为了研究邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)对雄性小鼠生殖功能的影响,将40只成年健康雄性小鼠按体重为随机分成4组,即空白组和低、中、高DEHP剂量组,每组10只。空白组以生理盐水灌胃,低、中、高DEHP剂量组分别以250 mg/kg·bw、500 mg/kg·bw、1 000 mg/kg·bw DEHP灌胃,每天1次,连续4周,灌胃体积为10 m L/kg·bw。试验过程中观察动物的毛发、活动及进食情况。试验结束后处死小鼠,取小鼠睾丸与附睾称重,计算其脏器系数,并测定精子计数和精子畸形率。结果显示与空白组比较,各剂量染毒组小鼠睾丸与附睾重量及其脏器系数、精子计数均降低;精子畸形率均升高;差异均有统计学意义(P 0. 05)。随着DEHP剂量的升高,雄性小鼠睾丸与附睾重量及其脏器系数、精子计数呈下降趋势,精子畸形率呈上升趋势。表明DEHP对雄性小鼠生殖功能具有损伤作用,损伤机制有待进一步研究。     

淫羊藿多糖对小鼠卵泡发育的影响

对健康雌性小鼠灌服不同剂量淫羊藿多糖,研究淫羊藿多糖对卵泡发育及卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:连续灌服7 d淫羊藿多糖后,高剂量组(6 mg/0.2 mL),中剂量组(4 mg/0.2 mL)与对照组子宫卵巢系数分别为0.403%,0.245%和0.146%,差异显著(P<0.05)。灌服淫羊藿多糖后小鼠卵巢卵泡个数和直径均有所提高。卵巢组织学分析表明,随着给药剂量的增加,有腔卵泡的数量也有增加,中、高剂量组卵巢上出现黄体。卵母细胞体外成熟培养表明,中、高剂量组所获GVBD卵母细胞百分率(61.4%和73.0%)与对照组相比(50.0%)均有显著提高(P<0.05)。本研究表明,小鼠每天灌服淫羊藿多糖4⁶ mg,连续1周后可明显促进卵泡发育,并提高卵母细胞体外成熟率。     

亚急性硒中毒对小鼠精子质量的影响研究

为了研究亚急性硒中毒对小鼠精子质量的影响,试验选用雄性昆明鼠灌胃染毒。高、中、低剂量组分别按照0.135 mg/kg、0.540 mg/kg、2.160 mg/kg剂量浓度灌胃亚硒酸钠溶液,对照组灌胃纯化水,连续攻毒30 d,每隔10 d各组随机选取10只采样,检查睾丸脏器系数、精子密度、精子活率、精子畸形率。随着染硒剂量的增加和时间的延长,各染硒剂量组睾丸脏器系数呈下降趋势,小鼠精子密度和精子活率随染硒剂量的增加逐渐减小,各染硒组小鼠的精子畸形率均有增加,呈现明显的时间-剂量-效应关系。结果表明:亚急性硒中毒可影响雄性小鼠生长发育,阻碍睾丸的发育甚至引起睾丸萎缩,影响精子的生成和发育,降低雄性小鼠的生殖机能。     

杨梅黄酮对环磷酰胺诱导雄性小鼠生精障碍的试验

为了研究杨梅黄酮对环磷酰胺所致雄性小鼠生精障碍的保护作用及作用机制,采用腹腔注射环磷酰胺(50 mg/kg·bw)连续7 d建立雄性小鼠生精障碍模型,杨梅黄酮组分别灌胃杨梅黄酮(100 mg/kg·bw、200 mg/kg·bw、400 mg/kg·bw),连续30 d。观察雄性小鼠的精子密度、精子畸变率,血清中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,睾丸组织中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子κB(NF-κB)等指标,并观察睾丸组织的病理改变。结果显示:与模型组比较,杨梅黄酮中、高剂量组的精子密度增加、精子畸变率减少,杨梅黄酮中、高剂量组睾丸组织中TNF-α及NF-κB含量降低,杨梅黄酮中、高剂量组血清中GSH水平增加,杨梅黄酮低、中、高剂量组睾丸组织中MDA含量降低、LDH活性增强。病理可见模型组睾丸组织生精上皮明显变薄,生精细胞层次、数量减少,多数生精小管腔未见精子形成,而杨梅黄酮可改善环磷酰胺所致的生精细胞的损伤。表明杨梅黄酮对环磷酰胺诱导雄性小鼠的生精障碍有一定保护作用,作用机制与抗氧化、抗炎有关。     

基于转录组测序的饲料添加淫羊藿对番鸭睾丸组织差异表达基因分析

为研究饲料添加淫羊藿的番鸭睾丸组织相关基因和调控通路变化，本研究将60只公番鸭随机分为2组，每组3个重复，一组饲喂基础日粮（对照组），另一组饲喂基础日粮的基础上添加量为1%的淫羊藿（实验组）。饲喂75 d结束后，测定血清生殖激素和抗氧化指标，并进行睾丸组织形态学观察和高通量转录组测序。结果显示，实验组生精上皮层数多，生精细胞数量多，管腔饱满，成熟精子多。实验组血清生殖激素中睾酮含量、雌二醇含量、促卵泡素含量和促黄体素含量均显著高于对照组，实验组血清抗氧化指标中超氧化物歧化酶含量、谷胱甘肽过氧化物酶含量、总抗氧化水平均显著高于对照组，丙二醛含量显著低于对照组。通过转录组测序分析，本研究最终得到2 414个差异表达基因，这些差异表达基因主要被注释到白细胞激活、受体等过程，主要富集于细胞因子受体相互作用、铁死亡等代谢途径和信号通路。本文研究表明饲料添加淫羊藿激活了番鸭睾丸相关基因或通路表达，对番鸭繁殖力的提高具有重要意义。     

淫羊藿多糖提取工艺的优化及对小鼠细胞免疫功能的影响

淫羊藿为小檗科淫羊属植物,是传统的补肾助阳中药.现代药理试验结果表明,淫羊藿能增加心脑血管流量,促进造血功能、免疫功能及骨代谢,具有抗衰老、抗肿瘤的功效.多糖是淫羊藿发挥免疫调节作用的有效成分之一,试验在传统水提醇沉法的基础上运用超声波法提取淫羊藿多糖,通过正交设计优化并建立淫羊藿多糖的最佳提取工艺,并进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验和淋巴细胞转化试验,以探讨淫羊藿多糖对小鼠细胞免疫功能的影响.     

β-谷甾醇、淫羊藿苷对猪精子体外获能效果的影响

探讨中药单体成分β-谷甾醇(β-sitosterol)、淫羊藿苷(Icariin,Ica)对猪精子体外获能的影响,以期提高体外受精效果.以mTBM+肝素获能液为对照组,分别添加β-谷甾醇、淫羊藿苷的低、中、高3个剂量为试验组,利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合体外受精检验体外获能效果.在mTBM+肝素中添加β-谷甾醇2(中剂量0.08 mg/L)、淫羊藿苷2(中剂量17 mg/L)的B型精子率(获能精子)显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.05),F型精子率(未获能精子)显著低于对照组和其他剂量组(P＜0.05),AR型精子率(发生顶体反应精子)与对照组和其他剂量组差异不显著(P0.05),卵裂率和囊胚率均极显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.01);表明中药单体成分β-谷甾醇、淫羊藿苷能够显著促进猪精子体外获能效果.     

苦杏仁苷对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸组织损伤的影响

为了观察苦杏仁苷(amygdalin)对醋酸铅诱导雄性小鼠睾丸组织损伤的影响,试验腹腔注射醋酸铅(20 mg/kg)致小鼠睾丸组织损伤,然后分别按体重60,30,15 mg/kg腹腔注射苦杏仁苷,连续注射42 d。结果表明:与对照组比较,模型组睾丸指数、精子密度降低,精子顶体完整率降低,AKP及Ca~(2+)-ATPase活性显著降低,MDA含量升高(P0.05或P0.01);与模型组比较,苦杏仁苷高剂量组睾丸指数升高,苦杏仁苷各剂量组精子密度升高,MDA含量降低,苦杏仁苷高、中剂量组的精子顶体完整率、AKP活性、Ca~(2+)-ATPase活性升高(P0.05或P0.01)。说明苦杏仁苷对醋酸铅诱导的雄性小鼠睾丸组织损伤有一定改善作用,其机制可能与影响能量利用关键酶活性及抗氧化有关。     

As_2O_3对小鼠雄性生殖系统的毒性作用

为了研究三氧化二砷(As_2O_3)对雄性小鼠生殖系统的影响,将40只6周龄雄性小鼠随机分为4组,以0,3,6,9 mg/kg的剂量连续4周皮下注射As_2O_3溶液,观察睾丸和附睾病理变化,检测精子活力、血浆和睾丸中砷含量、睾酮含量、抗氧化指标(MDA、GSH-Px)、生殖相关标志性分子AR、GPx5和Miwi基因表达以及Miwi定位表达。结果显示,As_2O_3处理组中睾丸生精管畸形,管内生精细胞排列紊乱,附睾管内精子和生精细胞显著减少。随着As_2O_3浓度的增加,精子活力下降,血浆和睾丸中的砷含量增加,睾酮水平降低。在血浆和睾丸中,MDA和GSH-Px含量在6和9 mg/kg As_2O_3组显著增加(P0.05)。生殖相关标志性分子AR、GPx5和Miwi的表达量与对照组相比显著降低(P0.05)。Miwi在睾丸初级精母细胞中的定位表达随着As_2O_3剂量的增加明显降低。上述结果表明,As_2O_3诱导小鼠发生氧化应激,阻碍了小鼠的精子成熟和精子发生,导致生殖毒性。     

不同运动方式和运动时间对小鼠睾酮分泌和精子生成的影响

为深入探究不同运动方式和运动强度对正常雄性动物生殖机能的影响,本研究以C57BL/6J小鼠为研究模型,将32只11周龄雄性小鼠随机分为对照组、(EE)组、短期有氧运动(AAE)和长期有氧运动(CAE)组,运动结束后采集血液、睾丸、附睾样品,检测血清睾酮水平,分析睾酮曲细精管管腔面积和生精标志基因表达、精子形态等差异。结果表明:与对照组小鼠相比,EE组小鼠血清睾酮水平显著降低,睾丸类固醇转运蛋白STAR的mRNA表达显著降低,且睾丸曲细精管和附睾管管壁形态不完整,精子总数降低,精子畸形率显著增加;AAE组小鼠睾丸发育及精子品质与对照组接近,但CAE组小鼠血清睾酮水平较对照组显著升高,睾丸类固醇转运蛋白STAR的mRNA表达水平显著增加,睾丸曲细精管空腔面积显著降低,精子畸形率显著降低。上述结果说明,长期有氧运动是提高小鼠生殖机能的有效方式,短期有氧运动无此效应,急性力竭运动有损小鼠的生殖能力。     

淫羊藿苷的抑菌效果及对新西兰兔精液常温保存品质的影响研究

为了研究淫羊藿苷对常温保存新西兰兔精液品质及抑菌效果的影响,试验将新西兰兔精液分为6组,1～5组分别加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组不添加淫羊藿苷为对照组,测定淫羊藿苷对精液细菌生长的抑制作用;另将新西兰兔精液分为7组,1～5组在精液稀释液中加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组为维生素C对照组(添加0.05%维生素C),7组为空白对照组(不添加任何抗氧化剂),测定17℃保存新西兰兔精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:精液中添加淫羊藿苷的抑菌效果和添加浓度呈正相关性(P0.05),在精液保存前3天抑菌效果较好;试验各组随着保存时间延长精子活率下降,但3组、4组和5组下降较其他各组缓慢,其中4组精子活率最高;与保存前1天比,兔精子质膜完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组精子质膜完整率在第2～5天时较高,和其他组差异显著(P0.05),在保存第3天和第5天时分别为77.37%、56.38%;各组兔精子顶体完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组顶体完整率较其他各组高;在保存第3～5天,添加淫羊藿苷的各组精子SOD活性比空白对照组高,差异显著(P0.05),其中3组和4组精子SOD活性最高。说明17℃保存时,向兔精液稀释液中添加一定量的淫羊藿苷(0.20%)不但可以有效降低精液中细菌数量,还能对兔精子品质起到较好的保护作用。     

牛膝多糖对炔雌醚致大鼠生精损伤的保护作用研究

为研究牛膝多糖对炔雌醚(Quinestrol)致雄性大鼠生殖损伤的保护作用,以20只8周龄成年雄性SD大鼠为研究对象。随机分为4组,分别进行炔雌醚与牛膝多糖处理。试验结束后,取睾丸、附睾、精囊腺和前列腺称重,取精子检测品质,测定睾丸抗氧化酶活性并观察睾丸形态与组织结构,检测Tunel表达。结果表明,炔雌醚引起大鼠生殖器官重量减少,形态萎缩,组织结构异常,精子数量和品质下降,抗氧化酶活性降低;Tunel表达增加。而炔雌醚+牛膝多糖处理组睾丸抗氧化酶活性升高,Tunel表达减少,降低精子畸形、提高精子数量和品质,缓解生精小管损伤,提高生殖器官重量,最终改善雄性大鼠生殖功能。与对照组相比,单独牛膝多糖处理组睾丸抗氧化酶活性、组织结构和精子质量均有一定程度提高。综上表明,牛膝多糖有效抑制了炔雌醚对生殖功能的破坏作用,对雄性生殖功能具有改善作用。     

牛冷冻精液稀释液中草药配方的初步研究

通过比较以淫羊藿为主要成分的单方及复方中草药提取液对牛冷冻精液解冻后精子活率、畸形率、顶体完整率及低温保存时间的影响，以期开发牛冷冻精液中式稀释液。将三种不同配方的淫羊藿提取液分别以6．25％、12．5％、25．0％、50．0％的体积分数添加于稀释液中，制作牛颗粒冻精，利用干解冻法（40～42℃）解冻后分别检查精子活率、畸形率和顶体完整率，评定其品质。结果表明：配方三取得了较佳的冷冻效果。其提取液添加12．5％时精子冻后活率平均达到0．56，极显著高于其他各组（P〈0．01）：精子顶体完整率最高达到76．80％。畸形率仅14．61％，低温保存时间长迭138h。配方三最有利于生产牛冷冻精液。     

淫羊藿对动物机体免疫功能的研究进展

淫羊藿(EP)别名仙灵脾,为传统补虚壮阳中药。现代化学成分研究表明,其主要有效成分是淫羊藿多糖(EPS)、淫羊藿苷ICA)、淫羊藿总黄酮(TFE),中药药理研究表明淫羊藿具有调节机体免疫功能,增强雄性生殖功能,延缓肾功能衰竭的进程,扩张血管,改善血液流变学和促进造血系统功能等作用。近年来,大量实验研究表明,淫羊藿及其提取物对机体免疫功能有显著增强和调节作用。本文拟对淫羊藿免疫药理学方面的研究现状作一概述。