SP-SephadexC-50柱层析法纯化孕马血清促性腺激素(PMSG)

应用HPO_3沉淀-硫酸铵浓缩-乙醇分部沉淀法,从孕马血清中粗提PMRG(平均比活1026IU/mg.平均回收率75%),用SP-Scphadex C-50一次柱层析纯化PMSG粗品,获得平均比活11847IU/mg的高活性PMSG精品,对粗品的平均回收率为88.5%.     

DEAE52离子交换层析法提纯禽腺病毒的效果观察

鸡产蛋下降综合症(Egg Drop Syhdrom-1976,EDS）是禽腺病毒感染蛋鸡和种母鸡所引起的一种传染病,可使鸡群产蛋量下降10％∽30％,甚至高达41％,蛋壳异常,蛋体畸形,产软壳蛋、薄壳蛋、粗壳蛋,使蛋的破损率增大,品质低劣,是目前引起产蛋下降的主要传染病。     

PMSG诱导母猪发情提高受胎率的试验

<正> 近年来,推广杜大长和杜长大杂交组合,对金华供港活猪的质量显著提高,但1～2胎母猪的发情率较低,据石门农垦场的调查,8月龄以上未见初情的育成母猪、占育成母猪总数的15％;产仔断奶后15天以上不见发情的2胎母猪,占2胎母猪总数的30％。母     

用反向亲和层析法纯化猪瘟病毒抗原

用兔抗牛睾丸细胞培养物的IgG琼脂糖4B偶联制备亲和层析柱,以反向亲和层析法纯化SFV—C抗原,即通过亲和层析免疫吸附除去PEG沉淀法部分纯化抗原中的残留牛睾丸细胞培养物成分。结果表明.通过3次反向亲和层析柱的纯化抗原.其总蛋白去除率达76.9％;应用纯化前后抗原检测猪瘟免疫血清.纯化抗原可以除去猪瘟免疫血清中的非相关抗体反应,确保猪瘟免疫抗体检测的特异性.     

离子交换层析法提取黏杆菌素的研究

本文采用D152型弱酸性阳离子交换树脂对多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)发酵液中黏杆菌类(Colistin)的提取条件进行了研究。通过静态与动态吸附相结合的方法，确定了影响提取效果的三个重要参数即洗脱液Hcl浓度、上样液浓度和洗脱液流速。结果表明，当上样液浓度为20000IU／ml，1mol／L HCl以2.0ml／min的流速洗脱时可获得最好的提取效果，收率达到52．8％。     

不同剂量生殖激素对小鼠超排效果的影响

为了探讨孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超数排卵的最佳组合剂量、最佳注射时间间隔,本试验以成熟实验小鼠为试验动物,分别采用不同剂量PMSG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)与不同剂量HCG(5IU、7.5IU、10IU、12.5IU)组合注射小鼠进行排卵效果研究,并以44h、46h、48h、50h的间隔时间对小鼠进行超数排卵处理试验。结果表明,(10+10)IU剂量组合处理的见栓小鼠平均获卵数最高(10.3枚);在注射间隔为48h试验组中见栓小鼠平均获卵数最高(8.4枚)。提示本试验条件下,小鼠超排中PMSG与HCG组合剂量为10IU、注射时间间隔为48h时超排效果较好。     

孕马血清促性腺激素的提纯研究

以比活100 IU/mL以上的孕马和孕驴血清为原料,应用HPO2沉淀-超滤浓缩(或用聚 乙二醇浓缩)-乙醇分部沉淀-超滤截留-SE-SephadexC-50柱层析-羟基磷灰石柱层析,进 行PMSG提纯试验,获得了比活9 000 IU/mg左右的高纯度产品,经PAG圆盘电泳只出现一条带.     

孕马血清促性腺激素单克隆抗体的研制

用高纯度孕马血清促性腺激素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，加完全佐剂进行基础免疫，第７日脾脏免疫，第１０日取血测滴度，为阳性则取出脾脏，将脾细胞与Ｓｐ２／０细胞融合，培养并用琼脂单扩法筛选抗体生成孔，ＥＬＩＳＡ复测，得孕马血清促性腺激素抗体阳性杂交瘤细胞株Ｄ６Ｃ１０。经降植烷予处理的ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔注射Ｄ６Ｃ１０，腹水单抗滴度１０＾６。瘤细胞ＤＮＡ含量测定证实为脾和骨髓瘤细胞的杂交瘤细胞。单抗亚型分析为Ｉ     

抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备、纯化及其特性

用大田软海绵酸与人IgG的偶联物OA-IgG作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规细胞融合技术将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0融合,用间接竞争ELISA方法对融合细胞所分泌抗体的特异性进行筛选。经过3次克隆,获得1株可稳定分泌抗OA的杂交瘤细胞株3C5,其染色体数为50±2,所分泌抗体属IgG1亚类,相对分子质量是159390,抗体亲和常数为9.8×108L/mol,滴度达2.56×106。     

家兔血清中苦马豆素的气相色谱测定方法

建立家兔血清中苦马豆素(SW)浓度的气相色谱测定方法,为SW的毒理学和免疫学研究提供条件。饲喂家兔甘肃棘豆草粉后,分别于5、10、20d采集血液并分离血清;血清经过丙酮沉淀、超声和离心净化处理后,冷冻干燥;冻干物经硅烷化试剂衍生化反应,用气相色谱内标法测定血清中SW的含量。结果显示,测定SW的线性范围为0.00008～2.5g/L,相关系数γ=0.9996,检出限为0.00008g/L。在0.001、0.01、0.1、1.0g/L分别添加SW的回收率为89.81%～96.23%,相对标准偏差为2.46%～4.35%。结果表明,该方法准确、灵敏、快速、简便,适用于家兔血清中SW含量的测定。     

家兔制备传染性法氏囊病抗体的探讨

采用自制传染性法氏囊病(IBD)灭活油乳剂疫苗免疫家兔,第2次免疫后4~5周,血清IBD抗体水平可达1-64。对每一份血清样品以两种方法进行纯化,即亲和层析与盐析-透析中,IBD抗体丢失量约15%左右。血清和透析所得液体经亲和层析,收集的混合液中IBD抗体水平均为1/8,蛋白含量在1.07%~1.25%,但血清样品比透析液样品的蛋白水平高4.8%~10.7%。对血清样品和透析液样品亲和层析后收集的混合液的蛋白水平进行t检验,t=1.64,t0.05(3)=3.182,t0.05,差异不显著。结果表明,血清样品直接进行亲和层析比盐析-亲和层析节省时间和成本,并可减少血清抗体的丢失量。