恩拉霉素微生物检定法的研究

以枯草芽孢杆菌为检定菌,检定培养基Ⅰ号为试验用培养基,采用双碟法进行恩拉霉素样品测定。通过浸提溶液组成、浸提时间、检定菌浓度考察,优化了检定条件。在此基础上,确立了恩拉霉素浓度的对数值与抑菌圈直径的线性范围,并对所建立的微生物检定法进行准确度、最小检出限等考察。结果表明,采用丙酮浸提液B、浸提恩拉霉素样品80 min,恩拉霉素浸提较完全。在检定菌浓度10⁶ 个/mL的条件下,恩拉霉素浓度在0.56~35.79 U/mL之间,其浓度的对数值与相应的抑菌圈直径呈直线相关,相关系数r为0.9960。将建立的恩拉霉素微生物检定法用于恩拉霉素样品测定,回收率为95.90%,相对标准偏差(RSD)为1.95%。本方法可用于含恩拉霉素的样品测定。     

恩拉霉素在动物生产中的应用

恩拉霉素,又名恩来霉素、安来霉素或持久霉素,属于多肽类抗生素,是由放线菌发酵而来的多肽类抗生素。最早由日本研发,由于其强大的杀菌功能,被许多国家和地区使用,1993年,我国批准该药在国内注册。2005年,国内企业与美国先灵葆雅动物保健品有限公司开始合作生产恩拉霉素预混剂。饲料中添加微量恩拉霉素,就可起到显著的促     

恩拉霉素在动物生产中的应用进展

恩拉霉素是一种较为常用的多肽类饲用抗生素,本文综述了恩拉霉素的理化性质、抗菌活性,对动物生产与肠道菌群的影响以及检测方法的研究进展。     

饲料中恩拉霉素的微生物学含量测定方法研究

研究并建立了微生物学法测定饲料中恩拉霉素含量的方法.饲料样品经酸性甲醇溶液提取,大孔吸附树脂层析柱吸附洗脱后,饲料中的恩拉霉素得到很好的分离纯化.本方法采用枯草芽孢杆菌为检验菌,饲料中恩拉霉素的最低定量限为0.5 mg/kg,标准曲线的线性范围为0.4～12.8 u/mL,相关系数R为0.999 1,回收率大于85%,RSD小于15%.该方法适用于饲料中恩拉霉素的检测.     

薄层层析－紫外分光光度法测定预混剂中的恩拉霉素

试验旨在建立薄层层析－紫外分光光度法测定预混剂中恩拉霉素的方法。使用硅胶GF254薄层板为固定相,正丁醇∶冰醋酸∶水(2∶1∶1)为展开剂,在紫外光灯(254 nm)下定位,样品中的恩拉霉素得到较好分离。在271 nm波长处对不同含量的恩拉霉素标品进行紫外检测,结果表明,恩拉霉素点样量在20~166 μg范围内与吸光度呈现良好的线性关系(r=0.9989),平均回收率为99.85%,RSD值为3.1%(n=9)。此法所测定的结果与高效液相色谱(HPLC)法所测定的结果基本一致。该方法简单、快捷、准确、分析量大,适用于预混剂中恩拉霉素的定量分析。     

抗生素对肉鸡生长、屠宰性能和肉品质的影响

试验研究饲粮中添加维吉尼亚霉素、恩拉霉素或黄霉素对肉鸡生长性能、屠宰性能及肌肉品质的影响。试验采用完全随机设计,将216只1日龄AA肉仔鸡随机分为6个处理,每个处理6个重复,每重复6只鸡(公、母各半)。基础饲粮为无抗生素对照组,其余处理在基础饲粮中分别添加维吉尼亚霉素(5、10、20mg/kg)、恩拉霉素(1~21日龄5mg/kg,22~42日龄3mg/kg)或黄霉素(5mg/kg)。与无抗生素对照组相比,添加维吉尼亚霉素和恩拉霉素显著提高11~21日龄平均日增重(ADG)及22~42日龄平均日采食量(ADFI)和ADG(P0.10)。添加黄霉素可显著提高22~42日龄ADG(P0.10)。黄霉素组胸肌滴水损失显著降于维吉尼亚霉素组(P0.10)。维吉尼亚霉素、恩拉霉素对屠宰性能和肌肉品质均无显著影响(P0.10)。结果表明:饲粮中添加维吉尼亚霉素、黄霉素和恩拉霉素均可改善肉仔鸡的生长性能,对其屠宰性能均无影响;维吉尼亚霉素和恩拉霉素对肉鸡肌肉品质无显著影响,而黄霉素可降低鸡胸肌滴水损失。     

恩拉霉素生物检测方法的改进

试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×10⁷个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。     

恩拉霉素作用机制及基因簇改造研究进展

恩拉霉素是一种环状多肽类抗生素,只需添加微量就呈现出优良的促进生长和改善饲料利用效率的作用,目前作为一种全新的饲料添加剂得到了广泛应用.本文总结了恩拉霉素的结构、作用机制、生物合成基因簇及其改造等万面的研究进展.     

饲用不同抗生素对肉鸡生长性能的影响

研究旨在比较研究恩拉霉素、维吉尼亚霉素、那西肽和杆菌肽锌对肉鸡生长性能的影响。试验选用600只1日龄健康商品AA肉仔鸡,随机分为6个处理组,每处理组5个重复,每重复20只鸡,分别饲喂6种日粮:日粮1(基础日粮),阴性对照组;日粮2(基础日粮+50.0 mg/kg土霉素钙),阳性对照组;日粮3(基础日粮+50.0 mg/kg土霉素钙+6.0 mg/kg恩拉霉素),恩拉霉素组;日粮4(基础日粮+50.0 mg/kg土霉素钙+10.0 mg/kg维吉尼亚霉素),维吉尼亚霉素组;日粮5(基础日粮+50.0 mg/kg土霉素钙+2.5 mg/kg那西肽),那西肽组;日粮6(基础日粮+50.0 mg/kg土霉素钙+45.0 mg/kg杆菌肽锌),杆菌肽锌组;抗生素含量均以有效成分计,试验期42 d。试验结果表明:肉鸡日粮中添加恩拉霉素、维吉尼亚霉素、那西肽和杆菌肽锌后,平均日增质量(ADG)试验组显著高于阴性对照组(P0.05),恩拉霉素组最高,较阴性对照组提高8.05%,较阳性对照组提高6.51%。维吉尼亚霉素组和杆菌肽锌组较阴性对照组分别提高6.51%和5.49%,较阳性对照组分别提高4.99%和3.99%。那西肽组较阴性对照组提高4.99%,较阳性对照组有提高趋势(P0.05)。平均日采食量,以阴性对照组最低,显著低于除杆菌肽锌组外的其他4个试验组(P0.05)。料肉比(F/G)以恩拉霉素组最低。恩拉霉素组、维吉尼亚霉素组和杆菌肽锌组显著低于阴性对照组和阳性对照组(P0.05)。由此可见,作为抗菌促生长剂,恩拉霉素、维吉尼亚霉素、杆菌肽锌和那西肽等均具有显著促生长效果,并且恩拉霉素效果最好。     

恩拉霉素在肉鸡上的应用试验

<正>恩拉霉素(enramycin),又名恩来霉素、安来霉素、持久霉素,是由放线菌(Streptomyces fungicidicus)发酵而得,是不饱和脂肪酸与十几种氨基酸结合的多肽类抗生素,主要组分有恩拉霉素A和B。精品为其盐酸盐形式,白色或微黄白色粉末;一般使用的是粗品,为灰色至灰褐色粉末,有特异臭味。恩拉霉素对革兰氏阳性菌有很强的活性,特别是对肠内的有害梭状芽孢杆菌(Clostridium)有很强的抑制力。长期使用后不容易产生抗药性,它可以改变肠道内的     

日粮中添加恩拉霉素对仔猪生产性能和肠道菌群的影响

试验研究日粮中添加恩拉霉素及停用后对断奶仔猪生长性能和肠道菌群结构的影响。采用单因素试验设计,将20头仔猪分为4个处理,每个处理5个重复;分别在基础饲粮中添加0、5、20 mg/kg和80 mg/kg恩拉霉素。试验分为3个阶段,加药期28 d,饲喂试验日粮;停药期7 d和LPS诱导应激期3 d,均饲喂基础日粮。结果表明:加药期与对照组相比,5、20mg/kg添加组平均日增重增加(P>0.05),80mg/kg添加组却显著降低(P<0.05),3个添加组直肠总菌数显著下降(P<0.05)。停药期,5、20 mg/kg添加组平均日增重与对照组相比有下降的趋势(P>0.05),20、80mg/kg添加组直肠总菌数和乳酸杆菌/大肠杆菌显著下降(P<0.05)。应激后,盲肠乙酸和丁酸含量显著下降(P<0.05)。     

Improved Biotin Detection Method of Enduracidinmold

The national standard pinella mildew element biological detection method was improved, using dry filter paper method instead of cylinder plate method, the potassium content of different samples of pinella mold were determined,and the extract composition, extraction time, the concentration of bacteria test and other factors influence on the test results of the established enramycin between concentration and the antibacterial circle diameter of linear equations was studied. The results showed that using acetone extraction liquid acetone (A:1 mol/mL HCl:water =35:12:56, pH value was adjusted to 3.0 with 1 mol/mL HCl) leaching provided sample, extraction time of 3.5 h could fully immersed test of enramycin. Use of biological indicator bacteria CMCC (B) 63501 spore count of 3.4×10⁷ per mL of the measurement of living flat dish, the formation of the inhibitory circle edge rule was clear, good accuracy. Using dry filter paper method could effectively eliminate the extraction or dilute acidic fluid itself to detect strains inhibitory effect, and the utility model had the advantages of simple operation, good repeatability. It could be used for large quantities of samples of enramycin content determination.Enramycin standard solution at concentrations for 150~500 U/mL and its bacteriostatic circle diameter and valence have good linear regression.The resulting regression equation was Y=0.00944X+11.55344, the correlation coefficient was R=0.9962, the final effective range was 0.75~2.5 U, the measured results were more close to the true value.It could be used as an efficient enduracidin determination method, worthy of promotion and use.     

恩拉霉素高产菌株的快速选育

为筛选恩拉霉素高产菌株,降低生产成本,以生产用Streptomyces-483为出发菌株,进行紫外-氯化锂复合诱变。以金黄色葡萄球菌为指示菌,用琼脂块法测定抑菌圈大小,筛选出84株突变株,经摇瓶初筛、复筛、5L发酵罐验证,最终获得4株高产突变株。筛选得到的4株高产突变株经稳定性考察完全适用于生产。     

动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂流行病学临界值的建立

【目的】建立动物源肠球菌对抗菌促生长剂的流行病学临界值,并基于此了解2019-2021年动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂的耐药情况。【方法】测定2019-2021年从北京、河北、四川、山西、陕西和内蒙古养殖场动物样本中分离得到的肠球菌对7种抗菌促生长剂（吉他霉素、黄霉素、恩拉霉素、那西肽、阿维拉霉素、维吉尼亚霉素和杆菌肽）的最小抑菌浓度（MIC）值。根据CLSI-VET中规定的方法,利用统计软件ECOFFinder对MIC分布数据进行非线性回归模拟,以95%置信区间下的流行病学临界值计算动物源肠球菌对7种抗菌促生长剂的耐药率。【结果】确定了动物源肠球菌对吉他霉素、黄霉素、恩拉霉素、那西肽、阿维拉霉素、维吉尼亚霉素和杆菌肽的流行病学临界值分别为8、8、8、0.25、8、8和32 μg/mL。由此计算的药物耐药率为64.38%、34.48%、80.06%、14.69%、19.06%、50.69%和24.96%,其中动物源肠球菌对恩拉霉素、吉他霉素和维吉尼亚霉素的耐药情况最为严重,而对那西肽最敏感。在2019-2021年的耐药率变化情况统计中,黄霉素和杆菌肽的耐药率下降趋势较为明显。【结论】本研究制定了动物源肠球菌对7种养殖业常用抗菌促生长剂的流行病学临界值,可作为动物源肠球菌对饲用抗菌促生长剂敏感和耐药的初步判定标准,为进一步制定耐药折点,监测动物源肠球菌对抗菌促生长剂的耐药情况变化提供数据基础和科学依据。     

Influence of antibiotics used as feed additives on the immune effect of erysipelas live vaccine in swine

To investigate the influence of antibiotics used as feed additives on the immune response to erysipelas live vaccine, the pig inoculation test was applied. Avilamycin, oxytetracycline quaternary salt, enramycin, virginiamycin and tylosin phosphate were selected as test antibiotics. Five experimental feeds containing each antibiotic at the highest concentration permitted for feed additives in Japan, and the basal diet lacking antibiotics were examined. Twenty-nine pigs were divided into six groups. At first all the groups were fed with the antibiotic-free basal diet for 7 days, and then each group received the experimental feeds. On the 14th day after feeding with test feeds all the pigs, except for one control pig in each group, were immunized with the vaccine and all the pigs were then challenge-exposed to a virulent strain of Erysipelothrix rhusiopathiae 14 days after vaccination. The clinical response was observed every day for 14 days. In all the groups, most of the vaccinated pigs did not develop any clinical signs of acute erysipelas after the challenge exposure, whereas non-vaccinated control pigs died or showed severe generalized erythema with profound depression and anorexia. No differences in the protection against the challenge exposure were observed among the groups. Therefore, the present results suggest that these selected antibiotics would not interfere with the immune effect of the vaccine if given at the usual concentrations used for feed additives.