ELISA检测3种禽多杀性巴氏杆菌抗原的比较

关于检测禽多杀性巴氏杆菌血清抗体的研究,国外学者是应用凝集反应、间接血凝、酶联免疫吸附试验。研究认为,ＥＬＩＳＡ具有敏感性和可重复性等优点,是理想的血清学检测方法。在应用ＥＬＩＳＡ检测禽多杀性巴氏杆菌抗体的时候,如同其它血清学方法一样,抗原提取及钝化...     

兔多杀巴氏杆菌病的ELISA诊断

应用间接ELISA检查104例多杀巴氏杆菌（Pm）工感染兔的血清，100／104为阳性反应，检出率96.2％。分别对30例波氏支气管败血菌、8例金黄色葡萄球菌、14例病毒性出血症病毒人工感染兔及50例健康兔的血清进行检查，均呈阴性反应。试验证明本方法具有特异性。用A型荚膜Pm抗原分别对A型或Pm人工感染的61只、43只兔进行ELISA，未见型特异性。Pm人工感染兔在接种后15－20天血清抗体阳转，抗体存留期在6个月以上。     

禽多杀性巴氏杆菌ELISA三种抗原比较研究

禽多杀性巴氏杆菌ＥＬＩＳＡ三种抗原比较研究刘云同郑星道金仁哲顾万钧黄伟（吉林省通化县家畜繁改站·１３４１００）（吉林农业大学动物科学系关于检测禽多杀性巴氏杆菌血清抗体的研究，国外学者是应用凝集反应、间接血凝、酶联免疫吸附试验检测禽多杀性巴氏杆菌弱毒免...     

单克隆抗体捕获ELISA检测鸡多杀性巴氏杆菌IgM抗体

应用抗鸡ＩｇＭ单克隆抗体建立了检测鸡抗多杀性巴氏杆菌（Ｐ．ｍ．）血清中特异性ＩｇＭ抗体的单克隆抗体捕获ＥＬＩＳＡ,其敏感性、特异性、重复性优于间接ＥＬＩＳＡ。用于检测鸡抗Ｐ．ｍ．的特异性ＩｇＭ抗体发现：鸡在注射免疫Ｐ．ｍ．灭活苗后第４天即可检测到ＩｇＭ抗体,并且上升较快,峰值在第２周为１：５１２０;鸡在口服免疫Ｐ．ｍ．弱毒活苗后ＩｇＭ抗体上升缓慢,峰值在第４周左右,滴度较低为１：３２０;鸡在由不同途径感染不同的Ｐ．ｍ．强毒后第８天时,ＩｇＭ抗体滴度都明显上升。同时应用间接ＥＬＩＳＡ检测ＩｇＧ抗体滴度进行比较。本项研究对建立检测鸡抗其它病原微生物特异性ＩｇＭ抗体方法具有借鉴意义。     

单抗捕获ELISA法检测禽多杀性巴氏杆菌特异性IgM抗体

本试验采用纯化的鸡ＩgＧ和环磷酰胺预处理后,再以亲和层析纯化的鸡ＩgＭ免疫ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠,动用淋巴细胞杂瘤技术,以间接ＥＬＩＳＡ法筛选,获得了５侏能稳定地分泌抗 鸡ＩgＭ（u链）特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经ＥＬＩＳＡ交叉反应性试验和羊抗鸡ＩgＭ（u链）抗血清阻断试验,证明这５株单克隆抗体均是抗鸡ＩgＭ（u链）特异性的。应用该抗鸡ＩhＭ：（u链）单克隆抗体建立了检测鸡抗多杀性巴氏杆菌血清中特异性ＩgＭ抗     

间接ELISA检测鸡多杀性巴氏杆菌抗体的研究

应用自然弱毒“1010”株包被ELISA板,以间接法检测鸡多杀性巴氏杆菌抗体.该方法简便,特异性强,比琼扩法敏感近千倍,与ND、IB等12种血清不发生交叉反应.在野外样本的调查中,鸡群自然感染率为43.1％.人工免疫鸡ET值在900以上时能耐受3个最小致死量强毒的攻击.用这种方法仅需检测一个稀释度即可知道血样的抗体滴度。     

间接ELISA检测禽霍乱抗体方法的建立

用多杀性巴氏杆菌 TJ8菌株制备ELISA抗原 ,与抗鸡 Ig单抗 1 B7酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接 ELISA方法。交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强 ,灵敏度高。确立了将鸡血清 1 0 0倍稀释监测 ELISA效价(ET)的回归方程 y=1 .4981 + 0 .391 9x(P>0 .0 5 ) ,可用于定量测定。间接凝集试验与ELISA方法的比较试验表明 ,EL ISA法比间接血凝试验敏感性高 4倍以上     

间接ELISA检测禽多杀性巴氏杆菌抗体中包被抗原的选择

间接ELISA已在抗体检测中广泛应用,而抗原包被作为间接ELISA中必不可少的一步可直接影响试验的准确性.试验分别使用超声波裂解抗原、脂多糖蛋白抗原和全菌抗原作为包被抗原,建立相应的检测方法并进行重复性试验.试验证明全茵抗原建立的禽多杀性巴氏杆菌ELISA检测方法在敏感度、特异性、稳定性方面均优于其他两种抗原.     

多杀性巴氏杆菌病研究进展

多杀性巴氏杆菌(P.multocida)是引起多种畜禽巴氏杆菌病(pasteurellosis)的病原菌,主要引起动物发生出血性败血病或传染性肺炎。动物之间相互传染,人被动物咬伤可感染。畜禽巴氏杆菌病的防治主要使用多杀性巴氏杆菌疫苗.目前防制巴氏杆菌病的疫苗主要有强毒灭活菌苗、弱毒菌苗和亚单位疫苗,这些疫苗在一定程度上对巴氏杆菌病的防治起到了一定的作用,但由于多杀性巴氏杆菌的血清型多,免疫效果也不理想,有关巴氏杆菌病防治还有待进一步研究。本文就多杀性巴氏杆菌的毒力因子、免疫原等进行综合阐述。     

间接ELISA检测鸭肝炎病毒抗体的研究

以蔗糖密度梯度离心法纯化的病毒作为包被抗原，建立了检测鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。经特异性及重复性试验，效果良好。ＥＬＩＳＡ效价与琼扩、中和效价存在平行关系。经ＥＬＩＳＡ检测，１日龄雏鸭免疫后，４日龄可检出ＥＬＩＳＡ抗体，１０日龄达到峰值。ＤＨＶ高免血清在雏鸭体内作用维持时间为１０ｄ左右。攻毒保护试验表明，攻毒前雏鸭的血清抗体水平与攻毒后雏鸭存活率具直接相关性。     

应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒

应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。     

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1：1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。     

多杀性巴氏杆菌外膜蛋白免疫作用研究进展

外膜蛋白是细胞膜中的一种重要成分之一,在免疫方面的作用越来越受到关注.随着对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白免疫原性及保护性的深入研究,开发有效的多杀性巴氏杆菌外膜蛋白疫苗将成为可能.笔者等就具有免疫作用的多杀性巴氏杆菌外膜蛋白的研究进展情况进行综述.     

禽多杀性巴氏杆菌C48—1成熟外膜蛋白H重组亚单位疫苗免疫效果的研究

将融合表达禽多杀性巴氏杆菌成熟外膜蛋白H（OmpmH）的重组菌pGEX—ompmH／BL21大量培养，在最佳诱导条件下诱导表达，表达产物经蛋白酶剪切及亲和层析纯化，得到OmpmH基因的原核表达产物，将其与弗氏完全佐剂混合制成油乳剂亚单位疫苗，用该疫苗肌肉注射接种5周龄鸡，首免后每周采血检测抗体，二免后第2周用10LD50禽多杀性巴氏杆菌强毒菌株C48-1进行攻击。结果显示，OmpmH具有良好的免疫原性，能诱导鸡体产生特异性抗体，可抵抗强毒菌株C48-1的致死性攻击，免疫效果优于禽多杀性巴氏杆菌弱毒疫苗。     

检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA方法的建立

本试验通过差速离心法和非线性蔗糖密度梯度离心法纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）。经三氯－三氟乙烷处理后,作为ＥＬＩＳＡ试验的标准抗原,并建立了检测ＰＲＲＳＶ抗体ＥＬＩＳＡ方法。该方法与ＩＦＡ、ＩＰＭＡ和国外同类商品化试剂盒进行了对比试验,表明该方法具有敏感性高、特异性好的特点,是一种快速准确检测ＰＲＲＳＶ抗体的方法。间接ＥＬＩＳＡ方法在敏感性上要优于ＩＦＡ和ＩＰＭＡ》     

西尼罗河病毒病竞争ELISA检测方法的初步建立及应用

本研究用表达的西尼罗河病毒(WNV)囊膜蛋白E结构域III蛋白作为包被抗原,单抗8F4A4作为竞争检测抗体,初步建立了能够对乙型脑炎病毒(JEV)和WNV进行鉴别诊断的竞争ELISA方法。优化的最佳抗原包被浓度为530ng/mL,单抗的最佳稀释倍数为1:8000,待检血清的最佳稀释倍数为1:10。通过对56份阴性样品进行检测确定了该方法的临界值为30%,以此为判定标准对临床220份血清进行检测,结果均为阴性。此方法的建立弥补了商品化试剂盒不能区分JEV和WNV感染的缺陷,为我国西尼罗河病毒病的流行病学调查提供了一种有效的抗体检测方法。     

间接ELISA检测禽多杀性巴氏杆菌抗体中包被抗原的选择

间接ELISA已在抗体检测中广泛应用,而抗原包被作为间接ELISA中必不可少的一步可直接影响试验的准确性。本试验分别使用超声波裂解抗原、脂多糖蛋白抗原和全茵抗原作为包被抗原,建立相应的检测方法并进行重复性试验。试验证明全菌抗原建立的禽多杀性巴氏杆菌ELISA检测方法在敏感度、特异性、稳定性方面均优于其他两种抗原。     

具有免疫作用的多杀性巴氏杆菌外膜蛋白特性研究

外膜蛋白是细胞膜的重要成分之一,在免疫方面的作用日益受到关注,对其深入研究可使开发有效的多杀性巴氏杆菌外膜蛋白疫苗成为可能,本文就多杀性巴氏杆菌概况、组成及具有免疫作用的外膜蛋白的特性进行综述,以期推动多杀性巴氏杆菌疾病的诊断和防治。