鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测法的建立

为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价,建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法.该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A (259 bp)和DHAV-C (194 bp)的特异片段,而不与其它被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为4.98×104拷贝/μL、1.68×104拷贝/μL;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20％(14/70)、70％(49/70);随机抽取的DHAV-CPCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100％(16/16).本研究结果显示,建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床DHAV的快速鉴别诊断.     

基因A型和C型鸭甲型肝炎病毒卵黄抗体的研制及应用

旨在研制基因A型和C型鸭甲型肝炎病毒(DHAV)单价及二价高免卵黄抗体,以满足实际生产中基因A型和C型DHAV单独或混合感染防控的需要。采用基因A型和C型DHAV强毒株作为抗原制备单价和二价油乳剂灭活疫苗免疫接种高产蛋鸡,制备了高效价的基因A型和C型DHAV单价及二价高免卵黄抗体,卵黄抗体鸭胚中和效价在1∶204与1∶281之间,单价及二价卵黄抗体防治试验证明,所制备的卵黄抗体防治效果良好。     

雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体的研制

选取鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV)分离株BZ-Ⅰ株作为疫苗株制备灭活苗,多次免疫蛋鸡制备卵黄抗体。经鸡胚中和试验法测定卵黄抗体的中和效价为2^9.6;经动物试验证实卵黄抗体可有效预防和治疗雏鸭对鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)强毒的攻击,为雏鸭DVH的防治提供了新的技术手段。     

鸭出血症高免卵黄抗体的研制和应用

鸭出血症（DHD）是由鸭疱疹病毒２型（鸭新型疱疹病毒）引起的以病鸭双翅羽毛管内出血呈紫黑色、脏器及肠道出血为特征的一种新的传染病。自１９９０年秋以来，经临床流行病学调查和送检病例发现我省福州、莆田、漳州、厦门、南平等地区以及浙江省金华、义乌等和广东省佛山、湛江等地鸭均有发生。该病可侵害番鸭、樱桃谷鸭、北京鸭、半番鸭、麻鸭、野鸭等，但以番鸭最易感，各日龄鸭均可发病，以１０d～３０d鸭更为多见，发病率高低不一，鸭日龄愈小发病率愈高，多种抗菌药物治疗无效，使用现有的鸭病疫苗、高免血清或高免卵黄抗体及药物…     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

鸭病毒性肝炎（Duck Virus Hepatitis）是由鸭病毒性肝炎病毒（DHV）引起的一种高度致死性急性传染病。尤其是3～20日龄的雏鸭发病，临床症状以发病急、死亡快，死前呈角弓反张姿态和病鸭肝脏肿胀，表面有出血斑点为病变特征。笔者试用鸡作为免疫蛋源，制备抗鸭肝炎病毒高免卵黄杭体，临床试用效果良好，现将试验结果报告如下。     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

本文利用鸭病毒性肝炎(DVH)弱毒活疫苗和DVH灭活油乳剂疫苗制备高免卵黄抗体,研究表明,高免卵黄抗体具有治疗鸭病毒性肝炎的临床疗效。在治疗过程中发现,高免卵黄抗体对鸭病毒性肝炎的疗效,主要决定于卵黄抗体当中的中和抗体效价与免疫途径。卵黄抗体当中的中和抗体效价一般都会在28.5之上。研究说明高免卵黄抗体对于雏鸭感染鸭病毒性肝炎病毒的24h以内完成肌肉注射,能够达到的免疫疗效最佳。     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

鸭病毒性肝炎(Duck Virus Hepatitis,DVH)是由鸭病毒性肝炎病毒(DHV)引起的一种高度致死性急性传染病。尤其是3～20日龄的雏鸭发     

鸭坦布苏病毒冻干卵黄抗体的研制

将鸭坦布苏病毒尿囊液浓缩灭活后制备灭活疫苗,依据制定的免疫程序免疫产蛋鸡,第三次免疫后14天,抗体中和效价≥1∶256,收集高免鸡蛋制备冻干卵黄抗体,并对制备的冻干卵黄抗体进行质量评价。结果表明,制备的冻干卵黄抗体中和效价为1∶90,能有效中和鸭坦布苏病毒,对鸭坦布苏病毒的致病性有较好的预防作用,为鸭坦布苏病毒的预防和治疗提供了一种可行的途径。     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

鸭病毒性肝炎(Duck Virus Hepatitis)是由鸭病毒性肝炎病毒(DHV)引起的一种高度致死性急性传染病。尤其是3￣20日龄的雏鸭发病,临床症状以发病急、死亡快,死前呈角弓反张姿态和病鸭肝脏肿胀,表面有出血斑点为病变特征。笔者试用鸡作为免疫蛋源,制备抗鸭肝炎病毒高免卵黄抗体,临床试用效果良好,现将试验结果报告如下。1鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的制备1.1高产蛋鸡的选择选择健康高产蛋鸡50只,隔离饲养,加强饲料营养,同时加喂抗生素预防细菌感染,观察1周,表现正常时接种疫苗。1.2DVH弱毒疫苗DVH弱毒疫苗由黑龙江省兽医卫生防疫站近期生产…     

鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制

用DVH弱毒疫苗和DVH油乳剂苗免疫健康高产蛋鸡,可以制备高免卵黄抗体。高免卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎疗效的试验表明,用卵黄抗体治疗DVH的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。卵黄抗体的中和效价应达2^8.5以上,并且在感染DVH24h以内对雏鸭进行肌肉注射,免疫效果为最适宜。     

基因C型鸭甲肝病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立

为建立检测基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)血清抗体的方法,本研究以纯化的DHAV-C作为包被抗原,抗DHAV-C单克隆抗体(MAb)5E3-9与待检血清竞争结合抗原,采用方阵法确定包被抗原、MAb及待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化,建立了DHAV-C抗体的竞争ELISA检测方法。该方法仅对DHAV-C血清检测为阳性,与DHAV-A、鸭圆环病毒、鸭乙型肝炎病毒等相关病原的鸭阳性血清无交叉反应。敏感性试验表明,标准阳性血清1:128倍稀释时,检测结果仍为阳性,比中和试验灵敏性更高。批内批间变异系数分别为4.64%~5.21%和6.02%~8.68%,具有良好的重复性。与中和试验比较,阳性符合率为100%(15/15),阴性符合率为77.8%(14/18)。本研究基于纯化的DHAV-C及其特异性MAb建立的MAb竞争ELISA检测方法可以用于DHAV-C流行病学调查以及抗体的检测。     

鸭副粘病毒病高免卵黄抗体的研制和应用

自2002年4月以来，在福州及其周边县市和莆田等地的肉鸭群中流行鸭副粘病毒病。我们已从自然感染番鸭、半番鸭等病死鸭脏器中分离到副粘病毒。并研制了鸭副粘病毒病高免卵黄抗体，经实验室攻毒试验和田间应用表明其防治效果令人满意。     

精制新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体效果研究

为明确新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的治疗效果,试验对3、5和7日龄健康易感雏鸭注射新型鸭呼肠孤病毒强毒RPVA1301-Z株,攻毒24 h后采用不同批次、不同剂量卵黄抗体进行治疗,同时设攻毒对照组(不接种卵黄抗体,但攻毒)和健康对照组(不接种卵黄抗体,也不攻毒),通过剖检试验雏鸭,观察病理变化,统计攻毒保护情况及治愈率。结果显示,以0.5、1.0 mL卵黄抗体治疗3日龄感病雏鸭,治愈率为100%;以1.0、1.5 mL卵黄抗体治疗5、7日龄感病雏鸭,治愈率为100%,卵黄抗体使用剂量与感病雏鸭日龄呈正相关。研究表明,新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体对于感染初期的雏鸭有确切的治疗效果,且不同批次卵黄抗体治疗结果具有可重复性,具有临床应用推广的价值。     

鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体的研制

将鸭坦布苏病毒浓缩后制备灭活苗,免疫试验鸡制备卵黄抗体,鸡胚中和试验表明,第3次免疫后15d,卵黄抗体中和效价为1：10^3.5,雏鸭攻毒保护试验结果表明,预防组和治疗组的保护率分别达到90％和78％,说明本试验制备的卵黄抗体对鸭坦布苏病毒病有着显著的预防和治疗作用。     

卵黄抗体对鸭传染性浆膜炎的治疗效果分析

<正>鸭疫里默氏杆菌曾被称为鸭疫巴氏杆菌或鸭疫莫拉氏菌,是一种无芽孢、无运动性、黄杆菌科的革兰阴性杆菌[1],能够感染水禽、火鸡、鸽子和鸡,尤其是鸭和鹅[2]。目前,报道被感染的鸭品种包括北京鸭、樱桃谷鸭、番鸭、半番鸭、麻鸭、奥白星鸭、丽佳鸭、天府肉鸭、江南鸭、香鸭等[3-7],其中樱桃谷鸭、北京鸭和麻鸭相对更易感[8]。感染鸭群日龄主要集中在1～8周龄易感,尤其是2～3周龄易感,成年鸭感染一般呈慢性经过。感染病鸭典型临床症状表现为精神沉郁,眼、鼻流出黏液性分泌物,拉黄绿稀便;     

鸭坦布苏病毒冻干高免卵黄抗体的研制

本研究用鸭坦布苏病毒病灭活苗三次免疫SPF蛋鸡,收取高免鸡蛋,制备成冻干高免卵黄抗体;用鸡胚中和试验和间接ELISA方法进行效价检测。试验结果显示,第3次免疫后2周,卵黄抗体中和效价为1∶103.5,4、5周达到最高值1∶104.5;间接ELISA方法检测冻干前后的抗体效价结果均为阳性;对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,可为鸭坦布苏病毒的防控提供一种有效的冻干高免卵黄抗体制剂。     

禽流感高效价卵黄抗体的制备和应用

试验选用4个免疫增强成分,采用1%添加水平添加到130日龄法国伊莎褐壳蛋鸡的日粮中,并用禽流感H5N1疫苗连续免疫鸡群3次,试验结果显示,4个免疫增强成分的试验组与对照组相比,前两次免疫效果显著,但当血清抗体效价达到15log2左右时,效果不是很明显;用制备的高效价卵黄抗体与疫苗同时接种未免疫过的海兰褐蛋雏鸡发现其能填补单独使用疫苗免疫时的抗体空白期,可提高紧急预防高致病性禽流感的效果。     

鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制与应用

用鸭病毒性肝炎Ｉ型鸡胚毒免疫鸡，成功制备出安全，高效的鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体。经实际应用于预防时，雏鸭的平均成活率为９６．９％；用于发病鸭群治疗时，保护率为９５％。试验表明，应用鸡制备高免卵黄抗体，不仅为鸭病毒性肝炎的研究提供了更为广泛的实验动物，时也为异源性高免卵黄抗体在防治鸭病毒性肝炎的应用上探讨出新的途径。     

检测鸭1型甲肝病毒抗体间接ELISA方法的建立

为了建立快速检测鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)抗体的血清学方法,本试验利用纯化浓缩的鸭1型甲肝病毒亚型MPZJ1206株病毒作为包被抗原,建立了检测DHAV-1a血清抗体的间接ELISA方法,并对各种检测条件进行了优化。结果表明,该方法简单、快速、特异性强、重复性好、稳定性高,可用于鸭群DHAV-1a感染的血清学监测及其抗体消长规律的检测。