草鱼FGF21基因编码区生物信息学分析

FGF21基因属于成纤维细胞生长因子家族(Fibroblast Growth Factors,FGFs)。试验对草鱼FGF21基因蛋白质的结构功能和理化性质进行了预测。结果显示,草鱼FGF21基因编码蛋白质属于不稳定亲水蛋白质,蛋白质二级结构以无规则卷曲(58.29%)为主,含有187个氨基酸,β-折叠的数值是21.39%,α-螺旋的数值是20.32%,不含β-转角;磷酸化位点有24个,无跨膜结构以及N-糖基化位点和信号肽。研究结果为进一步阐明草鱼FGF21基因的功能奠定分子生物学基础。     

长白猪FGF21基因CDS克隆及禁食后表达规律研究

为研究禁食后长白猪成纤维细胞生长因子21(FGF21)在脂肪沉积中的作用,本文以猪FGF21(登录号:NM_001163410.1)为参照序列,利用PCR技术扩增CDS区域并构建真核表达载体,序列进行生物信息学分析,随后通过实时荧光定量PCR技术检测禁食后FGF21在长白猪11种组织中的表达水平.结果显示:长白猪FGF...     

FGF21对机体糖代谢和脂质代谢的调控作用及其分子机制探讨

探讨了在动物机体糖代谢和脂质代谢中FGF21的调控作用及其分子机制,以期能够促进其在动物营养研究方面的发展。     

FGF21增强线粒体功能抑制猪卵巢颗粒细胞凋亡

旨在探究成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)对猪(Sus scrofa)卵巢颗粒细胞凋亡的作用及其调控机制。本研究采集大白×长白二元杂交母猪((8±1)月龄)新鲜卵巢组织抽取卵泡液分离颗粒细胞作为研究对象,通过RNAi技术和添加不同浓度的FGF21重组蛋白(0、0.1、1、10 ng·mL^-1)处理颗粒细胞24 h。24 h后通过流式细胞术检测细胞凋亡情况,利用Western blot、qRT-PCR等技术探究颗粒细胞BAX和BCL2的表达水平。为了进一步明确FGF21影响颗粒细胞凋亡与线粒体之间的关系,本试验检测了不同处理后颗粒细胞线粒体复合物的蛋白水平、细胞中线粒体数量、ATP浓度、总抗氧化能力、活性氧水平以及线粒体生成相关基因的表达水平。研究发现,利用RNAi技术敲低颗粒细胞中FGF21表达后,处于晚期凋亡的细胞比例显著上升(P<0.05),而活细胞比例显著降低(P<0.05)。同时,FGF21敲低组颗粒细胞促凋亡基因BAX的mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05),而抑制细胞凋亡的...     

绵羊FGF21基因核苷酸变异及其与生产性状的关联分析

为研究探讨FGF21基因核苷酸变异及其对绵羊生产性状的影响,本实验采集5个不同品种绵羊的血样并提取基因组DNA,测定相关生产数据,应用PCR-SSCP方法检测不同品种FGF21基因Exon-2区和Intron-2区核苷酸变异,利用一般线性模型(GLMs)分析Intron-2区核苷酸变异对罗姆尼羔羊生长性状和胴体性状的影...     

microRNA-21和TGFBI基因在猪骨骼肌生长发育中的表达分析

试验旨在研究microRNA-21(miR-21)和转化生长因子β诱导(TGFBI)基因在长白猪骨骼肌中的表达相关性。采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法分析了miR-21和TGFBI基因在长白成年猪中的组织表达谱,同时比较分析了其在长白猪不同发育阶段(出生前和出生后共28个发育点)背最长肌中的表达相关性。结果表明,miR-21在长白成年猪的各个组织中均表达,且分布相对平衡,在不同发育阶段的背最长肌中呈现波浪式的表达趋势;TGFBI基因在长白猪胚胎期的背最长肌中高表达,在整个背最长肌发育过程中呈现出不同的表达丰度。相关性分析表明,在胚胎期骨骼肌发育过程中,miR-21和TGFBI表达之间为显著的负相关,TGFBI可能是miR-21的调控靶标基因。     

FoxO1的功能研究进展

FoxO蛋白家族是2000年才公布统一命名的蛋白质家族,其中FoxO1是FoxO亚家族中的主要成员之一。作者在综述FoxO1的结构及其分布的基础上,重点探讨了其与生物代谢、氧化应激、动物肌细胞分化和肌纤维类型转化、动物繁殖等方面的生物学功能。     

猪重大育种价值基因及挖掘技术研究进展

随着分子生物学和动物遗传育种技术的快速发展,对于畜禽优良性状的研究已从对表型选育进入到对单个或多个重要性状关联基因的分子选育,如对猪肉质性状的相关研究,在影响猪背膘厚、肌内脂肪含量、火腿重量等方面筛选到许多关键基因。近年来,非洲猪瘟肆虐,对猪抗病的研究再次成为热点,也发现了众多关键基因,如CD163直接参与了猪呼吸与繁殖综合征病毒的侵入机制。除了疾病的影响外,繁殖性状对养猪业的发展也起着至关重要的作用。随着研究人员对各重要性状研究的不断深入,现已积累了大量重要育种价值基因的多维数据,且由此开发出了多种基因筛选技术,尤其是CRISPR-Cas9基因编辑技术的发现及其作为全基因组筛选工具的成功应用,以及在后基因组时代功能基因组筛选与多组学的联合应用等,进一步推动了遗传育种领域的发展。作者系统总结了猪肉质、抗病及繁殖性状相关的重要育种价值基因及其挖掘技术,以期为猪的遗传改良提供指导性建议和参考。     

FGF21对NEFA介导肝脂质沉积及AMPK调控因子的影响特征

研究旨在阐明成纤维细胞生长因子21（FGF21）对AMPK磷酸化调控因子的影响机制,并明确FGF21对高NEFA介导的小鼠肝细胞脂滴代谢的影响特征。对AML12小鼠肝细胞进行添加NEFA和（或）沉默FGF21处理,应用荧光定量PCR技术检测肝细胞FGF21、肝激酶B1（LKB1）、转化生长因子β激活激酶1（TAK1）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶（CaMKK）mRNA表达水平;用油红O染色检测肝脂沉积水平。结果显示,沉默FGF21,显著（P<0.05）降低LKB1表达,而对TAK1、CaMKK表达量没有显著（P>0.05）影响。高浓度NEFA下,沉默FGF21肝细胞脂质沉积水平显著增高。由该试验结果可以得出,高NEFA下肝细胞FGF21可能通过诱导LKB1激活AMPK信号通路,进而减少肝细胞脂质沉积。     

PLINs基因对脂质的调控及其潜在的育种价值研究进展

周脂素蛋白家族（Perilipins,PLINs）有PLIN1、PLIN2、PLIN3、PLIN4和PLIN5 5种蛋白,该蛋白家族定位于脂滴（Lipid Droplets,LDs）表面,与其他分子相互作用介导脂质的合成与分解。PLIN1可调控脂肪的蓄积,也是脂肪细胞分化的标志物之一。PLIN2是脂质蓄积最重要的调节因子之一,可促进脂质合成,抑制LDs中主要脂质甘油三酯（Triglycerides,TG）和胆固醇酯（Cholesterol Ester,CE）的分解。PLIN3是中性脂质形成的关键基因。PLIN4参与脂肪细胞分化,还可修补脂滴形态的缺陷。PLIN5在LD积累与缓解脂毒性中起关键作用。本文综述了近年关于PLINs家族调控脂质的研究现状及其在畜禽上的应用,旨在阐述其在畜禽生物育种中的潜在育种价值。     

铬的生物学功能及应用效果

铬元素是人和动物必需微量元素之一，它在体内含量少，但是作用大。铬主要通过影响糖代谢、脂代谢及蛋白质代谢等，调节机体生长繁殖性能及免疫功能。本文就铬的生物学功能及应用效果等做一简要综述。     

MYH3基因在动物肌肉发育、能量代谢及生产性能中的研究进展

肌球蛋白重链3（myosin heavy chain 3,MYH3）基因编码胚胎型肌球蛋白重链蛋白,控制肌肉的牵引滑动。MYH3基因是肌肉分化的重要标志基因,能够调控肌肉发育及能量代谢,在动物整个肌肉发育过程中均发挥重要作用。MYH3基因在不同物种间高度保守,且在动物体内多组织中均有表达,在胚胎期肌肉组织和肌肉再生过程中表达量较高。它受转录因子、microRNA、lncRNA及环境营养因子等多种因素影响,也可调控其他基因的功能。MYH3基因突变可以改变TGF-β信号通路和MAPK信号通路相关蛋白的磷酸化水平;影响ATP酶活性,使ATP水解时间延长,延长横桥周期;影响肌肉的能量代谢,最终引发肌肉能量代谢疾病。MYH3基因拷贝数变化、突变或表达量变化与动物的体尺、胴体重、屠宰重、生长性能具有显著的相关性。MYH3基因在大理石花纹高、肌内脂肪高的肌肉组织中表达量高,被认为是影响动物肌肉嫩度、剪切力和肉色红度的重要候选基因。MYH3基因的高表达与骨骼肌中氧化Ⅰ型肌纤维的含量、肌纤维直径和慢肌纤维含量有关。作者介绍了MYH3基因的基本结构特点,指出了其与肌肉组织发育及相关影响因子之间的调控作用,阐述了MYH3基因与动物肌肉能量代谢、生长性能和肉品质之间的关系,为进一步研究MYH3基因与肌肉发育调控和肉质性能改良提供参考。     

利用CRISPR/Cpf1技术构建HEK293细胞DDX21基因稳定敲除株及功能鉴定

利用CRISPR/Cpf1基因编辑技术构建DDX21基因稳定敲除的细胞株,并检测其生物学功能。设计、构建靶向DDX21基因向导RNA表达载体,与Cpf1表达载体共转染HEK293细胞,通过流式筛选、基因测序、Western blot和细胞增殖能力检测鉴定细胞株;荧光定量PCR检测病毒感染后模式识别受体(TLR-3、TLR-7、MDA-5)、Ⅰ型干扰素、IL-6以及抗病毒蛋白OAS mRNA水平表达情况。结果显示:成功筛选到2株DDX21基因敲除的细胞株,蛋白免疫印迹显示DDX21蛋白不表达;与野生型(wild type,WT)相比敲除株形成细胞单层的时间明显延长(P<0.01);H9N2亚型禽流感病毒感染试验表明,模式识别受体TLR-3、MDA-5的mRNA表达水平上调,TLR-7表达水平无明显差异,IFN-α、IFN-β、IL-6及抗病毒蛋白OAS的mRNA表达水平下调,表明DDX21基因敲除阻断了DDX21-TRIF-MyD88信号通路;TCID_(50)测定结果显示,差异最高可达到WT的3.01倍,表明DDX21基因敲除后流感病毒复制增加。本研究利用CRISPR/Cpf1系统获得2株DDX21基因稳定敲除的HEK293细胞株,为深入研究DDX21基因功能、病毒感染的天然免疫应答和调控研究奠定理论基础。