日本大耳白兔超数排卵研究

超数排卵,简称“超排”(Superovulation),是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢上许多卵泡发育并排出具有受精能力卵子的过程犤1犦。应用超排技术不仅开发利用了卵巢卵母细胞资源,提高了优良母畜的繁殖潜力,而且对加速品种改良,提高动物繁殖率具有重要意义,是胚胎工程技术中最     

家兔超数排卵影响因素探讨

超数排卵(简称超排),是生物工程中一个重要的基本技术环节,通过对动物的超排处理,可以获得大量卵母细胞和早期胚胎,加速动物的增殖和改良。本文根据作者近年来在家兔体外受精、胚胎分割等研究中所获资料,探讨影响家兔超数排卵的若干因素(如品种、季节、激素的使用、左右侧卵巢等),旨在揭示家兔超数排卵的规律,为今后进行家兔胚胎移植的深入研究,提供科学依据。 一、材料与方法 1.实验动物 所用实验动物为本地市售     

不同促性腺激素对家兔超排效果的影响

超数排卵简称"超排",是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力的卵子的过程,它既能提高良种母畜的繁殖潜力,又能为胚胎学、生殖生理学等提供一种研究手段[1].     

山羊体重、重复超排次数对超数排卵效果的影响

哺乳动物的卵巢在出生时含有20～40万个卵母细胞,但在动物生命过程中有99％的原始卵泡闭锁,只有1％发育成熟而排卵。为了获得大量卵子或胚胎,应用促性腺激素对雌性哺乳动物进行处理,促使其卵巢中有较多的卵泡发育并排卵,这种方法叫做超数排卵。超数排卵处理是在母畜发情周期的黄体期结束或人为终断黄体期时,利用外源促性腺激素对动物的下丘脑-垂体-性腺轴分泌活动以及卵巢本身产生刺激作用,增进卵巢的生理活性,激发多量卵泡在一个发情期中成熟并排卵的过程。     

PMSG在波尔山羊超数排卵中的应用

以各种外源促性腺激素诱发动物卵巢的许多卵泡发育并排出具有受精能力的印子的过程称为超数排卵，简称超排。超排是进行家畜胚胎移植的重要手段，对提高优良母畜的繁殖能力和加速品种改良具有重要的意义。PMSG是子宫内膜产生的一种糖蛋白激素，近年来被广泛应用于波尔山羊等家畜的超数排卵。     

犬卵母细胞体外成熟及其体外受精研究进展

犬科动物胚胎对于改进犬科珍贵物种及保护濒危犬种十分重要,因此对犬科动物体外受精(IVF)以及辅助生殖(ART)的研究逐渐变得必要.通过体外受精和核移植已经成功获得能够发育的犬科动物胚胎,克隆的犬胚胎移植到受体母犬能成功产仔,但是这一技术的效率仍然很低.主要原因是犬科动物胚胎在体外发育能力很低.犬卵母细胞早期发育和其他动物不同,犬卵巢排出的卵母细胞处于生发泡(GV)期,在输卵管中恢复减数分裂.犬卵母细胞核难以观测并且不容易确定排卵时间,所以很难确定精子入卵的确切时间,并且多精受精的情况时常发生.回顾犬卵母细胞体外成熟(IVM)和体外受精取得的进展,对于提高其胚胎生产效率很有必要.     

牛羊体外受精研究的重大进展

随着商业性胚胎移植技术的迅速发展,对家畜早期胚胎的需求量越来越大,由传统的超数排卵、体内受精所获得的胚胎已远不能满足这一需要,因此通过家畜卵巢卵母细胞的体外培养、体外受精技术作为解决早期胚胎来源的一个重要途径正在国际范围内引起重视。内蒙古大学实验动物研究中心,利用屠宰场采到的大量牛羊卵巢卵母细胞进行体外培养、体外受精处理获得成功,其成熟率和受精率分别达70％、90％以上。把这种体外受精卵     

小尾寒羊腔前卵泡体外生长发育的研究

近20年来,胚胎移植、体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术在理论和生产应用上已取得了很大进展.然而,所有这些技术是建立在具有完全发育能力的卵母细胞的基础之上的.大量卵母细胞的体外成熟培养是这些技术的限速步骤之一.目前采用的有腔卵泡卵母细胞的体外成熟和超数排卵,不能提供充足的卵母细胞以支撑胚胎工程技术的进一步发展.此外,卵巢中的卵母细胞绝大多数以无腔的形式存在于卵巢皮质内,有腔卵泡所占比例不到1%,屠宰场屠宰羊只后的卵巢内含有大量的腔前卵泡.如果建立腔前卵泡的体外培养体系,获得大量的具有成熟和受精能力的卵母细胞,一方面将会最大限度地挖掘保存卵巢上遗传资源;另一方面将极大的促进胚胎工程技术的研究与应用,还有利于研究卵泡和卵母细胞的生长和发育规律.     

卵巢运输及保存的重要影响因素

哺乳动物卵巢内含有大量的原始卵泡，是当前科研上获取卵母细胞的重要原材料。随着转基因、克隆等胚胎工程技术日渐成熟，对卵母细胞的需求也在不断增加。体内成熟技术（ in vitro maturation，IVM）和超数排卵技术所获得的卵母细胞数量有限，实际操作复杂且成本高。而屠宰场所提供的卵巢数量大、所获得卵母细胞充足且成本低廉。各研究所现在更趋向于选择屠宰场的废弃卵巢用来作为体外成熟卵母细胞的原材料。但因屠宰场和实验室之间距离以及工作时间因素的影响，卵巢从离体到实验对其进行处理使用的时间是不定的。导致采集卵母细胞的时间不可控，有时需要较长的时间。因此，为了合理安排实验的同时节省运输费用，需要对离体卵巢进行一定时间的保存。目前已有对常见家畜（猪、牛、绵羊、山羊等）以及一些特种动物（家猫、犬、野生梅花鹿、伊比利亚红鹿、羊驼、兔、鼠、牦牛、驴等）的相关报道。将卵巢从动物死亡那一刻起直至到实验人员取卵母细胞为止的保存条件是维持卵母细胞活力的重要因素，不适当的保存条件会对后续实验造成不利影响，可见如何在卵巢保存的过程中维持组织内卵泡的活力对于后续的研究工作是十分重要的。     

羊超数排卵的方法及影响其效果的因素

应用外源促性腺激素诱发母畜卵巢多个卵泡发育并排出具有受精能力的卵子的方法称为超数排卵(superovulation),简称"超排".超排是胚胎移植的重要的技术环节,对于提高优良母畜的繁殖力和品种改良具有重要意义,同时也为动物克隆和转基因动物生产提供卵子和胚胎来源.目前,尽管超排的方法已广泛应用,但超排的效果还不稳定,影响了胚胎移植的进一步推广和应用.     

幼畜超数排卵及卵母细胞体外成熟的研究进展

利用幼畜进行超数排卵,产生数量远高于成年母畜生产的窦状卵泡,结合活体取卵、卵母细胞体外成熟和体外受精等技术,大量生产体外胚胎,并移植至成年代孕母畜子宫内,迅速获得众多后代个体的系统工程,被称为幼畜体外胚胎移植技术(Juvenile in Vitro Embryo Transfer, JIVET)。该技术能最大程度地缩短世代间隔,加速遗传选育进度,可为胚胎干细胞、动物克隆和转基因动物制备等研究提供丰富的胚胎试验材料。JIVET技术成败的关键在于幼畜的超数排卵和体外成熟环节。该文综述了幼畜超数排卵的生理基础、幼畜的超数排卵效果;同时从卵泡液微环境、卵丘细胞状态、卵母细胞的细胞质和细胞核成熟以及体外成熟的优化方案等方面介绍了幼畜卵母细胞体外成熟的研究进展。     

哺乳动物小腔卵泡的体外发育

随着胚胎工程技术和辅助生殖技术的发展,对胚胎数量、质量要求都在增加。超数排卵、卵母细胞体外成熟等增加了卵母细胞利用率,但卵巢内大腔卵泡非常有限。因此小腔卵泡作为一种巨大的卵母细胞来源越来越受到众多学者关注。研究小腔卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精发育机制,有利于提高小腔卵泡卵母细胞的发育力。     

低LH活性的Folltropin对青年母牛的超排试验

对母牛进行超数排卵是为了增加卵巢中发育的卵泡数,并确保这些卵泡最后排出健康的卵母细胞。目前,超排处理都使用胎盘或垂体促性腺激素制剂,如孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绝经期促性腺激素(hMG)或垂体促卵泡激素(FSH-P)。在用 FSH-P和 PMSG 超排处理中由于和 FSH 活性相关的促黄体激素(LH)的活性较高,而对超数排卵反应产生抑制作用.男有报道,PMSG、FSH-P或 hMG 过量会产生有害作用。     

羊超数排卵影响因素的分析

超数排卵(简称超排)是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的多个卵泡发育并排出多个具有受精能力卵的过程。超排是胚胎移植最重要的技术环节,对于提高优良母畜的繁殖能力和品种改良具有重要意义,同时也为动物克隆和转基因动物生产等提供卵子和胚胎来源。目前,尽管超数排卵的方法已广泛应用,但超排的胚胎回收率和可用胚胎数还不稳定,影响了胚胎移植的进一步推广和应用。本文通过对超排影响的动物品种、个体差异、激素、超排处理方案、采胚方法、重复超排、年龄、营养状况、季节等诸多因素的分析,旨在为提高动物的超排效率提供借鉴。1影响超…     

牛超数排卵的常用方法及超排措施

超数排卵（superovulation）简称超排，是指在母牛发情周期中适时为其注射促性腺激素，而促使母牛卵巢比自然状态下有更多的卵泡发育并排出成卵的技术。使用激素类药物对动物进行超数排卵是进行胚胎移植、转基因等研究的方法之一，通过超数排卵可以获得大量成熟的卵子。尽管目前超排的方法已被广泛应用，但超排产生的胚胎依然有20％左右而不能用于移植。究其原因是现有的超排方法获卵率和可用的胚胎质量还不十分稳定，这严重阻碍了该项技术的推广应用。本文意在探讨超数排卵的方法和提高超排效果的技术措施，以为畜牧业生产提供技术指导。     

影响牛羊卵巢卵母细胞体外成熟的因素

随着哺乳动物胚胎工程技术的深入研究和商业性胚胎移植技术的迅猛发展,胚胎的需求量日益增加,单纯依靠超数排卵获得胚胎的方法成本高、采胚数量有限,远远不能满足科学研究和生产的需要.因此,充分挖掘优良母畜的繁殖潜力,深入研究卵泡卵母细胞体外生产胚胎的机理,建立一整套体外快速生产优质廉价胚胎的技术体系,为胚胎工程前沿研究和加速良种家畜的良种繁育进程提供优质胚胎具有巨大的科研价值与现实意义.卵母细胞体外成熟是体外生产胚胎的一个基础环节,对胚胎工程技术的其它环节产生决定性影响.本研究受山西省自然基金(20021089)资助,本文就牛羊卵巢卵母细胞体外成熟的因素作一阐述.     

超排兔卵巢卵母细胞直接用于体细胞核移植的研究

为了评估兔超排后卵巢残留卵泡内卵母细胞用作体细胞核移植的潜力,应用PMSG或FSH诱导母兔超排,排卵结束(hCG注射14h)后,抽吸卵巢表面卵泡回收卵母细胞(抽吸组/处理组)用于体细胞核移植(SCNT),同时与自然排卵到输卵管内的卵母细胞(排出组/对照组)进行比较。结果表明,PMSG和FSH超排获得的抽吸组成熟卵母细胞(以可见第一极体为准)的比率分别极显著和显著低于各自的排出组(PMSG:70.7%vs94.6%,P0.01;FSH:81.5%vs94.6%,P0.05),且PMSG和FSH抽吸组间卵母细胞的成熟率差异显著(70.7%vs 81.5%,P0.05)。PMSG和hCG超排的抽吸组成熟卵母细胞的去核效率也显著低于各自的排出组(PMSG:抽吸vs排出=69.2%vs83.6%,P0.05;FSH:抽吸vs排出=71.6%vs81.0%,P0.05)。抽吸组成熟的卵母细胞注核效率以及此类卵母细胞用作胞质受体经体细胞移植后的重构胚在融合率、分裂率以及分裂胚胎发育至囊胚的比例与排出组差异均不显著(P0.05)。另外,抽吸组卵母细胞孤雌激活后胚胎的发育能力以及囊胚细胞总数与排出组差异也不显著(P0.05)。但是,PMSG超排后的抽吸组成熟卵母细胞体细胞核移植的总体效率显著低于相应的排出组(8.4%vs11.5%,P0.05),而FSH超排的卵母细胞抽吸组与排出组差异则不显著(10.2%vs11.6%,P0.05)。结果显示,抽吸自超排兔卵巢表面卵泡内的卵母细胞大多数都已经成熟,虽然去核效果要差些,但获得的重构胚与源自排出到输卵管内的卵母细胞的重构胚具有等同的发育能力,可以不经体外成熟培养而直接用于体细胞核移植,而且FSH超排获得的抽吸组卵母细胞体细胞核移植的总体效率与自然排卵到输卵管内的卵母细胞没有显著差别。     

不同剂量超排激素对山羊超排效果影响的分析

用外源激素诱导成年动物卵巢卵泡超数发育获取卵母细胞,往往受动物的年龄、情期、卵巢卵泡状态等诸多因素的影响,使不同供体之间对外源激素的应答反应不一,因而影响获得的卵母细胞的数量及其质量[1,2].     

牛卵巢活动对超数排卵影响研究进展

超数排卵在实际生产中提高了胚胎移植技术对单胎动物的繁殖率,但是,超数排卵的结果存在很大的差异性。影响超数排卵结果的因素有很多,如牛的自身因素,超数排卵方法的选择,所使用促性腺激素的种类,激素的质量,环境因素等。文章以牛自身卵巢活动对超数排卵的影响为出发点,综述了牛正常卵巢活动及卵泡活动对超数排卵影响的研究进展,包括卵泡波动力学,卵泡波发育过程中促性腺激素的作用;分析了卵巢对促卵泡素(FSH)及促黄体素(LH)的特异应答性机制,对各个卵泡波进行了比较,根据卵泡波动力学理论列举了几种切实可行的同步卵泡波的超排方法,对超数排卵结果差异性的原因做了补充说明。     

重复手术法收集超数排卵后的家兔卵母细胞

采用促卵泡素(FSH)和FSH混合25%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)两种方法进行超数排卵,以正常排卵母兔作对照,经过3次重复剖腹手术(每次间隔至少50天以上)收集家兔卵母细胞,旨在探索大量获取家兔成熟卵母细胞简单有效的方法。结果超数排卵的两组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出3倍以上(P=0.001),两种超数排卵效果无显著差异(P>0.1)。3次连续手术均成活的家兔中,对照组和FSH组3次取卵效果无显著差异(P>0.05),FSH混合25%PVP组首次手术与第三次手术卵母细胞数出现显著差异(P<0.01)。本方法可有效获取大量家兔卵母细胞,并提高实验动物利用率。