浅谈如何提高ELISA测定的准确性

<正>近几年,畜产品质量安全意识与日俱增,动物疫病形势复杂化,基层动物疫病防控部门做好动物疫病筛查工作显得尤为重要。酶联免疫吸附试验(ELISA)因其具有操作简便、灵敏度高和特异性强等优点被广泛应用于血清、尿和饲料等     

浅谈导致ELISA测定异常结果的原因与对策

<正>酶联免疫吸附试验(ELISA)技术自1971年问世以来,因其具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点被广泛应用于兽医临床检验中。近几年,随着动物疫病形势复杂化,畜产品质量安全意识与日俱     

血凝抑制试验易出现的问题及纠正措施

血凝抑制试验在动物疫病诊断检测中,常用于鸡新城疫、禽流感等疫病的抗体效价测定,以及新城疫、禽流感流行病学的调查、疫病诊断、防疫监测、免疫程序制定等工作中。该试验操作要求取量精确,读数及时,实验环境温度适宜恒定等。操作过程中,     

兽药残留酶联免疫吸附试验影响因素分析

酶联免疫吸附法(ELISA)因其具有的灵敏度高,重现性好,检测成本低,操作简单,样品处理量大等特点,已广泛应用于兽药残留及违禁添加药物的快速检测。ELISA虽然操作简单,但试验操作中各环节对试验的检测结果影响较大,如不注意,很可能导致显色不全、重现性不好、假阳性或假阴性的结果。本文对影响ELISA试验的常见因素进行分析并总结出解决方法,以提高检测的准确性。     

浅析影响血凝和血凝抑制试验的因素

血凝和血凝抑制试验是化验室中进行动物疫病诊断和免疫监测最常用的试验方法之一，如禽流感、口蹄疫等疫病的化验室诊断或免疫监测在基层多使用这种试验方法。今年在我国其它省市发生多起禽流感等重大动物疫病威胁我省我市的情况下，省、市、县等各级畜牧兽医部门都对禽流感进行了大量的化验室监测，运用和准确掌握血凝和血凝抑制试验对禽流感等重大动物疫病的诊断和免疫监测就显得尤为重要。但血凝和血凝抑制试验方法在操作中常有较多的影响因素，容易造成试验结果偏差，甚至误判。现将这种实验方法操作中影响因素浅析如下。     

ELISA试验中的注意事项

正酶联免疫吸附试验(ELISA)是兽医疫病监测与防控中经常使用的一种试验方法。因其较高的灵敏性和特异性,以及适于批量操作等优点,广泛被应用于抗体或抗原的检测中。但是该试验对试验操作要求较高,一些细节操作不当会对试验结果造成很大偏差。本文就ELISA试验中应注意的一些细节进行探讨。1样品的采集和保存ELISA试验最常用的是血清样品。为了保证试验     

非洲猪瘟病毒荧光PCR检测假阳性的原因与预防措施

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)荧光PCR检测是防控非洲猪瘟(African swine fever,ASF)的关键环节。江苏省动物疫病预防控制中心对两家具备ASF检测资质的实验室,进行了阳性样品复核,发现检测结果存在假阳性。为避免实验室检测中出现检测失误,本文分析了导致ASFV检测假阳性结果的原因:实验室检测功能区域设置以及人员、物品流向不合理;检测人员操作不规范、不熟练,未在独立的生物安全柜中进行样品提取与试剂配制;实验室通风不良、清洁消毒不彻底,样品或提取模板间产生交叉污染,PCR试剂、产物、阳性质粒发生污染。为此,从实验室结构、环境、操作等方面提出控制建议:严格实验室功能分区与管理,规范各种试验操作与流程,加强实验室通风和消毒,控制试验中产生PCR污染的相关因素;同时省级实验室要加强对基层实验室的培训、指导和监督,使其在ASF防控中发挥应有的关键作用。本文为从事ASF等重大动物疫病PCR检测的实验室,在提高检测结果准确性和可靠性方面提供了参考。     

兽医实验室酶联免疫吸附试验操作要点

酶联免疫吸附试验(ELISA)是兽医实验室常用检测方法,具有灵敏度高、特异性强以及操作简便等特点。为了刚好地使用ELISA方法进行疫情检测以及疫病诊断,本文总结了常见ELISA试验各个操作步骤的注意事项,为广大实验员提供获得更准确有效的实验结果提供参考。     

我国陆生动物疫病检测诊断技术标准化发展分析

动物疫病检测和诊断类标准是检测和判断动物疫病的主要依据。本文梳理了我国动物疫病检测和诊断技术标准的建设现状,并将其与我国《一、二、三类动物疫病病种名录》以及OIE《陆生动物疫病诊断和疫苗手册》和《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的陆生动物疫病目录进行对比。分析发现:我国动物疫病检测和诊断技术标准体系对我国一、二、三类动物疫病的覆盖率为92.6%,其中80%的标准有PCR和(或)ELISA检测方法 ;对OIE陆生动物疫病诊断和疫苗手册名录疫病的覆盖率为88.3%,其中73%的标准有PCR和(或)ELISA检测方法 ;对我国进境动物检疫名录疫病的覆盖率为87.7%,其中73%的标准有PCR和(或)ELISA检测方法。由此提出了提高我国动物疫病检测和诊断技术标准覆盖率,强化快速诊断检测技术标准化建设的建议。     

动物样品采样方法及采样中常见的问题

<正>近年来,实验室监测在重大动物疫病的诊断及防控中发挥了不可取代的重要作用。而实验室监测结果的准确性、有效性除受实验方法、实验设备、监测试剂、实验操作等因素影响外,还要受到样品的采集、运输、保存等因素的影响。动物病料样品的采集是动物疫病实验室检验工作中的重要内容。怎样采集动物病料、采集时机、样品的处理和保存、运送是否合适等,都直接关系到检验结果的准确性及可靠性,对动物疫病的诊断、流     

禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验易出现的误差分析

禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验是禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法。近年来,随着动物疫病防控形势的需,禽流感疫病的日常监测、集中监测和免疫抗体检测工作量逐年增加,禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验成为当前基层兽医实验室检测禽流感的唯一技术方法,其试验结果的准确性直接影响着重大动物疫病防控策略的制定。通过开展基层兽医实验室比对试验发现,影响禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的因素诸多,分析试验结果和关键操作步骤,找出试验误差,以便从试剂配制、器材准备和操作规范三方面完善试验操作。     

影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素分析

禽流感血凝和血凝抑制试验是禽流感疫病监测和免疫抗体检测中最为常用的方法,随着动物疫病防控形势的需要,禽流感疫病的日常监测、集中监测和免疫抗体检测工作量的逐年增加,禽流感血凝和血凝抑制试验成为当前基层动物疫病预防控制中心实验室检测禽流感最常用的方法。但是由于试验中不规范的操作和细节方面的不注意,导致出现了不正确的检测结果,影响了试验的准确性。     

动物疫病监测样本采集的注意问题

动物疫病监测在动物疫病防控中作用巨大,实验室检测是目前动物疾病监测的重要内容,特别是传染性疫病更离不开实验室检测,实验结果的准确性、有效性除实验方法、检测试剂、实验操作等因素影响外,从一开始就受到样本的采集、保存、运输等因素的影响.特别是在开展动物疫病的监测工作,监测结果是否具有代表性,是否能够真实反映出疫病的真实情况都与监测样本的采集有重要关系.规范化的样本采集与管理是质量控制动物疫病诊断、监测工作中至关重要的一环,关系到实验结果的准确性.动物疫病样本监测采集需要注意以下内容:     

ELISA操作要求及质量控制

酶联免疫吸附试验（ELISA）是医学检验的免疫学检验方法之一,已广泛应用于对病原微生物的免疫学检查试验中。用ELISA法检测是目前最常用的实验室检验方法之一。与任何实验室检查方法一样,ELISA存在少量的假性结果（假阳性、假阴性）,对临床诊断和治疗会有一定影响。目前,ELISA已经普遍使用洗板机、全自动酶标分析仪,使试验数据的准确性和真实性都有明显提高。但试验设备的自动化并不代表试验数据100％可靠,还要求试验人员具备扎实的专业知识和熟练的试验操作技术,并且要对实验室的内外环境进行适时监控,从试验软件、仪器设备、操作程序、人员素质及环境监控等方面确保试验结果的准确性和可靠性。     

ELISA试验中常出现的问题及解决方法

正ELISA试验,即酶联免疫吸附试验,具有敏感性高的特点,兽医实验实常用ELISA试验检测样品的抗原或抗体,ELISA试验中很多因素都会影响试验的结果,试验中常出现的有显色淡,灵敏度偏低、样品重复试验差异大、假阳性和假阴性等。这些都会使我们对样品的真实结果做出误判,现就ELISA试验中非正常检测结果产生的原因进行分析,寻讨其解决的办法,以提高检测的准确性。     

猪、牛、羊口蹄疫和高致病性禽流感免疫抗体检测报告

为了防控重大动物疫病传播,确实掌握猪、牛羊口蹄疫和高致病性禽流感疫苗免疫效果,为重大动物疫病综合防控和制定合理免疫程序提供科学依据,本试验选择不同养殖场（户）的猪、牛、羊和鸡,分别应用口蹄疫液相阻断ELISA试验和血凝抑制试验开展了猪、牛、羊口蹄疫灭活疫苗和高致病性禽流感H5N1亚型灭活疫苗免疫抗体检测试验。现将试验结果报告如下：1试验材料1.1试验动物猪96头,其中徂徕镇某养猪户38头,     

浅谈影响ELISA试验结果的因素

为了保障养殖业的健康发展,对畜禽进行疫苗注射是保证不发生区域性重大动物疫病的重要手段,检测疫苗接种后动物是否具有抗病风险的能力,发挥兽医实验室为疫病诊断提供技术支撑的作用.务川县兽医实验室采用酶联免疫吸附法(ELISA)对口蹄疫、猪瘟、禽流感和小反刍兽疫等动物传染性疫病进行免疫抗体监测.现结合自己的实验室工作经验,就影响ELISA检测结果的因素及应对措施浅谈如下.     

浅谈兽医实验室工作几点注意事项

<正>笔者在基层兽医实验工作多年,承担着曲周县动物疫病监测的重任,通常进行的试验包括平板凝集试验、血凝试验、血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验、PCR试验等。在这些试验中对于不同的病种国家规定了不同的操作规程,但在实际工作中常因人为因素产生影响试验结果的各种问题,增加了试验误差,造成检测结果不准确,导致结果误差,给疫病防控带来不良后果。现将笔者近年来实验操作方面几个注意事项总结如下:1血凝和血凝抑制试验     

全球动物疫病诊断试剂领域专利信息分析

正通过专利检索,可以对全球动物疫病诊断试剂领域专利公开趋势、技术构成、主要专利权人等方面进行专利信息分析,挖掘动物疫病检测领域研发趋势和重点机构。一、专利检索要素动物疫病诊断试剂是动物保健领域关键技术之一,包括凝集试验用抗原及抗体、血凝试验用抗原及抗体、变态反应抗原、乳胶凝集抗原、单克隆抗体、ELISA诊断试剂盒、胶体金诊断试剂条、PCR及RTPCR诊断试剂盒、荧光PCR及RT-     

血凝和血凝抑制试验影响因素分析

血凝和血凝抑制试验是检验新城疫、禽流感等疫病抗体效价的一种常用方法,该方法具有经济、简便、灵敏、快速等优点,已被许多市、县级动物疫病预防控制机构实验室所采用,但该试验影响因素很多,常常导致试验结果不准确。作者从试剂的配制、器材的选择及操作中容易出现的问题等方面进行分析,从而避免或减少不利因素的影响,提高试验的准确性。