苷肽注射液对家兔的慢性毒性试验研究

本试验对家兔注射不同剂量的苷肽注射液,通过其对家兔的行为、体重、饮食状况和生理、生化指标及组织学变化的影响,研究苷肽注射液对家兔的慢性毒性试验。结果表明：苷肽注射液在一定使用剂量范围内,对家兔的行为、体重、饮食状况及生理生化指标均无不良影响。     

苷肽注射液对猪免疫器官及血液指标的影响研究

通过对猪注射不同剂量的苷肽注射液,研究了苷肽注射液对猪的免疫器官和血液指标的影响。结果表明,苷肽注射液在一定程度上可促进猪体重增长,对猪免疫器官的影响不显著,对血液指标未见不良影响。合适剂量的苷肽注射液能够促进仔猪外周血淋巴细胞PHA的增殖。     

苷肽注射液诱导犬产生IL-2的试验

为了探讨新型免疫增强剂——苷肽注射液对犬免疫功能的影响,以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射后0、2、7、15、21 d采血,检测不同组间的IL-2分泌情况。结果表明:苷肽注射液单独应用及其与疫苗联合应用,在注射后2 d就可以显著提高IL-2水平,并且可以维持15 d;注射苷肽注射液联合犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组IL-2水平显著高于单独注射犬五联疫苗组(P<0.05),说明苷肽注射液可以提高犬IL-2的水平,具有提高细胞免疫的作用。     

苷肽注射液对猪的慢性毒性试验

试验以保育猪为研究对象,肌肉注射不同剂量的苷肽注射液,观察其对保育猪的行为、增重、饮食和生理、生化指标及组织学变化的影响,研究苷肽注射液对保育猪的慢性毒性试验。结果表明:苷肽射液在一定使用剂量范围内,对保育猪的行为、增重、饮食状况以及血液生理生化指标、组织学变化均无不良影响。     

苷肽注射液诱导犬产生γ-干扰素试验的研究

为了探讨新型免疫增强剂———苷肽注射液对犬免疫功能的影响,以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗(狂犬病、犬瘟热、副流感、传染性肝炎与细小病毒性肠炎)、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射后0、2、7、15、21 d采血,检测不同组间IFN-γ含量的变化。结果表明:苷肽注射液单独应用及其与疫苗联合应用,在注射后2 d就可以显著提高IFN-γ水平,并且可以维持15 d;注射苷肽注射液联合犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组IFN-γ含量显著高于单独注射犬五联疫苗组(P<0.05),说明苷肽注射液可以诱导γ-干扰素的产生,从而发挥其免疫增强的作用。     

川楝素对昆明小鼠的胚胎毒性研究

取体重18~25 g雌鼠,超数排卵后与公鼠合笼。获得的孕鼠随机分为 6 组,分别用于研究川楝素对孕鼠2 细胞胚、桑椹胚、囊胚3个时期胚胎的毒性。每个时期均设对照组,以小鼠腹腔注射1/30半数致死量(LD50)的川楝素剂量对以上3个时期试验组孕鼠染毒2次,对照组孕鼠用等量PBS注射。研究其着床时期胚胎毒性时不对小鼠进行超数排卵,但试验组孕鼠染毒3次,对照组孕鼠用等量PBS注射。最后计数、观察4个时期孕鼠子宫内的胚胎数量和形态。结果表明:2 细胞胚、桑椹胚、囊胚时期试验组胚胎总数与对照组相比,没有统计学上差异(P>0 05); 2 细胞期试验组正常胚胎、异常胚胎数量与对照组相比,也无统计学上的差异(P> 0 05);桑椹胚、囊胚时期试验组正常胚胎、异常胚胎数量与对照组相比,具有极显著差异(P<0 01)。3 次染毒对着床后的胚胎毒性最大,子宫内胚胎几乎全部溶解,无法计数。母体组织病理切片观察发现川楝素对主要器官心、肝、肺、肾、子宫仅有轻微损害,提示腹腔注射小剂量川楝素对怀孕小鼠具有特定的胚胎毒性。     

环磷酰胺对SD大鼠围产期的毒性影响

为探讨环磷酰胺对SD大鼠围产期的毒性及毒性与剂量的相关性,取健康受孕SD大鼠100只,按体重随机分为溶媒对照组和环磷酰胺低、中、高剂量组,每组孕鼠不少于20只,皮下注射给药,观察临床表现,测定毒性。结果表明,环磷酰胺低、中、高各剂量组对大鼠围产期都有明显毒性作用,随环磷酰胺给药剂量增加,毒性作用增强,药物剂量与毒性具有明显的量效关系。     

苷肽注射液对犬外周血CD 4、CD 8比值的影响

以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,各组犬于注射的第0、2、7、15天采血,检测不同组之间的CD 4＋和CD 8＋比值变化规律。结果表明：苷肽注射液单独应用和与疫苗同时应用,在注射的第2天就可以显著提高CD4＋、CD8＋比值,到第7天时达到最高值。并且发现,注射苷肽注射液同时注射犬五联疫苗组和单独注射苷肽注射液组CD4＋、CD8＋比值显著高于单独注射犬五联疫苗组（P〈0.05）,这说明苷肽注射液具有增强免疫的作用。     

苷肽注射液对犬淋巴细胞转化试验

以20只健康犬为研究对象,随机分为四组,每组5只,分别注射苷肽注射液、苷肽注射液和犬五联疫苗、犬五联疫苗、生理盐水,研究苷肽注射液及其与疫苗配合进行的对犬淋巴细胞转化试验。各组犬于注射的第1、2、7、14、21天采血,进行淋巴细胞转化试验。结果表明:苷肽注射液单独应用和与疫苗同时应用,在注射的第2天就可以显著提高淋巴细胞转化率(P0.05),且能维持14～21天;疫苗组在注射的第7天达到了最高值,但明显低于前两组。这说明了苷肽注射液具有增强免疫的作用,并且可延长疫苗维持较高免疫功能的时间。     

黄芩苷对双酚A致小鼠生殖损伤的保护作用

为研究黄芩苷对双酚A(Bisphenol A,BPA)所致子代小鼠生殖毒性的缓解作用。本试验将60只昆明孕鼠随机分为A、B、C共3组,每组20只。A组为对照组,孕鼠妊娠1~14d灌胃生理盐水同时饲喂普通鼠粮;B组为BPA组,孕鼠妊娠1~7d给予生理盐水,妊娠8~14d给予500mg/kg BPA;C组为黄芩苷+BPA组,孕鼠妊娠1~7d灌胃1mg/kg黄芩苷,妊娠8~14d给予500mg/kg BPA,待孕鼠自然分娩。观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠8周龄剖杀,分离血清,摘取睾丸或卵巢,ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮(T)、雌二醇(E2)及黄体生成素(LH)水平,HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化,免疫组化及免疫荧光方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果显示:黄芩苷能够降低BPA致子代小鼠死亡率,升高仔鼠T(♂)、LH(♀)含量,降低仔鼠(♀)E2水平(P0.05)。HE染色结果表明,BPA组仔鼠睾丸组织损伤严重,间质细胞减少,卵巢组织结构空泡逐渐增多,颗粒数量逐渐减少。黄芩苷能改善BPA引起的睾丸及卵巢组织损伤。免疫组化结果显示,BPA对仔鼠睾丸或卵巢Bax蛋白表达无影响,但对睾丸或卵巢Bcl-2蛋白表达有降低作用。预先给于黄芩苷后能够升高仔鼠睾丸或卵巢Bcl-2蛋白表达,但对Bax蛋白表达无显著影响。免疫荧光结果发现,BPA升高仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达,降低Bcl-2阳性蛋白表达。黄芩苷降低睾丸或卵巢Bax蛋白表达,升高睾丸或卵巢Bcl-2蛋白表达。本试验结果表明,孕鼠妊娠期给予黄芩苷降低BPA引起的子代小鼠死亡率,平衡生殖激素水平和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白表达,缓解BPA染毒孕鼠对子代小鼠所致的生殖毒性。     

胆翘注射液急性和亚慢性毒性试验

旨在评价胆翘注射液的毒性,为临床安全用药提供理论依据。以昆明小鼠为研究对象,进行急性和亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中,给予小鼠不同浓度的胆翘注射液来测定胆翘注射液的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,小鼠以(10、5、2.5g/kg)不同剂量连续腹腔注射给药28d,在给药第28天观察小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标和病理组织学变化。结果显示,急性毒性试验各剂量组小鼠均无死亡,无法测出LD_(50),最大耐受量为20g/kg。亚慢性毒性试验中用药组小鼠的临床体征、体重及饲料利用率、血常规、血液生化指标与空白组小鼠相比,无显著差异(P0.05),组织病理学观察,实质器官无异常病变。表明胆翘注射液实际无毒,安全性好。     

六茜素注射液的亚慢性毒性试验

为了研究六茜素注射液的安全性,进行了六茜素注射液的亚慢性毒性试验。试验每天给大白鼠灌服六茜素注射液80、160、320 mg/kg,对各组大白鼠的体重变化、脏器系数、血液生理生化指标及心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胸腺等脏器病理变化进行了测定和分析。结果表明,试验组大白鼠的各脏器无明显肉眼可见剖检病变;试验组大白鼠的各脏器系数与对照组差异不显著(P>0.05);320 mg/kg剂量组大白鼠的肝脏和肾脏器官出现轻微的病理变化。结果说明,六茜素注射液毒性低,可以安全用于动物。     

硫代甜菜碱的一般毒性研究

为提供硫代甜菜碱的安全性评价资料,本试验进行了硫代甜菜碱对小鼠的一般毒性研究。采用改良Karber法测得DMSP对小白鼠的口服急性毒性LD50为3739.4mg/kg,属低毒;用剂量递增连续20d染毒法测得DMSP对小白鼠的累积系数K>5.3,属基本无蓄积;耐受性试验结果表明,连续用药,小白鼠能对硫代甜菜碱产生耐受现象;小鼠亚急性毒性试验的结果表明,DMSP在使用剂量范围内对小鼠的行为、体重、饮食状况、生理和生化指标均无不良影响。提示硫代甜菜碱毒性极低,在临床使用剂量下,作为饲料添加剂长期使用不会引起毒性反应。     

Effect of modified oligopeptides from the beetle Allomyrina dichotoma on Escherichia coli infection in mice

The novel peptides based on a putative active site of defensin, an anti-bacterial peptide from the beetle Allomyrina dichotoma, were synthesized. These synthetic oligopeptides exhibited strong anti-bacterial activity in vitro, even against antibiotic-resistant pathogenic bacteria. Then, anti-bacterial activity of two newly synthesized peptides, RLYLRIGRR-NH(2) (peptide A) and RLRLRIGRR-NH(2) (peptide B) was also examined by macroscopic and histopathologic assessment during the course of infection in mice inoculated with antibiotic-resistant pathogenic Escherichia coli (E. coli) in vivo. Peptide B decreased the mortality of mice inoculated with antibiotic-resistant pathogenic E. coli. The results of macroscopic and histopathologic examinations revealed that peptide B could protect the mice from infection. In contrast, peptide A failed to protect mice from infection with antibiotic-resistant pathogenic E. coli. Also, modified peptides A and B produced no toxicity or side effects in mice. These results suggest that peptide B is useful for developing novel antibiotics against antibiotic-resistant pathogenic bacteria.     

重组牛粒细胞集落刺激因子的纯化鉴定及对小鼠的安全性评价

[目的]评价重组牛粒细胞集落刺激因子（recombinant bovine granulocyte colony stimulating factor,rbG-CSF）的安全性,为后期rbG-CSF临床应用价值的研究打下基础。[方法]采用rbG-CSF重组大肠杆菌,经过发酵、纯化后获得rbG-CSF;利用SDS-PAGE法对[目的]蛋白进行鉴定;应用BCA法测定目的蛋白浓度。急性毒性试验使用健康昆明小鼠112只,分为8组,雌雄各半,将8组小鼠分为肌肉注射组和腹腔注射组,肌肉注射组和腹腔注射组分别设有1个对照组和3个剂量组,3个剂量组注射rbG-CSF的剂量分别是150、75、37.5 μg/只,对照组注射生理盐水,给药后每隔3 d进行1次称重,持续观察14 d,给药后14 d对各组小鼠进行剖检,取肝、脾、肾、生殖器官进行脏器系数测定和病理切片观察。慢性毒性试验使用健康昆明小鼠160只,分组与急性毒性试验相同,注射rbG-CSF的剂量分别是15、10、5 μg/只,每周注射1次,每周注射的第6天进行1次称重,持续注射12周,第12周给药后7 d对小鼠进行剖检,处理方法同急性毒性试验。[结果]rbG-CSF纯化成功,经SDS-PAGE法鉴定[目的]蛋白大小为21.5 kDa,与设计大小一致;测得[目的]蛋白浓度为302.19 μg /mL,可满足后期安全性试验所需浓度要求;急性毒性试验和慢性毒性试验中,小鼠的体重和脏器指数经SPSS 20.0单因素方差分析,剂量组与对照组相比均无显著差别;剖检各器官未出现明显病变;HE染色切片观察,各剂量组与对照组不存在显著变化。[结论]该试验建立的纯化鉴定rbG-CSF的方法可行,rbG-CSF在试验浓度下对小鼠并未造成器质性的伤害。