IgA和IgG分泌细胞在双峰驼CALT中的分布规律

为研究黏膜免疫重要效应分子IgA和IgG的分泌细胞在双峰驼眼结膜相关淋巴组织中的分布规律,应用免疫组织化学(SABC)的方法对两类细胞的分布进行了详细的比较研究。结果显示,IgA分泌细胞主要沿着结膜上皮下浅层固有层呈弥散性分布,在腺体周围、圆顶区和滤泡间区仅有零星分布;IgG分泌细胞的分布特征与IgA分泌细胞相似,但浅层固有层中IgA分泌细胞的数量多于IgG分泌细胞数量。结果表明,在结膜免疫中IgA分泌细胞占优势,而IgG分泌细胞的存在提示IgG不仅参与全身性体液免疫也有可能参与局部免疫。     

猪呼吸道IgA和IgG分泌细胞的分布

旨在研究猪呼吸道IgA和IgG分泌细胞的分布。取健康50日龄猪的软腭扁桃体、咽扁桃体、气管和肺组织,应用免疫组织化学技术研究猪呼吸道中IgA和IgG分泌细胞的变化。结果显示,在软腭扁桃体中,IgA和IgG分泌细胞主要分布在隐窝上皮下;在咽扁桃体中,IgA和IgG分泌细胞主要集中分布在黏膜上皮下;在气管中,IgA和IgG分泌细胞主要分布在黏膜上皮下固有层和气管腺周围,在气管上皮之间也有少量IgA分泌细胞分布;肺中的IgA和IgG分泌细胞主要集中分布在肺泡隔和各级支气管的黏膜上皮下。另外,我们观察到肺中的2种分泌细胞着色明显比气管中淡。对2种分泌细胞进行统计学分析发现,IgA分泌细胞在气管中分布最多,其次是咽扁桃体、软腭扁桃体,肺中最少;而IgG分泌细胞则在咽扁桃体中最多,其次是气管、肺,软腭扁桃体中最少。结果表明,猪呼吸道含有较多的抗体分泌细胞,但不同部位不同的抗体分泌细胞分布不尽相同,该结果可为猪呼吸道黏膜免疫及相关疫病发生机理的研究提供理论依据。     

寡果糖对人源菌群仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的影响

本文主要研究寡果糖对人源菌群仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的影响。通过无菌剖腹产获取15头无特定病原菌(specific pathogen free,SPF)仔猪,随机分为三组。第一组为SPF组,经口灌服磷酸钠缓冲液(内含10%甘油)以示对照;第二组为人源菌群(human flora-associated,HFA)组,经口服途径接种人源菌群;第三组为寡果糖(fructo-oligosaccharides,FOS)组,口服途径接种人源菌群且灌喂寡果糖。仔猪饲养于屏障系统内,无菌条件下人工哺育45天。应用免疫组织化学方法进行研究。结果表明:(1)所有仔猪小肠和结肠的固有层中均分布有IgA和IgG分泌细胞。(2)IgA和IgG分泌细胞在十二指肠中分布最多,随着肠段的向后推移IgA和IgG分泌细胞数量有逐渐下降趋势。(3)HFA组和FOS组IgA分泌细胞数量在回肠显著高于SPF组(P<0.01);十二指肠中HFA组IgG分泌细胞数量显著高于SPF组(P<0.01)。(4)FOS组IgA分泌细胞数量在空肠显著高于HFA组外(P<0.05),其他肠段总体上低于HFA组,但差异不显著。本结果提示给新生仔猪接种人源菌群能促进仔猪肠道中IgA和IgG分泌细胞的发育,而寡果糖使肠道IgA和IgG分泌细胞数量呈现下降的趋势。     

禽流感灭活抗原与佐剂配合鼻腔免疫对鸽呼吸道抗体分泌细胞的影响

通过禽流感灭活抗原配合黏膜免疫佐剂鼻腔免疫乳鸽,研究鸽呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量。结果显示,首免后第3、5周,应用CpG免疫后肺IgG分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）,首免后第5,7周,应用CpG免疫后肺IgA分泌细胞面积显著高于对照组（P〈0.05）;首免后第3、5、7周,应用灭活禽流感抗原免疫后,鸽呼吸道各部位IgG分泌细胞和IgA分泌细胞面积与对照组无显著差异;应用禽流感抗原配合CpG和胆酸钠免疫后鸽呼吸道各部位单位面积中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞面积均显著或极显著高于对照组（P〈0.01,P〈0.05）。结果表明,灭活禽流感抗原配合黏膜免疫佐剂通过鼻腔免疫能够提高呼吸道中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,增强局部呼吸道体液免疫应答水平。     

几种黏膜免疫佐剂对鸡小肠IgA分泌细胞的影响

分别在新城疫Ⅳ系弱毒苗中添加黏膜免疫佐剂乳酸杆菌、CpG DNA、重组IL-2、氟化钠和大豆黄酮，经口免疫鸡后，研究十二指肠、空肠、Peyer’s斑单位面积IgA分泌细胞的变化。首先提纯鸡IgA和制备兔抗鸡IgA血清，然后应用免疫组化技术显示鸡小肠IgA分泌细胞。结果表明，在免疫后第3周、第5周乳酸杆菌组比新城疫组（ND）极显著增加各段小肠IgA分泌细胞的数量（P〈0．01）；CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮在整个免疫期内均明显增加鸡小肠黏膜局部IgA分泌细胞数量；NaF对鸡体黏膜局部IgA分泌细胞数量无明显增加。结果表明乳酸杆菌、CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮是有效的口服黏膜免疫佐剂。     

IgM分泌细胞在不同年龄家兔胃肠道黏膜中的分布

为探讨IgM分泌细胞在家兔胃肠道中的分布特点,选取2月龄(幼年组)、5～7月龄(青年组)、36月龄(老年组)的健康日本大耳兔,采集胃肠道不同部位的组织样品,采用免疫组织化学方法检测这些部位中IgM分泌细胞的分布特征。结果显示:IgM分泌细胞在各年龄组家兔胃肠道的分布位置和分布趋势基本一致,主要分布在黏膜固有层和肠腺附近,阳性细胞密度从胃底腺区至十二指肠呈增加趋势,空肠至直肠呈减少趋势。胃中幽门腺区分布密度显著高于胃底腺区(P0.05);小肠中十二指肠密度最高,回肠最低;大肠中盲肠密度最高,直肠最低。IgM分泌细胞在青年组胃肠中的分布最为丰富。提示:青年组家兔抵御病原体入侵的能力强于幼年组和老年组,十二指肠和幽门腺区可能是家兔胃肠道黏膜免疫中产生体液免疫应答的主要部位。     

单胃动物胃液的成分及作用

胃底腺是胃的主要消化腺,占据整个胃底部,由主细胞、壁细胞和粘液细胞三类细胞组成。他们分别分泌胃消化酶原、盐酸和粘液。此外壁细胞还分泌一种称为“内因子”的物质,该物质与小肠钴胺素的吸收有关。幽门腺分布于幽门部,可分泌碱性粘液。胃液即是有这三种腺体和胃黏膜上皮细胞的分泌物共同组成。胃黏膜内还含有一些内分泌细胞,除了位于幽门腺区的分泌胃泌素的G细胞外,还有分泌生长抑素的D细胞、分泌胰多肽的PP细胞和分泌组胺的肥大细胞。     

枯草芽孢杆菌对仔猪小肠局部天然免疫及TLR表达的影响

本研究主要探索枯草芽孢杆菌对仔猪小肠局部天然免疫及TLR表达的影响。选取4窝相同胎次的新生仔猪(15头)为研究对象。分别于仔猪0、7、14、26日龄灌喂枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(活菌数为1×108CFU.mL-1)。试验结果显示:枯草芽孢杆菌能够显著地促进十二指肠中TLR9和细胞因子IL-6的表达(P<0.05)以及回肠中细胞因子IL-1的表达(P<0.01),同时能够显著地提高仔猪小肠IgA分泌细胞的数量(P<0.01)。结果提示,枯草芽孢杆菌可能通过胞外成分激活小肠TLR9的表达后,诱导细胞因子IL-6的分泌,促进IgA分泌细胞数量增加。饲喂枯草芽孢杆菌具有促进新生仔猪小肠细胞免疫和体液免疫的作用,对预防新生仔猪腹泻提供了应用前景。     

分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征

分泌IgA和IgG的浆细胞是黏膜免疫系统中两种重要的效应细胞。本研究旨在探究分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征。以20只健康成年家兔为研究对象，根据硬腭褶皱和牙齿特征，依次将家兔鼻腔分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ 5段，运用组织学、免疫组织化学、图像分析及统计学方法，对分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征进行了详细的研究。免疫组化结果显示：分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔每段都有分布，主要弥散分布于鼻黏膜固有层中；其形态呈圆形或卵圆形，核一般位于细胞一侧，胞质丰富呈阳性反应。统计结果显示：分泌IgA和IgG的浆细胞在鼻腔不同段的分布密度由高到低依次是：鼻腔第Ⅳ段、第Ⅴ段、第Ⅲ段、第Ⅱ段、第Ⅰ段。其中分泌IgA的浆细胞在鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅰ、Ⅱ段（P<0.05），在上颌鼻甲、鼻中隔和筛鼻甲的分布密度显著高于上鼻甲（P<0.05）；与分泌IgA的浆细胞相比，分泌IgG的浆细胞除鼻腔第Ⅳ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅲ、Ⅴ段（P<0.05）外，其分布变化趋势基本与分泌IgA的浆细胞类似。结果证明，分泌IgA和IgG的浆细胞弥散分布于家兔每段鼻腔的鼻黏膜固有层中，有利于SIgA和IgG分子在整个鼻黏膜形成完整的保护屏障；分泌IgA和IgG的浆细胞主要分布在家兔鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段及上颌鼻甲、筛鼻甲和鼻中隔，提示这些区域是家兔鼻腔免疫的重要效应部位。本研究为家兔呼吸系统疾病的预防及进一步探讨家兔鼻腔免疫应答的机制提供重要的理论依据。     

仔猪小肠母源抗体IgG的摄取与肠道淋巴组织发育的组织学研究

本研究采用H．E．染色、硫化铅组织化学染色及IgG免疫组织化学染色的方法对0、5、28日龄仔猪小肠进行了组织学研究。结果显示：仔猪小肠IgG阳性反应物分布于小肠绒毛柱状细胞的转运泡、柱状细胞基底部、小肠小血管血浆、淋巴管淋巴浆中，中央乳糜管周围的结缔组织中也有分布。仔猪小肠IgG阳性强度随日龄的增加逐渐下降。在各肠段中。空肠IgG阳性最强。仔猪小肠酸性磷酸酶的分布规律与IgG相似。仔猪小肠上皮内淋巴细胞数目随日龄增加显著增多，集合淋巴小结由0日龄至28日龄逐渐发育成熟。结论：仔猪在出生时通过胞吞作用摄取母源抗体IgG，伴随此过程的还有溶酶体的细胞内消化作用。最终通过毛细血管和毛细淋巴管途径进行转运，0～5日龄是仔猪小肠摄取母源抗体IgG的最佳时机，至28日龄，仔猪小肠发生“肠关闭”，IgG摄取停止。与此同时，小肠淋巴组织逐渐发育成熟，肠道的黏膜免疫屏障趋于完善。     

牛磺脱氧胆酸钠和CpGDNA对灭活H9N2禽流感病毒鼻腔免疫鸭的呼吸道抗体分泌细胞的影响

运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭,通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价.结果发现:应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周,鼻腔、气管和气管叉组织中的IgA和IgG分泌细胞面积显著或极显著(P＜0.05或P＜0.01)高于单独H9N2灭活病毒免疫后的水平;应用CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后鼻腔和气管组织中IgA和IgG分泌细胞的面积有部分提高(P＜0.05);而单独运用H9N2灭活病毒鼻腔免疫后IgA和IgG分泌细胞面积同对照组相比没有显著差异.结果表明:在牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA的配合下,禽流感H9N2灭活病毒鼻腔免疫能够提高雏鸭呼吸道组织中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,有效地增强呼吸道局部的免疫应答水平.     

Helicobacter pylori-specific immunoglobulin synthesis in gnotobiotic piglets: evidence for the induction of mucosal immunity in the stomach

Short term tissue biopsy cultures and paired, sera, bile and gastric and intestinal contents from Helicobacter pylori-infected gnotobiotic piglets were tested for the synthesis of H. pylori-specific immunoglobulin (Ig) isotype production by antigen-specific ELISA from post-infection days (PIDs) 2-28. Serum antibody levels in all three Ig isotypes were elevated from baseline values by PID 14, serum IgM levels reached peak levels on PID 14 and by PID 28 bile was strongly positive for IgA and IgG.Intestinal, but not gastric contents from infected piglets, contained IgA-specific antibody from PID 14 onward. Gastric mucosal epithelia adjacent to areas of inflammation in infected but not uninfected control piglets produced readily detectable amounts of porcine secretory component (SC); IgA-positive plasma cells were identified in gastric submucosa and lamina propria in these areas. Culture fluid supernatants, collected from explanted gastric cardia and antra and intestinal ilea of H. pylori-infected piglets had trace amounts of IgA as early as PID 2 in some animals, and strong IgA reactivity in all by PID 28. Supernatants also contained H. pylori-specific IgG by PID 14. A strong gastric lymph node IgA response contrasted with moderate IgA production in mesenteric lymph nodes and spleen. Mucosal biopsy production of H. pylori-specific IgG was more evenly distributed throughout the lymphoid system. These data support the contention that the Ig response to H. pylori is initiated within the gastric compartment and matures over time to a generalized IgA-dominated mucosal and IgG-dominated nonmucosal humoral immune response.     

The protective effect of two porcine enterovirus vaccines in swine.

The virus neutralizing substance in the gastrointestinal tract of swine vaccinated in different ways with porcine enterovirus strain T80 was characterized by tests for enhancement and absorption of virus neutralizing activity by class specific antiporcine Ig antisera. The gastrointestinal virus neutralizing activity of piglets which were vaccinated with live virus orally resided predominantly in the IgA class, although some activity was present also in the IgM and IgG classes. The serum virus neutralizing activity of this group was present in all three classes but primarily in the IgG class. The IgA in the serum of this group was presumably of gut origin. However, in piglets vaccinated with live virus intramuscularly, with formaldehyde-inactivated virus orally or intramuscularly or with ethylenimine-inactivated virus by both oral and subcutaneous routes, both serum and gastrointestinal virus neutralizing activity were attributable predominantly to antibodies of the IgG and IgM classes. None possessed serum IgA. There was evidence also for the presence of Ig fragments in some gastrointestinal extracts.     

猪流行性腹泻免疫病理学研究Ⅳ.胃肠道IgA、IgM和IgG产生细胞数及其分泌液和血清中IgA、IgM和IgG含量动态观察

给10头8周龄仔猪经口感染猪流行性腹泻肠管毒,于感染后5、15、25、35和45d各扑杀2头,采取胃及各段肠管标本,用免疫过氧化物酶技术(间接法)检查胃肠粘膜固有层中IgA、IgM和IgG产生细胞数;收集血液及胃、各段肠管分泌液,应用ELISA双抗体夹心法测定IgA、IgM和IgG含量。结果:实验猪感染后第15d,空肠下段、回肠和回盲口处粘膜固有层中IgA和IgM产生细胞明显增多,肠管分泌液中IgA含量与IgA产生细胞数呈正相关,肠道局部免疫反应的高峰比全身性(系统性)免疫出现得早,且周期短。本试验提示,肠道粘膜积极参与了该病的免疫过程;胃肠道对猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫反应的主要部位在空肠下段、回肠和回盲目;参与胃肠道免疫反应的免疫球蛋白产生细胞主要是IgA和IgM产生细胞。     

Commensal bacteria coated by secretory immunoglobulin A and immunoglobulin G in the gastrointestinal tract of pigs and calves

A large amount of secretory immunoglobulin A (S‐IgA) is secreted in the alimentary tract of mammals. It has been reported that S‐IgA coats a portion of commensal intestinal bacteria in human and mouse. However, S‐IgA‐coated bacteria have not been studied in pigs and calves. In this study, we evaluated the distribution of S‐IgA‐coated commensal intestinal bacteria in each portion of the gastrointestinal tracts of pigs and calves. Immunoglobulin G (IgG)‐coated bacteria were also analyzed because a considerable amount of IgG is secreted in the gastrointestinal tracts of pigs, and in particular, calves. S‐IgA‐ or IgG‐coated bacteria were detected in all the segments of the gastrointestinal tracts of pigs and calves. The proportion of S‐IgA‐coated bacteria to total bacteria (i.e. S‐IgA coating ratio) varied in the segments of the gastrointestinal tract in pigs, whereas those of calves were nearly the same throughout the gastrointestinal tract. The S‐IgA and IgG coating ratios were higher in pigs than in calves for all segments of the gastrointestinal tract.     

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IgA分泌细胞和SIgA(分泌型IgA)的影响

雏鸡在新城疫La Sota系冻干苗进行口腔免疫时,分别按0.125,0.250,0.500 g/mL 3个剂量灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续10 d。于20,40,60日龄时剖杀摘取各段肠管,免疫组织化学方法检测十二指肠、空肠、Peyer's斑单位面积IgA分泌细胞的变化,同时通过ELISA方法测定空肠中SIgA的含量。结果表明,与对照组相比,芪蓝四君子汤能显著提高雏鸡小肠IgA分泌细胞的阳性表达率及空肠SIgA抗体水平,揭示芪蓝四君子汤能提高新城疫的免疫原性,增强雏鸡的黏膜免疫力,是有效的口服佐剂。