猪旋毛虫病快速检测试纸研制成功

旋毛虫病是一种人畜共患的寄生虫病，其感染宿主众多，流行范围非常广泛，可感染人和150多种动物。旋毛虫感染猪和犬后几乎不表现任何临床症状，这给旋毛虫病的诊断和控制带来一定的困难。     

林可霉素胶体金快速检测试纸条的研制

本文利用胶体金免疫层析技术研制了一种快速检测牛奶中林可霉素的试纸条,经过测试,该试纸条的检测限为20μg/L,检测时间为10min,假阳性率和假阴性率均为0,该方法准确,可靠,使用简便,适合大量样品的现场检测。     

鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸条的研制及特性测定

以高亲和力和高特异性IBDV单克隆抗体为基础,成功的研制出IBDV快速诊断试纸条,试验结果表明IBD试纸与鸡的NDV、ALV、EDS-76、IBV、ILTV、MDV无交叉反应。IBD试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与琼扩试验相比,则提高了32—64倍,能够识别不同的IBDV毒株包括强毒和弱毒。与ELISA的阳性符合率为100％。对于人工感染IBDV鸡,感染后36h在感染鸡的法氏囊即可检出IBDV,从检测到获得结果仅需要1-2min,IBD试纸具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂,实现了鸡病诊断的一步法。     

链霉素胶体金快速检测试纸条的研制

本研究建立了一种基于免疫胶体金技术的链霉素快速检测方法。该方法检测灵敏度10ng·ml-(101ppb),蜂蜜样本检出限是40ng·ml-(40ppb),单个样本检测时间为5～10min。所研制试纸条产品检测变异系数小,批1间、批内检测结果重复性良好,可以应用于蜂蜜样本中链霉素的快速检测和现场筛查,具有较高的市场应用前景。     

种快速检测猪兰耳病抗体的免疫金标试纸研制成功

猪兰耳病（PRRS）与其它繁殖性障碍和呼吸道病的临床症状非常类似，根据临床症状很难做出准确的鉴别诊断。采用疫苗接种是防制该病发生和流行的有效方法，而检测猪体抗体水平是检验免疫是否有效的最好方法。当前检测猪兰耳病抗体的方法有间接ELISA法和乳胶凝集法。两者都需要分离猪血清，还需要有酶标仪等仪器。为此，我们应用８０年代发展起来的免疫胶体金技术与快速斑点免疫技术、胶体金层析技术建立的快速检测猪血液中的猪兰耳病抗体的胶体金试纸检测法。该法具有微量、敏感、特异、快速、简便、结果容易判定、重复性好，检测一个样…     

应用试纸条对南阳地区旋毛虫病试验检测研究

目的为调查研究20世纪90年代以来南阳地区旋毛虫发病现状,感染率,流行动态,流行病学特点。方法自2003年1月-2005年12月,应用河南省农科院生物技术研究所研制开发的具有特异、敏感、快速、简单、易存、实惠等优点的旋毛虫快速诊断试纸条,对南阳地区4个平原县(市、区)(宛城区、卧龙区、新野县、邓州市)和1个山区县内乡3 788头猪进行血清学检测和屠宰猪肌肉镜检,对南阳市郊区狗、猫、鼠和食肉昆虫四种动物共计132只分别进行血清学检测和肌肉目测镜检,将旋毛虫阳性的狗、猫、鼠和食肉昆虫分别人工喂猪做感染试验,并进行猪肉泔水、狗肉泔水、牛、羊肉泔水饲喂试验检测泔水中旋毛虫感染程度。结果南阳地区猪旋毛虫血清学阳性率为2.93%,目测镜检的阳性率为2%;狗血清学阳性率为12.5%,镜检阳性率12.5%;猫血清学阳性率50%,镜检阳性率为33.33%;鼠血清学阳性率为10.3%,镜检阳性率为5.88%;食肉昆虫血清学阳性率为4.76%。感染试验中,猪受到感染的情况分别为33.3%、66.7%、100%和0。测定草食兽未发现有旋毛虫感染。泔水试验结果:狗肉泔水感染率为10%,猪肉泔水感染率为50%,牛、羊肉泔水未发生感染。结论市区比县发病率低,猪肉与狗肉泔水喂猪是当地猪感染旋毛虫的主要来源,南阳地区的保虫宿主主要是猪,山区猪旋毛虫超过平原地区,应用旋毛虫快速诊断试纸条检测旋毛虫比传统的目测镜检检测高出近1个百分点。     

新城疫快速诊断试纸条的研制及初步应用

以红色胶体金标记鸡新城疫(ND)抗体，兔抗鸡ND抗体和兔抗鸡二抗包被于硝酸纤维素膜上，研制出快速诊断鸡新城疫的免疫层析测试条。将试纸条插入样品中，利用滤膜的层析作用，使加在膜一端的样品，向另一端移动，在移动过程中抗原与抗体发生反应，产生肉眼可见的红色条带。该法具有操作简便、快速准确、特异性强、重复性好，无需任何仪器设备等特点，对于鸡场中快速诊断及防治本病具有重大意义。     

盐酸克伦特罗胶体金快速检测试纸条的研制

研制一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法的试纸条,以用于对猪尿中盐酸克伦特罗的检测。以胶体金标记盐酸克伦特罗单克隆抗体竞争性膜层析技术制成了猪尿液中盐酸克伦特罗残留检测的快速检测试纸条。如待测尿样中无盐酸克伦特罗,则金标抗体能顺利地与固相载体结合,形成肉眼可见的红色带;如待测尿样中含有盐酸克伦特罗,则与金标抗体以同样的机会与固相载体结合,竞争性地占去了金标抗体与固相载体结合的机会,使金标抗体与固相载体的结合量减少,无法形成肉眼可见的红色带。经过试验制成了可检测出猪尿样中盐酸克伦特罗浓度为2 ng/mL的试纸条,可在8 min完成测试,肉眼即可判断;该试纸条灵敏度能够达到临床使用的要求,且无需任何仪器设备,具有敏感、特异、快速、简便的特点,适用于现场快速检测和筛选工作。     

弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制

将样品垫（加样区）、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上，组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条。然后用其进行动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫IHA诊断试剂进行对照试验。经对已知弓形虫阴、阳性血清检测，与弓形虫IHA检测结果的符合率为82．5％，金标试纸条较弓形虫IHA诊断试剂能提前2d检测到抗体。结果表明，检测弓形虫抗体免疫胶体金试剂（金标试纸条）的敏感度高于IHA。     

食品中亚硝酸盐快速检测试纸条的研制

利用与对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺反应显色的原理,探索最佳的试纸卡制作工艺,将对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺分别浸在试纸上,干燥,组装成亚硝酸盐速测试纸卡。同时制备含量依次为100 mg/L、80 mg/L、60 mg/L、40 mg/L、20 mg/L、10 mg/L、5.0mg/L、2mg/L、1mg/L的亚硝酸盐溶液制成标准比色卡,作为比色对照。经与分光光度法做了灵敏度和准确度的对比,该方法具有快速、简便、灵敏度和准确度高等特点。     

牛奶中恩诺沙星和环丙沙星检测试纸的研制及性能测定

应用胶体金免疫层析技术建立了恩诺沙星和环丙沙星快速检测试纸,并对试纸条的检测限、特异性和稳定性等参数进行了确定。结果表明,该试纸条对牛奶样本的检测限为50μg/L,能够特异性地检测恩诺沙星和环丙沙星,与液相色谱-串联质谱方法检测的阴性样本符合率为97．8％。该试纸条在2℃～8℃或室温可保存12个月,可应用于恩诺沙星在牛奶中的快速筛查现场检测。     

三抗体间接Dot-ELISA检测犬旋毛虫病IgG抗体的研究

本试验成功地建立了检测旋毛虫病犬血清中的特异性抗体的一种新的免疫学诊断法 -三抗体间接 Dot-EL ISA法 ,并与压片镜检法 (TSM)和琼脂扩散试验 (AGID)进行了比较。试验结果表明 ,Dot- EL ISA和 AGID对2 4 5份被检血清的阳性检出率为 2 2 .86 % (5 6 / 2 4 5 )和 6 .94 % (17/ 2 4 5 ) ,两者符合为 30 .36 %。该法的检出率比AGID高 15 .92 % ,比 TSM高 18.37%。Dot- EL ISA的相对灵敏度为 AGID的 6 7.4 7倍     

鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸的研制

本文简述用胶体金免疫层析技术,构建鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸。试纸主要由测试端、显色区和手柄端3部分构成,能在很短的时间内完成对鸡传染性法氏囊病的诊断,且无需任何仪器设备,具有简便、快速、敏感、特异的特点。     

Quantitative Risk Assessment of Human Trichinellosis Caused by Consumption of Pork Meat Sausages in Argentina

In Argentina, there are three known species of genus Trichinella; however, Trichinella spiralis is most commonly associated with domestic pigs and it is recognized as the main cause of human trichinellosis by the consumption of products made with raw or insufficiently cooked pork meat. In some areas of Argentina, this disease is endemic and it is thus necessary to develop a more effective programme of prevention and control. Here, we developed a quantitative risk assessment of human trichinellosis following pork meat sausage consumption, which may be used to identify the stages with greater impact on the probability of acquiring the disease. The quantitative model was designed to describe the conditions in which the meat is produced, processed, transported, stored, sold and consumed in Argentina. The model predicted a risk of human trichinellosis of 4.88 × 10^?6 and an estimated annual number of trichinellosis cases of 109. The risk of human trichinellosis was sensitive to the number of Trichinella larvae that effectively survived the storage period (r = 0.89), the average probability of infection (P_Pinf) (r = 0.44) and the storage time (Storage) (r = 0.08). This model allowed assessing the impact of different factors influencing the risk of acquiring trichinellosis. The model may thus help to select possible strategies to reduce the risk in the chain of by‐products of pork production.     

柑桔黑斑病菌的快速识别鉴定

本研究旨在探索一种快速、可靠、准确及操作简便的柑桔黑斑病菌检测方法。采用引物JRGGc,CITRIC1-ITS4,GCP和GCF3-GCR7分别对从柠檬果实黑斑上分离纯化到的黑斑病菌进行扩增,结果表明,引物GCP的扩增特异性最好,用其与酶MightyAmp?DNA Polymerase构建检测体系对黑斑病菌的扩增有很高的灵敏度,只需0.2g病斑组织在5h之内即可进行快速鉴定。此研究为柑橘黑斑病菌的快速检测奠定了基础。     

试纸法与琼扩法检测鸡IBD母源抗体的比较试验

应用快速检测试纸和琼脂扩散法（AGP）对雏鸡母源抗体消长规律及IBD高免卵黄进行了检测。结果表明，试纸法与琼扩法对雏鸡IBD母源抗体消长规律的检测结果基本一致，但前者的检出率比后者高。对高免卵黄抗体的检测结果表明两种方法具有极显著的直线相关关系，r=0.898。试纸法检测IBD母抗原体与其它方法比较，具有灵敏、特异、快速、简便等优点，为IBD母源抗体的快速检测提供了一种新的方法。     

RT-PCR快速诊断禽流感

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果,设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物,不经病毒分离,直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸, ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株,４个亚型１２株国内分离野毒株,ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性;对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒,ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒 Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和 Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品 ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２; ２４／５５、２４／５５, 二者符合率大于９５％。 ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测,只用６个小时就可得出准确的诊断结果,证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异,可用于禽流感的快速诊断。