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相似文献
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1.
牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列,合成GH-1、GH-2两条引物,分别以IBRV的Barta Nu/67株、IBRVBK125株基因组DNA为模板进行扩增,结果两株IBR病毒DNA均可扩增出362bp的特异性片段;对其同属的伪狂犬病毒(PRV)、火鸡疱疹病毒(HVT)及牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)进行扩增均未见特异性条带;敏感性检测表明,该法对IBR病毒的检出限量为104.25TCID50/0.1mL.  相似文献   

2.
牛传染性支气管炎病毒PCR诊断方法的研究   总被引:8,自引:1,他引:7  
根据已发表的牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因序列,应用oligo4.1程序设计一对引物PB1/PB2,分别对IBRVLA株、洛精、美精、BarthaNu/67株、B7株、云南-1和云南-2分离株进行PCR扩增。结果显示7株IBR病毒DNA均有399bp的特异性片段。用此引物对其同属的伪狂犬病毒(PRV)、马立克氏病毒(MDV)、鸡传染必喉气管炎病毒(ILTV)进行扩增。均未见特异性条带,证  相似文献   

3.
本文报道了应用本所1962年分离的伪狂犬病毒闽A株强毒为种毒(简称PRVFA)。该病毒株在乳地鼠肾和乳兔肾原代细胞上传500代后,对多种家畜仍保持原来的毒力。后采用蚀班克隆,筛选直径小于2mm的小斑,并结合低温诱变,选育出伪狂犬病毒弱毒株(简称PRVFB)。该弱毒株特性:对2kg重的家兔仍有35%发病死亡或麻痹和奇痒症状,其中有极少数耐过康复;对乳猪已无致病性;对其它家畜的奇痒症诱发力消失;.用家兔和乳猪盲传未发现返强;接种动物同居感染未发现水平传播;制成冻干弱毒疫苗的病毒最低滴度为LogTCID50=5.0;接种多种家畜安全有效。  相似文献   

4.
鸡传染性喉气管炎病毒套式PCR检测方法的建立及应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
材料和方法1.病毒鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸭瘟病毒(DPV)、伪狂犬病毒(PRV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)均由本实验室保存.  相似文献   

5.
以伪狂犬病毒(PRV)作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,融合之后经间接ELISA、IFA和IHC试验进行杂交瘤筛选,共获得2株能分泌针对PRV单克隆抗体(简称单抗)的杂交瘤细胞株。2株猪伪狂犬病毒单抗与猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒均无交叉反应,IFA结果显示单抗能与接种于猪睾丸细胞(ST)的PRV发生特异性反应,IHC结果显示单抗能用感染了PRV的猪神经组织发生反应,证实抗PRV单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性,此结论为猪伪狂犬病毒抗原表位分析及相关抗原抗体诊断试剂盒的研制奠定了基础。  相似文献   

6.
伪狂犬病毒DNA限制性内切酶分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用5种限制性核酸内切酶(BamHI、KpnI、SalⅠ、BglⅡ和HindⅢ)建立了伪狂犬病毒闽A株DNA的内切酶图谱,并与Buk株、Shope株、Norden株、S株,台湾NTU株进行比较,认为闽A株与美国或欧洲毒株无关,而与台湾株同源,表明核酸限制性内切酶分析在伪狂犬病病毒研究中是一种毒株鉴别、分子流行病学调查的有用工具。  相似文献   

7.
伪狂犬病病毒血凝及血凝抑制试验   总被引:1,自引:0,他引:1  
伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)属于疱疹病毒科、疱疹病毒亚科,又称猪疱疹病毒Ⅰ型。某些疱疹病毒,如牛疱疹病毒、马流产病毒、猫鼻气管炎病毒及鸡传染性喉气管炎病毒等都具有凝集动物红细胞的特性。据国外资料报道,PRV也能凝集小鼠红细胞,而目前国内这方面的报道甚少,仅有李学伍等做过此方面的试验研究,本人在李学伍等人试验方法的基础上进行了改进,应用鞣酸法处理小鼠红细胞,提高了实验的敏感性和可重复性,效果十分理想。在猪易感病毒中有很多病毒都能凝集小鼠红细胞,如猪细小病毒,乙型脑炎病毒,冠状病毒等。为了检测伪狂犬病病毒是否能凝集小鼠红细胞及其血凝性可否被特异性抗血清抑制,从而建立一种快速诊断伪狂犬病的方法,特作本试验。  相似文献   

8.
乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建   总被引:7,自引:0,他引:7  
设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK—NS1。将pUSK—NS1与伪狂犬病毒Ea株TK/gG/LacZ^ 突变株基因组共转染真核细胞IBRS-2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK/gG^-/NS^ 1。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。  相似文献   

9.
猪伪狂犬病毒(PRV)是一种良好的兽用活病毒疫苗载体。但以PRY基因缺失疫苗株TK^-/gE^-/LacZ^+为载体表达PRRSV GP5的重组病毒TK^-/gE^-/GP5^+免疫实验动物后难以激发抗PRRSV的中和抗体。为了进一步增强这种重组病毒的免疫效力,本研究用具有更好免疫原性的修饰的ORF5基因(ORF5m)代替天然ORF5基因,构建了表达PRRSV的修饰型GP5m蛋白的重组伪狂犬病毒TK^-/gE^-/GP5m^+。经PCR、Southem Blot、Western blot证实构建正确,并能表达具有活性的GP5m蛋白。将TX^-/gE^-/GP5m^+与TK^-/gE^-/GP5^+分别免疫Balb/c小鼠,结果TK^-/gE^-/GP5m^+免疫小鼠不仅产生了较高水平的抗PRRSV的中和抗体(3/6只达到了1:16),而且在诱导PRRSV特异性细胞免疫方面也显著优于TK^-/gE^-/GP5^+,表明TX^-/gE^-/GP5m^+是一种极有希望的PRRSV和PRV二价基因工程候选疫苗。  相似文献   

10.
鸡传染性喉气管炎王岗株病毒(ILTV)经SPF鸡肾细胞增殖,差速离心及蔗糖密度梯度离心纯化;电镜观察,以纯化的病毒4次免疫BALB/c鼠,按常规方法进行细胞融合,采用有限稀释法克隆,经ELISA筛选出3株(8E2、13G6,9C4)分泌抗ILTV特异McAb的杂交瘤细胞,特异性试验表明经闪与鸡的传染性支气管炎,痘病毒,新城疫病毒马立克氏病病毒,白血病病毒及鸡肾细胞均无交叉反应。在获得三株单抗建立单  相似文献   

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