高效液相色谱法测定羊血液中三聚氰胺

试验建立了应用高效液相色谱测定羊血液中三聚氰胺含量的方法。样品经三氯乙酸-乙酸锌提取,MCX固相萃取柱净化后,应用DikmaC18色谱柱进行分离,缓冲液为辛烷磺酸钠和柠檬酸混合溶液,以缓冲液+乙腈为流动相,流速为1mL/min,柱温25℃,紫外检测波长为240nm。定量分析采用外标法,线性范围为0.5～100μg/mL,线性方程为y=2939.6x+160.59,相关系数(R2)=0.9999,样品添加回收率范围为81.4%～93.1%,变异系数为1.87%～3.29%,检测限为0.5mg/kg。     

高效液相色谱法测定洛克沙胂预混剂含量方法的研究

采用高效液相色谱法测定洛克沙胂预混剂的含量,色谱柱为C18(250×4.6mm,5μm),流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾-甲醇-醋酸(9091),检测波长254nm,流速1ml/min,进样量20μl.方法的线性范围为0.4124～0.04124mg/ml,r=0.9999,样品回收率为100.7%(5%)和100.8%(10%),RSD=0.19%(5%)和RSD=0.26%(10%),本方法具有专属性,可与已知的杂质进行有效地分离.     

HLPC测定制剂中盐酸左旋咪唑的含量

采用高效液相色谱法测定制剂中盐酸左旋咪唑的含量。色谱柱用 CLC- ODSC1 8( 5μm,4.6mm× 1 50 mm) ,柱温为室温 ,流动相为甲醇 -水 (用冰醋酸调 p H至 4.5) =65∶ 35,检测波长2 54nm,流速 1 ml/min。方法的线性范围为 4.0～ 64.0μg/ml,r=0 .9996,样品回收率为 1 0 1 .1 %RSD为 0 .36%。该法与经典非水滴定法比较 ,两种方法测定结果差异不显著     

高效液相色谱法测定鱼饲料中甲基睾丸酮含量的研究

试验建立了鱼饲料中17α-甲基睾丸酮的液相色谱检测方法。该方法以甲醇提取样品中的甲基睾酮,3β-甲基-17β-羟基-5-雄烯-7-酮为内标;梯度洗脱,流动相分别为水-乙腈溶液(80:20,V/V),流速0.5 ml/min;柱温40℃,DAD检测器检测,内标法定量,甲基睾酮的平均保留时间为11.29 min(R.S.D=0.20%),内标为8.68 min(R.S.D=0.19%)。结果表明,在7.5～60.0μg/ml范围内线性关系良好,拟合度为0.999 8,回收率在94%～100%之间,相对标准偏差为1.97%～3.21%。     

反相离子对色谱法测定蜂蜜中氟哌酸残留量

研究建立蜂蜜中氟哌酸残留量的反相离子对高效液相色谱测定方法.样品用水相提取,经C18固相萃取柱净化,在273 nm波长下用二极管矩阵检测器检测.色谱柱为Agilent ZORBOX SBC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇/磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L磷酸二氢钾)/四丁基溴化胺(0.05 mol/L)=24/73/3(V/V/V),用磷酸调节pH=2.75.流速1.0 ml/min.氟哌酸浓度在0.3～4.0μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为81.3%～94.7%,变异系数为1.52%～3.31%,最低检测限为0.1μg/ml.本方法简便、快速、准确.     

高效液相色谱法同时测定猪血浆中的SMM、SMZ和TMP

建立同时测定SMM，SMZ和TMP血药浓度的HPLC方法，采用WatersHPLC系统，Wa-tersODS2柱，以乙腈：0.017mol/L磷酸液(20：80）为流动相，检测波长为230nm,SMM,SMZ在0.05-10.0μg/ml范围内线性良好（r=0.99998),TMP在0.01-2.0μg/ml范围内线性良好（r=0.99999)，平均方法回收率分别为94.5%,98.6%和86.8%。最低血浆检测浓度可达SMM0.15μ/ml，SMZ，0.15μ/ml，TMP0.03μg/ml。该法采血量少，样品预处理简单，检测快速，灵敏。     

高效液相色谱法测定苄星邻氯青霉素乳房注入剂中苄星邻氯青霉素的含量

用反相高效液相色谱法测定苄星邻氯青霉素乳房注入剂中苄星邻氯青霉素的含量。采用AgilentEclipseXDB-C185μm4.6×150mm色谱柱;流动相为0.1mol/L磷酸二氢钠-乙腈(3:1);检测波长为220nm;柱温为40℃。在该色谱条件下,苄星邻氯青霉素在20μg/ml～180μg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.99999;100%浓度时平均回收率为100.7%,RSD=0.04%。该方法快速灵敏,准确实用。     

反相液相色谱法测定饲料中的金霉素含量

采用反相液相色谱法测定饲料级、预混合饲料和配合饲料中的金霉素含量方法的研究.色谱柱为C18预柱及分析柱150×4.6mm,5μm;流动相为0.01 mol/L草酸溶液-乙腈-甲醇(1032);紫外检测器,检测波长为360nm;柱温25℃.结果为在0.2～50μg/ml之间呈现良好的线性关系,相关系数r为0.9997,3个不同浓度样品加样回收率(n=5)分别为95.96%,98.32%,95.41%.本法简便,快速,准确度和精密度较高,适用于各种饲料中金霉素含量的测定.     

高效液相色谱法测定酵素中γ-氨基丁酸

本实验旨在通过对衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择，建立一种灵敏检测酵素中γ-氨基丁酸的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂，衍生时间2 min，衍生温度为室温，色谱条件为：检测波长334 nm，流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（体积比20:80），柱温25 ℃，流速0.8 mL/min。结果表明：在浓度为0.3 μg/mL ～ 1 mg/mL时线性关系良好（R2=0.9997），平均加标回收率为92.17% ～ 104.29%，相对标准偏差为0.51% ～ 3.99%（n=5），检出限为0.1 μg/mL，并采用建立的方法测定了不同酵素样品中γ-氨基丁酸的含量。该方法操作简单、灵敏、准确可靠，适用于酵素中γ-氨基丁酸含量的检测。 [关键词] γ-氨基丁酸|酵素|高效液相色谱法|检测|含量     

HPLC法测定整肠舒颗粒中秦皮甲素的含量

目的：测定整肠舒颗粒中秦皮甲素的含量方法：采用TLC法对样品中的秦皮甲素进行定性鉴别，用HPLC法测定样品中秦皮甲素的含量色谱柱为十八烷基键合硅胶柱，流动相为甲醇-水-磷酸(24:76:0.1)，检测波长为335nm，流速为1.0ml/min.结果：整肠舒颗粒中秦皮甲素浓度在20～100μg/ml范围内线性良好，r=0.9996，平均回收率98.87％(RSD=1.92％，n=6)结论：本方法操作简便、快速、准确，可用于整肠舒颗粒中秦皮甲素含量的测定。     

气相色谱-质谱法测定鸡蛋中三聚氰胺残留

采用气相色谱-质谱法(GC-MS)测定了鸡蛋中三聚氰胺残留。样品匀浆后,用三氯乙酸去蛋白提取,MCX柱净化,BSTFA和TMCS衍生化后,气相色谱-质谱检测。质谱定性离子为m/z342、327、171和99,定量离子为m/z327。方法定量限为0.5μg/g,添加浓度为0.5、2μg/g和10μg/g时的回收率在89.2%~96.2%之间,变异系数在2.9%~5.6%之间。     

牛奶及奶粉中三聚氰胺残留酶联免疫检测方法的研究

通过4,6-二氨基-2-氯-1,3,5-三嗪与对氨基苯丁酸反应获得三聚氰胺半抗原,再以活性酯法与载体蛋白偶联制备三聚氰胺免疫原或包被原。免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备出针对三聚氰胺的特异性单克隆抗体。采用间接竞争酶联免疫吸附法(ciELISA)建立检测三聚氰胺的标准曲线,线性范围是17.4～345.5ng/mL,50%抑制浓度(IC50)61.3ng/mL。牛奶和奶粉加标回收率在68.1%～91.0%,变异系数在2.4%～14.5%。结果表明,该方法可以满足牛奶和奶粉中三聚氰胺残留分析要求。     

高效毛细管电泳法同时检测饲料中七种防腐剂

建立酸性条件下同时分离测定山梨酸(SA)、苯甲酸(BA)、脱氢乙酸(DHA)、对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)、对羟基苯甲酸丁酯(BP)七种防腐剂的高效毛细管电泳法。本试验用甲醇:水=1:1(体积比)的混合液作为提取剂提取饲料样品中防腐剂;以40 mmol/l磷酸二氢钾(KH2PO4)和100 mmol/l十二烷基硫酸钠(SDS)的1:1体积比混合液(pH=4.00)作为缓冲液,采用高效毛细管胶束电动色谱法测定样品中七种防腐剂。该方法在19 min内实现了七种防腐剂的分离;SA、BA的线性范围分别为1～500μg/ml和3～500μg/ml,DHA、MP、PP、BP、PP的线性范围均为5～500μg/ml,线性相关系数≥0.999 5。SA、BA、DHA和四种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的检测限分别为0.5、1.5、3.0、2.5μg/ml;样品平均回收率为80.8%～107.0%,相对标准偏差≤5.0%。该方法高效快速分离了多种防腐剂,并且可以应用到各种饲料样品的检测。     

检测牛乳中三聚氰胺的间接竞争ELISA方法的建立

利用戊二醛法合成的三聚氰胺—钥孔匙锥蓝蛋白(KLH)为免疫原制得三聚氰胺的多克隆抗体,并在此基础上以重氮法制备的三聚氰胺—牛血清白蛋白为包被抗原建立了检测三聚氰胺的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,理想的包被抗原质量浓度为0.8mg/L,抗三聚氰胺抗血清的稀释倍数为1:400,最适检测范围为0.03-10mg/L,最小检测量为0.01mg/L,批内与批间变异系数分别为1.952%和6.673%,回归方程为y=-0.4239-0.0933。本实验建立的三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫吸附试验(ci-ELISA)方法可用于牛乳样品中三聚氰胺残留的检测。     

以MTT比色法检测鸡脾淋巴细胞转化效果

本研究运用ＭＴＴ比色法以正交试验对鸡脾脏淋巴细胞转化的最佳条件（ｃｏｎＡ量、血清种类和浓度）进行了研究。结果表明，无论血清种类和浓度如何，低剂量ＣｏｎＡ（２．５～１０μｇ／ｍｌ）可以获得较好的转化效果。当ＣｏｎＡ的量确定时，低浓度鸡血清（０．５％～１．２５％）的转化效果优于高浓度（２％～３％）：５％犊牛血清优于任何浓度的鸡血清；无血清培养基优于血清培养基。其最佳组合为无血清ＲＰＭＩ１６４０培养基加ＣｏｎＡ２．５μｇ／ｍｌ。     

高效液相色谱法测定饲料中的氯烯雌醚

试验建立了饲料中氯烯雌醚的反相高效液相色谱测定方法。经乙腈提取饲料中的氯烯雌醚,以C18固相萃取小柱进行纯化后,用反相高效液相色谱法检测。氯烯雌醚在0.5～100μg/ml范围内线性关系良好,回归方程Y=138222509X+19447,r=0.9999,饲料中氯烯雌醚的最低检测量为35μg/kg。高、中、低3个浓度的平均加样回收率分别为100.2%、99.10%、99.13%,RSD在0.88%～1.11%范围内。     

RP-HPLC测定水产饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯含量

建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定水产饲料中L-抗坏血酸-2-磷酸酯含量的分析方法。采用ZORBAX SB-C18分析柱(250mm×4.0mm,5μm),以甲醇-离子对试剂缓冲液(15:85,v/v)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为254nm,柱温为30℃,在此色谱条件下,L-抗坏血酸-2-磷酸酯在1.0～100.0mg/l浓度范围内线性关系良好,相关系数r>0.9999,在10.0～50.0mg/kg加标浓度范围内,样品平均回收率为88.7%～101.6%,日内相对标准偏差为1.84%～5.31%,日间相对标准偏差为5.04%～9.13%,方法的检出限为2.0mg/kg。     

Quantification of melamine absorption, distribution to tissues, and excretion by sheep

Eight D?hne Merino rams were used to quantify apparent absorption, distribution to tissues, and excretion of dietary melamine in sheep. Two batches of concentrate pellets were made; one (CON) contained corn gluten meal with no detectable melamine and the other (MEL) contained corn gluten meal that was previously found to be highly contaminated with melamine at 15,117 mg/kg. The MEL pellets contained 1,149 mg/kg of melamine. During a 10-d adaptation period, all the animals received a forage-based diet supplemented with 600 g/d of the CON pellets. This was followed by an 8-d collection period during which 6 of the animals received MEL pellets and 2 received CON pellets. Melamine intake of sheep that received MEL pellets was 0.69 g/d. Blood samples were taken before first ingestion of MEL pellets on d 1 and again on d 3, 6, and 8 of the collection period for melamine and serum creatinine analyses. Feces and urine were collected quantitatively over the 8 d for proximate and melamine analyses. All the animals were slaughtered at the end of the trial, and samples of the LM, liver, kidneys, and abdominal fat were taken for melamine analysis. Data of the 2 sheep that received CON pellets for the duration of the trial confirmed that no melamine was detected in any of the samples, and no statistical analyses were performed on these data. The apparent digestibility or efficiency of absorption of ingested melamine was 76.7%. Melamine was detected in the urine, blood, muscle (LM), and fat tissue of all the sheep that received MEL pellets. Serum melamine concentrations reached 5.4 mg/kg on d 8 of the collection period, and the meat (LM) contained 9.6 mg/kg of melamine. Calculations on the partitioning of ingested melamine suggested that urine is the major excretion route accounting for 53.2%, whereas feces accounted for 23.3% of ingested melamine. Approximately 3.5% of the ingested melamine was detected in muscle. It was concluded that ingested melamine is highly absorbable from the small intestine and that a pathway exists for the distribution of dietary melamine to meat.     

农畜产品中三聚氰胺间接竞争ELISA检测方法的建立

利用制备的抗三聚氰胺单克隆抗体建立了间接竞争ELISA方法,采用棋盘滴定法确定最佳三聚氰胺-OVA包被浓度为1.0μg/mL,单抗最佳稀释度为1∶1 000,最佳的封闭液为50g/L的脱脂乳,标准曲线的线性方程为y=-15.12x+107.3(R2=0.997)。批内变异系数(CV)为1.07%～5.53%,批间CV值为3.33%～11.92%,确定此方法精确度良好。利用建立的间接竞争ELISA方法,测定添加有三聚氰胺标准溶液的样品(宠物食品、小麦面筋、饲料、牛乳、鸡蛋),得到三聚氰胺在各样品中的回收率范围分别为宠物食品73.8%～84.32%,小麦面筋67.3%～88.27%,饲料70.3%～85.9%,牛乳83.47%～89.76%,鸡蛋76.2%～87.29%。确定可以利用此间接竞争ELISA方法检测样品中的三聚氰胺含量。