双葛止泻口服液微生物限度检查方法学验证

建立了双葛止泻口服液的微生物限度检查方法。根据2015年版《中华人民共和国兽药典(二部)》通则1102非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法,以及通则1103非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法和通则1104非无菌兽药微生物限度标准进行方法适用性试验。结果表明,采用薄膜过滤法对样品进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌计数方法适用性试验,试验组与菌液对照组的比值为0.5~2,采用常规法进行控制菌检查方法适用性试验,试验组检出阳性试验菌。所建立的方法可作为双葛止泻口服液微生物限度的检查方法。     

河南信阳规模化猪场仔猪腹泻的诊断和疗效观察

2019年2—3月,河南信阳某猪场仔猪群出现腹泻症状,130头猪只死亡。对病死猪剖检并采集肛门拭子、肠内容物、新鲜粪便等样品进行细菌分离和鉴定,同时采用荧光PCR方法进行腹泻相关病毒的检测。并随机分为5个不同试验组对病猪开展治疗试验。结果表明,猪群发生腹泻的主要原因是轮状病毒感染;在治疗效果方面,双葛止泻口服液各剂量组和白头翁口服液治疗组猪群的精神面貌特征和粪便特征上均有所改善,其中双葛止泻口服液中高剂量组猪群的临床腹泻症状均显著改善,与对照组相比,差异均显著。双葛止泻口服液按每千克体重0.34 mL剂量灌服,连用5 d,可有效治疗仔猪的腹泻。     

葛根芩连口服液体外抑菌及体内免疫调节作用的试验

试验研究葛根芩连口服液体外抑菌及体内免疫调节作用。选用21日龄仔猪40头,随机分为4组,每组10头。Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为饮水中添加葛根芩连口服液,添加量分别为0.2,0.4,0.7 m L/L,同时采用双倍稀释法,测定葛根芩连口服液对大肠杆菌、沙门菌及肠球菌的药敏试验。结果表明,体外抑菌初步考察结果显示,葛根芩连口服液对肠球菌、沙门菌、大肠杆菌均有抑制作用,其MIC值分别为20.83μg/m L、41.7μg/m L、62.5μg/m L,抑菌效果强于单独的葛根、黄芩、黄连提取液及硫酸粘杆菌素。同时仔猪血清中IL-1、IL-4、TNF-α、TNF-γ细胞因子水平有不同程度的提高(P0.05)。结果提示,葛根芩连口服液能提高仔猪血清中细胞因子水平及机体免疫功能,并且对大肠杆菌、沙门菌、肠球菌具有良好体外抑菌作用。     

五氯柳胺混悬液抑菌效力测定

五氯柳胺是水杨酰苯胺类抗寄生虫药物,主要用于治疗肝片吸虫病,五氯柳胺口服混悬液是一种用于动物吸虫病防治的新型制剂。为了验证五氯柳胺混悬液中抑菌剂的效果,试验按照中国兽药典2015年版抑菌效力检查法,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、黑曲霉和白色念珠菌为试验菌株,分别加入五氯柳胺混悬液中进行微生物的挑战试验,在不同时间点检测样品中微生物的存活情况。结果显示:五氯柳胺混悬液的抑菌效力对细菌和真菌能够达到"内服制剂、直肠给药制剂的抑菌效力判断标准"的要求。表明五氯柳胺混悬液具有充分的抗菌效力,可避免在贮藏和使用过程中发生微生物污染。     

复方中药制剂止泻散及其口服液防治仔猪腹泻临床试验

观察复方中药制剂止泻散(口服液)预防和治疗仔猪腹泻的临床效果及其作为药物饲料添加剂预防断奶仔猪腹泻和促生长作用。结果表明,止泻口服液对吮乳仔猪腹泻的治愈率和有效率分别为89.39%~93.33%、92.42%~96.67%,预防保护率为100%,与杨树花口服液、硫酸庆大霉素注射液相比较,临床治疗效果显著。提示在饲料中添加止泻散可有效预防断奶仔猪腹泻,增加仔猪食欲和促进仔猪生长。     

HPLC法同时测定双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素的含量

[摘 要] 建立了同时测定双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素含量的测定方法。采用高效液相色谱（HPLC）法,使用Waters XBridge C18（250 × 4.6 mm,5 μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱;检测波长为315 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30 ℃。结果表明,绿原酸浓度在0.008242~0.1030 mg/mL的范围内,与峰面积线性关系良好（r = 1.0000）,平均回收率为99.1%（n = 6）,RSD为1.8%;葛根素浓度在0.02296~0.2871 mg/mL的范围内,与峰面积线性关系良好（r = 1.0000）,平均回收率为98.7%（n = 6）,RSD为1.6%。该方法简单、准确、专属性强,可用于双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素的质量控制。     

体外法评估不同植物精油对需氧菌的抑菌活性

本试验采用琼脂平板法,测定肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油、丁香酚和山苍子油对产肠毒大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、乙型溶血性链球菌的最低抑菌浓度,从中选出抑菌能力较强的精油,继续测定其对产肠毒大肠杆菌、出血性大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和乙型溶血性链球菌的抑菌效果,筛选出具有替抗潜力的精油并评估精油作为抑菌剂应用在饲料中的前景。本试验采用琼脂平板培养法,在固态培养基中添加不同浓度的肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油、丁香酚和山苍子油,分别接种产肠毒大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、乙型溶血性链球菌,测定其最低抑菌浓度,初步筛选出抑菌作用较强的精油,利用同样的方法,继续测定其对产肠毒大肠杆菌、出血性大肠杆菌、宋氏志贺氏菌、痢疾志贺氏菌、猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和乙型溶血性链球菌的最低抑菌浓度,最终筛选出抑菌能力较强的精油。结果表明:①通过初筛,发现肉桂醛、百里香酚、香芹酚、牛至油和丁香酚的抑菌效果较好,选择该五种精油进行复筛;②复筛结果表明,精油对供试菌株的抑菌能力由强到弱为百里香酚>肉桂醛>香芹酚>牛至油>丁香酚,其最低抑菌浓度分别为为0.02%～0.07%、0.02%～0.08%、0.03%～0.07%、0.04%～0.09%、0.07%～0.18%;③百里香酚、肉桂醛、香芹酚、牛至油作为饲料添加剂具有极好的潜力。     

添加不同防霉剂对全混合日粮存放的影响

选择山梨酸钾、脱氢醋酸钠、苯甲酸钠、丙酸和丙酸钙5种防霉剂,分别以0.15％和0.3％的剂量添加到奶牛全混合日粮（total mixed ration,TMR）中进行7 d的贮存试验,测定防霉剂对TMR饲料贮存效果的影响。试验结果表明,添加脱氢醋酸钠和0.3％山梨酸钾组的TMR饲料在贮存期内没有发热产生,也未发生霉变,其它各防霉剂添加组从贮存第2天开始逐渐出现升温发霉现象。贮存第2天,添加丙酸、丙酸钙及0.15％苯甲酸钠组TMR饲料的含水量极显著低于对照组（P＜0.01）;贮存第3天和第5天,添加脱氢醋酸钠和添加0.3％山梨酸钾组TMR饲料的含水量高于对照组（P＜0.05）。贮存过程中TMR饲料的粗蛋白质和粗脂肪均无明显变化。综合各项指标,TMR饲料中添加脱氢醋酸钠和山梨酸钾比苯甲酸钠、丙酸和丙酸钙有较好的防霉效果。     

桑叶口服液制备条件探讨

以多糖含量为指标,用正交实验法及单因素实验考察,优选桑叶口服液的制备条件。结果表明:最佳条件为50倍量溶剂(水),温度100℃提取3次,每次0.5h,膨润土和木糖醇的添加量分别为0.3%和8%。得到的桑叶口服液色泽橙黄、质地细腻均匀并带有香醇桑叶味,具有较高的营养保健价值。     

自拟中药复方制剂对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑菌试验

为了探究自拟中药复方制剂扶正止泻散（I组）以及扶正止泻散基础方（Ⅱ组）对畜禽肠道腹泻病原菌的抑制作用,本研究通过中药复方制剂与临床分离的畜禽肠道腹泻病原菌的作用,以明确中药复方对畜禽肠道腹泻病原菌的体外抑制作用.本试验采用扩散法和试管法测定中药复方制剂的最小抑菌浓度.试验结果表明,在所有分离的50株菌中,I组对其中的15株菌的抑菌圈直径大小在2.00mm以上,14株菌的最小抑菌浓度低于0.239 g/mL;Ⅱ组对其中的5株菌的抑菌圈直径在2.00mm以上,9株菌的最小抑菌浓度低于0.125 g/mL.因此,扶正止泻散基础方以及扶正止泻散均有抑菌作用,为其进一步的临床试验提供了实验依据.     

抗菌肽制剂对妊娠母猪蓝耳病抗体水平及生产性能的影响

为了研究抗菌肽制剂对妊娠母猪蓝耳病抗体水平及生产性能的影响,根据品种相同、体重相当的原则,随机选取180头妊娠母猪,试验A组、B组以及对照组各60头,试验A、B组饲料中添加0.3%、0.5%抗菌肽,对照组饲料中添加抗生素。通过ELISA抗体检测方法 ,分别检测试验组和对照组的蓝耳病抗体水平。结果表明:试验A、B组的蓝耳病抗体水平(S/P值)的稳定比例分别为80%和88.3%,显著高于对照组的68.33%(P≤0.05);试验A、B组的死胎率、窝均木乃伊数和死胎数均显著低于对照组(P≤0.05),窝均健仔数显著高于对照组(P≤0.05)。     

饲料中添加天蚕素抗菌肽对南美白对虾免疫功能、抗病力的影响

本研究以南美白对虾为研究对象,探究饲料中天蚕素抗菌肽的合适添加量。在饲料中依次添加不同浓度水平（0%、1%、2%、3%、4%和5%）的天蚕素抗菌肽,配制为6种配合饲料,用以投喂南美白对虾,饲养周期8周。结果显示：与对照组相比,饲料中添加天蚕抗菌肽对南美白对虾增重率、蛋白质沉积率和特定生长率有显著影响（P＜0.05）,高水平天蚕素抗菌肽会抑制南美白对虾的增重率和特定生长率,南美白对虾的饵料系数显著下降,但对南美白对虾存活率和摄食率无显著影响（P＞0.05）|随着饲料中天蚕素抗菌肽的添加水平不断增加,3%组南美白对虾的ACP、POD和SOD含量达到最大水平,与对照组有明显差异（P＜0.05）|随着饲料中天蚕素抗菌肽的添加水平的不断上升,3%组南美白对虾的淀粉酶、脂肪酶和胃蛋白酶含量最高,与对照组存在明显差异（P＜0.05）。结果表明,饲料中添加天蚕素抗菌肽显著提高南美白对虾的增重率和特定生长率,提高南美白对虾的生长发育速度,从而增强机体免疫力,提高南美白对虾的抗病能力。 [关键词]天蚕抗菌肽|南美白对虾|抗病力|免疫功能     

金芩蓝口服液对鸡风热犯肺证的疗效研究

为探讨金芩蓝口服液对人工诱导和自然发病鸡风热犯肺证的治疗效果,以H9N2 AIV与脂多糖(LPS)为诱导因素人工建立鸡风热犯肺证,通过发病率、死亡率、临床症状等指标进行中兽医辨证来考察模型的建立情况;通过肛温变化、治愈率、有效率和无效率等指标考察金芩蓝口服液对人工诱发鸡风热犯肺证的疗效;将蛋鸡养殖场自然发病的600只200日龄的风热犯肺证患鸡随机分为两组,分别采用金芩蓝口服液与双黄连口服液进行治疗,观察记录采食情况和产蛋率,并计算治愈率、有效率、无效率和死亡率。结果显示,采用H9N2 AIV与LPS混合感染配合热应激的方式成功建立鸡风热犯肺证的动物模型;金芩蓝高剂量组治愈率和总有效率分别为90%、95%,金芩蓝中剂量组治愈率和总有效率为85%、95%,与模型对照组相比,皆具有极显著的统计学意义(P<0.01);而自然发病的鸡风热犯肺证病鸡,经金芩蓝口服治疗,治愈率达89%,总有效率达96.3%。结果表明,金芩蓝口服液可有效的治疗鸡风热犯肺证。     

多黏类芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及特性研究

试验旨在分离纯化多黏类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）BLCC1-0402代谢产物中的抗菌肽,为抗菌肽制备及其制品检测提供参考。采用离心、不同分子质量卷式膜超滤浓缩、Superdex peptide 10/300GL凝胶过滤层析对多黏类芽孢杆菌发酵上清液进行逐级分离纯化,对不同时段的收集液做抑菌试验,以大肠杆菌O78标准菌株为指示菌,采用打孔法进行抑菌活性检测,比较评价分步层析效果,以Tricine-SDS-PAGE进行分子质量检测。结果显示,通过5和3 ku卷式膜超滤获得的3~5 ku组分蛋白质样品抗菌活性较强;对于3~5 ku组分经凝胶过滤层析分离纯化,纯化后的抗菌肽A3抑菌活性最强,经Tricine-SDS-PAGE小分子多肽电泳检测,已达到电泳纯,分子质量为4 ku;抑菌活性检测结果显示,该抗菌肽A3对大肠杆菌O78标准菌株具有较强的抑菌作用。同时,抗菌肽A3表现出较好的耐热性,90~100 ℃处理15 min,抑菌活性可保持在96%左右;具有较好的酸碱稳定性,在pH 2.0~9.0下,抑菌活性保持在90%以上;经胃蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低20%,胰蛋白酶作用后抗菌肽A3抑菌活性降低18%,蛋白酶K对抗菌肽A3的抑菌活性几乎无影响。本研究结果表明,分离得到的抗菌肽A3是一种对大肠杆菌O78具有抑菌活性的新型抗菌肽,具有一定的开发潜力,可为下一步抗菌肽的结构分析、理化特性分析等深入研究提供一定参考依据。     

不同中草药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑菌效果研究

为了检测不同中草药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果,选取了7种不同粉碎粒度的中草药进行试验。用水提取法制备提取液,通过微量肉汤稀释法测定各提取液的抑菌效果。结果表明,厚朴、白术、茵陈提取液对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌活性;细粒度的厚朴提取液对MRSA的抑菌效果比粗粒度的厚朴提取液好。由此可见,厚朴提取物对MRSA具有潜在的抗菌优势。     

抗菌肽对抗生素耐药菌株的抑菌活性研究

[目的]研究抗菌肽对抗生素耐药菌株的抑菌活性。[方法]利用抗性平板划线法从腹泻病牛血便中筛选分离出1株耐药菌,通过16S rDNA序列进行鉴定,采用琼脂孔穴扩散法通过梯度盐酸壮观霉素（spectinomycin,Spe⁺）、氨苄青霉素（ampicillin,Amp⁺）、硫酸卡那霉素（kanamycin,Kan⁺）和氯霉素（chloramphenicol,Cm⁺）试验确定该菌药敏特性,并利用1种抗菌肽制剂对该菌株进行药敏试验。[结果]经BLAST比对分析该菌16S rDNA序列,鉴定该耐药菌为科氏葡萄球菌（Staphylococcus cohnii）,此菌对Amp⁺敏感,但对试验中其他抗生素均有耐药性,各梯度抗菌肽对该耐药菌均具有明显的抑菌活性。[结论]抗菌肽能有效抑制耐药科氏葡萄球菌的生长,有望在畜牧生产中代替抗生素使用。     

超微粉碎对黄连解毒散和白头翁散体外抑菌效果的影响

目的：观察黄连解毒散和白头翁散超微粉的体外抑菌效果。方法：采用超微粉碎和普通粉碎方法将黄连解毒散、白头翁散粉碎成超微粉（300目）和细粉（65目）,用其水提取液和醇提取液采用管碟法进行体外抑菌试验。结果：黄连解毒散、白头翁散超微粉比细粉的抑菌圈直径均显著增大（P〈0.05）。说明超微粉碎可明显提高黄连解毒散和白头翁散的体外抑菌效果。     

泰妙菌素的体外抑菌活性与一般毒性研究

采用二倍稀释法、改良寇式法和蓄积系数法测定了泰妙菌素的体外抑菌活性、急性毒性和蓄积毒性。体外抑菌试验结果显示,泰妙菌素对猪、鸡支原体、猪链球菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为0 015、0 125、0 5ug/mL,呈现较好的杀菌效果,且较磷酸泰乐菌素效果好;而对大肠杆菌、禽巴氏杆菌效果较差。一般毒性试验结果显示,泰妙菌素对小鼠、鸡的经口LD50分别为1 58g/kg和2 19g/kg。按国际急性毒性分级标准可判断为实际无毒,蓄积系数K>5,为弱蓄积性,且小鼠对其不具有耐受性。     

Clinical pharmacology of antimicrobial drugs for the treatment of septic neonatal calves.

For a given infection, each antibiotic will have a probability of producing a beneficial outcome. Decisions that increase the antibacterial activity of the therapeutic regimen against the bacterial infection will increase the probability of a beneficial outcome. Unfortunately, such decisions may increase the cost of therapy or the risks of toxicity. Finally, neonatal calves presented for therapy are not of uniform value. It is logical to employ different antimicrobial drugs and ancillary therapies when the value of the individual calf is considered. A constructive balance between efficacy, cost, and toxicity establishes the value of a therapeutic approach for the client.