猪肝星状细胞内质网应激模型的建立及对泛素化的影响

试验对衣霉素（tunicamycin,TM）处理猪肝星状细胞的浓度和培养时间进行筛选,以期成功构建内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）模型,并在此基础上探究ERS下猪肝星状细胞泛素化的变化。试验采用浓度为0、1、2、5、10和15 μg/mL的TM处理猪肝星状细胞,培养2、4、8、16、24和36 h。通过检测细胞抑制率对TM浓度和培养时间进行初筛;通过检测细胞周期及ERS标志基因和蛋白表达对TM浓度和培养时间进行终选,以确定是否成功构建ERS模型,同时,在ERS下检测猪肝星状细胞泛素化相关基因的表达变化。结果表明：由细胞抑制率检测结果初步确定TM浓度5 μg/mL、培养8或24 h后有可能出现ERS。5 μg/mL TM在培养8或24 h时,ERS标志基因表达均极显著上调（P < 0.01）。在培养8 h时,ERS标志蛋白中仅ATF4显著上调（P < 0.05）,细胞周期中仅G2/M期细胞比例显著下降（P < 0.05）;在培养24 h时,ERS标志蛋白均显著上调（P < 0.05）,细胞周期在G1期出现阻滞,并导致S期和G2/M期细胞比例极显著下降（P < 0.01）。以上结果说明,5 μg/mL TM培养24 h可成功构建细胞ERS模型。在ERS下,细胞泛素化相关基因UBA2和UBE2E的表达均极显著升高（P < 0.01）。综上,猪肝星状细胞经5 μg/mL TM处理24 h,可成功建立ERS模型,并启动泛素化机制。     

BDE-47和钼对内质网应激介导的小鼠睾丸细胞凋亡研究

试验旨在探讨BDE-47和钼联合对小鼠睾丸组织内质网应激(ERS)诱导的Calpain/Caspase通路和睾丸细胞凋亡的关系,以分析其雄性生殖系统毒性机制。取雄性昆明系小鼠75只,随机分为5组,Ⅰ组为生理盐水对照组(n=15)、Ⅱ组为BDE-47组(n=15)、Ⅲ组为高剂量钼组(n=15)、Ⅳ组为BDE-47钼联合组(n=15),Ⅴ组为EGTA组(n=15),每日进行灌胃染毒,连续30d,取出睾丸。测定睾丸组织中睾丸内超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)活力和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。采用荧光定量PCR检测钙蛋白酶(Calpain)、C-Capase-12、Capase-9、C-Capase-3的表达。结果表明:SOD、GSH-Px、LDH和SDH活性呈下降趋势,MDA随着染毒剂量的增加而显示升高趋势。Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组Calpain、C-Capase-12、Capase-9、C-Capase-3基因mRNA表达显著高于对照组,且具有统计学差异(P0.05);Ⅳ组Calpain、C-Capase-12、Capase-9、C-Capase-3基因mRNA表达高于Ⅱ组和Ⅲ组,且具有统计学差异(P0.05);Ⅴ组与对照组Calpain、C-Capase-12、Capase-9、C-Capase-3基因mRNA表达没有统计学差异(P0.05);Ⅴ组Calpain、C-Capase-12、Capase-9、C-Capase-3基因mRNA表达低于Ⅳ组。结果表明,BDE-47和钼可以损伤小鼠睾丸抗氧化能力;BDE-47和钼在Calpain/Caspase信号通路mRNA水平上对小鼠睾丸组织产生影响,BDE-47和钼对雄性生殖系统损伤时通过激活Calpain/Caspase通路的活性来调控的,且BDE-47和钼联合引起睾丸组织损伤更强。ERS是通过上调细胞内钙离子浓度活化Calpain/Caspase信号通路实现的。     

猪肝星状细胞内质网应激模型的建立及对泛素化的影响

试验对衣霉素(tunicamycin,TM)处理猪肝星状细胞的浓度和培养时间进行筛选,以期成功构建内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型,并在此基础上探究ERS下猪肝星状细胞泛素化的变化。试验采用浓度为0、1、2、5、10和15μg/mL的TM处理猪肝星状细胞,培养2、4、8、16、24和36 h。通过检测细胞抑制率对TM浓度和培养时间进行初筛;通过检测细胞周期及ERS标志基因和蛋白表达对TM浓度和培养时间进行终选,以确定是否成功构建ERS模型,同时,在ERS下检测猪肝星状细胞泛素化相关基因的表达变化。结果表明:由细胞抑制率检测结果初步确定TM浓度5μg/mL、培养8或24 h后有可能出现ERS。5μg/mL TM在培养8或24 h时,ERS标志基因表达均极显著上调(P0.01)。在培养8 h时,ERS标志蛋白中仅ATF4显著上调(P0.05),细胞周期中仅G2/M期细胞比例显著下降(P0.05);在培养24 h时,ERS标志蛋白均显著上调(P0.05),细胞周期在G1期出现阻滞,并导致S期和G2/M期细胞比例极显著下降(P0.01)。以上结果说明,5μg/mL TM培养24 h可成功构建细胞ERS模型。在ERS下,细胞泛素化相关基因UBA2和UBE2E的表达均极显著升高(P0.01)。综上,猪肝星状细胞经5μg/mL TM处理24 h,可成功建立ERS模型,并启动泛素化机制。     

维生素在应激过程中的重要作用

释放出的能量，通过维持大脑、肝脏、心脏、肺、肾脏等器官的正常功能，维持动物的健康和存活。生长、繁殖和免疫所需的能量和营养，由于对即时存活是非必需的而被中止。因此，适应的营养需要以牺牲重要经济参数(如生长和饲料效率)为代价。可利用养分依赖于必需辅助因子的可利用性，并按一定的代谢途径转化成能量。     

锌在家领取热应激中的作用

文章以热应激为中心,详细阐述了锌元素对家禽生产性能、养分消化率、抗氧化作以及对免疫功能的影响,诠释了锌元素在缓解家禽热应激中的特殊生理作用。     

维生素C在应激管理中的作用

维生素Ｃ在应激管理中的作用■郭叙林译本刊校应激是对外界刺激，瞬时生存需要调整和长期生存适应的一种基本生理反应，这种生理状态需要转移和消耗能量。因此，所有的生理应激影响到营养的转移和机体贮存，以满足瞬时生存需要，最终影响到一些重要的经济性状。一、与应激...     

中草药在预防畜禽应激中的作用

适当的自然应激可使机体逐步适应环境,提高生产性能。如果应激过度即动物体受到长时间或高强度的应激原刺激时,就会产生严重的不利影响,从而危害机体。应激造成的危害既有单一的,也有综合的,且其影响是多方面的。应激反应过强可导致畜禽生长发育迟缓,繁殖机能障碍,生产性能下降,产品产量降低且品质低劣,动物机体维生素需要量增加,     

锌在家禽热应激中的作用

文章以热应激为中心,详细阐述了锌元素对家禽生产性能、养分消化率、抗氧化作以及对免疫功能的影响,诠释了锌元素在缓解家禽热应激中的特殊生理作用。     

维生素C在应激管理中的作用

维生素Ｃ在应激管理中的作用ＢａｌｋａｒＳ．Ｂａｉｎｓ著周桂莲摘译高宇清校在养禽生产实践中，常用“应激”一词来描述某些环境因素或非特异性因素对禽类的影响。特别是在没有确切诊断方法或有效治疗及预防措施时，应激是一种可供选择的补救方法。生理应激在商业化家禽...     

钙离子超载在镉致大鼠肝细胞凋亡中的作用

拟探讨Ca2+超载在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉、醋酸镉与Bapta-AM共同处理肝细胞。用MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态和凋亡,流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度、ROS生成和ΔΨm变化。结果表明,随着镉剂量的增加和作用时间的延长,细胞变形,坏死细胞和凋亡细胞增多,镉可极显著提高细胞内Ca2+浓度和ROS生成量(P<0.01),极显著降低线粒体膜电位(P<0.01),Bapta-AM可显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低镉的毒性。研究结果提示Ca2+超载在镉致肝细胞凋亡中发挥重要作用。     

谨防网床肉鸭热应激

<正>大棚网床饲养肉鸭是一个经济效益显著且值得推广的养殖模式。大棚圈舍建筑简单,不仅成本较低,便捷饲养管理,而且彻底改善了肉鸭的生长环境,缩短了养殖周期。几年来我区大力推广此养殖模式,取得了很好的效益。高温季节,在此谨提醒广大养鸭户临床实践中应高度重视的注意事项:1提供营养全面高效饲料,确保肉鸭正常生长     

营养调控在肉鸡抗热应激中的作用

现代农业中,肉鸡集约化、高密度的养殖模式导致热应激在肉鸡养殖业中造成的危害愈加严重。笔者阐述了热应激对肉鸡养殖业的影响,并从营养角度对抗热应激的几种方法进行了简单介绍,以供研究参考。     

内质网应激在糖脂代谢中的作用研究进展

内质网应激已被证实参与多种疾病的分子机制,内质网应激通过影响代谢通路在糖脂代谢紊乱的发生发展中扮演重要的角色。本文主要从脂质代谢和糖代谢两个方面讨论内质网应激反应与糖脂代谢的关系及其调控机制。     

植物多糖对内质网应激介导的动物细胞凋亡、炎症和氧化损伤的影响及其作用机制北大核心CSCD

内质网是细胞内负责蛋白质折叠和修饰的重要细胞器。内质网应激是由于蛋白质异常累积而引起的细胞应激反应,可导致炎症、氧化损伤和细胞凋亡等动物机体的不良反应。近年来的研究表明,植物多糖可通过内质网应激介导的内质网过载反应和未折叠蛋白质反应相关通路,缓解内质网应激,进而保护动物机体免受损伤。本文综述了植物多糖在缓解内质网应激导致的动物机体炎症、氧化损伤和细胞凋亡等方面的相关机制和研究进展。     

肝素钙离子载体咖啡因在家畜精子体外获能中的作用

前言自 Brackett 等(1981)通过体外受精(InVitro Capacition,IVF)技术获得首例试管牛以来,已相继通过 IVF 得到了绵羊(花田章1985)、山羊(福田丰,1986)、猪(Cheng等,1986)的试管后代,我国也先后在牛、绵羊、猪取得成功。精子在与卵子受精之前必须发生获能和顶体反应,精子的体外获能和顶体反应是家畜体外受精过程的重要一环。自 Chang 和 Austin(1951)发现精子的获能现象以来,许多学者     

PCV2感染猪各组织病毒载量与细胞内质网应激和自噬相关性

通过对PCV2阳性猪剖检,采集了心脏、肝脏、肾脏、肺脏、肾脏、大脑、肠、胃等组织样品,使用定量PCR(qPCR)对PCV2衣壳蛋白Cap基因、ERS和自噬标志基因进行定量分析。结果显示,肺脏中PCV2载量最高,其次为肝脏和肾脏含有较多病毒,小肠、心脏与大脑中病毒载量较少,胃内并未检测到PCV2。ERS和自噬在肺脏中发生最多,其次为小肠,再次为肝脏和肾脏,ERS和自噬水平较高,心脏与大脑中仅发生少量ERS与自噬,而在胃中几乎没有发生。通过透射电子显微镜观察心脏、肝脏、肾脏、肺脏、大脑、肠等组织样品。观察结果显示,所有器官中均可观察到PCV2感染,除肺脏内含量较多外其余各组织中差异不大。各组织中均可见不同数量的自噬小体与内质网应激,其中以肺脏内数量最多,其次为肠道,其余各组织中数量差异不大。电镜观察结果与qPCR检测结果一致,肺脏为病毒载量最大的器官同时也是ERS与自噬发生最多的器官,胃中几乎无病毒感染同时也几乎没有ERS与自噬发生。试验结果表明,除了小肠以外的各组织中ERS与自噬发生情况均与PCV2载量成正相关。为深入研究PCV2诱导细胞ERS和自噬的机制提供了新的理论依据。     

鸡应激及VE抗应激的作用

工厂化饲养的鸡生长速度在很大程度上取决于鸡对各种应激刺激的耐受力。一般性适应综合症单一因素的刺激如寒冷,某种营养成分缺乏、轻度疾病和惊吓等都会使鸡立即发生适应性综合症,鸡体代谢引起以下变化:1.促肾上腺皮质素生成量和释放量增加,垂体前叶肿大。2.肾上腺内部增生肿大。3.因皮质酮释放量增加而分泌肾上腺胆