抗鼠隐孢子虫单克隆抗体的研究

利用鼠隐孢子虫卵囊脱囊物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，经过３￣４次有限稀释法克隆化，获得５株持续分泌抗体的杂交瘤细胞株。所获抗体均属ＩｇＧ１。ＩＦＡ检测结果表明：２Ｇ７株单抗作用于卵囊壁抗原，而ＩＡ４、２Ｅ７、３Ｇ３、４Ａ７株单抗作用于子孢子表面抗原。诱生腹水经过反复冻融、冻干及硫酸铵沉淀后，抗体活性无明显变化。５株单抗均不与贝氏隐孢子虫及柔嫩艾美尔球虫产生交叉反应，与小孢隐     

贝氏隐孢子虫对丝毛乌骨鸡的致病性试验

２ 日龄丝毛乌骨鸡经口接种贝氏隐孢子虫（ Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｂａｉｌｅｙｉ）卵囊２×１０６ 个／只，潜隐期４ｄ，排卵囊开放期１８ｄ，排卵囊高峰期为感染后（ Ｐ Ｉ Ｄ）７～１４ｄ。呼吸道症状出现于 Ｐ Ｉ Ｄ１０，死亡率为１３３％ （２／１５）。扫描电镜观察发现气管纤毛脱落，寄生有各阶段发育虫体及杆形细菌和渗出的红细胞；法氏囊也寄生有大量虫体，粘膜上皮细胞肥大，微绒毛脱落， Ｐ Ｉ Ｄ２０ 在法氏囊粘膜表面见有许多虫体逸出后留下的带虫空泡。试验证明丝毛乌骨鸡为贝氏隐孢子虫的新宿主。使用扫描电镜系统观察了贝氏隐孢子虫感染引起的组织形态学病理变化。     

2株贝氏隐孢子虫鸡源分离株对雏鸡的致病性比较

为了解不同地区鸡源贝氏隐孢子虫的致病特点,对收集到的郑州、林州两地区鸡源贝氏隐孢子虫卵囊经雏鸡传代扩增纯化后,分别以1×106个卵囊量接种3日龄罗曼公雏鸡,从其排卵囊情况、临床症状和病理学变化比较了2个分离株的致病情况。结果表明:2个隐孢子虫分离株均主要引起雏鸡呼吸道症状和法氏囊炎病变;接种雏鸡均于感染后第4天开始排卵囊,林州株和郑州株排卵囊持续期分别为23 d和13 d;排卵囊高峰期均为感染后第8~12天。雏鸡感染2个地区鸡源贝氏隐孢子虫分离株后,排卵囊量及排卵囊规律存在差异。     

人工感染鸡隐孢子虫病理变化初步研究

４日龄伊莎公鸡经口感染贝氏隐孢子虫卵囊，感染后２，４，６，８，１０，１２，１４，１６天剖杀，取法氏囊，气管，小肠进行病理组织学观察，法氏囊感染后２天，粘膜皮皮就出现坏死，并有隐孢子虫卵囊附着在上皮细胞表层，滤泡内淋巴组织开始萎缩，数量减少，局部结缔组织增生。     

畜禽隐孢子虫病的调查与人工感染试验

作者于１９９４－１９９６年，经对我宁夏自治区银北，银南，银川和固原地区１７个县，７１个行政府村１６９群饲养的牛、猪，鸡等畜禽的调查，其隐孢子虫的总感染率为２３．０８％，其中牛为２４．５８％，猪为１１．００％鸡为３６．８１％经人工感染、卵旨数测定等试验证明，奶牛感染的隐孢子虫为小鼠隐孢子虫鸡所感染的孢子虫为贝氏隐孢子虫。     

广东鸡,鸭隐孢子虫种类鉴定与致病性研究

从有患轻微呼吸道症状的鸡和鸭的粪便中分离到隐孢子虫卵囊，并在其组织切片中观察到隐孢子虫。根据卵囊的形态和大小、虫体寄生部位，确定鸡、鸭均为贝氏隐孢子虫感染。用上述鸡、鸭粪便中分离的卵囊，分别经口感染２日龄鸡和鸭各１５只以探索其致病性。感染鸡出现明显呼吸道症状，将引起死亡，气管、支气管、气囊、肺和法氏囊出现大体与显微病变。感染鸭则症状和病变都较鸡轻。结果表明：鸭对贝氏隐孢子虫感染的抵抗力比鸡强。     

Real-timeqPCR检测鸡胚中贝氏隐孢子虫方法研究

为检测鸡胚中贝氏隐孢子虫,本研究根据GenBank公布的贝氏隐孢子虫和原鸡18SrRNA基因序列设计针对贝氏隐孢子虫的特异性引物,并以贝氏隐孢子虫卵囊基因组DNA为模板,建立检测贝氏隐孢子虫SYBRGreen实时荧光定量PCR（Real—timeqPCR）方法,同时对贝氏隐孢子虫在鸡胚中培养7d后尿囊膜和尿囊液样品中虫体DNA进行检测。结果表明,建立的SYBRGreenreal—timeqPCR方法可特异性检测到贝氏隐孢子虫,建立的标准曲线线性关系良好（R2=0．998）,卵囊基因组DNA检测阈值为10个卵囊,重复检测结果显示试验重现性较好。该方法成功检测到尿囊膜和尿囊液中虫体DNA。本研究建立了快速、特异的定量检测鸡胚中贝氏隐孢子虫real—timeqPCR方法,可用于对贝氏隐孢子虫在鸡胚中繁殖规律分析和抗隐孢子虫药物筛选等研究。     

禽隐孢子虫病的诊断与防治

<正>隐孢子虫病是家禽、鸟类最常见的寄生虫病之一,隐孢子虫的宿主多达30余种,目前,隐孢子虫种已达20余种,寄生于禽类的隐孢子虫有3个虫种,即火鸡隐孢子虫(Cryptosporidiummeleagridis)、贝氏隐孢子虫(C.baileyi)和鸡隐孢子虫(C.galli)。我国发现的禽隐孢子虫有2种包括贝氏隐孢子虫(C.baileyi)和火鸡隐孢子虫,主要引起呼吸系统、消化系统疾病,导致产蛋率下降或鸡只死亡,当与其他传染病,免疫抑制性共同感染时,会造成更为严重的经济损失。     

一例禽隐孢子虫病的诊治

正禽隐孢子虫病是由隐孢子虫科隐孢子虫属的贝氏隐孢子虫、火鸡隐孢子虫寄生于家禽的呼吸系统、消化道、法氏囊和泄殖腔内所引起的一种原虫病。隐孢子虫病呈全球性分布,能使鸡、鸭、鹅等多种家禽致病,是仪次于球虫病的高发性原虫病。近年来,由于禽场的饲养管理水平不断提高,典型的禽隐孢子虫病病例在规模化禽场已很少     

河南省鹌鹑隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握河南省鹌鹑隐孢子虫病的流行状况,于2006年9月至2007年8月对河南省鹌鹑养殖量较大的5个地市47个鹌鹑养殖场（户）进行了调查。共采集1818份粪样,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子虫感染率为13．15％（239／1818）。根据形态学特征,将分离到的2种隐孢子虫鉴定为贝氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫。调查结果表明,河南省不同品种鹌鹑之间隐孢子虫的感染率差异不显著,但鹌鹑隐孢子虫的感染率具有一定的地区、季节及年龄差异。     

种鸡感染隐孢子虫的鉴定

本文对广东某种鸡场3万余只中40%排白色、浅黄色稀粪的种鸡，作病因检查时，发现隐孢子虫卵囊，并根据测定数据，形态及寄生部位作鉴定，作者认为此次检出的卵囊介于贝氏隐孢子虫与火鸡隐孢子虫之间，究意属何种隐孢子虫还有待探讨。     

三明市禽隐孢子虫感染情况调查

为了解三明市家禽隐孢子虫感染状况,对三明市辖区内12个鸡场、8个鸭场、2个鹅场、1个鸽场、1个鹌鹑场和36家农村散养户进行随机抽样,共采集696份粪便样品,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子虫平均感染率27.6%。调查结果表明,不同地区、不同种类、不同日龄、不同饲养方式下禽类隐孢子虫感染率有所差异;根据形态学特征,将分离得到的隐孢子虫鉴定为贝氏隐孢子虫。     

山东省部分地区禽隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握山东省禽类隐孢子虫病的流行状况,自2007年3月至2008年4月对山东省5个地市及15个县市的禽类进行了调查。共采集4 500份粪样,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子虫感染率为23.7%。根据形态学特征,鉴定为贝氏隐孢子虫感染。调查结果表明,不同饲养方式、不同种类、不同地区和季节的禽类隐孢子虫的感染率有明显差异。     

禽隐孢子虫病及其公共安全

禽隐孢子虫病是由火鸡隐孢子虫和贝氏隐孢子虫所引起的一种原虫病,主要的宿主为火鸡、鸡、孔雀等,是引起火鸡、鸡、鹌鹑因患呼吸系统和肠道疾病而死亡的重要病原.从目前研究报道来看,火鸡隐孢子虫和贝氏隐孢子虫均可引起人畜共患,因此其更被关注.基于上述情况,对感染禽隐孢子虫的种类、临床症状和诊治等作一概述.     

山东省禽隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握山东省禽类隐孢子虫病的流行状况,自2007年3月至2008年4月对山东省6个地市及18个县市的禽类进行了调查.共采集6 190份粪样,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子感染率为20.46%.根据形态学特征,将分离得到的隐孢子鉴定为贝氏隐孢子虫.调查结果表明,不同饲养方式、不同种类、不同地区和季节的禽类隐孢子虫感染率有明显差异.     

固始鸡源隐孢子虫人工感染试验

为了解来源于地方鸡品种的隐孢子虫分离株致病特点,对收集到的河南固始鸡源隐孢子虫经鹌鹑传代纯化后,进行动物感染。结果:固始鸡源隐孢子虫分离株无论在正常还是免疫抑制情况下均不能感染小鼠,但能成功感染海兰雏鸡,出现明显的呼吸道症状及法氏囊病变。剖检发现虫体主要寄生在法氏囊、气管和泄殖腔等部位。根据卵囊形态学及寄生部位等特点,本试验分离的隐孢子虫种类鉴定为贝氏隐孢子虫(Crypto-sporidium baileyi)。增大感染剂量,可使雏鸡排卵囊高峰期提前,排卵囊量增大,持续期延长;免疫抑制剂的使用也可使高峰期提前,持续期延长,但会造成试验动物死亡率增高。雏鸡临床症状、剖检病变和增重减少均与感染剂量呈正相关,免疫抑制剂的使用会加重此影响。     

隐孢子虫卵囊形态学观察及动物交叉感染试验

作者观察了从湖南６种动物分离出的隐孢子虫卵囊的光镜下形态，并以鸡源、牛源和猪源隐孢子虫卵囊人工感染实验动物作交叉感染性研究。结果鉴定出隐孢子虫３个种，即贝氏隐孢子虫（Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ），寄生于鸡、鸭；微小隐孢子虫（Ｃ．Ｐａｒｖｕｍ），寄生于牛、山羊、猪、家兔和小鼠；鼠隐孢子虫（Ｃ．ｍｕｒｉｓ），寄生于牛。交叉感染结果表明，来自鸡的隐孢子虫可以感染雏鸡和雏鸭，而不能感染小鼠和家兔；来自牛的隐孢子虫可以感染小鼠和家兔而不能感染雏鸡，来自猪的隐孢子虫可以感染小鼠而对雏鸡无感染性。作者认为，哺乳类和鸟类的隐孢子虫可能在宿主纲的水平上具有宿主持异性。     

猪源隐孢子虫Hsp70基因的测定与种系发育关系分析

从河南两个地区猪的粪便中分离纯化了猪源隐孢子虫卵囊。参考隐孢子虫Hsp70基因属特异性引物,用PCR分别扩增了卵囊基因组DNA大小均为1 948 bp的片段,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化,纯化后PCR产物直接测序。将测得的序列和推测出的氨基酸序列分别用ClustalX软件与已报道的相应序列比对,用DNASTAR中的MegAlign分析其同源性,并用PAUP绘制系统发育进化树。序列分析结果显示河南猪源隐孢子虫两个分离株Hsp70 DNA序列的同源性为99.9%,与其他隐孢子虫相应序列同源性介于81.9%~99.8%之间,其中与猪隐孢子虫(Cryptosporidium suis,AF221533)同源性最高分别为99.8%,97.9%;与安氏隐孢子虫(C.andersoni,AY954592)同源性最低。两个分离株推导Hsp70氨基酸序列的同源性为100%,同其他隐孢子虫相关序列的同源性在92.8%~99.8%之间。本研究为隐孢子虫诊断及流行病学研究打下了良好基础。     

奶牛隐孢子虫病流行病学调查及初生犊牛感染试验

应用饱和糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法调查郑州、商丘和洛阳3个地区的5个奶牛场、2个专业村的582份粪样，查出阳性样品64份，隐孢子虫总阳性率11％（64／582），发现两种不同形态的卵囊，根据其形态结构等特点鉴定为小球隐孢子虫（C．parvum）和安氏隐孢子虫（C．andersoni）。其中2个场奶牛感染安氏隐孢子虫，有1个场的奶牛感染小球隐孢子虫，且感染强度较小。犊牛感染率较育成牛、成年牛高。并进行小球隐孢子虫分离株对初生犊牛的致病性试验，其结果为潜隐期7天，排卵囊高峰出现在感染后第16天，高峰期5天。剖检后消化道黏膜经抗酸染色鉴定，仅在回肠中段发现卵囊。     

鸭源贝氏隐孢子虫对鸡的致病性

设计3个不同剂量的鸭源隐孢子虫试验感染2日龄雏鸡,通过临床症状、增重、排卵囊规律和法氏囊指数及寄生器官组织扫描电镜观察,证实贝氏隐孢子虫160万个卵囊感染即可引起明显的呼吸道症状,发病鸡增重显著降低,法氏囊严重萎缩。贝氏隐孢子虫致病程度和排卵囊规律与感染剂量相关,主要病变表现呼吸道病变和法氏囊炎症。