测定鸡蛋蛋清中溶菌酶含量和活力标准方法的建立

研究测定鸡蛋蛋清中溶菌酶含量和活力的标准方法。在比浊法的基础上,用紫外-可见分光光度计测定鸡蛋蛋清中溶菌酶的含量和活力,并对该方法的精密度、准确度、灵敏度和可重复性进行验证。结果表明:本方法的精密度(RSD4%)、准确度(R95%)、灵敏度(LOQ5μg/mL,LOD0.3μg/mL)、可重复性(RSD7%)均符合方法评估实验要求,所测鸡蛋蛋清溶菌酶含量为2.93～4.07mg/mL、活力为13832.54～20842.74U/mg。研究证明,本方法能科学地估计蛋清中的溶菌酶含量和活力,是一种操作性强、易于掌握、结果可靠稳定的测定方法,可以作为测定鸡蛋蛋清中溶菌酶含量和活力的标准方法。     

不同品种鸡蛋蛋清溶菌酶粗提率及蛋清抑菌效果的比较

为了研究不同品种鸡蛋蛋清溶菌酶粗提率及蛋清抑菌效果,试验以遂昌散养土鸡所产的鸡蛋、市售品牌土鸡蛋、散装土鸡蛋和普通鲜鸡蛋为研究对象,测定其鸡蛋重量、蛋清重量、溶菌酶粗提率以及蛋清对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。结果表明,遂昌土鸡蛋的重量显著小于其余3种鸡蛋(P0.01),但蛋清重量和溶菌酶粗提率在4种鸡蛋中均无显著差异(P0.05);遂昌土鸡蛋蛋清对大肠杆菌的抑菌效果显著优于散装土鸡蛋和普通鲜鸡蛋(P0.01),但对金黄色葡萄球菌的抑菌效果在4种鸡蛋中无显著差异(P0.05)。     

蛋清溶菌酶的改造及其抑菌活性

本研究旨在探讨高温酸性改造的蛋清溶菌酶对两种革兰阳性菌G⁺（金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis）和两种革兰阴性菌G^-（大肠杆菌Escherichia coli、鳗弧菌Vibrio anguillarum）的抑制作用。采用高温（57.0±0.1）℃、pH 2.0条件对蛋清溶菌酶进行改造，透射电镜观察改造蛋清溶菌酶的超微结构，8-苯胺基-1-萘磺酸（ANS）测定蛋清溶菌酶改造前后疏水性的变化，圆二色谱法与BeStSel软件分析改造后溶菌酶二级结构的改变，并采用牛津杯法测量改造后蛋清溶菌酶对供试菌的抑菌直径，生长曲线测定法测定改造后蛋清溶菌酶的最小抑菌浓度，Western blot检测4种供试菌菌液与菌体中溶菌酶含量变化。透射电镜结果显示，改造后蛋清溶菌酶为短杆状纤维结构；ANS和圆二色谱法结果显示，改造后蛋清溶菌酶疏水性增强，β折叠含量提高31.7%；牛津杯法显示，改造后蛋清溶菌酶对试验菌的抑菌强弱为鳗弧菌>枯草芽胞杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌；生长曲线测定结果发现，鳗弧菌最小抑菌浓度为8 μmol·L^-1，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌的最小抑菌浓度为6 μmol·L^-1；Western blot发现菌液中改造蛋清溶菌酶分子质量未发生改变，而菌体中溶菌酶含量和分子质量发生改变，革兰阳性菌和阴性菌均在10 ku处出现条带，且革兰阳性菌在22 ku处溶菌酶含量增加，但菌液上清均仅在14.3 ku处有条带。结果提示，改造蛋清溶菌酶对革兰阳性菌和阴性菌均具有较强的抑菌效果，为改造蛋清溶菌酶在畜牧业中的应用提供了基础数据。     

响应面法优化地衣芽孢杆菌S6产角蛋白酶培养基

试验利用响应面法对地衣芽孢杆菌S6产角蛋白酶的培养基进行优化.单因素试验表明:(K2HPO4/KH2PO4)、NaCl和MgSO4最佳水平分别为1.4/0.7、0 3和0.1 g/L,响应面优化地表芽孢杆菌S6培养基最佳组成为麦芽糖0.03 mol/L、半胱氨酸0.02 mol/L和生物素28.17μg/L,与基础发酵培养基相比,角蛋白酶活力最高值提高了2 822 4倍,为210.55 U/mL.     

固态发酵复合酶培养条件的优化及工艺研究

根据猪的消化生理特点和饲喂饲料,确定猪用复合酶以酸性蛋白酶、木聚糖酶为主,兼有纤维素酶,并采用单因素搜索试验对培养基组成、培养条件进行优化。试验确定的最佳培养基组成为:麸皮60g,纤维素粉40g,豆粕10g,(NH4)2SO42g,MgSO40.05g,K2HPO40.1g。最佳培养条件为:接种量w(曲种)=0.3%,每克原料含3×105个孢子,培养温度30～35℃和适宜的培养时间,在此条件下,所产酶活力分别为:纤维素酶8597U/g,木聚糖酶5054U/g,酸性蛋白酶861U/g。     

乙醇/磷酸氢二钾(K2HPO4)双水相提取核桃青皮多糖工艺及其抗氧化活性的研究

为了探讨核桃青皮多糖的提取工艺及其抗氧化功能,以多糖提取率为考察指标,采用乙醇(ethanol)/磷酸氢二钾(K₂HPO₄)双水相体系提取核桃青皮多糖,并采用响应面Box-Behnken耦合遗传算法优化双水相提取核桃青皮多糖(walnut peel polysaccharides,WPPs)工艺,采用红外光谱分析方法(FT-IR)探究了WPPs结构,并检测其体外抗氧化活性。结果显示：双水相提取WPPs的最佳工艺为K₂HPO₄质量分数16%,提取时间34 min,提取温度28℃,WPPs的提取率为111 mg/g;WPPs存在多糖物质的特征吸收峰。双水相技术制备所得WPPs可有效清除ABTS自由基。说明双水相体系可以安全、价廉、高效提取核桃青皮中的多糖,并且保留了WPPs的生物活性。     

草酸青霉果胶酶生产工艺研究

通过正交试验对鹅源草酸青霉固态发酵产果胶酶的发酵条件及发酵工艺参数进行优化.结果表明:最佳培养基配方为:每15 g基础培养基中葡萄糖0.9 g、(NH4)2SO4 1.2 g、KH2PO4(或K2HPO4、MgSO4、CaCl2)0.07 g；最优发酵参数为:起始pH 4.5,发酵时间60 h,发酵温度30℃,接种量1.5 mL.果胶酶的最适浸提剂为1％ NaCl.     

阳离子交换法提取蛋清溶菌酶的研究

采用静态离子交换法从鸡蛋清中提取溶菌酶,探讨不同条件对溶菌酶收率等的影响,确定了最优操作参数,所用树脂为D152阳离子交换树脂。最佳提取条件为：树脂用量占蛋清体积的30％;吸附时间6h;去离子水洗涤杂蛋白3次;用10％硫酸铵溶液洗脱3次,洗脱时间1h;用洗脱液体积2倍的丙酮沉淀溶菌酶,试验从300mL蛋清中制得溶菌酶0．896g,得率0．295％,比酶活可达9500U／mg左右,纯度为96．3％     

混菌固态发酵制备玉米皮菌体蛋白饲料的培养基优化

选择Plackett-Burman设计和响应面优化相结合的方法,对米曲霉CGMCC 2.0951和热带假丝酵母CGMCC 2.118混合固态发酵玉米皮制备菌体蛋白质饲料的培养基组成进行了优化.二水平PB设计对影响玉米皮发酵的8个因素进行筛选,得出影响最大的3个因素:麸皮、尿素和K2HPO4;再通过响应面分析法对这3个因素进行优化,得出最适添加量分别为麸皮7.63％、尿素1.54％和K2HPO41.16％.优化后的玉米皮培养基经过混菌发酵,其真蛋白质含量可达到12.54％,较发酵原料提高了1.65倍.     

红豆双皮奶的研究

本文主要研究利用娟姗生鲜牛奶与优质的银香鸡的鸡蛋蛋清有机结合,再辅以红豆沙加工成一种红豆双皮奶的方法.确定了产品的最佳配方为:红豆∶水(m/m) =1∶6,红豆浆∶牛奶(m/m) =5∶95,添加剂比例(m/m)为0.3％,红豆奶∶蛋清(m/m)=85∶15,白糖的添加比例(m/m)为4％;蒸煮时间为15 min.该产品既含有丰富的牛奶蛋白质和蛋清蛋白,又含有红豆的植物蛋白,同时红豆含有丰富的膳食纤维和叶酸,从而使产品具有良好的营养保健作用,市场潜力较大.