狐狸致病性大肠杆菌的分离鉴定及敏感药物筛选

从山东省某养殖场发病死亡病狐采集了病料。经细菌培养、形态观察、染色镜检、生化试验,结合临床症状及流行病学特点,最终确定病原体为狐狸致病性大肠杆菌。用10种药物做了药敏试验,结果该养殖场分离的狐狸致病性大肠杆菌对阿莫西林、链霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、呋喃妥因、四环素高度敏感;对环丙沙星中度敏感;对红霉素、庆大霉素、卡那霉素耐药。     

猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

从湖北省襄樊地区7家猪场采集病料进行大肠杆菌分离培养,获得36株菌株。通过菌落和细菌形态学观察、生化试验和动物试验确定分离细菌为致病性大肠杆菌。应用纸片扩散法对分离的大肠杆菌进行药物敏感试验,结果表明,对丁胺卡那霉素敏感的菌株有81％,氟苯尼考42％,庆大霉素39％,痢菌净33％,新霉素31％。对阿莫西林耐药的菌株为86％,氯霉素72％,土霉素56％,卡那霉素47％、庆大霉素47％。通过本次试验可知丁胺卡那霉素可作为襄樊地区防治致病性大肠杆菌的首选药物,氟苯尼考作为备选药物。     

辽宁省鸡大肠杆菌分离、鉴定及药物敏感性试验

2008年6月以来,采集辽宁省各地区疑似鸡大肠杆菌病病料,采用平板划线法分离纯化细菌,通过生化试验和血清学试验进行鉴定,利用纸片法对所分离大肠杆菌菌株进行常用药物的敏感性检测.结果表明,目前流行的大肠杆菌主要为078、057、02、01,035、0157、08;常用药物的敏感率较高的是丁胺卡那87.5%,粘杆菌素87.5%,克林霉素81.25%,左旋氧氟沙星81.25%,氟苯尼考75%,新霉素75%;新复方制剂对大肠杆菌均高度敏感.     

仔猪黄白痢大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了对仔猪黄白痢病做出正确的诊断和治疗,对发病猪场分离到的36株病原菌进行了分离鉴定和药敏试验,证实了病原为大肠杆菌,并且确定了细菌的主要血清型和用药范围,为今后该病的防治提供了科学依据。     

生猪养殖场仔猪白痢大肠杆菌分离、鉴定及药物敏感性试验

仔猪白痢为仔猪常发疾病,严重制约生猪养殖产业。试验以沈阳地区某规模化生猪养殖场患白痢的63头仔猪为研究对象,对其进行病原菌分离、鉴定及药物敏感性试验。结果表明,该场仔猪白痢主要病原菌为大肠杆菌,共得到大肠杆菌分离株55株。分离株对磺胺甲基异恶唑耐药率最高、其次为青霉素;分离株对头孢噻呋最敏感。分离株多药耐药现象较为严重,同时耐受5种抗菌药物的分离株最多,占27.3%。     

猪场新生仔猪黄痢的病原分离及药敏试验

从重庆市几个规模化猪场的发病仔猪中采集病料，分离培养的病原菌，在麦康凯培养基上菌落呈红色，革兰氏染色为G^-菌，生化试验结果显示对葡萄糖、乳糖、麦芽糖产酸产气，不分解尿素，不产生硫化氢，表明所分离菌为大肠杆菌。用分离菌对头孢唑啉等29种药物进行药敏试验，所分离的大肠杆菌对头孢类药物、氧氟沙星、氨苄西啉等药物高度敏感，而对链霉素、替硝唑产生耐药性。但从不同场分离到的菌株对药物的敏感性不一致。     

仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

从20多个猪场中采集仔猪腹泻粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经接种小白鼠进行致病性鉴定后，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出1株猪水肿病致大肠杆菌。对其中112株进行了药敏试验；先锋霉素V的敏感菌株为96.3%，环丙沙星为56.3%，诺氟沙星为50.5%，卡那霉素和庆大霉素均为45.9%。蓖株的耐药率，四环素为96.8%，链霉素为71.8%，复方新诺明为67.5%，随机抽取10株进行了5种微量糖发酵试验；结果均符合大肠杆菌生化特性。此外对广西某猪场分离出的大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定为阴性。     

猪源大肠杆菌的分离和耐药性监测

为了调查猪源大肠埃希氏菌的耐药性,从扬州大学动物医院送检的大肠杆菌病猪中,采取病料进行大肠杆菌的分离培养,共获得16株菌株。通过茵落的细菌形态学观察,革兰氏染色镜检和生化试验,确定分离的细菌为大肠杆菌。应用纸片扩散法对分离的大肠杆菌进行药物敏感性试验,结果表明分离得到的大肠杆菌对茵必治、痈特灵、丁氨卡那较敏感。通过本次试验可知,菌必治可作为送检地区防治致病性犬肠埃希氏菌的首选药物,丁胺卡那作为备选药,而痢特灵作为兽药禁用药由于使用很少,所以细菌对其敏感性较高。     

猪源大肠埃希氏菌对较新的16种抗生素的敏感性

对从北京某猪场分离的 2 0株猪源大肠埃希氏菌所做的对 1 6种较新抗生素的药敏试验结果表明 ,除对头孢三嗪 ( CRO)、头孢噻甲羧肟 ( CAZ)、头孢噻肟 ( CTX)未产生耐药性外 ,分离菌株对其余 1 3种药物均显示程度不同的耐药。多西环 ( DO)、乙酰螺旋霉素 ( ASP)、杆菌肽 ( B)、新生霉素 ( NB)、氯洁霉素对其无抑制作用。 2 0株耐药菌株中 ,有 1 5种耐药谱型 ,多数为 5耐以上多重联合耐药     

沈阳某鸡场大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验

对沈阳市某肉鸡养殖场的85例病死鸡进行大肠埃希菌的分离鉴定及药物敏感性试验,结果分离到大肠埃希菌62株,分离率为72.9%,分离菌株对头孢氨苄全部耐药,对其余抗菌药物的耐药率在0~88.7%之间,多重耐药情况普遍。     

猪水肿病大肠杆菌分离、鉴定及药敏试验

本实验从疑似猪水肿病的病例分离到5株大肠杆菌,O抗原鉴定结果表明所有菌株均为O139血清型;应用F18ab菌毛单克隆抗体对这5株大肠杆菌能否表达F18ab菌毛进行了鉴定,结果表明其中2个菌株能表达F18ab菌毛;利用聚合酶链式反应(PCR)对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)操纵子基因保守区进行了扩增,结果发现在能表达F18ab菌毛2个菌株中可扩增一段特异性序列。以上数据表明这2株大肠杆菌为致仔猪水肿病大肠杆菌。药敏试验表明这两株菌株均对氟哌酸、妥布霉素、庆大霉素、利福平等抗生素高度敏感。     

猪源大肠杆菌脂多糖的提取、纯化及活性分析

为了从猪源大肠杆菌中获得纯度高、产率高的脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）,并评价其毒力,本试验采集仔猪腹泻粪便作为病料,进行细菌分离鉴定和16S rDNA鉴定,采用热酚水法提取细菌的LPS,通过DNaseⅠ、RNaseA、蛋白酶K和醇沉法对LPS进行纯化,通过苯酚硫酸法、Bradford法和紫外分光光度法测定LPS多糖、蛋白及核酸含量,鲎试剂定量法测定其活性,采用小鼠急性毒性试验方法测定小鼠半数致死量（LD₅₀）。结果显示,分离获得一株具有高致病性的猪源大肠杆菌,纯化的猪源大肠杆菌LPS平均产率为3.74%,其中多糖含量为13.40%,蛋白含量为0.48%,核酸含量为0.06%,主要条带集中在14~160 ku范围内,鲎试剂定量法测定其活性为1.21×10⁷ EU/mg,提取LPS对小鼠的LD₅₀为31.86 mg/kg。该猪场仔猪腹泻是由致病性大肠杆菌引起,获得其毒力因子LPS纯度高、产率高、毒力强,这将为临床防制猪大肠杆菌病及LPS提取纯化提供理论依据。     

Extraction,Purification and Activity Analysis of Lipopolysaccharides from Escherichia coli Isolated from Swine

In order to obtain higher purity and high yield of LPS isolated from Escherichia coli, and evaluate its virulence,excrement of diarrhea piglet was collected as pathological samples, of which, some strains of Escherichia coli were isolated and identified. And furthermore, a strain of Escherichia coli was acquired by 16S rDNA identification. The LPS from this strain of Escherichia coli was isolated with the hot-phenol water method and purified by DNaseⅠ, RNaseA, proteinase K treatment and alcohol precipitation. The polysaccharide, protein and nucleic acid content of purified LPS were detected by phenol-sulfuric acid method, Bradford method and UV points spectrophotometric method. And its bioactivity and acute median lethal dose was determinated by tachypleus amebocyte lysate (TAL) method and acute toxicity experiment method, respectively. The results showed that a strain of highly pathogenic Escherichia coli was successfully isolated. The average yield of purified LPS was 3.74%, the proportion of the polysaccharide was 13.40%, the protein was 0.48%, and the nucleic acid was 0.06%. SDS-PAGE electrophoresis and silver stain showed that the bands were mainly concentrated in the range of 14 to 160 ku. The LAL bioactivity of the prepared LPS was 1.21×10⁷ EU/mg, LD₅₀ of the mouse abdominal cavity was 31.86 mg/kg. The results revealed that the diarrhea piglets in the farm was caused by pathogenic Escherichia coli,purified LPS from this strain of Escherichia coli had the advantages of higher purity, high yield and strong virulence, which would provide theoretical data for clinical prevention and treatment of diarrhea piglets.     

珍珠鸡大肠杆菌敏感性药物筛选研究

对珍珠鸡的病料进行细菌分离培养、纯化培养、染色镜检、生化鉴定,并进行40种抗菌药物的药敏试验。结果表明,极敏药物占27.5%,高敏药物占12.5%,中敏药物占20.0%,低敏药物占17.5%,不敏感药物占22.5%。其中,珍珠鸡大肠杆菌对先锋噻肟、舒普深、先锋必、菌必治最敏感。     

仔猪腹泻的大肠杆菌生物膜的筛选和致病力观察

采用96孔微量板法,对临床分离鉴定的24株大肠杆菌进行生物膜筛选,得到11株生物膜阳性大肠杆菌,并绘制出4株生物膜强阳性菌株的生长曲线。同时对小鼠进行攻毒试验,结果表明,生物膜阳性菌株的致病力强于生物膜阴性菌株,这为临床预防仔猪腹泻病提供了理论依据。     

辽宁猪源大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

为了调查辽宁省不同地区猪源大肠杆菌病的流行和耐药情况,无菌采集临床疑似大肠杆菌病病死猪或患病猪病料65份,经细菌分离培养及生化试验,共分离到65株大肠埃希菌,分离率为100%。对分离到的菌株进行药物敏感试验及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)筛选和确证试验,结果显示,辽宁地区分离株均表现出不同程度的耐药,耐药菌株占98.46%,其中对四环素、青霉素及氨苄西林的耐药率分别为93.33%、81.54%和80.00%;对甲氧苄啶、磺胺异恶唑、氯霉素、恩诺沙星耐药性较高,分别为74.29%、74.29%、69.23%和68.57%;对米诺霉素及多粘菌素B较为敏感,耐药率仅为10%和9.23%;分离株多药耐药率较高,达92.31%。ESBLs确证试验结果发现,辽宁省分离株中29.23%的菌株能产生ESBLs。说明辽宁地区猪大肠埃希菌流行情况较为广泛,耐药情况较为严重。     

肉鸽大肠杆菌的分离与鉴定

为研究肉鸽大肠杆菌的生化特性、药敏情况、血清型和致病性。2010年1月江苏省某肉鸽场鸽群出现呼吸困难,死亡增多现象。对病死鸽剖检发现,以气囊炎和肺部坏死为主,无菌采集病料分离到1株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定,确定为大肠杆菌,微量凝集试验表明其血清型为O2。经过肺结节压片镜检,没有发现霉菌的菌丝;检测健康鸽和患病鸽各10只的鸽新城疫抗体,发现其抗体效价比较高且整齐度较好,两者之间的抗体无明显差异。对分离菌株进行药敏试验,结果表明对恩诺沙星等7种药物敏感,对阿莫西林等16种药物已产生了耐药性。将分离到的菌株接种21日龄雏鸽进行动物回归试验,死亡率达80%,说明该分离菌株对雏鸽具有较强的致病性。