羔羊腹泻病原菌常规分离鉴定及药敏试验

从安微省合肥、滁州地区的肉羊养殖场中共采集到羔羊腹泻粪样11份,进行细菌分离培养与镜检,将分离的细菌进行纯培养,并进行生化鉴定、药敏试验和小鼠攻毒致病性检验。结果显示:在检测的11份粪样中,共检测出大肠杆菌11株、奇异变形杆菌7株;致病性试验显示大肠杆菌和奇异变形杆菌均对小鼠有致病力,但奇异变形杆菌致病性弱于大肠杆菌;药敏试验显示分离菌株对恩诺沙星、氟苯尼考、卡那霉素、丁胺卡那霉素、菌必治、复方新诺明、丙氟哌酸、头孢唑啉等敏感,对庆大霉素、氟哌酸等常规药物均表现出一定的耐药性,对青霉素、链霉素、克拉霉素、红霉素和强力霉素等完全耐药。结果表明,大肠杆菌和奇异变形杆菌都有一定的致病性,上述地区羔羊腹泻是由混合感染引起,且混合感染致病性更强。     

鸡场大肠杆菌的分离与药敏试验

对某规模化鸡场发生的疾病进行调查,根据临床症状、病理变化将疑似大肠杆菌病20份病鸡的肝脏样品经细菌培养、镜检和生化试验等实验室方法分离鉴定出18株大肠杆菌。动物实验表明所分离的大肠杆菌均具有很强的致病性。用临床上常用的9种抗菌药物对分离菌株进行药敏试验,结果表明,所分离的大肠杆菌对阿莫西林、丁胺卡那霉素、氟苯尼考和头孢噻呋高度敏感,对庆大霉素中度敏感,对青霉素、红霉素、恩诺沙星和链霉素等产生耐药性。     

规模化鸡场大肠杆菌的分离与药敏试验

对某规模化鸡场发生的疾病进行调查，根据临床症状、病理变化将疑似大肠杆菌病20份病鸡的肝脏样品经细菌培养、镜检和生化试验等实验室方法分离鉴定出18株大肠杆菌。动物实验表明所分离的大肠杆菌均具有很强的致病性。用临床上常用的9种抗茵药物对分离菌株进行药敏试验，结果表明，所分离的大肠杆菌对阿莫西林、丁胺卡那霉素、氟苯尼考和头孢噻呋高度敏感，对庆大霉素中度敏感，对青霉素、红霉素、恩诺沙星和链霉素等产生耐药性。     

一例仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

为确定仔猪的死亡原因并为猪场及时制定防控措施提供参考依据,对病料样品进行镜检观察、细菌分离培养与纯化、分离菌株的形态特征观察、生化试验、致病性试验、16S r RNA序列鉴定等,最终鉴定为仔猪致病性大肠杆菌。药敏试验结果显示,分离菌株在13种常见药物中对环丙沙星、头孢曲松钠、阿奇霉素、氧氟沙星、头孢噻呋、头孢噻肟、阿莫西林、氟苯尼考8种药物高度敏感,对红霉素、阿米卡星、庆大霉素3种药物中度敏感,对强力霉素、四环素2种药物低度敏感。     

28种药物对广东鸡致病性大肠杆菌敏感性调查

以广东省21个地级市为单位,从鸡场病死鸡中分离细菌,选取经生化鉴定和动物试验确定为鸡致病性大肠杆菌共182株为试验菌株,采用纸片法药敏试验测定其对28种药物的敏感性。头孢氨苄敏感株占76.4%、丁胺卡那敏感株为76.9%、妥布霉素敏感株为77.5%、多粘菌素B敏感株为93.4%、氟苯尼考敏感株为60.5%、庆大霉素敏感株为59.3%,以上药物是防治鸡致病性大肠杆菌病较理想的抗菌药。     

鸡致病性大肠杆菌药敏试验

用２０种抗菌药物对分离自四川不同地区的１５株毒力强的致病性大肠杆菌进行体外药物敏感性试验。结果表明，供试菌对丁胺卡那霉素、先锋霉素Ｖ、新霉素１００％敏感，其高敏以上菌株所占比例分别为１００％、９３．３％、９３．３％，可作为防治鸡大肠杆菌病的首选药物。     

鸡源大肠杆菌临床株的分离鉴定及药敏试验

研究2株分离自广东博罗地区某养鸡场和梅州地区某养鸡场的鸡源大肠杆菌进行分离鉴定和药物敏感试验,根据细菌培养特性试验与分子生物学的鉴定,确定分离菌株为鸡源性大肠杆菌并分别命名为ECGD2010-1株和ECGD2010-2株。对分离鉴定所得菌株进行红霉素、青霉素、氨苄西林、头孢唑林、诺氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、氯霉素、庆大霉素和丁胺卡那霉素的药物敏感试验。结果显示,ECGD2010-1株高度耐药,仅对庆大霉素和丁胺卡那霉素敏感;ECGD2010-2株除对氨苄西林耐药外,对其他抗生素均表现出高度敏感。     

山东东营地区规模化猪场母猪子宫内膜炎病原菌检测与药物敏感性分析

为了解山东东营地区规模化猪场母猪子宫内膜炎的主要致病菌情况,对12头患有子宫内膜炎的母猪子宫内容物进行细菌分离纯化、鉴定、生化试验、PCR试验及序列比对、药敏试验、动物致病性试验。结果分离出9株大肠杆菌菌株和6株金黄色葡萄球菌菌株,12份样本中有4头患病母猪的子宫内容物检测出有2种致病菌存在。本试验分离的9株细菌菌株符合大肠杆菌的形态及生化特性,6株细菌菌株符合金黄色葡萄球菌的形态及生化特征,15株菌株均具有较强的致病性。大肠杆菌分别对头孢曲松、氟苯尼考、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星敏感;对大观霉素、阿莫西林、阿米卡星、多西环素耐药。金黄色葡萄球菌对头孢曲松、氨苄西林、环丙沙星、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星等药物敏感;对庆大霉素、阿米卡星耐药。说明山东东营地区规模化猪场中导致母猪发生子宫内膜炎感染的主要致病菌为大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。15个菌株对很多药物都有一定耐药性,如何采取科学手段治疗母猪子宫内膜炎值得各养殖场户重视。     

湖南省永州市规模化猪场猪源大肠杆菌的耐药性调查

为研究猪源大肠杆菌对常用抗菌药的耐药率,试验应用了12种抗菌药物对湖南地区分离的179株猪源致病性大肠杆菌进行了药物敏感性试验。试验结果显示,猪源大肠杆菌分离菌株对目前常用和应用时间较长的抗菌药物,如四环素、氨苄青霉素、恩诺沙星、阿莫西林、链霉素等产生了非常严重的耐药性。猪源大肠杆菌分离株对于一些新药和未大量应用于猪场的药物如安普霉素、丁胺卡那霉素等则比较敏感。细菌耐药性与用药情况密切相关。     

潍坊地区鸭大肠杆菌病敏感药物的筛选

为给潍坊地区治疗鸭大肠杆菌病提供敏感药物,笔者从潍坊地区各养鸭场送检病死鸭的肝、心包液和心血中分离到20株鸭大肠杆菌,用14种常用抗菌药物对这些菌株进行了药敏试验。结果发现：潍坊市治疗鸭大肠杆菌病最有效的药物为头孢唑酮、头孢噻肟和头孢拉定（高敏株及中敏株占85％）,其次为氟苯尼考和庆大霉素（高敏株及中敏株占80％）,再次为氧氟沙星和丁胺卡那霉素,而硫酸粘杆菌素、氨苄青霉素、强力霉素和环丙沙星治疗效果不佳。     

鸭源致病性大肠杆菌耐氟苯尼考floR基因的克隆与序列分析

为调查鸭源致病性大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的存在情况，利用PCR对20株临床分离的耐氟苯尼考的致病性大肠杆菌进行floR分子检测，分子检测结果显示，全部菌株floR基因阳性；对其中2株大肠杆菌的氟苯尼考耐药基因floR进行了克隆和测序，结果表明，鸭源大肠杆菌floR基因片段的克隆测序结果与预期所得片段结果相符，长度为753 bp，2株鸭源大肠杆菌floR基因的同源性为99.6%，与牛源、鸡源等floR基因的同源性为84.8%～99.9%。系统发育分析发现，2株鸭源大肠杆菌floR基因不在同一支上，亲缘关系较远，表明floR基因的亲缘关系与该基因的来源动物无关。     

鸭Ⅰ型肝炎病毒VP1基因片段的克隆与表达载体的构建

为研究鸭肝炎病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达情况,根据鸭肝炎病毒核苷酸序列设计1对外引物和1对含有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的内引物。以内外引物进行PCR扩增,将所得PCR产物回收,以相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体pET-32a后构建重组表达载体,并转入宿主菌BL21和Rosseta,经酶切、PCR和测序鉴定,证明VP1基因正确插入了表达载体。用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,结果表明,VP1基因片段在大肠杆菌Rosseta和BL21中均难以表达。     

12味中药对鸡血清型O_(78)大肠杆菌的抗菌活性观察

本研究旨在观察乌梅、芦荟等12味中药的水煎液对鸡致病性大肠杆菌O78的抗菌活性。选取乌梅、芦荟等12味中药加水煎煮以获得中药水提取物,测定其对鸡致病性大肠杆菌O78的最低抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并对体外抑菌效果较好的单味中药进行体内试验。乌梅、芦荟、白头翁抗菌活性较好,桔梗、连翘、大黄、白芍、白术几乎无抗菌活性,其中乌梅、白头翁与芦荟水提取物对鸡致病性大肠杆菌O78的MIC分别为2.57、2.06和2.31mg/mL。乌梅、芦荟、白头翁具有一定的抗鸡致病性大肠杆菌O78的作用,将为开发新的抗鸡致病性大肠杆菌的药物奠定理论基础。     

子宫内膜炎致病菌的分离鉴定

[目的]为了弄清子宫内膜炎的致病菌种类和数量。[方法]本试验对张掖市百万头肉牛基地患子宫内膜炎的60头母牛进行病原菌分离、鉴定。从60份样品中分离出8种共计174株细菌。对所有分离株进行10种药物的敏感性试验。[结果]表明:恩诺杀星、氧氟沙星、环丙沙星、卡那霉素、氟苯尼考均对大肠杆菌和沙门氏菌敏感:青霉素、氨苄青霉素、氟苯尼考均对蜡样芽孢杆菌、三种葡萄球菌和两种链球菌敏感。[结论]说明在实践中需要采取综合预防和治疗的措施。     

奶牛胎衣不下病原菌分离鉴定及药敏试验

选取阿克苏地区某奶牛场胎衣不下奶牛17头,采集其子宫分泌物,对其病原菌进行细菌学分离鉴定,并使用全自动微生物鉴定仪及药敏分析仪进行生化鉴定及药敏试验。结果在胎衣不下的患病奶牛黏液中分离鉴定到的主要细菌有大肠埃希菌、科氏葡萄球菌、痢疾志贺氏菌。药敏试验的结果表明:抗生素仍是治疗胎衣不下较理想的药物。     

旧院黑鸡致病性大肠杆菌的分离与药敏试验

从患病死亡的旧院黑鸡病料中分离纯化得到一株细菌，经染色镜检、生化试验和动物致病性试验，最终鉴定为致病性大肠杆菌。选用临床常用的12种抗生素对该菌株进行了药敏试验．结果显示该菌对庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考敏感；对氨苄西林／克拉维酸、卡那霉素、环丙沙星中敏；对氨苄西林、链霉素等耐药。     

四种植物提取物对大肠杆菌的抑菌效果研究

 为充分利用当地资源和进一步开发植物药进行畜禽大肠杆菌病防治提供科学依据,采摘了本地生长的马鞭草、马齿苋、忍冬藤、蒲公英等四种植物,应用水提醇沉法制备提取液,用纸片扩散法和试管两倍稀释法对猪源、鸽源、牛源大肠杆菌进行体外抑菌效果试验,同时以小鼠为试验动物,检测四种植物提取液体内的抗菌作用。结果显示,四种植物对猪源大肠杆菌的抑菌圈在10～14 mm之间,均为中敏;对鸽源大肠杆菌在10～22 mm之间,马鞭草极敏,蒲公英高敏;对牛源大肠杆菌在7～14 mm之间,马鞭草高敏,蒲公英、忍冬藤中敏,马齿苋低敏。马鞭草对猪源、鸽源大肠杆菌的MIC和MBC是31.25 mg/mL,对牛源是62.5 mg/mL;蒲公英对猪源、鸽源的大肠杆菌MIC和MBC是62.5 mg/mL,对牛源是125 mg/mL;马齿苋对猪源的MIC和MBC是62.5 mg/mL和125 mg/mL,对鸽源、牛源的MIC和MBC分别是125 mg/mL和250 mg/mL;忍冬藤对猪源、牛源的MIC和MBC分别是125 mg/mL和250 mg/mL,对鸽源MIC和MBC是62.5 mg/mL和125 mg/mL。小鼠体内抗菌作用提示,用蒲公英和马鞭草1.88 g/kg、马齿苋和忍冬藤3.75 g/kg进行预防,可使感染大肠杆菌的小鼠成活率为达100%。四种植物提取液对大肠杆菌体外抑菌和体内抗菌均有较好的效果,马鞭草效果最好     

鸡源大肠杆菌的耐药性监测及生物学特性研究

从山东省诸城地区6个集约化养鸡场采集50只病死鸡病料,从中分离鉴定得到32株大肠杆菌,对其进行了12种常规药敏试验,发现分离的菌株有不同程度的耐药性。对14株优势血清型菌株进行了质粒DNA提取分析,然后用HindⅢ限制性内切酶对质粒进行了酶切。结果表明,质粒的得率为100%,来源相同的菌株具有相同或相似的质粒图谱,也就是说它们有共同的起源;来源不同的菌株的质粒图谱一般不同,即有不同的起源。将血清型和质粒图谱比较,结果发现,同一血清型可以有不同的质粒图谱,不同血清型可以有相似的质粒图谱,血清型与质粒图谱没有直接的联系。     

牛乳铁蛋白肽基因LfcinB的合成及真核表达载体的构建

根据APD抗菌肽数据库报道的牛乳铁蛋白肽LfcinB氨基酸序列,合成编码LfcinB基因的2条互补的寡核苷酸链,退火后在5′端和3′端分别形成含有BamH I和Xho I位点粘性末端的双链DNA。真核表达载体pcDNA3.1（+）经BamH I 和Xho I限制性内切酶双酶切处理后与合成的LfcinB基因进行连接,连接产物转化E.coli DH5α感受态细胞,提取质粒DNA进行测序。测序结果显示,牛乳铁蛋白肽LfcinB基因成功克隆到pcDNA3.1（+）真核表达载体中,为进一步表达和抗菌活性研究奠定物质基础。     

团头鲂肠道细菌的分离鉴定与药敏试验

从团头鲂(Megalobrama amblycepnala)肠道中分离纯化到4株细菌,菌株编号为MA1～4,通过细菌镜检及培养结果表明,均为革兰氏阴性直杆状菌,在LB培养基上生长;4株细菌氧化酶试验为阴性、过氧化氢酶试验为阳性、半固体动力阳性,不能利用棉子糖、山梨醇、木糖等多种糖类,产H2S、VP试验和葡萄糖酸盐利用试验为阴性;采用数值编码鉴定,MA1为鲶鱼爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri),MA2为摩氏摩根氏菌(Morganella morganii),MA3为嗜线虫致病杆菌(Xenorhab-dus nematophilua),MA4为弗氏志贺菌(Shigella flexneri)。进一步进行药敏试验分析显示,4株菌耐药率分别为52.2%、69.6%、95.7%、100%,均对阿奇霉素、红霉素、洁霉素、氯洁霉素、灭滴灵、头孢噻吩、先锋霉素Ⅳ、复方新诺明和甲氧咔啶具有耐药性;对利福平、氯霉素、头孢孟多、先锋必素、氧哌嗪青霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、卡那霉素和四环素等药物敏感性不同。该研究结果对探明鱼类肠道菌群、养殖水体微生态和疾病防治具有重要参考价值。