苜蓿皂苷对胆固醇逆向转运基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1、清道夫受体BⅠmRNA表达的影响

本试验以大鼠肝脏和肝脏细胞(BRL细胞)及小鼠巨噬细胞(ANA-1细胞)为研究对象,从动物和细胞水平上研究苜蓿皂苷对胆固醇逆向转运基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、清道夫受体BⅠ(SR-BⅠ)mRNA表达的影响。取雄性健康SD大鼠32只,随机分成4组,分别为正常对照组、苜蓿皂苷组、高脂模型组和高脂苜蓿皂苷组,每组8只。正常对照组和苜蓿皂苷组饲喂基础饲粮,其余2组均饲喂高脂饲粮,饲喂4周后,苜蓿皂苷组和高脂皂苷组从第5周开始每天灌胃240 mg/kg苜蓿皂苷,灌胃4周。采用胎牛血清作用于BRL细胞48 h,构建脂变模型,将BRL细胞分为正常对照组(正常细胞)、苜蓿皂苷组(正常细胞)、脂变模型组(脂变细胞)和脂变皂苷组(脂变细胞),苜蓿皂苷组、脂变皂苷组培养液中添加苜蓿皂苷(终浓度300μg/m L),培养24 h。采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用于ANA-1细胞48 h,构建荷脂模型,将ANA-1细胞分为正常对照组(正常细胞)、苜蓿皂苷组(正常细胞)、荷脂模型组(荷脂细胞)和荷脂皂苷组(荷脂细胞),苜蓿皂苷组、荷脂皂苷组培养液中添加苜蓿皂苷(终浓度300μg/m L),培养24 h。采用荧光定量PCR法测定大鼠肝脏、BRL细胞和ANA-1细胞中ABCA1、SR-BⅠmRNA表达量。结果表明:1)苜蓿皂苷显著提高了正常大鼠肝脏ABCA1和SR-BⅠmRNA表达量(P0.05),显著提高了高脂大鼠肝脏ABCA1 mRNA的表达量(P0.05),对高脂大鼠肝脏SR-BⅠmRNA表达量影响不显著(P0.05);2)苜蓿皂苷显著提高了正常BRL细胞ABCA1和SR-BⅠmRNA的表达量(P0.05),而对脂变BRL细胞ABCA1和SR-BⅠmRNA表达量影响不大(P0.05);3)苜蓿皂苷显著降低正常ANA-1细胞ABCA1 mRNA表达量(P0.05)。由此可见,苜蓿皂苷可通过上调大鼠肝脏和正常肝脏细胞ABCA1和SR-BⅠmRNA的表达促进胆固醇的逆向转运,增强肝脏胆固醇排泄,从而发挥其对高脂血症的预防和治疗作用。     

苜蓿皂苷对SD大鼠胆固醇代谢的影响及其分子机理的初步探讨

研究了苜蓿皂苷对SD大鼠胆固醇代谢的影响,并初步探讨其分子机理。取雄性健康SD大鼠32只,随机分为4组,分别为:正常对照组、苜蓿皂苷组、高脂模型组和高脂皂苷组,每组8只。前4周为高脂模型建立期,后4周为灌胃期,正常对照组和苜蓿皂苷组饲喂基础饲粮,其余2组饲喂高脂饲粮,苜蓿皂苷组和高脂皂苷组从第5周开始灌胃240 mg/kg苜蓿皂苷,灌胃4周。测定试验大鼠体重、肝脏系数、血脂水平、粪便和肝脏中的胆固醇、胆汁酸含量,并用实时荧光定量PCR技术检测大鼠肝脏胆固醇7α-羟化酶(CYP7a1)和三磷酸腺苷结合盒转运体G5/三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG5/ABCG8) mRNA的表达量。结果表明,1)苜蓿皂苷显著降低高脂大鼠体重、肝脏系数;降低血清中总胆固醇含量,加速胆固醇向肝脏的聚集;增加粪便中胆固醇和胆汁酸的排出; 2)显著增加正常血脂水平大鼠粪便中胆固醇的含量,但对其体重、肝脏系数等影响不大;3)添加苜蓿皂苷后正常和高脂水平SD大鼠肝脏CYP7a1和ABCG5/ABCG8 mRNA的表达量均成倍增加。提示苜蓿皂苷能够调节SD大鼠体内胆固醇的分布,具有良好的降血脂效应,其效应可能与增加CYP7a1和ABCG5/ABCG8 mRNA表达量,加速体内胆固醇、胆汁酸排泄有关。     

家蚕三磷酸腺苷结合盒转运子B亚族基因Abcb6的克隆与序列分析及组织表达

三磷酸腺苷结合盒转运子B亚族成员ABCB6(ATP-binding cassette transporter subfamily B member 6,ABCB6)是一个重要的半分子转运子,在哺乳动物中主要参与细胞内卟啉类化合物的转运和铁离子平衡的调节。利用人的ABCB6蛋白的氨基酸序列在家蚕EST数据库中进行TBLASTN检索,将检索到的EST序列进行电子延伸和重叠群拼接,根据拼接结果设计引物进行RT-PCR扩增,成功克隆了家蚕Abcb亚族基因第1个成员BmAbcb6的完整开放阅读框。用生物信息学方法检测发现,BmAbcb6有16个外显子和15个内含子,编码850个氨基酸残基,分子质量96.35 kD,等电点8.23;BmAbcb6含有1个核苷酸结合结构域和10个α螺旋构成的跨膜结构域,属家蚕Abcb亚族成员。半定量RT-PCR方法分析BmAbcb6在家蚕5龄第3天幼虫不同组织中均有较高表达,其中以精巢中的表达水平最高。研究结果为进一步分析该基因的功能奠定了基础。     

苜蓿皂苷对断奶仔猪生长性能、肠道菌群、组织抗氧化能力及相关酶mRNA表达的影响

本试验旨在研究苜蓿皂苷对断奶仔猪生长性能、肠道菌群、组织抗氧化能力及相关酶mRNA表达的影响。选取24头平均体重为8 kg的大×长杂交断奶仔猪,随机分为2组,每组3个重复,每个重复4头猪。对照组饲喂基础饲粮,苜蓿皂苷组饲喂在基础饲粮中添加0.25%苜蓿皂苷的饲粮。预试期10 d,正试期30 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加苜蓿皂苷可显著提高断奶仔猪平均日增重(P0.05),并显著降低料重比(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮中添加苜蓿皂苷可显著降低仔猪十二指肠和盲肠的pH(P0.05),显著提高十二指肠、空肠和回肠中乳酸菌数量(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮中添加苜蓿皂苷可显著提高仔猪肝脏和肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性(P0.05),并显著提高仔猪肝脏和空肠中GSH-Px mRNA表达量及十二指肠和回肠中CAT mRNA表达量(P0.05)。综上,苜蓿皂苷可以提高断奶仔猪生长性能,增强其组织抗氧化能力并有效改善其肠道菌群。     

人参三醇组皂苷对大鼠急性坐骨神经损伤修复相关蛋白表达的影响

研究人参三醇组皂苷(PTS)对大鼠坐骨神经急性损伤蛋白表达的影响。建立大鼠坐骨神经挤压损伤模型,随机分为PTS组,模型对照组及空白对照组,每组各10只大鼠;各组均经腹腔注射给药,PTS组损伤后注射PTS;模型对照组,损伤后注射同剂量生理盐水;空白对照组,不损伤坐骨神经,注射同剂量生理盐水。坐骨神经损伤术后30d,免疫荧光化学染色检测PTS对损伤侧坐骨神经神经丝蛋白(NF-M)、微管相关蛋白-2(MAP-2)、生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响,观察PTS对损伤侧神经的影响。大鼠损伤侧坐骨神经NF-M、MAP-2、GAP-43平均光密度表达(9.66±0.99、12.43±1.44、0.344±0.040)与模型对照组(8.21±1.25、11.90±1.14、0.278±0.042)比较有极显著性差异(P0.01)。PTS可促进坐骨神经损伤大鼠NF-M,MAP-2,GAP-43的表达。     

长时期饲喂杂粕型饲粮对蛋鸭产蛋性能、生殖器官及卵巢激素受体mRNA表达水平的影响

本试验旨在探讨长时期饲喂杂粕型饲粮对蛋鸭产蛋性能、生殖器官及卵巢激素受体mRNA表达水平的影响,为蛋鸭生产中合理应用杂粕提供参考.试验选用19周龄龙岩麻鸭360只,随机分为2组,每组6个重复,每个重复30只鸭.豆粕组饲喂豆粕型饲粮,杂粕组饲喂不同杂粕型饲粮[含有9％棉籽粕、9％菜籽粕、9％玉米干酒糟及其可溶物(DDGS...     

乳酸菌对獭兔生长性能、肉品质及肌肉胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子1受体、生长激素受体mRNA相对表达量的影响

本试验旨在研究乳酸菌对獭兔生长性能、肉品质及肌肉胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、生长激素受体(GHR)mRNA相对表达量的影响,探讨其对肉品质的调控作用及适宜用量.选取(43±2)日龄断奶、体重为(1.15±0.05)kg的健康白色獭兔80只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复4只兔(公母各占1/2).对照组喂饮生理盐水;试验组(Ⅰ～Ⅳ组)喂饮植物乳杆菌菌液,其水平分别为104、107、1010和1013 CFU/mL.每隔1d喂饮1次,每次10 mL.预试期7d,正试期60 d.结果表明:1)与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ组的失水率分别降低了4.49％和2.27％,差异显著(P＜0.05).各组獭兔肌肉的pH、剪切力和肉色均无显著差异(P＞0.05).2)Ⅱ组平均日增重显著高于对照组(P＜0.05),料重比显著低于对照组(P＜0.05).各组平均日采食量差异不显著(P＞0.05).3)Ⅰ组IGF-1 mRNA相对表达量显著高于其他各组(P＜0.05),Ⅱ组GHR mRNA相对表达量显著高于对照组(P＜0.05).各组IGF-1RmRNA相对表达量无显著差异(P＞0.05).由此可知,在饮水中添加乳酸菌能提高獭兔生长性能,促进肌肉IGF-1、GHR mRNA的表达,并改善肌肉的系水力.本试验条件下,乳酸菌的适宜添加水平为107 CFU/mL,推荐添加水平为104 ～ 107 CFU/mL.     

阴外动脉灌注氨基酸、葡萄糖混合物对奶山羊血浆总蛋白、白蛋白及相关激素受体mRNA表达量的影响

本试验旨在研究阴外动脉乳成分前体物浓度的变化对奶山羊乳腺吸收及相关激素受体mRNA表达量的影响.选用2～3岁,体重、产奶量相近、安装有阴外动脉和腹部皮下静脉血插管的关中奶山羊3只,由阴外动脉灌注氨基酸和葡萄糖混合物,在灌注前后分别采集动静脉血浆、乳腺组织,测定动静脉血浆中总蛋白、白蛋白的含量及乳腺组织β-酪蛋白、催乳素受体、生长激素受体和类胰岛素生长因子Ⅰ的mRNA表达量。结果表明,与灌注前相比,乳成分前体物含量及乳腺对其的摄取量均提高(P<0.05).乳腺组织中β-酪蛋白、生长激素受体和类胰岛素生长因子Ⅰ的mRNA表达量显著提高(P<0.05),催乳素受体的mRNA表达量极显著提高(P<0.01),说明阴外动脉灌注氨基酸、葡萄糖混合物可以显著地提高乳成分前体物的浓度,有效地刺激血液中激素发生变化,提高乳腺组织中相关受体mRNA的表达.     

苜蓿皂苷对高脂血症大鼠胆固醇代谢及其相关基因表达的影响

本文旨在探讨苜蓿皂苷对高脂血症大鼠胆固醇代谢及肝脏组织中胆固醇7α-羟化酶( CYP7 A1)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因表达的影响.取雄性健康SD大鼠40只,随机分为4组,分别为:正常对照组、高脂模型组、苜蓿皂苷预防组和苜蓿皂苷治疗组,每组10只.正常对照组饲喂基础饲粮,其余3组均饲喂高脂饲粮,其中苜蓿皂苷预防组从第1周开始灌胃240 mg/kg苜蓿皂苷,苜蓿皂苷治疗组从第5周开始灌胃240 mg/kg苜蓿皂苷,试验期共8周.测定试验大鼠体重、肝脏系数、血脂水平和肝脏病理变化情况,并采用酶联免疫法和实时荧光定量PCR技术分别检测大鼠肝脏CYP7A1和LDL-R的蛋白和mRNA表达结果.结果表明:1)和高脂模型组相比,苜蓿皂苷极显著降低预防组大鼠体重及预防组和治疗组血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇含量(P＜0.01),同时改善肝脏脂化程度.2)苜蓿皂苷预防组和治疗组CYP7 A1和LDL-R的蛋白和mRNA表达量极显著高于高脂模型组(P＜0.01).结果提示,苜蓿皂苷通过促进肝脏CYP7A1和LDL-R的表达,增强肝脏胆固醇的排泄,发挥其对高脂血症的预防和治疗作用.     

阿奇霉素对弓形虫病大鼠肝细胞周期和细胞凋亡及NO水平的影响

为了研究阿奇霉素对弓形虫病大鼠肝细胞周期及细胞凋亡及血清 NO水平的影响。用3 0只成年雄性 SD大鼠 ,随机分为感染组、治疗组和空白对照组 ,每组各 10只。感染组每只腹腔注射 2× 10 5/ m L 活的纯化弓形虫速殖子悬液 2m L。治疗组每只腹注同上剂量纯化弓形虫速殖子悬液后 ,每只每天喂服阿奇霉素 2 0 0 m g/ kg体重治疗 ,连用 7d。空白对照组每只腹注生理盐水 2 m L。 9周后解剖所有的大鼠 ,取肝组织制成单细胞悬液 ,应用流式细胞仪检测其细胞周期及细胞凋亡率。同时应用硝酸还原酶法测定各组大鼠血清 NO水平。结果表明 :感染组大鼠肝细胞凋亡率 ( 10 .3 0± 2 .62 ) %显著高于空白对照组大鼠肝细胞凋亡率 ( 9.2 3± 3 .0 3 ) % ( P<0 .0 5 )。治疗组大鼠肝细胞凋亡率 ( 9.73±3 .73 ) %明显低于感染组大鼠肝细胞凋亡率( 10 .3 0± 2 .62 ) % ( P <0 .0 5 )。治疗组大鼠肝细胞凋亡率与空白对照组大鼠肝细胞凋亡率相比较 ,无显著性差异 ( P >0 .0 5 )。肝细胞周期中 S期肝细胞比例感染组较治疗组低 ( P <0 .0 5 ) ,而 G1 期比例二者相反。治疗组与空白对照组比较细胞周期无显著性差异 ( P >0 .0 5 )。同时 ,感染组大鼠血清 NO平均水平为 ( 10 3 .2 6± 3 7.14 )μm ol/ L,治疗组大鼠血清 NO平均为 ( 85     

马链球菌对树突状细胞Toll样受体和MyD88及细胞因子mRNA表达的影响

为探究马链球菌马亚种(Streptococcus equi subsp.equi,S.equi)对小鼠骨髓源树突状细胞(bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)TLR1、TLR2、TLR6、MyD88、IL-1、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-αmRNA表达的影响,用GM-CSF、IL-4细胞因子刺激小鼠骨髓细胞使其诱导分化成未成熟的BMDCs,感染S.equi后16、20、26h,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测感染组及未感染组细胞TLRs、MyD88和细胞因子mRNA的表达情况。结果显示,S.equi感染BMDCs后16、20、26h,TLR1、TLR2、TLR6、MyD88mRNA的表达量均显著或极显著的高于未感染组(P0.05或P0.01)。S.equi感染DCs后16、26h,IL-1的分泌量较未感染组没有变化(P0.05),IL-10、TNF-α的分泌量显著或极显著增加(P0.05或P0.01)。IL-6在S.equi感染DCs后16h的分泌量显著增加(P0.05),但感染后26h无显著变化(P0.05)。IL-12在S.equi感染DCs后16h的表达没有变化(P0.05),但感染后26h分泌量有所增加(P0.05)。说明S.equi具有调节DCs TLRs、MyD88和细胞因子表达的能力,从而介导机体的免疫应答反应。