猪链球菌2型毒力因子及其检测方法

猪链球菌病是由多种致病性链球菌引起的一种细菌性人兽共患传染病,是由D、E及L群链球菌引起猪的多种疾病的总称,其中以2型猪链球菌病的流行最广。已发现的猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2,SS2）的毒力因子包括溶血素（suilysin,SLY）、溶菌酶释放蛋白（muramidase-relased protein,MRP）、细胞外蛋白因子（extracellular factor,EF）、IgG结合蛋白等。 SS2的毒力因子与其致病性密切相关,目前有多种检测SS2毒力因子的方法,常用的有免疫印迹、ELISA和PCR等检测方法。主要就猪链球菌病及其猪链球菌2型毒力因子的检测方法进行概述。     

致病性猪链球菌2型的病原分离鉴定及毒力因子的PCR检测

通过对广西某猪场急性死亡的猪进行病原分离,分离到革兰氏阳性球菌,用链球菌快速鉴定试剂条Rapid ID 32 Strep鉴定为猪链球菌2型;并对分离菌进行猪链球菌2型荚膜多糖抗原（cps2J）及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、细胞外蛋白因子（EF）和溶血素（SLY）的多重PCR检测,同时对cps2J基因进行序列测定,与GenBank发表的猪链球菌2型相比,同源性为98.8%,毒力因子MRP、EF和SLY检测均为阳性,证实广西某猪场急性死亡的猪为高毒力猪链球菌2型感染所致。动物试验中,该菌可引起小白鼠部分死亡,家兔体温最高升至40.3℃,最后败血而死。     

2型猪链球菌毒力因子概述

2型猪链球菌感染已成为影响全世界养猪业的重要问题之一。它主要引起猪脑膜炎、肺炎、心内膜炎、关节炎、败血症等,并可感染人。猪链球菌2型致病机理还不太清楚,至今为止,已知的毒力因子有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、溶血素、粘附素等。文章对猪链球菌2型毒力因子做一系统概述。     

猪链球菌病

链球菌病是由链球菌感染畜禽所引起的一些疾病的总称。引起猪链球菌病的病原主要有C群兽疫链球菌和类马链球菌,D群的猪链球菌以及E、L、S、R、Q等群。猪链球菌毒力因子有溶血酶释放因子、细胞外蛋白因子、溶血素、荚膜多糖以及分子质量为44 ku蛋白I、gG结合蛋白、纤毛黏着素等。目前,有许多关于猪链球菌灭活菌苗研制应用的报道,尽管菌苗株来源和筛选的方法不同,免疫效果亦多有不同。但总体来讲,都具有一定的保护效果。猪链球菌病是多年来一直困扰我国养猪业的主要传染病之一,对病原类型和毒力因子的研究,有助于对猪链球菌病进行特异性预防,减少养猪业损失。     

猪链球菌毒力因子的研究进展

猪链球菌病是一种重要的人畜共患病,给人类和养猪业的健康发展造成极大的危害。猪链球菌的毒力因子包括荚膜多糖(CPS)、溶菌酶释放蛋白(MRP)、胞外因子(EF)、溶血素(SLY)、毒力相关序列(ORF2)、纤连蛋白和血纤蛋白原结合蛋白(FBPS)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、IgG结合蛋白等,它们与猪链球菌的致病性有着密切的关系。笔者通过总结毒力因子对猪链球菌致病机理的影响,以期为猪链球菌病疫苗的研制和治疗提供理论基础。     

猪链球菌2型毒力因子研究进展

猪链球菌2型是一种重要的人畜共患病病原。该菌有很多的毒力因子,在其致病过程中发挥着重要的作用。近年来,人们对猪链球菌2型的毒力因子进行了广泛深入的研究,已知的毒力因子有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、纤连蛋白结合蛋白等,本文对其研究进展作一综述。     

猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用

根据相关文献设计并合成引物，建立了能同时检测猪链球菌2型（cps）及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白（mrp）和细胞外因子（epf）的多重PCR方法。目的片段的大小分别为885bp（mrp）、675bp（cps）和443bp（epf）。对参考菌株、人工攻毒病料和临床收集病料的检测结果显示，该多重PCR特异性强、敏感性高，可直接从临床病料中检测出猪链球菌2型，并能鉴定其毒力因子表型。     

猪链球菌2型毒力因子及疫苗候选蛋白研究进展

猪链球菌2型（ss2）是一种重要的人兽共患病病原菌,可引起人和猪发生严重疾病。SS2的经典毒力因子有荚膜抗原、溶菌酶释放蛋白、溶血素等。随着研究的深入．又发现了一些与SS2致病性相关的基因和毒力相关元件,以及一些蛋白酶类,这些毒力因子多数具有较好的免疫原性,并在链球菌致病和生长过程中发挥十分重要的作用。通过对一些具有免疫原性的SS2毒力因子蛋白片段进行体外重组表达,有望研制出有效预防SS2感染的基因工程疫苗。     

猪链球菌耐药性产生对其毒力的影响

为探讨猪链球菌2型菌株耐药性产生对其毒力的影响,作者采用次抑菌浓度的青霉素和红霉素诱导猪链球菌2型临床分离敏感株HA9801成为青霉素、红霉素耐药株,并对亲本株与诱导耐药株的半数致死量（LD50）、溶血环、毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、胞外蛋白因子（EF）和荚膜多糖（CPS）及对小鼠的组织损伤进行比较。结果显示：次抑菌浓度的红霉素和青霉素可以诱导耐药性的产生,但耐药株与亲本株比较,溶血性、LD50、MRP、CPS、EF及对组织的损伤程度均与亲本株无显著差异（P〈0．05）。结果表明：猪链球菌2型HA9801株在获得耐药性的同时,仍能保持与亲本株相似的毒力,其毒力不会因耐药性的获得而降低。     

猪链球菌2型HA0609的分离及致病性研究

从江苏省某屠宰场猪的扁桃体中分离到1株细菌,通过培养特性、菌体形态、菌落形态、染色特性、生化试验以及荚膜多糖(cps)基因的PCR检测,确定为猪链球菌2型,命名为HA0609。本试验针对猪链球菌7种主要毒力因子——谷氨酸脱氢酶(gdh)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(epf)、溶血素(sly)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)、次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(impdh)及毒力相关序列orf2,进行PCR检测。与已知强毒株比较,该菌株2种主要毒力因子sly和epf均为阴性。动物试验显示HA0609对猪、兔和Balb/c鼠均无致病性。