快速检测动物病毒电镜技术

经多年研究，提出了适用于快速检出和鉴定动物病毒的系列电镜样品制备技术。该技术包括离子交换捕捉、微波幅射、高速离心、免疫金标方法。通过与常规法对比试验证实了离子交换捕捉法具有防腐保鲜作用，其浓缩样品的程度相当于超速离心法，简便易行，适用于远距离运送样品的检测；微波幅射改进法，不但加快了包埋制样速度，而且也提高了包埋质量；高速离心沉淀法快速简便，提高了检出率；免疫金标法不但提高了检出率，而且对于非典型及形态特征性不强的病毒粒子也能作出准确的诊断。可根据不同种类、不同目的的样品采取不同的制样方法，形成了系列化技术。此技术经农牧区、边疆、兽医生药厂、高等院校、科研单位以及海关进出口检疫等送检样品的验证，完全是可行的。应用该技术可快速、准确地诊断动物病毒病。     

应用离子捕捉电镜技术对鸡粪便中新城疫病毒的快速鉴定

应用电镜技术的负染法直接观察粪便中病毒粒子,由于粪便中的各种杂质干扰,造成图象模糊的背景,影响对目的物的观察。去除这些杂质,最常用的方法为差异离心、密度梯度超速离心以及柱层析等。但这些方法操作复杂,需时较长。我们采用了磷酸氢钙(CaHPO_4)离子交换捕捉法纯化粪便中的病毒,方法简便易行、节省时间、纯化高度,适用于电镜快速鉴定,现介绍如下。     

斑点金标免疫渗滤法快速检测牛血吸虫病抗体的效果观察

目的观察斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病抗体的效果。方法使用斑点金标免疫渗滤诊断试剂盒检测粪检血吸虫病牛血清(血纸)146头份,疫区耕牛血清(血纸)562头份,并用间接血凝法(indirect haem aggluti-nation assay,IHA)法作对比。结果146头份粪检阳性血清(血纸)检测为阳性者140头份,阳性检出率95.9%,IHA法检测为阳性者141头份,阳性检出率96.6%。结论斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,但仍有一定漏检,有待于进一步研究提高。     

斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探

目的比较宽点酶标法与癍点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛，耳静脉取血制备血纸，作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与癍点酶标法检测，比较检测结果。结果癍点金标渗滤法检测仅需30min，而斑点酶标法则需160min。结论疵点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病，操作简便易行、快捷，省时、省工，工作效率成倍提高。     

血凝-血凝抑制试验在快速诊断犬细小病毒性肠炎中的应用

对38份疑似细小病毒性肠炎病犬粪便样品以HA-HI方法进行了检测,同时与免疫金标检测试纸和PCR检测方法进行比较。结果显示,HA-HI、免疫金标检测试纸和PCR 3种方法检测的阳性率分别为84.2%(32/38)、92.1%(35/38)和89.4%(34/38)。与PCR方法相比,HA-HI检测方法的敏感性和特异性分别为94.1%和100%,免疫金标检测试纸的敏感性和特异性分别为94.1%和25%。结果表明,HA-HI检测方法的特异性比免疫金标检测试纸好,敏感性略低于PCR,适用于基层单位对犬细小病毒性肠炎的快速诊断。     

用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜的检测区，在其下端附着胶体金标记的猪瘟抗原，组成免疫金标试纸条，根据胶体金免疫层析原理，用该试纸条建立检测猪瘟抗体水平的免疫金标检测法。再用本试纸条检测法与Dot-ELISA及间接血凝法对298份猪、鸡、鸭、鹌鹑、兔、鼠、羊血清进行猪瘟抗体检测，结果符合率达100%。试验结果表明，本法与Dot-ELISA及间接血凝法一样特异、敏感和微量，而且检测时间短、直观，结果容易判定，适用于大面积猪瘟抗体监测普查。     

应用猪瘟抗体免疫金标试纸检测猪瘟抗体的比较试验和改进试验

目前国内对猪瘟抗体水平检测方法有ELISA检测法,DOT—ELISA检测法、单抗ELISA检测法和猪瘟正向间接血凝法。这些方法虽然都具有微量、特异、准确的优点，但需要比较完备的实验仪器和经验丰富的技术人员，一次检测至少需要4h，对于基层兽医站、兽医诊所和养猪场不适用。猪瘟抗体免疫金标试纸的研制成功开创了猪瘟抗体水平检测的新方法，该方法操作简便，不需要任何仪器设备及复杂的样品处理，检测一个样品只需5～10min，操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定，非常适应于基层兽医站和各养猪场使用。基层兽医站和各养猪场（户）可应用猪瘟抗体免疫金标试纸进行猪瘟抗体监测。但金标试纸条是新开发的一种全新猪瘟抗体检测方法，其应用有待于继续研究，针对这种情况，试验对三种检测方法进行了比较研究，并对金标试纸条法进行了改进研究，使金标试纸条法的检测结果与其他方法的符合率达到了无显著差异的水平。     

应用免疫金标检测试纸与其它方法检测猪瘟抗体的比较

作者应用免疫金标检测试纸与其它检测猪瘟抗体的方法进行比较，试验结果表明免疫金标检测试纸法检出率与西班牙海博莱公司生产的ELISA试剂盒十分接近，与dot-ELISA也较为接近，与正向间接血凝试验有差异，且与猪圆环病毒等无交叉反应，4℃下保存期大于15个月。     

运用ELISA检测"瘦肉精"的技术要点

高效液相色谱(HPLC)和气相色谱——质谱(GC-MS)法曾作为检测盐酸克伦特罗的常用方法，但由于检测费用昂贵，步骤繁琐，现已不适用于畜牧兽医部门的检测。竞争酶标免疫法(ELISA)运用抗原抗体反应的原理，能快速地对“瘦肉精”作出定量分析，一般实验只需2～3h，适用于宰前检测，而且实验具有准确性高、重复性强的优点，检测费用也相对低廉。现将该方法介绍如下。     

检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究

从已建立的抗沙门氏茵单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3—47—26单抗．采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3—47—26单抗．改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法，进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度：HRP-3—47—26为1：100；LPS的包被浓度为400ng／mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合，解决了包被过程中的解吸附作用，增强了包被的稳定性，同时也减少了假阳性反应，优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法，利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合，以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的。通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用，通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明，竞争ELISA方法的检出率为18．09％；检出阳性样品36份，国标法检出率为17．14％；两者符合率为97．14％。竞争ELISA敏感性和特异性分别为94．4％和97．7‰从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。