鸡舍环境金黄色葡萄球菌气溶胶产生及其传播的REP-PCR鉴定

采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌,计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度;与此同时,收集鸡的粪便,分离金黄色葡萄球菌。利用金黄色葡萄球菌DNA基因外重复一致回文序列聚合酶链式反应（Repetitive extragenic palindromic elements PCR,REP—PCR）鉴定技术,扩增不同测量点和粪便分离的金黄色葡萄球菌的DNA图谱。通过每个采样点的金黄色葡萄球菌的浓度变化以及金黄色葡萄球菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：4个鸡场舍内空气中金黄色葡萄球菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的金黄色葡萄球菌浓度（P〈0．05或P〈0．01）,但是舍外下风不同距离间的金黄色葡萄球菌浓度差异并不显著（P〉0．05）。REP-PCR结果表明,从鸡的粪便中分离的金黄色葡萄球菌与从舍内空气中分离的部分金黄色葡萄球菌（38．7％）相似性可达100％,从鸡场舍外下风方向分离到的多数金黄色葡萄球菌（55．9％）与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性可达100％。可见,它们分别是由粪便中遗传基因完全相同的菌株繁殖而来。而从鸡舍上风分离到的金黄色葡萄球菌与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性仅在60％～87％。结果显示,鸡粪便中的金黄色葡萄球菌能够形成气溶胶,进入气悬状态,不仅能在舍内传播,而且还能够借助舍内外气体交换,传播到舍外下风一定的距离。从而说明,来自动物体的金黄色葡萄球菌既能污染舍内空气,对本舍鸡群构成传染威胁,又能传播一定的距离,对周边社区环境空气造成生物污染。     

鸡舍内外环境中气载大肠杆菌同源性的分子鉴定

采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在5个鸡场舍内空气、舍外上风向和下风向不同距离收集气载大肠杆菌;并收集鸡的粪便,分离大肠杆菌。利用大肠杆菌基因间重复一致序列为引物的聚合酶链式反应（ERIC-PCR）分型技术,扩增不同测量点收集的大肠杆菌的DNA图谱。通过每个采样点的大肠杆菌的浓度变化以及大肠杆菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：5个鸡舍内空气中大肠杆菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的大肠杆菌浓度（P〈0.05或P〈0.01）,但是舍外不同距离间的大肠杆菌浓度差异并不显著（P〉0.05）。同样,ERIC-PCR结果表明,从鸡的粪便中分离的大肠杆菌与从舍内空气中分离的部分大肠杆菌（34.1%）,以及从鸡场舍外下风方向分离到的多数大肠杆菌（54.5%）与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性可达100%。而从鸡舍上风向分离到的大肠杆菌与从舍内空气或粪便中分离的大肠杆菌相似性为73%-92%。从而说明来自动物体的大肠杆菌既能污染舍内空气,又能对其周围的环境构成污染。本研究揭示了微生物气溶胶的传播规律,具有公共卫生及流行病学意义。     

奶牛舍内外环境中细菌总数测定及金黄色葡萄球菌耐药性研究

本研究选择规模化奶牛场和奶牛小区为试验点,采用微生物检测的常规方法,对奶牛舍内外环境空气中的细菌含量和金黄色葡萄球菌的分布及耐药情况进行了检测分析,结果显示,不同的牧场不同的牛舍环境空气中细菌菌落总数不同,相同的牧场不同的牛舍细菌菌落总数不同,舍内高于舍外,舍外的上风口低于下风口,下风口100m低于50m。牛舍内外细菌菌落总数最高的是奶牛小区B舍的4号采样点(132.15×10~3cfu/m~3),最低的是规模化奶牛场A舍牛舍上风口50m(4.31×10~3cfu/m~3),与国家标准比较,舍内细菌总数严重超标,舍外细菌总数在国家标准范围内。分离鉴定出15株金黄色葡萄球菌,占总数的25%(15/60)。耐药性检测结果显示,这15株金黄色葡萄球菌均对20种抗菌药物有多重耐药,最少为4耐,最多为11耐。最普遍的耐药类型是P-OX-AMP-SXT和P-OX-AMP-FOX-STR。     

ERIC-PCR和PFGE对大肠埃希菌由舍内向舍外传播的鉴定及两种方法的比较

为了深入认识鸡舍环境微生物气溶胶的产生及其向舍外环境的传播,同时比较ERIC-PCR和PFGE对细菌的基因分型结果,本研究以大肠埃希菌为指示菌,采用Andersen-6级空气微生物样品收集器,分别在两个鸡舍的舍内、舍外上风向10 m和50 m和下风向10、50、100、200、400 m的距离处收集空气样品,同时采集鸡的粪便,分离、鉴定大肠埃希菌。采用ERIC-PCR和PFGE两种方法对不同来源的大肠埃希菌分离株进行基因分型,根据每个采样点大肠埃希菌的相似性指数,确认动物舍内微生物气溶胶向舍外环境传播的模式,并比较这两种方法对大肠埃希菌的基因分型结果,分析这两种分子生物学分型方法各自的优缺点和适应性。本试验共采集到28株大肠埃希菌,ERIC-PCR和PFGE两种方法分别进行同源性鉴定显示,从鸡的粪便中分离到的大肠埃希菌与从舍内空气中分离到的部分大肠埃希菌(62.5%)具有相同来源;从鸡场舍外下风方向分离到的多数大肠埃希菌(20%)与舍内空气或粪便中分离的大肠埃希菌来源相同。而从鸡舍上风没有分离到大肠埃希菌,排除了下风向采得的大肠埃希菌来自上风向的可能。而很多从舍内空气和舍外下风方向分离到的大肠埃希菌与粪便中的具有相同来源,说明粪便中的细菌能够形成气溶胶,并且通过舍内外气体交换传播到舍外,依气象条件传播到舍外不同的距离。造成周边环境的生物污染以及病原微生物的扩散。本研究同时对ERIC-PCR和PFGE两种方法所得的分型结果进行了比较。PFGE的分辨率高于ERIC-PCR,而且PFGE的重复性也很高,不同试验室得出的结果可以相互比较,是细菌基因分型的"金标准"。但是PFGE试验费用高,需要时间长,对试剂、仪器和操作都具有很高的要求;ERIC-PCR虽然分辨率不及PFGE,但是ERIC-PCR简单、快速,成本低,对操作和试剂以及仪器要求都不高,所以ERIC-PCR也可以对肠杆菌进行同源性鉴定,应用于流行病学调查和对气源性微生物传播的鉴定。由于ERIC-PCR和PF-GE是根据DNA中不同的遗传特征进行分类的,所以这两种分型技术结合起来分析菌株的遗传进化关系,意义更大。     

猪圈及其周边社区环境大肠埃希菌气溶胶产生及其传播

目的是以大肠埃希菌为指示菌研究猪舍环境中微生物气溶胶产生及向其舍外环境的传播。采用Andersen-6级空气微生物样品收集器和RCS-离心式采样器分别在4个猪场舍内、舍外不同距离收集大肠埃希菌气溶胶,计算每个采样点大肠埃希菌的浓度;同时,采集猪的粪便,分离大肠埃希菌。利用ERIC-PCR技术,扩增其DNA条带,形成聚类图谱。通过每一个采样点大肠埃希菌遗传相似性分析及其浓度变化的比较,确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播模式。结果表明,4个猪场舍内空气中大肠埃希菌的浓度远远高于舍外大肠埃希菌浓度(P0.05)。52.4%粪便大肠埃希菌与舍内空气中的大肠埃希菌相似性可达90%以上;从猪场舍外下风方向分离到的多数大肠埃希菌(55%)与舍内空气或粪便中分离的大肠埃希菌相似性可达90%以上。说明源于猪舍的微生物气溶胶能够传播到舍外环境或居民社区,具有流行病学及公共卫生意义。     

猪源携带质粒介导喹诺酮类耐药基因大肠杆菌气源性传播的研究

为了调查养猪场携带质粒介导喹诺酮类耐药基因大肠杆菌的气源性传播情况,本试验分别在5个猪场舍内及舍外上风向和下风向不同距离收集空气样品,并在舍内随机采集粪便样品,分离大肠杆菌。药敏试验检测其对14种抗生素的耐药性。以质粒介导喹诺酮类耐药基因(qnr、aac(6')-Ib-cr、qepA)为指示基因,利用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链式反应(ERIC-PCR)鉴定技术,分别对5个猪场不同样品中大肠杆菌的遗传相似性进行分析,评估其向舍外空气的传播情况。结果显示,5个猪场中的大肠杆菌对庆大霉素、卡那霉素、四环素、链霉素、萘啶酸、复方新诺明等12种常用抗生素耐药率较高,且呈现多重耐药。ERIC-PCR结果显示,46.34% (19/41)的舍内空气分离株与粪便分离株来源相同,其中73.68% (14/19)的分离株携带的耐药基因也相同;68.42% (26/38)的舍外空气分离株与舍内空气或粪便分离株来源相同,其中65.38% (17/26)的菌株携带相同的耐药基因。结果表明,起源于舍内粪便的携带质粒介导喹诺酮类耐药基因的大肠杆菌能形成气溶胶污染舍内空气,并借助舍内外气体交换,传播到舍外不同距离空气中(≥400 m),对养殖场周围的环境卫生及社区居民的健康形成威胁。     

猪合环境中金黄色葡萄球菌耐药性及其在合内外环境中的传播

为检测各猪场中金黄色葡萄球菌对抗生素的耐药程度,分析耐药性在舍内外的传播,从6个养猪场的猪粪便及猪舍内、外环境空气中分离到149株金黄色葡萄球菌,通过K—B纸片扩散法对其耐药性进行检测。结果发现,从6个猪场的粪便和空气样品中分离到的金黄色葡萄球菌菌株的耐药情况十分严重。此外,分离到的金黄色葡萄球菌菌株还呈现多重耐药,4～6重耐药的菌株居多,分别达16．1％（24／149）、32．9％（49／149）、14．8％（22／149）,9重耐药菌有3株。尤其值得注意的是,从养猪场猪粪便及猪舍内、外环境空气（上风向10、50m,下风向10、50、100、200m）分离的部分菌株其耐药性完全相同。结果证明,猪体产生的具有耐药性的金黄色葡萄球菌能产生气溶胶,并且能够借助舍内外的气体交换传播到舍外环境中去,视气象条件扩散一定的距离,不仅导致传染病的流行,而且对社区的公共卫生形成威胁。     

超长种鸭舍环境对种鸭生产性能的影响研究

试验旨在研究超长种鸭舍不同季节纵向不同距离室内空气环境因子、细菌气溶胶和有害气体浓度的变化及其与生产性能的关系。在离进风口0、30、60、90、120m处检测空气流速、温度、湿度、NH3和CO2、气载总菌浓度、气载金黄色葡萄球菌浓度、气载大肠杆菌浓度和气载沙门氏菌浓度以及种鸭产蛋率、受精率和孵化率。结果表明,离进风口越远气载总菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、氨气和二氧化碳浓度逐渐上升(P0.01);离进风口不同距离对种鸭产蛋率、受精率和孵化率差异不显著(P0.05)。表明目前行业应用纵长120m的种鸭舍可以良好控制其舍内环境并使种鸭发挥良好的生产性能,具有在生产中推广的价值。     

规模化猪场环境中病原菌的调查

为了解规模化猪场环境中的细菌数量与主要病原菌的分布情况。本试验在荣昌地区2个具有代表性的规模化养猪场中采集空气、排污水、粪便和土壤进行细菌总数检测,并对细菌(葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌)进行分离鉴定。结果显示,2个猪场空气、排污水、粪便和土壤样本细菌总数分别为(7.95~50.7)×103 cfu/m3、(0.98~22.10)×105 cfu/mL、(989~12 600)×104 cfu/g、(6.30~37.2)×104 cfu/g;细菌经分离鉴定有79株,其中葡萄球菌30株、链球菌15株、大肠杆菌29株、沙门氏菌5株。结果表明该地区规模化猪场的土壤样本有轻、中度污染,其余样本的细菌总数都符合国家规定;分离的主要病原菌中葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌较多,沙门氏菌较少,其致病性还有待进一步检测。这为当地猪场的卫生消毒和疾病防控提供了重要的参考数据。     

动物园部分动物舍内外环境中常见病原菌的调查

为了解动物园动物及其环境中常见病原菌的分布情况,采用菌落计数、细菌分离培养及动物致病性试验等方法,对南京市红山森林动物园的部分动物生存环境的空气、土壤、水共126份样品进行检测.结果表明,各种动物舍内菌落总数均大于舍外菌落总数.从126份样品中分离到16个菌种127个菌株,其中葡萄球菌有69株,占54.33%(69/127);肠杆菌有51株,占40.16%(51/127);链球菌有7株,占5.51%(7/127).通过动物试验得知,分离得到的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、臭鼻克雷伯氏菌、粘质沙雷氏菌、假结核耶氏菌、福氏志贺氏菌1-5型、聚团肠杆菌和血链球菌等8种致病性较强,松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、解糖葡萄球菌和变异链球菌等4种致病性较弱,耳葡萄球菌、头葡萄球菌、施莱福葡萄球菌和唾液链球菌等无致病性.动物舍内外环境中葡萄球菌是主要污染菌.     

鸡舍通风注意事项

不论是夏季还是冬季，大多数鸡场都面临着通风的问题，如果鸡舍通风不良，将会影响种鸡的生产性能。如果我们仔细观察的话，位于纵向通风鸡舍前半部分的鸡群和后半部分的鸡群生产性能有明显的差异，实际上是由于鸡舍内前后段的温度差异所造成。要保证鸡舍内空气质量良好，鸡舍内昼夜温差和前后温差均匀一致（一般要求温差低于2℃为宜），必须注意以下一些方面。     

鸡舍的通风

封闭式鸡舍的通风系统包括排气扇、运气扇、水帘、布帘及加热降温设施等。一个运用良好的通风系统，可以产生较好的鸡舍环境，获得较佳的经济效益。 1春夏季通风管理 　　在阴雨天气，易造成舍内垫料板结和氨味加重，此时应调低风扇的开启温度，加强通风及垫料的管理，如更换、翻动等。在夏季，鸡舍内应做好密封工作，堵塞布帘、天花板、墙缝等漏洞，防止出现漏风，遇高温高湿天气，鸡群因体热难以散发易应激发病。此时因湿度大，开启水帘降温作用低，甚至对鸡群产生反作用，应多开风扇并努力提高风速。鸡舍过风截面积太大的可考虑用塑料薄…     

Quantitation of house dust mites and house dust mite allergens in the microenvironment of dogs

OBJECTIVE: To quantitate the density of Dermatophagoides farinae and D pteronyssinus and concentrations of house dust mite (HDM) allergens (Der f 1, Der p 1, and Group 2 allergens) in the indoor microenvironment of dogs. SAMPLE POPULATION: 50 homes in Columbus, Ohio. PROCEDURES: In each home, samples of dust were collected from 3 locations in which dogs spent most time. Whenever possible, the species of mites collected was identified. Mite density (mites/g of dust) was assessed, and allergen concentrations were assayed by standardized ELISAs. Relative humidity and temperature in each home were monitored during a 5-day period. Characteristics of homes and sample sources were evaluated. RESULTS: Dust samples from all 50 homes contained > or = 1 HDM allergen; Der f 1 and Der p 1 were detected in 100 and 74% of homes, respectively. Fifteen homes had HDMs; compared with D pteronyssinus, D farinae was found more commonly (14/15 homes) and at a higher density. Basements, homes without central air-conditioning, and dog beds that were > or = 1 year old had high HDM allergen concentrations. Homes with > or = 2 microg of Der f 1 or Group 2 allergens/g of dust or > or = 100 mites/g of dust were significantly more likely to have a maximum relative humidity > or = 75%. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: Results indicated the presence of HDMs and HDM allergens in the specific microenvironment of dogs in homes. Factors associated with high levels of exposure were identified, which may be associated with increased risk for sensitization and development of atopic diseases.     

Quantitation of house dust mites and house dust mite allergens in the microenvironment of dogs

OBJECTIVE: To quantitate the density of Dermatophagoides farinae and D pteronyssinus and concentrations of house dust mite (HDM) allergens (Der f 1, Der p 1, and Group 2 allergens) in the indoor microenvironment of dogs. Sample Population-50 homes in Columbus, Ohio. PROCEDURES: n each home, samples of dust were collected from 3 locations in which dogs spent most time. Whenever possible, the species of mites collected was identified. Mite density (mites/g of dust) was assessed, and allergen concentrations were assayed by standardized ELISAs. Relative humidity and temperature in each home were monitored during a 5-day period. Characteristics of homes and sample sources were evaluated. RESULTS: Dust samples from all 50 homes contained > or = 1 HDM allergen; Der f 1 and Der p 1 were detected in 100 and 74% of homes, respectively. Fifteen homes had HDMs; compared with D pteronyssinus, D farinae was found more commonly (14/15 homes) and at a higher density. Basements, homes without central air-conditioning, and dog beds that were > or = 1 year old had high HDM allergen concentrations. Homes with > or = 2 microg of Der f 1 or Group 2 allergens/g of dust or > or = 100 mites/g of dust were significantly more likely to have a maximum relative humidity > or = 75%. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: Results indicate the presence of HDMs and HDM allergens in the specific microenvironment of dogs in homes. Factors associated with high levels of exposure were identified, which may be associated with increased risk for sensitization and development of atopic diseases.     

The clinical effect of environmental control of house dust mites in 60 house dust mite-sensitive dogs

Abstract   The purpose of this study was to evaluate the effects of benzyl benzoate, an acaricide for the control of house dust mites, in 60 house dust mite-sensitive dogs. All dogs showed positive reactions on intradermal skin testing for house dust mites ( Dermatophagoides farinae , Dermatophagoides pteronyssinus ) alone, or house dust mites with storage mites ( Acarus siro , Tyrophagus putrescentiae , Glycophagus domesticus ). House dust samples from the owners' houses were collected and sent to the clinic, where the authors performed a test (Acarex® test) to semiquantify the amount of guanine, a house dust mite product. Treatment with benzyl benzoate was repeated until the house dust samples were negative for house dust mite guanine. After treatment, 29 out of 60 house dust mite-sensitive dogs (48%) showed no skin lesions or pruritus. Moderate results were achieved in 22 dogs (36%), with reduced pruritus and minimal skin lesions, but still requiring medication. In 13 dogs, this involved regular treatment (3–4 times a year) with antibiotics and antiyeast medication, and in eight dogs, immunotherapy was used. One dog was controlled with essential fatty acids as monotherapy and one dog was controlled with immunotherapy and essential fatty acids. In the remaining nine dogs (15%), the pruritus remained the same, and these dogs were controlled with oral corticosteroids. These results indicate that house dust mite elimination is a useful tool in the management of house dust mite-sensitive dogs.     

新型节能猪舍与传统猪舍环境对断奶仔猪生产性能的比较

本研究旨在通过测定夏季相同时间段内新型节能猪舍与传统猪舍的环境参数,以及对猪生产性能的影响,为改善养殖环境提供参考。结果表明,在12:00时,新型节能猪舍舍内温度显著低于传统猪舍及外部环境温度(P0.05),两个类型猪舍舍内湿度显著高于外部环境湿度(P0.05);在12:00新型节能猪舍CO2浓度显著低于传统猪舍(P0.05);在8:00、12:00和18:00传统猪舍内氨气浓度都显著高于新型节能猪舍(P0.05);在12:00新型节能猪舍内部风速显著高于传统猪舍内部以及外部环境风速(P0.05)。在仔猪生长性能方面,平均日增重、饲料/增重比,节能猪舍比传统猪舍分别提高了6.18%、6.20%(P0.05)。所以,新型节能猪舍在节约能源的基础上能够在一定程度上改善猪舍内的环境。     

鸡场应采取的卫生防疫措施

所谓"卫生防疫",不仅仅是清扫、消毒、预防接种、投药、灭鼠等工作,而是一项系统工作。它包括场址的选择、建筑结构和布局的设计、饲养环境和饲料营养的改善、对病原微生物增加或蔓延的控制、科学的免疫程序等。我们必须周密考虑到场内、场外的各种因素,在一个总体的卫生防疫观念指导下,根据需要制定切实可行的卫生防疫措施。     

鸡舍带鸡消毒的科学方法

带鸡消毒即有鸡在时使用喷雾设备，从鸡舍上方喷洒含有消毒剂的雾水，以达到消毒的目的。带鸡消毒是当前集约化养鸡综合防疫的重要组成部分．特别是对那些隔离条件差及各种疫病经常发生的老鸡场更为有效，是控制鸡舍内环境污染和疫病传播的有效措施之一。     

鸡舍气候控制

家禽可以在相当大的温度、湿度和空气质量范围内生存.但要保证其最好的生产性能,如产蛋或增重速度,则不仅仅是提供适于生存的条件,而是要提供适于生产的理想温度和空气质量.温度是气候的重要因素之一,尤其是对雏鸡.     

鸡群喷雾免疫注意要点

喷雾免疫是利用气压使稀释的疫苗雾化,并均匀地悬浮于空气中,雾化的疫苗随呼吸进入鸡体,使鸡获得免疫力。只有预防呼吸道疾病的疫苗才可以通过喷雾方式进行免疫,如鸡新城疫Ⅱ、Ⅳ系弱毒疫苗等。另外,当鸡发生呼吸道疾病时不能进行喷雾免疫,否则不仅不会产生理想效果,而且还可能加重病情。