奶牛乳汁中细菌的分离鉴定与药物敏感性试验

对南京市某奶牛场19头奶牛抽取乳汁进行细菌分离鉴定。其中,健康奶牛9头,患显性乳房炎奶牛6头,患隐性乳房炎奶牛4头。共分离鉴定出蜡状芽胞杆菌1株、克雷伯菌属细菌1株、肠杆菌属细菌2株、葡萄球菌属细菌12株。对分离出的16株细菌采用药敏纸片法进行常用抗生素的药物敏感性试验。结果表明,分离菌中的蜡状芽孢杆菌对庆大霉素、氯霉素、复方新诺明、呋喃妥因、链霉素和红霉素均较为敏感,克雷伯菌仅对氯霉素较敏感,肠杆菌仅对庆大霉素敏感,葡萄球菌则对青霉素、氯霉素、红霉素较为敏感。     

奶牛乳房炎常见致病菌的分离及药敏试验

对呼和浩特市周边患有奶牛乳房炎的50份奶样进行细菌分离鉴定、致病性评估及药敏试验,初步探讨奶牛乳房炎主要致病菌的耐药特征,比较蒙药与抗生素的抗菌差异。试验结果显示:患有奶牛乳房炎的奶样检出金黄色葡萄球菌18株,占分离菌的37%;链球菌13株,占分离菌的27%;大肠杆菌17株,占分离菌的35%。药敏试验结果表明,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌对青霉素、头孢噻吩、阿莫西林、克林霉素等药物不敏感,耐药率达到88%以上;而链球菌对青霉素及克林霉素、链霉素不敏感,耐药率达到84.6%以上,对环丙沙星、红霉素、四环素等中度敏感或不敏感。2种蒙药复方对奶牛常见致病菌的抑菌圈直径均大于15.56 mm。在奶牛乳房炎常见菌对青霉素类、头孢类、林可酰胺类药物产生一定的耐药性的情况下,2种蒙药复方对奶牛乳房炎常见菌具有良好的抗菌作用,无耐药性。     

8株奶牛乳房炎链球菌的分离鉴定与耐药性分析

对湖南地区某奶牛场隐性乳房炎发病牛病原菌感染和耐药情况进行分析.对该牛场连续5次送检的乳样进行分离纯化培养、16sRNA PCR测序、药敏试验以及耐药基因检测.结果显示:共分离出链球菌8株.基因测序鉴定显示乳房链球菌4株、停乳链球菌2株、A群链球菌2株;药敏试验显示8株链球菌对氨苄西林、头孢拉定、万古霉素高度敏感,对阿奇霉素、四环素中度敏感,对诺氟沙星、庆大霉素、链霉素不敏感;耐药基因检测显示大环内酯类耐药基因ermB、喹诺酮类耐药基因gyrA、ParC检出率最高,与细菌耐药谱相关性不强.     

犬子宫蓄脓需氧菌的分离鉴定及药敏试验

采集患子宫蓄脓病犬子宫的分泌物进行了细菌的分离培养和鉴定及药敏试验。结果分离出链球菌5株;金黄色葡萄球菌6株;化脓性棒状杆菌1株;埃希氏大肠杆菌17株。药敏试验表明,链球菌的敏感药物为卡那霉素等,金黄色葡萄球菌的敏感药物为庆大霉素等,化脓性棒状杆菌的敏感药物为呋喃妥因等,埃希氏大肠杆菌的敏感药物为头孢哌酮等。     

猪胸膜肺炎放线杆菌四川株的分离鉴定及药物敏感性试验

从四川某猪场疑似胸膜肺炎放线杆菌感染的病料中分离到一株革兰氏阴性小球杆菌。经染色镜检、生化试验、PCR检测、血清型检测,致病性试验和药敏试验,鉴定该菌为猪胸膜肺炎放线杆菌1型,且具有较强致病性。药敏试验结果表明,该菌对四环素、甲氧苄啶,以及链霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁胺卡那、新霉素等氨基糖苷类药物高度耐药,对氯霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林和恩诺沙星、诺氟沙星等喹诺酮类受试药物敏感。     

母猪上呼吸道感染金黄色葡萄球菌的分离鉴定

从内蒙古呼和浩特市郊区某猪场饲养的母猪鼻腔分泌物中分离到1株病原细菌。经细菌纯化培养和生化鉴定后,结果表明该细菌为革兰氏阳性。菌体形态为成对、短链状、葡萄串状排列的球菌。进一步进行了PCR扩增产物测序分析发现该菌株与金黄色葡萄球菌的同源性达99%。药敏试验显示,该菌株对拜有利高度敏感,对庆大霉素、头孢噻污、氧氟沙星、卡那霉素、氯霉素中度敏感,对林可霉素、四环素等耐药。结果显示,该分离菌符合金黄色葡萄球菌的生物学及分子学特性。     

长春部分地区奶牛隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究

采用SMT方法，从长春部分地区规模化奶牛场及散养农户各筛选30份患隐性乳房炎牛奶样品，经分离培养及鉴定，17份样品检出金黄色葡萄球菌，其中规模化牛场6份，散养户11份。通过动物致病性试验和药敏试验，结果表明，所分离的金黄色葡萄球菌均具有致病性，所有菌株对链霉素、氨苄青霉素等均具耐药性；多数菌株对头孢噻肟钠和庆大霉素等药物表现为高度敏感；个别菌株对头孢噻肟钠和庆大霉素等中度敏感。     

兔大肠杆菌病原菌的分离鉴定与药敏试验

从重庆市几个种兔场临诊严重腹泻的病兔采集病料，分离出3株菌，经形态学检查及生化鉴定，呈革兰氏阴性，两端钝圆的杆状，常规的生化结果均符合大肠杆菌特征，但3株菌对棉子糖、蕈糖的分解及赖氨酸的利用上存在着差异。用青霉素G等20种药物进行药敏试验，结果表明：对头孢类、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、壮观霉素、痢特灵等敏感；对麦迪霉素、强力霉家等中敏；而对青霉家G、四环素、链霉素等表现为耐药。其中1号菌株对喹诺酮类、强力霉素、卡那霉素、复方新诺明等耐药，2号菌株对喹诺酮类、氯霉素、卡那霉素等敏感，而对复方新诺明、利福平等耐药，3号菌株对卡那霉素、氯霉素、强力霉素等敏感，而对利福平耐药。该试验结果表明：在不同兔场，感染兔的大肠杆菌的株型不一致，并且对药物的敏感性也不一致。     

奶牛临床型乳房炎的细菌分离鉴定与耐药性分析

2011年山西省多个奶牛场发生了较严重的乳房炎,对76份采集的奶样进行细菌分离鉴定并采用药敏纸片法检测主要分离菌的抗生素耐药情况。所分离细菌以革兰氏阳性菌为主,革兰氏阳性球菌和其他革兰氏阳性菌分别占60.67%和23.59%。分离出多种病原菌和机会致病菌,主要的病原菌有链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,检出率为2.24%~11.24%,其中无乳链球菌的检出率最高;机会致病菌有粪链球菌、微球菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌等,检出率为1.12%~11.24%,其中粪链球菌和微球菌的检出率较大,分别为11.24%和6.74%。药敏试验检测结果显示,在所选的15种药物中,主要分离菌均对丁胺卡那霉素、氟哌酸和恩诺沙星3种药物敏感;大肠杆菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素类和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂类药物产生了极强的耐药性,耐药率均为100%;乳房链球菌对该类药物也产生不同程度的耐药,耐药率为20%~100%;对链霉素产生100%耐药的细菌有大肠杆菌、克雷伯菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌等细菌;部分分离菌对卡那霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、红霉素、先锋霉素Ⅴ、复方新诺明等药物产生不同程度耐药。被检奶牛场混合感染较为严重,应进一步加强环境卫生管理,临床治疗应合理有效用药。     

规模化奶牛场奶牛乳房炎病原菌的分离与药敏试验

为了研究奶牛乳房炎乳汁中的主要病原菌及其敏感性药物,试验采用规模化奶牛场16头临床型乳房炎奶牛的乳样进行病原菌的分离、鉴定,选择了31种抗生素和11种单味中药、1个复方中药制剂进行药敏试验。结果表明:从35份乳样中分离到8种细菌43个菌株。鉴定出葡萄球菌23株,其中金黄色葡萄球菌21株,占分离菌的46.51%;溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌各1株,均占分离菌的2.32%;大肠杆菌16株,占分离菌的37.20%;无乳链球菌、停乳链球菌、肺炎克雷伯菌、伤寒沙门杆菌各1株,均占分离菌的2.32%。从乳房炎乳汁中分离的几种主要致病菌对氧氟沙星、氟哌酸、头孢噻吩、先锋必、氟罗沙星、庆大霉素和卡那霉素等药物具有高度敏感性;对连翘、柴胡、红藤和皂角刺等单味药和复方中药制剂敏感性也较高。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

从奶牛分离得到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin—resistant Staphylococcus aureus,MRSA）。按常规方法复苏菌株,用血浆凝固酶试验鉴定SA。用KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法（VITEK32）、聚合酶链反应等鉴定MRSA。常规分离鏊定的葡萄球菌468株,其中凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative Staphylococcus,CNS）361株,检出率为77．149,6,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）105株,检出率为22．44％,MRSA36株检出率为34．29％,2株未定型,占0．42％。而MRSA在乳房炎奶样中检出率高达34．29％,表明新疆兵团部分垦区牛场MRSA已经呈蔓延趋势。     

几种商用益生芽孢杆菌特性的比较研究

为比较几种商用益生芽孢的菌株特性，为芽孢杆菌的选育提供理论基础，本试验收集整理了15种药用（Y1~Y6）和饲用益生芽孢杆菌（S7~S15）产品，对其芽孢杆菌进行分离鉴定，分别从产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶等酶活特性，抗菌活性，耐酸和耐0.3%胆盐稳定性，抗生素敏感性，耗氧及生长速率测试等方面对芽孢杆菌特性进行了比较研究。结果显示，分离的15株芽孢杆菌均能产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶，但不同菌株产酶能力差异较大，S9菌株表现出较高的产蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶活力；所有分离的芽孢杆菌均能对金黄色葡萄球菌及藤黄微球菌产生显著抑制活性，但只有7株芽孢杆菌（Y2、Y6、S7、S9、S10、S11、S12）可对大肠杆菌产生抑制作用，尤其是S9菌株综合抗菌能力最强。S9、Y2和S8的营养体细胞具有较高的耐酸能力，S9、Y2菌株在0.3%胆盐环境中存活率超过90%。15株芽孢杆菌中有3株饲用来源菌株（S10、S12、S13）表现出对红霉素的耐受，S10菌株对四环素耐受。此外，S9菌株具有较快的耗氧速率和生长速率。上述结果表明，S9菌株（解淀粉芽孢杆菌）的益生特性更为优良，本试验结果可为芽孢杆菌益生菌的选育及活性评价提供参考依据。     

Staphylococci isolated from animals and food with phenotypically reduced susceptibility to beta-lactamase-resistant beta-lactam antibiotics

The antibiotic resistance pattern of 1921 Staphylococcus strains isolated from animals and food within the last two years were examined using diffusion tests. Among them there were only 35 strains of S. aureus having an inhibition zone diameter of 15 mm or less, and 4 strains of coagulase-negative staphylococci (CNS) having a zone diameter of 18 mm or less to 1-microg oxacillin disk. These 39 strains were examined also by E-test to oxacillin and for the detection of the mecA gene by PCR in order to determine whether they might be real methicillin-resistant staphylococci. Among the 39 strains there were only two that were susceptible to penicillin by disk diffusion method; however, further examination by the penicillinase test showed that they produced beta-lactamase. While 19 (15 S. aureus, 4 CNS) strains were resistant and 7 strains were intermediate to oxacillin in disk diffusion test, the E-test gave 8 resistant and 5 intermediate results. Six out of the 8 oxacillin-resistant strains examined by disk diffusion and E-test harboured the mecA gene. Thus only 6 out of the examined 1921 strains proved to be mecA positive. These methicillin-resistant, mecA-positive strains (5 of the S. aureus strains and 1 of the S. epidermidis) originated from two dairy herds. The results prove that methicillin-resistant S. aureus (MRSA) strains in animals are really rare in Hungary. Eighteen strains were chosen and screened for minimal inhibitory concentration (MIC) of oxacillin with or without clavulanic acid or sulbactam, and three of them produced methicillinase enzyme.     

沙门氏菌PCR检测方法的建立

根据GenBank沙门氏菌侵袭蛋白A(invA)基因序列设计引物,扩增特异的202 bp核苷酸片段,经过优化PCR扩增条件,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法。特异性试验结果表明,从沙门氏菌参考菌株中均能扩增出特异性的核苷酸片段,大肠杆菌、巴氏杆菌、金黄色葡萄菌、志贺氏菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,采用简便的直接煮沸裂解法制备样品DNA,该方法的敏感性可达2.43×103CFU/mL。     

奶牛乳房炎病原分离鉴定及其治疗方法研究

为进一步制定奶牛乳房炎的防治措施,对天水地区6个不同奶牛场50份乳房炎奶样,进行病原分离、鉴定和药敏试验,共分离得到3类106株细菌,分别为：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、大肠杆菌、沙门菌、沙雷菌和变形杆菌。金黄色葡萄球菌检出率最高,为24.5%。同时比较了不同治疗方法对奶牛乳房炎的治疗效果,认为中西医结合治疗乳房炎,其治愈率高,见效快。     

乳房炎源性金黄色葡萄球菌生物被膜检测及药敏试验

金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎的最主要病原之一,由其引起的奶牛乳房炎发病率高、防治困难,常常会给奶业造成巨大经济损失,对食品安全造成巨大威胁.以新疆阿克苏地区奶牛乳房炎性金黄色葡萄球菌分离株为研究对象,详细观察了菌株在刚果红培养基上的形态,并通过K-B扩散法分析了5株金黄色葡萄球菌乳房炎分离株对19种抗生素的耐药情况.结果表明,5株金黄色葡萄球菌均具有生物被膜形成能力,且对青霉素、链霉素、氨苄西林和四环素等常用抗生素完全耐药,对万古霉素、环丙沙星、诺氟沙星、阿米卡星等抗生素中度敏感,而对恩诺沙星、头孢西丁和头孢噻肟3种抗生素高度敏感.研究结果提示,乳房炎性金黄色葡萄球菌具有较强的耐药性,而这种耐药性可能与其生物被膜形成有关.     

10种中草药对金黄色葡萄球菌的体外抗菌试验

采用试管法和平板法,分别测定了10种中草药对临床分离的一株鸡关节炎源性金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),从而为临床预防和治疗鸡金黄色葡萄球菌性关节炎提供理论依据。结果发现,10种单味中草药对临床分离的球菌均有一定的抗菌活性,尤其是黄连、大青叶、艾叶、连翘4 种中草药的体外抗菌效果更明显。     

贵州地区牛源金黄色葡萄球菌分离株16S rRNA分子鉴定及RAPD分型研究

利用16S rRNA保守序列对引起贵州地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,建立随机多态性扩增体系对金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究。结果表明,69份奶样中共分离出金黄色葡萄球菌37株,DNA随机多态性扩增（random amplified polymorphic DNA,RAPD）结果显示这37株金黄色葡萄球菌扩增产物在1～7条带之间,产物大小为400～4500 bp。菌株可分为7个基因型,其中Ⅰ型7株（18.9%）、Ⅱ型2株（5.4%）、Ⅲ型2株（5.4%）、Ⅳ型1株（2.7%）、Ⅴ型19株（51.4%）、Ⅵ型1株（2.7%）、Ⅶ型5株（13.5%）,Ⅴ型为该地区的流行优势菌群。地理和气候环境对病原菌流行传播的影响是病原菌基因型分布差异的重要原因。     

青海省部分规模化奶牛场乳房炎主要病原菌调查分析

为了初步摸清青海省部分规模化奶牛场奶牛乳房炎的发病情况,本研究采集了青海省5个规模化奶牛场共142份样品,进行细菌的分离鉴定、生化实验及耐药性检测。发现在5个规模化奶牛场中都有不同程度的乳房炎发生。鉴定结果显示,在142份样品中共检出大肠杆菌20株,检出率为14.08%(20/142);金黄色葡萄球菌6株,检出率为4.23%(6/142);链球菌2株,检出率为1.41%(2/142)。耐药性检测结果显示,大肠杆菌对氟苯尼考高度敏感,对头孢他啶、丁胺卡那比较敏感,对青霉素、链霉素等其他药物耐药。金黄色葡萄球菌对万古霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢他啶较敏感,对其他药物耐药。链球菌对阿莫西林、氨苄西林敏感,对其他药物耐药。     

22味祛风湿中药对2个分离菌株的体外抑菌作用

采用平板打孔法检测了22味祛风湿中药对临床分离自关节部位的一株鸡源金黄色葡萄球菌和一株猪源链球菌的抑菌效果。结果表明,猪源链球菌对伸筋草、狗脊、独活的敏感性较高,金黄色葡萄球菌对狗脊、木瓜、秦艽的敏感性较高。而猪源链球菌与金黄色葡萄球菌均对海桐皮、雷公藤、松节、丝瓜络、穿山甲、桑寄生敏感性较差。