一株肾型鸡传染性支气管炎病毒的初步分离鉴定

从哈尔滨市某肉鸡养殖场疑似传染性支气管炎的病死鸡中分离到1株肾型IBV,并对其进行鸡胚矮小化、血凝性、电镜下特征、新城疫干扰试验、致病性等生物学鉴定和N基因的RT-PCR鉴定。结果表明,该病毒分离株在鸡胚上传至第四代(F)4开始出现死亡或侏儒胚;病毒不凝集鸡红细胞;透射电镜下可见多呈球形、直径约80～120nm的病毒粒子,具有冠状病毒的典型形态特点;该病毒可干扰新城疫LaSota株在鸡胚中的增殖;将分离毒第4代尿囊液接种于6日龄雏鸡,7d后开始出现死亡,死亡率高达67%(6/9),病死鸡剖解后可见肾脏明显肿大、苍白,具有传染性支气管炎的典型病变;分离毒第5代尿囊液经N基因特异性RT-PCR获得大小约438bp的目的片断。初步确定所分离病毒为肾型IBV。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因片段的克隆和测序

通过形态学观察、动物回归试验、鸡胚接种试验、病毒干扰试验以及血凝试验分离鉴定了1株肾型鸡传染性支气管炎病毒(IBV)。在透射电子显微镜下，病毒粒子多呈球形，直径为80～120nm，有囊膜，表面有冠状突起。鸡胚连续盲传至第1～2代，开始出现死亡或出现侏儒胚；分离株可显著干扰NDV在鸡胚中的增殖；病毒尿囊液无凝血活性，但经5g／L胰蛋白酶处理后。能够凝集10mL/L的鸡红细胞。利用RT—PCR技术对分离株的N基因进行了扩增，经克隆、序列测定和分析比较，证实分离株为肾型IBV，命名为AH3—04株。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

从我省某鸡场有一定性呼吸道症状及剖检肾肿的病鸡中分离到一株病毒，该病毒接种易感鸡可在２４－４８小时出现呼吸道症状，病鸡多数肾肿大、苍白，可致死部分鸡胚和产生侏儒胚，能在鸡胚中干扰鸡新城疫病毒ＬａｓＯＴａ株的生长；但不能凝集鸡红细胞，电镜观察见直径约１３０ｎｍ的圆形颗粒病毒，初步鉴定分离株是鸡传染性支气管炎病毒。     

乌骨鸡体内鸡肾传染性支气管炎病毒的分离鉴定

从具有鸡肾型传染性支气管炎临床病变特征的乌骨鸡体内分离到一株病毒。该病毒经鸡胚盲传代后，可引起４０％上鸡胚死亡，并出现典型的侏儒胚；人工感染雏鸡表现为肾肿大和尿酸盐沉积；能干扰新城疫ＬａＳｏｔａ株在鸡胚中的繁殖；病毒对氯仿和乙醚敏感，５６℃水浴３０分钟被灭活，而ＰＨ３和ＰＨ１１；不能直接凝集红细胞，但经１．５％胰酶处理后能凝集鸡红细胞（１；５２），这种血凝性可被传染性支气管炎病毒澳大利亚Ｔ株阳性血     

鸡肾型传染性支气管炎病毒JH9801株的分离鉴定

从天津市某肉用鸡场疑似肾型传染性支气管炎（NIB）病鸡中取肾组织，按常规处理后接种9－10日龄鸡胚，连续传代培养至第7代，并对4－7代分离毒株的致病性、血凝性、EID50及对DNV的干扰性和乙醚敏感性进行测试，同时进行了动物回归试验。结果表明，4－7代分离毒株可使85％－90％鸡胚于接种后8－9d死亡，多数死胚和残存活胚胚体出血、蜷缩、矮化等具有IBV感染特征；该分离毒株无直接血凝性，但经10g/L胰酶处理后可集鸡红细胞；分离毒株对乙醚敏感；动物回归试验中有65％的感染鸡在15d内发病或死亡。剖检病死鸡可肾苍白、肿胀，肾小管内充塞大量尿酸盐，外观呈菜花样。经鉴定，分离的病毒株JH9801为鸡肾型传染性支气管炎病毒（NIBV）。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

从我省某鸡场有一过性呼吸道症状及剖检肾肿的病鸡中分离到一株病毒，该病毒接种易感鸡可在２４～４８小时出现呼吸道症状，病鸡多数肾肿大、苍白，可致死部分鸡胚和产生侏儒胚，能在鸡胚中干扰鸡新城疫病毒ＬａＳｏｔａ株的生长，但不能凝集鸡红细胞．电镜观察见直径约１３０ｎｍ的圆形颗粒病毒。初步鉴定分离株是鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。     

鸡传染性支气管炎病毒HZ13株的分离与鉴定

从浙江省某肉鸡养殖场发生疑似肾型传染性支气管炎的发病鸡群中采集病料,进行病毒分离。结果显示,经1%胰酶处理后,该病毒尿囊液可以凝集鸡的红细胞,而未处理的病毒尿囊液则无此凝集活性;该分离株对新城疫病毒(La Sota)株增殖具有明显的抑制作用;对10日龄鸡胚的致病变率达100%;通过鸡胚矮小化试验和动物回归试验,发现该分离株能引起鸡胚和病鸡典型的临床症状和病理变化;RT-PCR可扩增出768 bp片段,测序比对结果证实分离获得了1株肾型鸡传染性支气管炎病毒,命名为HZ13株。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离与鉴定

对陕北(榆林)、关中(宝鸡市、扶风县)、陕南(洋县)等地鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡，进行了病毒分离和鉴定。结果分离到4株IBV(定名为YL-04、BJ-04、FF-04、YX-04)，并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化等生物学特性鉴定。结果发现，分离的4株病毒经1％胰酶处理后的各代病毒尿囊收集液均可凝集鸡红细胞；IBV标准阳性血清可特异性的抑制其凝集性；回归试验可复制出与自然发病相同的病例；病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用。以上研究结果表明，我们分离到的是鸡传染性支气管炎病毒，临床表现为致肾脏病变的组织嗜性，证明以上地区鸡群发病与肾型传染性支气管炎病毒感染有关。     

腺胃病变型IBV豫北株的分离鉴定及灭活苗的研制

1998年 9月豫北地区发生了以腺胃肿大为特征的传染病 ,采集腺胃组织进行病原分离 ,鸡胚传至 8代以上 ,鸡胚开始出现典型侏儒化和规律性死亡 ;鸡胚尿囊液 (YBXD)经磷钨酸负染后电镜下可以看到有囊膜和纤突、圆形、直径 90～ 1 60nm的病毒粒子 ;未经处理的YBXD毒株不能凝集鸡红细胞 ,经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞 ,此凝集能特异地被抗YBXD高免血清所抑制。用所分离毒株制备油佐剂灭活苗预防传染性支气管炎取得良好效果     

肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株的生物学特性研究

通过致病力试验和免疫原性检测对肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株(IBVXJ-2株)进行生物学特性的研究。致病力检测结果证实,IBVXJ-2株可以致SPF鸡胚卷缩、僵化,EID50达10-8.3/0.1 mL;鸡胚肾细胞在接毒后96 h出现皱缩、脱落等明显的细胞病变;对20日龄非免疫鸡攻毒后第2天,试验鸡出现甩鼻、伸颈张口呼吸等症状。将IBVXJ-2株抗原经乳化后接种1月龄非免疫鸡,在接种后22 d和44 d用ELISA和HI检测到了IBV特异性抗体。     

鸡传染性支气管炎病毒BJ0903株的分离鉴定

从北京某养鸡场疑似肾型传染性支气管炎病死鸡的肾脏和肺脏组织中分离到一株病毒,经SPF鸡胚连续传代、血凝试验、鸡胚矮小试验、干扰新城疫病毒复制试验、PCR鉴定和动物回归试验,初步确定该病毒为鸡传染性支气管炎病毒,命名为BJ0903株。     

鸡肾型IBV的分离及其N基因的克隆与测序

通过病毒形态学观察、血凝试验、病毒干扰实验、动物回归实验等分离鉴定了1株鸡肾型传染性支气管炎病毒.利用RT-PCR技术对分离毒株的N基因进行了扩增,经克隆、序列测定和分析,证实分离株为肾型IBV.     

1株肾型鸡传染性支气管炎病毒的鉴定

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有不同致病特性,将IBV XDC-2株接种9日龄SPF鸡胚培养,可引起鸡胚死亡和出现侏儒胚,病毒EID50达5×10-5.33/mL。将IBV XDC-2株接种18日龄SPF鸡,饲养观察14 d,病鸡临床症状表现为:精神沉郁,羽毛凌乱,双翅下垂,轻微腹泻,多数拉白色水样稀粪。病死鸡出现肾肿大、呈花斑状、大量尿酸盐沉积。鸡发病率为100%,死亡率为25%。死亡鸡肺脏、肾组织制作组织切片,发现病理变化明显,主要为:肾小管扩张,上皮细胞呈玻璃样变性,部分管腔内可见坏死脱落之上皮细胞,于肾间质可见大量单核细胞浸润,肾间质有充血、出血现象;肺内动脉、毛细血管充血,淋巴细胞浸润。死亡鸡肺脏、肾组织接种鸡胚分离病毒,RT-PCR检测结果为阳性,表明该分离株为鸡传染性支气管炎病毒,具有很强的嗜肾性。     

鸡腺胃病变型传染性支气管炎病毒感染试验

本文采用腺胃病变型传染性支气管炎患病鸡的腺胃病料和H95株分离株尿囊液毒,对不同品种、不同日龄的易感鸡,采用不同的感染途径进行感染,对其增重、死亡等数据进行统计分析,结果表明:供试不同品种的鸡在不同的感染途径下,采用腺胃病料和鸡胚尿囊液毒分别感染,均可引起不同程度的感染发病,并出现和自然病例相同的症状和典型的病理变化。随日龄的增长,其易感率和死亡率呈下降趋势。从感染死亡鸡中可重新回收到相应的病毒,发病耐过的鸡可产生特异性抗体。     

THE ISOLATION OF LENTOGENIC STRAINS OF NEWCASTLE DISEASE VIRUS IN AUSTRALIA

SUMMARY Twelve isolations of Newcastle disease virus were made from 77 clinical samples from chickens with conjunctivitis, respiratory disease, proventriculitis and bursal atrophy. Nine of the Isolations were made from chickens with conjunctivitis. The viruses were identified as Newcastle disease virus by inhibition of their haemagglutinins with specific antiserum to Newcastle disease virus. The viruses failed to kill chicken embryos after inoculation into the allantoic cavity and they were judged to be lentogenic strains. There was no evidence that the Newcastle disease viruses were responsible for any of the clinical conditions from which they were isolated. The presence of other agents in 10 of the samples was indicated by reduced production of haemagglutinin in allantoic fluids of infected embryos, by deaths of infected embryos, by the production of cytopathic changes in avian cell cultures and by electron microscopy. Three isolations of infectious bronchitis virus, 2 of avian adenovirus and one of avian reovirus were made. Other samples were suspected of containing infectious bronchitis virus and mycoplasmas, but these were not isolated. The Newcastle disease viruses failed to produce plaques in chicken embryo fibroblast cell cultures and they were separated from the contaminating agents by haemagglutination and elution followed by passage at terminal dilution in chick embryos. No Newcastle disease virus was isolated from 60 caecal tonsils and 60 lung samples from 9-week-old broiler chickens. Eight lung samples yielded mycoplasmas that caused haemadsorption in chicken cell cultures. The mycoplasmas were probably Mycoplasma gallisepticum.     

鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定及S1基因遗传演化分析

为调查辽宁地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的流行及遗传演化情况,从辽宁某鸡场疑似鸡传染性支气管炎病料中分离得到1株病毒,经分子生物学检测、鸡胚矮小化试验、新城疫病毒血凝特性干扰试验和动物回归试验,确定该毒株为IBV,并命名为CH/LN/2019。扩增该毒株S1基因并进行序列分析发现,分离株S1基因全长1 620 nt,编码540个氨基酸,S1蛋白裂解位点为HRRRR,属于基因Ⅰ型(QX型)毒株;同源性比对发现,分离株与基因Ⅰ型代表毒株QXIBV株的核苷酸和氨基酸序列同源性最高,分别为95.6%和94.8%;与国内常规型疫苗H52、H120和Ma5毒株的同源性较低,核苷酸和氨基酸序列同源性仅为77.2%~76.9%和75.4%~76.2%。本试验为辽宁地区鸡传染性支气管炎的流行病学调查及免疫防控提供了参考。     

鸡传染性支气管炎活疫苗(D971p株)的研究

从国内发病鸡群中分离到传染性支气管炎（嗜腺胃型）病毒（IBV-D971株），在SPF鸡胚上连续传至120代，培育出IBV-D971p弱毒株。用该毒株制备活疫苗，经安全、效力等试验证明具有较高的免疫保护率和安全性，能有效的预防腺胃型、肾型鸡传染性支气管炎。     

朗德鹅禽流感病毒的分离与鉴定

用禽流感病毒ELISA试剂盒对某朗德鹅养殖场的病鹅气管粘液进行了检测，发现5份粘液样本均呈禽流感阳性；随后取相应气管组织材料接种于9～11日龄鸡胚分离病毒．发现尿囊液能使鸡红细胞发生凝集，用禽流感病毒H5、H7、H9标准阳性血清和新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒抗血清作HI试验，结果禽流感病毒H5亚型抗血清的血凝抑制滴度达到2^7，而禽流感病毒H7、H9亚型及其他病毒抗血清无血凝抑制滴度，说明从朗德鹅分离到的病毒为H5亚型禽流感病毒。