养殖鲤和锦鲤中的鲤浮肿病毒检测与分析

鲤浮肿病毒（carp edema virus,CEV）是一种严重危害养殖鲤和锦鲤的病毒。2014年在北京地区确诊的首例鲤浮肿病意味着该病已进入中国。为调查CEV在养殖鲤、锦鲤中的流行现状,同时筛选适宜的CEV普查方法,探索其发病条件,试验于2016年5月至2016年9月共采集13个样品,采用日本学者建立的Nest-PCR法及英国学者研究的Nest-PCR法、Real-time PCR法进行CEV检测。结果发现,13个样品中共检测到5个CEV阳性,3个为锦鲤样品,2个为普通鲤或杂交鲤样品。Real-time PCR法检出所有阳性,日本的Nest-PCR法检出3个锦鲤阳性和1个普通鲤阳性,英国的Nest-PCR法仅检出3个锦鲤阳性。在阳性样品中,3号和10号样品的养殖鱼并未发病死亡,且3号样品鱼体内的病毒拷贝数高于有临床症状并出现死亡的7号、8号和13号样品。说明目前养殖鲤、锦鲤的CEV阳性率较高,亟需加强该病毒的监测、防控。英国学者建立的Real-time PCR法不会漏检,更适合用于中国CEV的监测普查。没有外界环境条件刺激,养殖鱼即使感染CEV或CEV在其体内增殖,也不一定发生鲤浮肿病。结合鲤浮肿病发病温度范围较宽,提示环境条件刺激才是导致该病发生的关键因素,避免环境刺激是降低该病发生的一个有效措施。     

鲤浮肿病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用

为了给鲤浮肿病(carp edema virus disease,CEVD)的防控提供特异、灵敏、快速的检测方法,针对鲤浮肿病毒(carp edema virus,CEV)的P4a基因序列设计5条特异性引物,建立CEV的环介导等温扩增检测方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。结果表明该方法具有很高的特异性。最低可检出6 000拷贝/μL,检测灵敏度与Real-time PCR方法相当。对30个鲤及锦鲤养殖场样品进行检测并与Real-time PCR方法进行比较,该方法的检测结果符合率达到96.7%以上。本方法的建立及应用为CEVD的防控提供依据。     

锦鲤疱疹病毒病的诊断与防控

正锦鲤疱疹病毒病是危害黑龙江省鲤鱼养殖业发展的疾病之一,目前本病无有效地治疗方法,只能及早诊断,做好疾病的预防和控制工作。本文就锦鲤疱疹病毒病的诊断方法和防控措施进行简要介绍。锦鲤疱疹病毒病(Koi herpes virus disease,KHVD),是严重威胁鲤和锦鲤养殖业安全的一种世界性疾病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须申报的疾病,我国将其列为二类动物疫病。病原为异样疱疹病毒科,鲤病毒属,锦鲤疱疹病     

锦鲤疱疹病毒病的诊断病例

锦鲤疱疹病毒病(koi herpesvirus disease,KHVD)是由锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)感染锦鲤、鲤及其普通变种如框镜鲤等而导致的一种具有高度传染性和致死性的疾病。该病多发生在水温为18℃～28℃的春秋季节,具有高度传     

养殖锦鲤鲤鱼浮肿病的检测与鉴定

北京房山某锦鲤养殖场锦鲤发生大量死亡,患病锦鲤呈烂鳃、肾脏糜烂、身体浮肿;症状类似锦鲤疱疹病毒（koi herpes virus,KHV）感染,但经PCR检测排除了KHV感染。为进一步确定病原,对发病鱼进行了临床症状观察、病毒分离、细菌分离培养、病鱼组织超薄切片电镜观察和PCR扩增等检测。通过病鱼组织超薄切片电镜观察,在肾脏内可见200 nm×400 nm的痘病毒样颗粒。抽提病毒核酸后,用已知的鲤鱼浮肿病毒（carp edema virus,CEV）的保守序列设计2对引物进行PCR扩增,扩增出548和180 bp片段,测序结果和GenBank公布的CEV H504株序列完全一致。根据发病鱼临床症状和实验室检测结果,最终确定该病为CEV引起的鲤鱼浮肿病。这是在中国首次发现的鲤鱼浮肿病。     

鲤春病毒血症病毒(SVCV)人工感染锦鲤攻毒试验

为了研究鲤科鱼类感染鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)后的病理变化,试验通过使用本中心实验室采集和保藏的鲤春病毒血症病毒株(JX14-012)对养殖的锦鲤(Cyprinus carpio koi)进行人工感染试验,然后对对照组和试验组锦鲤进行鲤春病毒血症病毒检测,结果显示,试验组呈阳性,即已感染鲤春病毒血症病毒,对照组呈阴性;对试验组进行生化指标检测发现肝胰脏、肾脏受到严重损害导致功能不全;组织病理切片观察结果发现,脑、鳃、肝胰脏、脾脏、肾脏、肌肉各组织均出现不同程度的变性坏死。表明JX14-012病毒株对锦鲤进行攻毒能够使试验组锦鲤致病,该毒株感染锦鲤后可在其体内复制、增殖,且对锦鲤有一定的致病力。其表现出来的症状对进一步掌握鲤春病毒血症病毒病,及时诊断其危害具有重大的现实意义。     

利用壳聚糖-海藻酸盐胶囊运送表达KHV ORF81蛋白的益生菌疫苗：一种适于鲤鱼口服免疫抗KHV感染的疫苗策略

正锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),又称鲤疱疹病毒3型,是鲤科新发病原。KHV基因组为线性双链DNA,大小为295 kb,编码156个开放阅读框。KHV对普通鲤鱼和锦鲤具有强致病性,引起锦鲤疱疹病(KHVD),该病自20世纪90年代末发现以来,随着国际鱼类贸易,目前已遍布全球,给普通鲤鱼和锦鲤养殖业造成了巨大的经济损失。     

不同试剂盒检测锦鲤疱疹病毒效果比较

为提升实验室对锦鲤疱疹病毒病(koi herpes virus disease,KHVD)病原检测的能力,加强水生动物防疫系统实验室能力建设,本实验室参加了2020年由全国水产技术推广总站组织的锦鲤疱疹病毒病病原检测能力测试。按照中国检验检疫科学研究院下发的《能力测试作业指导书》,结合水产行业标准《鲤疱疹病毒检测方法第1部分:锦鲤疱疹病毒》(SC/T 7212.1-2011)对样品进行鉴定,检测结果为满意。另外,本实验室选用3种商品化的锦鲤疱疹病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒(A、B、C),以本次参测盲样为样品进行了试剂比对,试验结果表明:只有A与作业指导书要求的《SC/T 7212.1-2011》检测结果完全相同,B和C均未检测出阳性盲样。     

锦鲤的人工繁殖技术

(一)生物学特性 1.形态特征:锦鲤是鲤的变种,体型和鲤相似,体表有绚丽的色彩和变幻多姿的花纹。 根据色彩、斑纹等分布情况,锦鲤又分为红白、大正     

鲤浮肿病毒传入风险分析

为评估鲤浮肿病毒(CEV)跨境传播风险,提出科学可行的防控措施,基于病原学和流行病学特征,对CEV进入我国的可能因素进行了风险分析。分析认为,CEV的传入威胁主要来自疫区的活养殖鲤、锦鲤,以及金鱼等其它活敏感鱼类,其次是用于食用的活敏感鱼类,以及冰冻、冰鲜的敏感鱼类。因此,根据进口对象,制定不同的风险管理方案并采取相应的检疫措施,对有效控制CEV传入我国具有重要意义。