四君子汤和补中益气汤对雏鸡免疫新城疫疫苗的影响

阐明四君子汤和补中益气汤对雏鸡免疫新城疫疫苗的影响。试验选取体质量30~35 g的1日龄海兰白雏鸡150只,饲喂全价饲料,7 d后,将其平均随机分为对照组、四君子汤组和补中益气汤组。对各组雏鸡滴鼻、点眼免疫新城疫活疫苗,免疫2 d后,对照组雏鸡每天给予纯化水,四君子汤组雏鸡每天给予四君子汤,补中益气汤组雏鸡每天给予补中益气汤,按照0.4 mL/kg的剂量连续灌服给药3 d。分别于免疫后第0天、第7天、第14天、第21天和第28天,从各试验组中随机采集10只试验鸡的血液,分离血清,用血凝抑制法测定新城疫抗体效价;翼静脉无菌采血,观察淋巴细胞转化情况,计算淋巴细胞转化率;利用碳廓清法,计算巨噬细胞吞噬率;采用全自动血球分析仪检测外周血白细胞的数量。试验结果显示,四君子汤组和补中益气汤组雏鸡的新城疫病毒抗体效价、外周血淋巴细胞转化率、巨噬细胞吞噬率均较对照组显著升高(P<0.05),白细胞总数无明显变化(P>0.05)。试验表明四君子汤和补中益气汤对雏鸡免疫新城疫疫苗均具有免疫增效作用。     

灵芝多糖对鸡新城疫疫苗抗体滴度的影响

90只14日龄公鸡随机均分成3组,用新城疫LaSota弱毒疫苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的灵芝多糖溶液,注射1次/d,连续注射3次,对照组注射生理盐水。各组分别于免疫后7、14、21、28、35、42d翼下静脉采血,分离血清,用微量血凝抑制（HI）测定新城疫抗体效价。结果表明,灵芝多糖高、低剂量组的HI抗体效价明显高于对照组;灵芝多糖的高剂量组抗体效价明显高于低剂量组;表明灵芝多糖对新城疫疫苗的抗体滴度有明显的增强作用,灵芝多糖高剂量组对新城疫疫苗抗体滴度的增强作用更显著。     

日粮添加益生菌对高海拔肉鸡免疫机能的影响

旨在是研究益生菌对高海拔缺氧条件下肉鸡免疫机能的影响。270只健康1日龄AA肉鸡随机分成3组,每组6个重复,每个重复15只。C组为对照组,饲喂基础日粮且不免疫新城疫疫苗;N组饲喂基础日粮且在7日龄和28日龄分别免疫新城疫疫苗;P+N组饲喂添加益生菌菌粉的基础日粮(添加剂量为109CFU/kg)且在7日龄和28日龄分别免疫新城疫疫苗。测定各组免疫器官指数、淋巴细胞转化率和新城疫抗体效价。结果发现,益生菌可以显著增加肉鸡的脾脏指数,但对胸腺和法氏囊指数无显著影响。在新城疫二免7 d后,N组和P+N组肉鸡的T淋巴细胞和B淋巴细胞转化率显著高于C组,且P+N组显著高于N组;在二免14 d后,P+N组肉鸡的T淋巴细胞显著高于C组,但各组之间B淋巴细胞转化率差异不显著。此外,P+N组肉鸡外周血新城疫抗体滴度显著高于N组。试验结果表明,益生菌可以提高高海拔缺氧环境下肉鸡的特异性免疫应答,这种作用可能与益生菌提高免疫器官指数和淋巴细胞转化率有关。     

苜蓿多糖对新城疫弱毒苗免疫效果的影响

为了研究苜蓿多糖对新城疫弱毒苗免疫鸡所产生的免疫调节作用,本研究选择1日龄海兰雏鸡120羽,随机分为4组,每组30羽,7日龄每羽用鸡新城疫活疫苗（La Sota株）免疫,28日龄以相同剂量进行加强免疫。其中3个试验组从7日龄开始分别肌肉注射低、中、高剂量（10、25、50μg/mL）的苜蓿多糖,对照组注射生理盐水,1次/d,连用7 d。于14、21、28、35、42、49、56日龄,通过静脉采血,用MTT法检测外周血淋巴细胞吸光度值（OD值）;同时用微量法检测血清中新城疫病毒血凝抑制（HI）抗体效价。结果显示,苜蓿多糖能够显著提高外周血淋巴细胞OD值,中剂量组（25μg/mL）淋巴细胞OD值最大;苜蓿多糖能够显著提高血清中新城疫病毒HI抗体效价,中剂量组免疫后期抗体存在时间长,抗体高峰期持续时间也长。本试验表明合适剂量苜蓿多糖对新城疫弱毒苗的免疫效果有明显的增强作用。     

归芪饮安全药理学试验研究

23日龄非免疫健康罗曼蛋公鸡640羽随机均分为6个不同剂量用药组、1个疫苗对照和1个空白对照组,另取60羽设1个疫苗对照组和1个空白对照组,30羽/组,除空白对照组外均用新城疫Ⅳ系苗滴鼻、点眼免疫(3羽份/羽),37日龄二免。在免疫的同时,6个用药组分别饮水添加6种浓度的的归芪饮,0.5mL/羽,每天1次,连续3d;给药后每天观察各组鸡群精神、活动、采食、饮水和发病死亡情况;分别于免疫后第7、14、21、28、35和42天翼静脉采血,检测血清NDV-HI抗体效价;于首次免疫后第8周选取0.5g/mL、1g/mL、1.5g/mL、2g/mL4个剂量组(50羽/组),1个疫苗攻毒对照组(50羽/组),1个空白攻毒对照组(50羽/组),1个疫苗对照组(30羽/组)和1个空白对照组(30羽/组)进行攻毒保护试验。同时,进行了体外刺激外周血T淋巴细胞转化增殖试验。结果显示,各组给药后未见任何不良反应,各剂量组在各时间点的抗体效价多明显或显著高于疫苗对照组和空白对照组,1g/mL剂量组鸡只末重显著增加,1g/mL、1.5g/mL剂量组日增重显著高于对照组,料重比显著低于对照组,2g/mL剂量组料重比显著低于对照组;1.5g/mL组的攻毒保护率最高,其次为1g/mL剂量组;体外试验结果也显示,归芪饮在合适的剂量可以刺激外周血T淋巴细胞增殖。表明归芪饮临床应用安全,增强细胞免疫和体液免疫的效果确实,可以将1-2g/mL剂量作为临床试验应用剂量,1g/mL剂量最佳。     

左旋咪唑增强鸡新城疫疫苗免疫效果的观察

本文报道了左旋咪唑对鸡新城疫病疫苗免疫效果的影响。进行了两个实验:每个实验分为10毫克/千克,左旋咪唑给药组和空白对照组。实验一观察对鸡ND疫苗初次免疫的影响:疫苗免疫前用药,5日龄时给药,连用3天,7日龄滴鼻给予ND—Lasota系疫苗;疫苗免疫后用药,7日龄时滴鼻给予ND—Lasota系活疫苗,13日龄时给药,连用3天。实验二观察对鸡ND疫苗二次免疫的影响:7日龄时饮水给予ND+IBD二联活疫苗,40日龄时给药,连用3天,42日龄时肌肉注射ND—Lasota系疫苗。实验一结果显示,免疫前用药,10mg/kg左旋咪唑用药组,首次免疫后7～21d,抗体滴度与未用药对照组比较无明显差别,但28d抗体滴度明显高于未用药对照组;免疫后用药,用药后21d,10mg/kg左旋咪唑用药组,抗体滴度明显高于空白对照组。实验二结果显示10mg/kg左旋咪唑用药组,疫苗二次免疫后7～28d,抗体滴度明显高于未用药对照组。     

玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用研究

研究玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的调节作用。将120只1日龄雏鸡随机分成6组,分别为空白对照组、玉竹多糖对照组、玉竹多糖调节组、板蓝根多糖对照组、板蓝根多糖调节组、免疫抑制对照组,除空白对照组外,其余各组在7日龄时饮水免疫鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗(LaSota株+H120株)。测定免疫后不同阶段雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量和外周淋巴细胞OD570 nm值,以及脾脏指数和法氏囊指数。结果显示,环磷酰胺造模后,可见环磷酰胺抑制对照组抗体滴度持续处于较低的状态,血清IgA含量较低,外周淋巴细胞增殖受抑制,免疫器官指数较低;在免疫后14 d、21 d、28 d和35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清抗体滴度显著高于免疫抑制对照组(P<0.05);在免疫后21d、35 d,玉竹多糖调节组和板蓝根多糖调节组血清IgA含量、外周淋巴细胞OD570 nm值和免疫器官指数显著高于免疫抑制对照组(P<0.05)。本试验结果表明,玉竹多糖和板蓝根多糖对环磷酰胺造模形成免疫抑制雏鸡免疫系统具有调节功能,可解除免疫抑制,使免疫系统恢复至正常水平,能够提高雏鸡新城疫疫苗抗体滴度、血清IgA含量,增强外周淋巴细胞增殖。     

合成鱼腥草素对鸡新城疫疫苗免疫增强效果的研究

为探讨合成鱼腥草素对鸡新城疫疫苗免疫增强效果的影响,本试验将160只7日龄非免疫健康雏鸡随机分为空白对照组和低、中、高3个剂量组,各组用NDV La Sota株弱毒活疫苗进行初免,2周后加强免疫1次,并在第2次免疫的当天灌胃给药,3个剂量组分别以50、100和150 mg/kg的剂量灌服合成鱼腥草素,连续给药7 d,空白对照组灌服等量的生理盐水.各组分别于初免后的14、21、28和35 d随机抽取8只鸡,测定其免疫器官指数,血清中IFN-γ、IL-2和IL-4的含量及新城疫抗体的效价.结果表明,不同剂量的合成鱼腥草素均能不同程度地提高肉鸡免疫器官指数、细胞因子和抗体滴度的水平,其中以中剂量(100 mg/kg)效果最明显.     

左旋咪唑增强鸡新城疫疫苗免疫效果的观察

本文报道了左旋咪唑对鸡新城疫病疫苗免疫效果的影响。进行了两个实验：每个实验分为10毫克／千克，左旋咪唑给药组和空白对照组。实验一观察对鸡ND疫苗初次免疫的影响：疫苗免疫前用药，5日龄时给药，连用3天，7日龄滴鼻给予ND－Lasota系疫苗；疫苗免疫后用药，7日龄时滴鼻给予ND－Lasota系活疫苗，13日龄时给药，连用3天。实验二观察对鸡ND疫苗二次免疫的影响：7日龄时饮水给予ND＋IBD联活疫苗，40日龄时给药，连用3天，42日龄时肌肉注射ND－Lasota系疫苗。实验一结果显示，免疫前用药，10mg/kg左旋咪唑用药组，首次免疫后7－21d，抗体滴度与未用药对照组比较无明显差别，但28d抗体滴度明显高于未用药对照组；免疫后用药，用药后21d,10mg/kg左旋咪唑用药组，抗体滴度明显高于空白对照组。实验二结果显示10mg/kg左旋咪唑用药组，疫苗二次免疫后7－28d，抗体滴度明显高于未用药对照组。     

芪蓝四君子汤对雏鸡部分免疫指标的影响

选用370只1日龄雏鸡,随机分成5组,Ⅰ～Ⅲ组在新城疫(ND)La Sota系冻干苗免疫时分别按低(0.125 g/mL)、中(0.25 g/mL)、高(0.5 g/mL)的3个浓度灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续10 d。Ⅳ组和Ⅴ组分别为免疫对照组和非免疫对照组。各组分别于20、30、40、50、60日龄采血测定新城疫血凝抑制(HI)抗体水平,随后剖杀计算胸腺、脾脏、法氏囊的器官指数;并于21、35、49日龄时用碳粒廓清试验测定外周血巨噬细胞的吞噬功能。试验结果表明,高剂量芪蓝四君子汤能显著提高新城疫HI抗体效价(P0.01)和免疫器官指数(P0.05),促进外周血巨噬细胞的吞噬功能(P0.01)。中,低剂量的芪蓝四君子汤对抗体、免疫器官指数、外周血巨噬细胞的吞噬功能均有不同程度的增强作用。芪蓝四君子汤能有效提高雏鸡的特异性免疫以及非特异性免疫功能。     

新城疫病毒HI抗体效价与流行株感染排毒之间的相关性

为了分析免疫鸡群中新城疫强毒感染流行的原因,明确抗体效价与流行株感染排毒率之间的关系,本研究以LaSota为抗原制备新城疫灭活疫苗,并以0.02mL和0.4mL的量分别免疫3周龄的SPF鸡10只。免疫后7、14、21d分别测定免疫鸡血清中的抗体HI效价。免疫后21d以基因Ⅶd亚型新城疫流行株JS5/05进行攻毒,攻毒后每天观察试验鸡的临床症状,并于攻毒后3、5、7d采集试验鸡的喉气管与泄殖腔棉拭样品进行病毒分离,结果显示,免疫3周后0.02mL和0.4mL疫苗免疫组鸡的血清HI抗体平均效价分别为5.4log2和8.2log2;0.02mL免疫组在攻毒后的排毒率达到100%,且排毒时间较长,而0.4mL免疫组在攻毒后的排毒率明显降低,且排毒时间较短。上述结果表明新城疫抗体效价与流行株感染排毒率之间存在明显的负相关。     

Co-administration of toll-like receptor (TLR)-3 and 4 ligands augments immune response to Newcastle disease virus (NDV) vaccine in chicken

Toll-like receptors (TLRs) are pattern recognition receptors (PRRs) that mediate first line of host defence to pathogens. TLR agonists are potent immunostimulatory agents that help to prime a robust adaptive immune response. In the present study, adjuvant potential of Poly I:C and lipopolysaccharide (LPS) were evaluated with live Newcastle disease virus (NDV) vaccine. Cornish chickens were immunized with live Newcastle disease virus (NDV) vaccine (R2B-mesogenic strain) adjuvanted either with Poly I:C (TLR3 agonist) or LPS-TLR4 agonist and both. Humoral Immune response to ND vaccine was evaluated through haemagglutination inhibition (HI) test and ELISA, while the cellular immune response (CMI) was quantified by lymphocyte transformation test (LTT). IL-1β cytokine mRNA levels in spleen tissue were also quantified by real time PCR. The results suggest that TLR3 and TLR4 agonists are an efficient immune-stimulators separately, as LPS co-administered group has shown significantly higher serum titre on second week post-immunization and Poly I:C group on third week post-immunization both by HI and ELISA (P?<?0.01), however, the combined administration of both LPS and Poly I:C did not give any complementary effect on serum titre. There were no significant differences in stimulation indices (SI) and IL-1β cytokine levels between groups at different intervals post-immunization. Hence, TLR agonists LPS followed by Poly I:C could be used as adjuvant to enhance the immune response to NDV vaccine in chicken.

     

禽流感-新城疫重组二联活疫苗口服免疫试验

选择未接种禽流感-新城疫疫苗的黄腹角雉所产蛋,经孵化后,于10日龄选黄腹角雉15只,随机分成A、B、C 3组,每组5只,以点眼接种量的10、15、20羽份,直接口腔滴入禽流感-新城疫重组二联活疫苗rl-H5株口服免疫。分别于接种前1 d和3次接种后15 d经翅静脉采血,通过测定其禽流感和新城疫血凝抑制试验(HI)抗体滴度。结果表明,第2次接种20羽份剂量抗体效价达到峰值,新城疫和禽流感HI抗体均值分别为7.5 log2和5.5 log2。     

不同剂型新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平对比试验

不同剂型的佐剂对疫苗的免疫效果有较大的影响,本试验旨在对比不同剂型佐剂的新城疫-禽流感(简称"新-流")二联灭活疫苗的免疫效果,从而为生产上选择最佳剂型佐剂应用于新城疫-禽流流感二联灭活疫苗提供依据。分别将油包水型、水包油型、水包油包水型佐剂与新城疫及禽流感灭活抗原乳化成不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗,将这三种不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗分别免疫一组7日龄SPF鸡。每羽颈部皮下注射0.2 m L,同时设一组未免7日龄SPF鸡作为对照组,各免疫组与对照组SPF鸡于免疫组免后6、10、15、21、28、35 d进行采血,检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:免疫油包水型疫苗组SPF鸡免疫后新城疫与禽流感抗体上升最快,在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最高,其次是免疫水包油包水型的,而免疫水包油型疫苗组的SPF鸡新城疫与禽流感抗体上升最慢,而且在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最低。此外,从各免疫组可以看出,在免后6 d时新城疫抗体已开始产生,在1log2以下,而禽流感抗体仍未产生。可见免疫新-流二联苗后,新城疫抗体比禽流感抗体更早产生,油包水型新-流二联苗的免后抗体高于水包油包水及水包油型,而且能持续刺激机体产生高水平抗体,更具优势。     

分子筛凝胶浓缩新城疫病毒疫苗的研究

本文采用新型分子筛凝胶作为浓缩剂对新城疫病毒感染鸡胚的尿囊毒进行了浓缩实验,结果表明,该浓缩胶可使新城疫病毒浓缩９６．２４倍,病毒的损失量为８．６５％,用浓缩胶浓缩新城疫病毒后并制成灭活苗,浓缩苗进行鸡的免疫实验,以研究浓缩疫苗的免疫效果。浓缩新城疫抗原后制备的灭活苗在免疫后８天抗体水平迅速上升,ＨＩ为５．６,并持续上升,均高于对照组,说明浓缩疫苗可以使鸡产生较高的抗体水平。     

黄芪灵芝口服液对免疫新城疫疫苗雏鸡免疫功能的影响

为研究黄芪灵芝口服液对雏鸡免疫功能的影响,本试验将180只14日龄雏鸡随机分成9组并通过点眼滴鼻免疫新城疫(ND)疫苗。1~3组分别是黄芪灵芝口服液高、中和低剂量组;4~6组分别是环磷酰胺+黄芪灵芝口服液高、中和低剂量组;7~9组分别为环磷酰胺组、阳性对照组及生理盐水对照组。分别于免疫后的第7、14、21、28天测定脾脏淋巴细胞增殖和抗体滴度的动态变化。结果表明,黄芪灵芝口服液能提高雏鸡脾脏淋巴细胞的增殖能力和促进新城疫病毒(NDV)抗体的产生,能一定程度上缓解环磷酰胺的免疫抑制,其中黄芪灵芝口服液低剂量组对脾脏淋巴细胞增殖效果最好,黄芪灵芝口服液可作为一种新型的免疫增强剂。     

Effects of the Oral Liquid of Astragalus and Lucidum Polysaccharides on Immunological Function in Chickens Immuned with ND Vaccine

In order to study the effects of the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides on immunological function in chickens,one hundred and eighty 14-day-old chickens were randomly divided into 9 groups and inoculated with the Newcastle disease vaccine.1 to 3 experimental groups were respectively the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides high,middle and low dose groups;4 to 6 experimental groups were respectively the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides with cyclophosphamide high,middle and low dose groups;7 to 9 experimental groups were respectively cyclophosphamide group,positive control group and saline control group.The proliferation index of spleen lymphocyte and Newcastle disease virus antibody level by HI method were determined on days 7,14,21 and 28 after vaccination.The results showed that the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides could apparently promote lymphocyte proliferation and enhance antibody titer,and alleviate the immunosupperession of the chickens in some degree,the low dose of the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides promoted lymphocyte proliferation best,implying that the oral liquid of Astragalus and Lucidum polysaccharides would be expected as a candidate of new-type immunopotentiator.     

Study on Synergistic Effect of VA5 Immunopotentiator on Pigeon NDV Inactivated Vaccine

This study was designed to evaluate the synergistic effect of VA5 immunopotentiator on pigeon ND4416 inactivated vaccine.160 healthy pigeons were randomly divided into four groups,including ND4416 strain inactivated vaccine group (NDV group),ND4416 strain inactivated vaccine and immunopotentiator (VA5) mixed group (NDV+VA5 group),La Sota inactivated vaccine group (La Sota group) and normal saline as the control group (C group),to assess their vaccine efficacy against virulent pigeon NDV by serological analysis and animal testing.Pigeons sera were collected at different time points after immunization and measured the HI antibody titer of each group.The results showed that VA5 immunopotentiator significantly improved the serum antibody level of pigeons immunized with pigeon Newcastle disease inactivated vaccine (P<0.05).In addition,comparative test of spleen lymphocyte transformation was conducted at various time points after immunization.The results indicated that VA5 effectively stimulated the lymphocyte transformation of immune pigeon.Pigeons in each groups were challenged with ND4416 strain at the 30th,90th and 180th d after immunization.The results presented that the NDV+VA5 group had 100% protection rate and higher than La Sota group.The duration of immunization test showed that the antibody titer of NDV+VA5 group reached peak 11.20log₂ at the 21st d,remained 7.50log₂ at 180th d,and the protection rate remained 100% at 180th d.It indicated that VA5 immunopotentiator sustained the immune duration of pigeon NDV vaccine up to 180 d.Moreover,the in vitro detoxification test results suggested that VA5 immunopotentiator reduced the in vitro detoxification cycle of pigeons after challenge.Overall,this study suggested VA5 immunopotentiator could significantly improve the immune efficacy of pigeon Newcastle disease inactivated vaccine,which provided a basis for further enhancing the efficacy of Newcastle disease vaccine,as well increased experimental data for the application of immunopotentiators.     

VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒灭活疫苗的增效作用研究

试验旨在探究VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒（NDV）灭活疫苗（ND4416株）的免疫增效作用。选取160只健康鸽随机分为4组：ND4416株灭活疫苗组（NDV组）、ND4416株灭活疫苗与免疫增强剂（VA5）混合组（NDV+VA5组）、La Sota灭活疫苗组（La Sota组）及生理盐水空白对照组（C组）,进行免疫效力及免疫持续期试验。采用血凝抑制试验检测各组鸽免疫后不同时间点的血清抗体效价,结果显示,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗血清抗体水平（P<0.05）。脾脏淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能够有效刺激免疫鸽的淋巴细胞转化。在免疫后第30、90、180天,各组鸽子采用ND4416株进行攻毒试验,结果显示,NDV+VA5组在3个时间点的攻毒保护率均为100%,均高于La Sota组。免疫持续期试验结果显示,NDV+VA5组血清抗体水平在免疫后第21天达峰值11.20log₂,第180天仍能达到7.50log₂,攻毒保护率达100%,表明VA5免疫增强剂可延长鸽新城疫疫苗的免疫效力持续期至180 d。攻毒后体外排毒检测结果表明,VA5免疫增强剂能够缩短攻毒后鸽的体外排毒周期,减少体外排毒。综上,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗的免疫效果,为研制效果更好的鸽NDV疫苗提供了基础依据,同时也为免疫增强剂的应用增加了试验数据。