动物园鹦鹉馆内空气细菌总数及分离菌致病力测定

本试验采用了自然沉降法采集各种鹦鹉笼环境空气中细菌样本,进行了细菌总数测定,并对分离出的病原菌进行动物致病性试验。结果显示:营养琼脂培养基上的环境空气中细菌菌落总数最多,其中绯红鹦鹉笼内19.24×104cfu/m3,亚马逊鹦鹉笼内最少,为5.59×104cfu/m3。鹦鹉馆笼外空气中平均细菌菌落总数为13.19×104cfu/m3,笼内平均细菌菌落总数为10.12×104cfu/m3。在本次试验共采取样本110份,检测到22种细菌98株,其中葡萄球菌58株,肠杆菌36株,链球菌4株。动物致病试验结果显示,金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌、大肠杆菌、发光致病杆菌和聚团多源肠杆菌6种致病力较强;耳葡萄球菌、头葡萄球菌、人葡萄球菌、表皮葡萄球菌、咳痰塔特姆氏菌5种致病力弱;而模仿葡萄球菌、霍米奇肠杆菌、美国爱文氏菌、嗜盐四联球菌等11种无致病性。     

兔舍内气载需氧菌和气载葡萄球菌的检测

本研究采用Andersen-6级空气微生物样品收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同种兔舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析.结果表明,两个兔舍内需氧菌含量分别为1.73～85.8×103CFU/m3、2.71～9.66×103CFU/m3空气,葡萄球菌含量分别为0.94～7.84×103CFU/m3、1.02～6.54×103CFU/m3空气.兔舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、科氏葡萄球菌、头状葡萄球菌和马胃葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的含量占葡萄球菌总数的26.3%～29.6%,其次是腐生葡萄球菌和表皮葡萄球菌.另外,还对需氧菌和金黄色葡萄球菌在Andersen-6级收集器不同层级上的分布情况进行了统计分析,结果表明,约有56.4%的需氧菌和49%金黄色葡萄球菌分布在3～6层上,空气动力学直径(Aerodynamic diameter,Dae)在6～0.2μm,它们能进入人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对饲养员和动物的呼吸道构成严重危害.     

兔舍内气载需氧菌和气载葡萄球菌的检测

本研究采用A ndersen-6级空气微生物样品收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同种兔舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析。结果表明,两个兔舍内需氧菌含量分别为1.73~85.8×103CFU/m3、2.71~9.66×103CFU/m3空气,葡萄球菌含量分别为0.94~7.84×103CFU/m3、1.02~6.54×103CFU/m3空气。兔舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、科氏葡萄球菌、头状葡萄球菌和马胃葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的含量占葡萄球菌总数的26.3%~29.6%,其次是腐生葡萄球菌和表皮葡萄球菌。另外,还对需氧菌和金黄色葡萄球菌在A ndersen-6级收集器不同层级上的分布情况进行了统计分析,结果表明,约有56.4%的需氧菌和49%金黄色葡萄球菌分布在3~6层上,空气动力学直径(A erody-nam ic d iam eter,D ae)在6~0.2μm,它们能进入人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对饲养员和动物的呼吸道构成严重危害。     

乳牛舍内环境空气中细菌数量与乳房炎的关系研究

采用自然沉降法对规模化泌乳奶牛舍内消毒前后空气细菌含量进行检测,同时对泌乳牛群进行乳房炎调查,对乳房炎奶牛乳汁中病原菌分离鉴定。结果表明,不同的牛舍不同的培养基其结果均不相同,NA培养基菌落数最高达77.8×103cfu/m3,S.S培养基在多个分布点无细菌生长。牛舍经过消毒后环境空气中的细菌总数大幅度减少,运动场空气细菌总数明显低于舍内。奶牛乳房炎的发生率与牛舍环境空气中的细菌总数呈正相关,细菌总数多的牛舍奶牛乳房炎的发病率也高。环境空气中和乳房炎奶牛乳汁中同时分离到金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌等。     

禽舍微生物气溶胶含量及其空气动力学研究

采用Andersen-微生物空气样品收集器，选用普通营养琼脂和金黄色葡萄球菌选择培养基对一个种鸡场舍环境空气进行监测。其需氧菌含量从3.12×104到9.01×105，金黄色葡萄球菌含量波动于2.0×103～3.3×104CFU/m3之间。根据微生物气溶胶颗粒在Andersen-收集器不同层级上的分离情况得知，22.5%的需氧菌、1.8%的金黄色葡萄球菌气溶胶颗粒的空气动力学直径(d50)为Φ0.65～2.1μm，它们能进入人、畜的肺泡，对人畜呼吸道构成感染威胁。     

奶牛舍内外环境中细菌总数测定及金黄色葡萄球菌耐药性研究

本研究选择规模化奶牛场和奶牛小区为试验点,采用微生物检测的常规方法,对奶牛舍内外环境空气中的细菌含量和金黄色葡萄球菌的分布及耐药情况进行了检测分析,结果显示,不同的牧场不同的牛舍环境空气中细菌菌落总数不同,相同的牧场不同的牛舍细菌菌落总数不同,舍内高于舍外,舍外的上风口低于下风口,下风口100m低于50m。牛舍内外细菌菌落总数最高的是奶牛小区B舍的4号采样点(132.15×10~3cfu/m~3),最低的是规模化奶牛场A舍牛舍上风口50m(4.31×10~3cfu/m~3),与国家标准比较,舍内细菌总数严重超标,舍外细菌总数在国家标准范围内。分离鉴定出15株金黄色葡萄球菌,占总数的25%(15/60)。耐药性检测结果显示,这15株金黄色葡萄球菌均对20种抗菌药物有多重耐药,最少为4耐,最多为11耐。最普遍的耐药类型是P-OX-AMP-SXT和P-OX-AMP-FOX-STR。     

兔舍环境气载内毒素检测

兔舍内气载内毒素的含量介于65￣217 EU/m 3;需氧革兰氏阴性活菌的含量介于0.7￣1.6×103 C FU/m 3空气之间,占优势的是肠杆菌,其中大肠杆菌最为常见;需氧菌含量介于3.3￣7.8×103 C FU/m 3。气载内毒素与需氧革兰氏阴性活菌含量和需氧菌总数在数值上存在弱的正相关(r=0.23;r=0.20)。结果表明:不能通过测定气载革兰氏阴性细菌或细菌总数来估计气载内毒素的含量。气载内毒素含量与粪便和饲料中内毒素浓度之间呈正相关(r=0.71;r=0.58),证明饲料和粪便是气载内毒素的重要来源。     

兔舍环境空气微生物气溶胶的检测

采用国际标准ANDERSEN6级微生物空气样品收集器,选用血葡萄糖琼脂培养基,分别对两个不同种兔舍环境空气微生物进行监测。其舍内需氧菌含量分别为4.19×103～5.55×104CFU/m3、6.35×103CFU/m3空气,需氧革兰氏阴性细菌含量分别为3.04×102～3.27×103CFU/m3、4.68×102CFU/m3空气。根据微生物气溶胶颗粒在ANDERSEN-收集器不同层级上的分布情况得知,约有50%的需氧细菌气溶胶颗粒和革兰氏阴性细菌气溶胶颗粒分布在3、4层上,空气动力学直径(Dae50)在2～6μm之间,它们能进入人、畜的气管、支气管,甚至细支气管,对饲养员和动物的呼吸道构成严重威胁。     

不同乳牛舍环境空气中细菌含量的比较研究

采用自然沉降法对南京3个规模化奶牛场和3个奶牛小区泌乳奶牛舍内细菌含量进行监测和比较。结果显示,牛舍环境空气中的细菌菌落总数,不同的牛舍不同采样点、不同的培养基其结果均不相同。运动场细菌菌落总数少于牛舍内。NA培养基菌落数最高达33.81×103 CFU/m3,MAC和S.S培养基在多个分布点无细菌生长。6个牧场空气中的细菌菌落总数为F场＞E场＞B场＞C场＞A场＞D场。牛舍的空气细菌总数与牛舍规模化程度无关,而与各牧场牛舍卫生管理有很大的相关性。从270个样本中共分离到338株细菌,A、B牧场主要是葡萄球菌,分别占分离菌的75.34%（55/73）和60.61%（40/66）;C、E、F牧场主要是肠杆菌,分别占分离菌的51.22%（42/82）、62.16%（23/37）、61.11%（33/54）;D牧场葡萄球菌占分离菌的46.15%（12/26）,肠杆菌和链球菌分别占26.92%（7/26）。结果表明,规模化奶牛场和奶牛小区空气细菌总数无明显差异。     

养殖环境真菌气溶胶的研究

用Andersen-6级采样器、虎红氯霉素琼脂(RBC)在养殖环境采样,培养后分级计数,按形态学鉴定,并进行空气动力学分析.结果共捕获活性真菌粒子7.77×103CFU.鸡、猪、兔、牛舍气溶胶真菌浓度分别为2.39×103CFU/m3、2.51×103CFU/m3、1.76×103CFU/m3和1.66×103CFU/m3;平均CMD值分别为3.02μm、3.52 μm、3.29 μm和3.39 μm;GSD分别为2.03、1.71、1.70和1.69.养殖环境中每分钟可沉积到支气管、直接侵入肺泡和极细粒子的活性真菌量分别是居室的3.4倍、1.4倍和1.9倍;鉴定出21个属,各采样点优势菌群主要有曲霉属、青霉属、链格孢属、枝孢霉属、镰刀菌属等.表明所测养殖环境活性真菌粒子浓度高于原野或居室环境,且其浓度可以通过采用开放式或半开放式结构、合理降低饲养密度及调整舍内温湿度等人为措施来控制;真菌粒子比细菌更易进入呼吸道深部;养殖环境优势真菌属与真菌感染及毒素中毒密切相关.     

奶牛舍内外环境夏季气载微生物的检测

旨在比较夏季不同建筑类型奶牛舍内外气载细菌和真菌数量的变化。选择3种建筑类型的奶牛舍,采用定点采样和平板计数法对舍内、运动场、净道以及场外上风向和下风向处的气载微生物进行同期检测。结果表明:不同建筑类型和不同时间段牛舍内微生物数量均表现出显著性差异(P0.05),气载细菌和真菌总数范围分别为1.7×103~6.9×103和175~483 cfu/m3,通风好的牛舍细菌和真菌总数均较低,且一天中中午的细菌和真菌总数最高。此外,舍内细菌数量显著高于净道和运动场(P0.05),但舍内真菌总数与净道之间未表现出显著性差异(P0.05),仅显著高于运动场;多数牛场外下风向5~50 m处的细菌和真菌总数显著高于上风向处(P0.05)。本研究结果可为奶牛舍环境改善和疾病预防提供参考。     

养殖环境真菌气溶胶的研究

用Andersen-6级采样器、虎红氯霉素琼脂(RBC)在养殖环境采样,培养后分级计数,按形态学鉴定,并进行空气动力学分析。结果共捕获活性真菌粒子7．77×103CFU。鸡、猪、兔、牛舍气溶胶真菌浓度分别为2．39×103CFU/m3、2．51×103CFU/m3、1．76×103CFU/m3和 1．66×103CFU/m3;平均CMD值分别为3．02 μm、3．52 μm、3．29 μm和3．39 μm;GSD分别为2．03、1．71、1．70和1．69。养殖环境中每分钟可沉积到支气管、直接侵入肺泡和极细粒子的活性真菌量分别是居室的3．4倍、1．4倍和1．9倍;鉴定出21个属,各采样点优势菌群主要有曲霉属、青霉属、链格孢属、枝孢霉属、镰刀菌属等。表明所测养殖环境活性真菌粒子浓度高于原野或居室环境,且其浓度可以通过采用开放式或半开放式结构、合理降低饲养密度及调整舍内温湿度等人为措施来控制;真菌粒子比细菌更易进入呼吸道深部;养殖环境优势真菌属与真菌感染及毒素中毒密切相关。     

卧龙自然保护区大熊猫粪样菌群的分离鉴定与分布研究

对四川卧龙中国保护大熊猫研究中心 6只不同年龄的健康大熊猫全年粪样内好氧和兼性厌氧菌的数量、种类和分布情况进行了初步研究。研究发现 ,全年粪样所含细菌数在 10 3cfu/g～ 10 7cfu/g之间 ,其中 ,亚成年大熊猫全年粪样含菌量为 7 3× 10 5cfu/g ,成年大熊猫为 7 8× 10 5cfu/g ,老年大熊猫为 2 0× 10 6 cfu/g。粪样中共分离鉴定出 16种细菌 ,优势菌群分别为肠球菌(4 0 2 % ) ,肠杆菌 (36 7% )和乳杆菌 (17 8% )。这些菌株的分离鉴定为研究大熊猫肠道内正常菌群的种类和分布 ,为今后进一步研究野外自然生态环境下大熊猫肠道正常菌群的种类和分布 ,为预防大熊猫感染细菌性疾病和亚成年大熊猫食性转换期食物结构的合理搭配提供了参考资料。     

兔舍内气载革兰氏阴性菌群的检测

采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器,以5%公绵羊血琼脂和麦康凯3号培养基为采样介质,分别对3个不同兔场环境中气载需氧菌含量、气载革兰氏阴性菌含量与菌群组成进行了检测。结果表明:兔舍内气载需氧菌含量在0.78×103~20.10×103 CFU/m3之间,气载需氧革兰氏阴性菌含量在0.39×102~10.30×102 CFU/m3之间,占需氧菌总数的2.12%~10.20%;革兰氏阴性菌群包括肠杆菌、奈瑟氏菌、巴氏杆菌和假单胞菌,肠杆菌科细菌中大肠埃希氏菌占多数。在其中2个兔舍中还检测到可导致兔发生肺炎的肺炎克雷伯氏菌。     

豆渣固态发酵生产纳豆芽孢杆菌的研究

通过单因素和正交试验,得出用豆渣培养纳豆芽孢杆菌的最佳工艺条件为m豆渣:m麸皮:v磷酸盐缓冲液为5:1:10、添加3%的豆饼粉、15%(v/m)接菌量,培养时间48h,最终含菌量为1.5×1011cfu/g。通过单因素和正交试验,得出用豆渣培养纳豆芽孢杆菌的最佳工艺条件为m豆渣:m麸皮:v磷酸盐缓冲液为5:1:10、添加3%的豆饼粉、15%(v/m)接菌量,培养时间48h,最终含菌量为1.5×1011cfu/g。     

种鸭场鸭舍内外环境中细菌的种类及分布研究

为了解种鸭场鸭舍内外环境中细菌的种类、数量及分布情况,采用菌落计数、细菌分离培养、革兰氏染色、生化试验及16S rRNA鉴定等方法对山东省潍坊地区某种鸭场鸭舍内外的空气、墙壁、地面、水槽和料槽样品进行了检测。结果表明:鸭舍内空气中细菌菌落总数为3 921 cfu/m~3,明显高于舍外空气中细菌总数;不同物体表面细菌的数量不同,墙壁细菌总数为123 cfu/cm~2,地面细菌总数为4 342 cfu/cm~2,水槽细菌总数为2 579 cfu/cm~2,料槽细菌总数为1 542 cfu/cm~2。从117份样品中分离到106株细菌,其中芽胞杆菌37株,占检出菌的34.9%(37/106);葡萄球菌30株,占检出菌的28.3%(30/106);肠杆菌30株,占检出菌的28.3%(30/106);链球菌9株,占检出菌的8.5%(9/106),且空气中和地面表面的细菌种类最多。说明种鸭场鸭舍内外环境中葡萄球菌、芽胞杆菌和肠杆菌是主要污染菌。     

规模化奶牛场空气细菌数量与乳房炎发生的相关性调查

本试验采用自然沉降法对规模化奶牛场泌乳奶牛舍进行空气细菌含量检测,同时对空气中细菌和乳房炎奶牛乳汁中细菌进行分离鉴定。结果表明,不同牧场不同培养基的细菌菌落总数均不同,在NA培养基上,细菌菌落总数B场10.97×10~3 cfu/m~3C场10.17×10~3 efu/m~3A场8.78×10~3 cfu/m~3;运动场细菌菌落总数少于牛舍内。3个牧场奶牛乳房炎的发病率分别是B场32.14%C场的30.91%A场29.25%,空气中的细菌菌落总数与奶牛乳房炎的发病率呈正相关。从3个牧场牛舍空气样本中分离到221个菌株,有金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙门菌、停乳链球菌、无乳链球菌和肺炎链球菌等主要病原菌。A、B牧场主要是葡萄球菌,占分离菌的75.34%和60.61%。其中金黄色葡萄球菌分别占45.21%和22.73%。C牧场牛舍空气中主要是肠杆菌,占分离菌的51.23%,其中大肠埃希菌占31.70%。3个牧场乳房炎奶牛乳汁中所检测到的主要病原菌分别是:A、B牧场主要是葡萄球菌,占分离菌的48%和57.96%,其中金黄色葡萄球菌分别占24%和23.8%;C牧场主要是肠杆菌,占分离菌的50%,其中大肠埃希菌占18.8%,沙门菌占9.09%。奶牛场空气中主要病原菌的种类和乳房炎奶牛乳汁中主要病原菌的种类基本一致。     

AOS-80空气净化机对冬季鸡舍空气的净化作用

在有窗或无窗密闭式鸡舍中,舍内产生的有毒有害气体、微生物和粉尘对鸡的健康与生产性能有很大的影响。本研究选用AOS-80空气净化机,测定其对冬季蛋鸡舍空气的净化效果。选取尺寸、样式和饲养密度等完全相同的2栋蛋鸡舍做对比试验,2栋鸡舍通风采用自动控制装置。在试验鸡舍的屋架上按米字形均匀安装6台净化机,测定2栋鸡舍舍内有毒有害气体和空气细菌总数的浓度。结果表明:2栋鸡舍在适当通风条件下(使舍内温度维持在(15±0.1)℃,对照鸡舍和试验鸡舍的空气细菌总数平均浓度分别为33.3cfu/L和10.6cfu/L(P<0.01),净化机使之降低68.2%;NH3的平均浓度分别为1.71mg/m3和1.22mg/m(3P<0.01),净化机使之降低28.6%;H2S的平均浓度分别为0.670mg/m3和0.643mg/m3(P<0.05),净化机使之降低4.03%;蛋鸡平均周死亡率分别为0.997%和0.607%(P<0.01),净化机使之降低39.0%。本研究结果表明,舍内安装空气净化机能显著降低鸡舍空气细菌总数和有毒有害气体浓度,降低蛋鸡死亡率。     

水貂养殖舍中细菌气溶胶与气载内毒素检测

摘 要：[目的]本研究旨在了解水貂舍细菌气溶胶和气载内毒素对环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害。[方法]采用Andersen-6空气收集器和AGI-30液体冲击式采样器对市郊不同饲养条件的2个水貂场6栋养殖舍内的细菌气溶胶和气载内毒素进行定期检测。[结果]两个场舍内气载需氧革兰氏阴性菌浓度分别介于4.17×101~2.43×103 CFU/m3之间和4.27×101~5.1×103 CFU/m3之间,以大肠杆菌科为主,假单胞菌属和巴斯德氏菌属次之;从革兰氏阴性菌在Andersen-6空气收集器层级上的分布规律来看,主要分布在Ⅲ级（36.9%）,气溶胶颗粒直径在2~6 mm之间。两个场舍内的气载内毒素浓度分别介于2.92×102~2.15×103 EU/m3之间和2.67×101~2.56×102 EU/m3之间。[结论]水貂舍内气溶胶颗粒可以进入到动物和人的支气管、细支气管,甚至肺泡,在一定程度上增加了水貂和饲养人员呼吸道疾病发生的可能性;气载内毒素的浓度部分超出了对人体无影响的推荐标准（1.0×102 EU/m3）,可对水貂饲养人员的健康造成一定的危害;舍内气载革兰氏阴性菌与内毒素之间没有必然的相关性,表明空气中气载内毒素含量不能用空气中气载革兰氏阴性菌的含量来评估。     

嗜水气单胞菌GYK1株培养基的优化

在营养肉汤培养基的基础上,经过一系列嗜水气单胞菌GYK1株培养试验,结果证明,成本价格较低的蔗糖、酵母膏可以代替葡萄糖、牛肉膏,从而降低培养基原料成本;添加少量的K2HPO4和微量元素溶液(Mg2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+)可明显提高培养液的活菌数;通过正交试验得到低成本、高得率的适合嗜水气单胞菌GYK1菌株生长的培养基配方,该培养基组成(g/L):蛋白胨10.0、酵母膏10.0、蔗糖15.0、K2HPO42.28;NaCl 5.0微量元素(硫酸镁0.1,硫酸亚铁0.04,硫酸锌0.00375,二氯化锰0.0021)。24 h摇瓶培养,菌液中的最高活菌数可达316×108cfu/mL,比营养肉汤培养基活菌数(151×108cfu/mL)提高100%以上。