犬血清中MMP2和MMP9与肿瘤疾病的相关性研究

为了在兽医临床上找到用于犬肿瘤疾病的血清生物标志物，试验采集113份犬血清样本，分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和明胶酶谱分析方法检测血清样本中MMP2与MMP9蛋白的质量浓度和活性，并对犬血清中MMP2和MMP9蛋白的质量浓度与活性进行了相关性分析。结果表明：肿瘤犬血清中MMP2和MMP9蛋白的质量浓度(中位数分别为126.76μg/mL和230.31μg/mL)均显著高于非肿瘤犬血清中MMP2和MMP9的蛋白质量浓度(中位数分别为58.90μg/mL和55.14μg/mL,P<0.05);≥7岁的非肿瘤犬血清中MMP2蛋白质量浓度极显著高于<7岁的非肿瘤犬(P<0.01),MMP9蛋白质量浓度略高于<7岁的非肿瘤犬(P>0.05);≥7岁的肿瘤犬血清中MMP2和MMP9蛋白质量浓度均略高于<7岁的肿瘤犬(P>0.05);<7岁和≥7岁的肿瘤犬血清中MMP2蛋白质量浓度均显著高于同年龄段的非肿瘤犬(P<0.05);不同肿瘤类型的肿瘤犬血清中MMP2蛋白质量浓度差异不显著(P>0.05);乳腺肿瘤、肉瘤和其他肿瘤中MM...     

不同体型比格犬血清肿瘤标志物含量调查

本试验拟对大、中、小体型3个品系的健康成年比格犬血清肿瘤标志物AFP、CEA、CA125、CA153、CA199进行检测,用犬肿瘤标志物AFP、CEA、CA125、CA153、CA199 ELISA试剂盒,对97只健康成年大体型比格犬、228只中体型比格犬、63只小体型比格犬的血清进行相关肿瘤标志物浓度测定,为比格犬肿瘤模型筛选提供参考。试验结果表明,小体型比格犬血清中AFP、CA125、CA153、CEA的浓度明显低于其他两个品系犬(P<0.05);而CA199的浓度明显高于中体型比格犬(P<0.05)。大体型比格犬血清中AFP、CEA、CA125、CA153的浓度最高,小体型比格犬血清中CA199最高,推测认为大体型比格犬患消化系统和生殖系统肿瘤的风险较高,小体型比格犬患腺癌的风险较高。     

肿瘤标志物在犬肿瘤性疾病诊断中的应用

为探讨血清中肿瘤性标志物(TM)在犬肿瘤疾病的早期诊断、多种恶性肿瘤的诊断及肿瘤筛查中的应用价值,本试验选择7只健康犬作为对照组,以临床接诊的32例肿瘤患犬为试验组,分别测定犬血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原25(CA125)、糖类抗原15-3(CA15-3)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)等5项TM的含量。试验结果显示,与对照组相比,良性肿瘤组血清中AFP、CA125和CA15-3的含量显著升高(P0.05),恶性肿瘤组血清中AFP和CA125的含量显著升高(P0.05),TSGF极显著升高(P0.01);与良性肿瘤组相比,恶性肿瘤组血清中TSGF极显著升高(0.01);恶性肿瘤组的5项TM的阳性检出率均高于良性肿瘤组;TM联合检测其阳性检出率均高于单一TM检测阳性检出率;与乳腺及生殖器官肿瘤组相比,皮下及软组织肿瘤组血清中CA125和CA15-3含量显著降低(P0.05)。试验表明,血清TM具有一定的特异性,在不同组织肿瘤表达中存在较大的差异,可作为犬肿瘤性疾病的早期诊断依据,且TM联合检测可显著提高恶性肿瘤的检出率。     

犬癌胚抗原免疫梳检测方法的建立

为建立一种犬癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)免疫梳检测方法，将包被鼠抗CEA捕获抗体固定于硝酸纤维膜(nitrocellulose filter membrane, NC膜)上，筛选出合适的包被液、包被温度、封闭液、封闭条件、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记抗体反应条件等，制备免疫梳。对建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验，并采用化学发光法和所建立的免疫梳检测方法对10份患恶性乳腺肿瘤病犬只的血清样品进行检测。优化条件：CEA捕获抗体质量浓度为100μg/mL,HRP标记抗体按1∶400(体积比)稀释，包被液为碳酸盐缓冲液(pH 9.6),包被温度为37℃,封闭液为3%BSA-PBS[含3%(质量分数)牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)],封闭条件为4℃过夜，HRP标记抗体反应条件为37℃孵育1 h。建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法中CEA最低检出限为5 ng/mL,同时肿瘤标志物角蛋白8抗原、甲胎蛋白和前列腺抗原的检测结果均为阴性，重复性和稳定性良好；临床血清样品的...     

CA15-3在犬乳腺肿瘤中的表达及其临床意义

通过ELISA和IHC分别检测了乳腺肿瘤患犬血清和组织中CA15-3的浓度和表达情况,发现CA15-3在乳腺肿瘤患犬血清浓度(15. 70 U/m L±12. 93 U/m L)明显高于健康犬血液中CA15-3浓度(5. 72 U/m L±4. 82 U/m L)。IHC结果发现,CA15-3 MOD在乳腺肿瘤组织中(0. 21±0. 08)明显高于健康乳腺组织(0. 10±0. 04),且在不同的组织分级中差异显著(P 0. 05)。结论:血清中CA15-3浓度可作为犬乳腺肿瘤早期诊断和预后评估的生物标志物之一,组织中CA15-3蛋白可作为评估犬乳腺肿瘤恶性程度的生物标志物之一。     

犬乳腺肿瘤病理组织学观察及ER PR C-erbB-2的表达分析

通过对20例犬乳腺肿瘤进行病理组织学观察、免疫组织化学染色,探讨犬乳腺肿瘤病理形态学特点,ER、PR、Cerb B-2表达与乳腺肿瘤的关系。结果显示,20例犬乳腺肿瘤,70%为恶性肿瘤,其中良性肿瘤有导管内乳头状瘤和纤维性瘤,恶性肿瘤有浸润性导管癌,单纯癌,小叶原位癌,癌肉瘤,腺癌,恶性肿瘤发病率高于良性肿瘤。免疫组化结果显示-ER、PR在良性肿瘤的表达率均高于恶性肿瘤,P<0.05,差异显著;C-erb B-2在恶性肿瘤中的表达高于良性肿瘤,P<0.05,差异显著。提示,犬乳腺肿瘤恶性肿瘤发病率较高,ER、PR、C-erb B-2对犬乳腺肿瘤发病中的诊断、治疗及预后有重要意义。     

一例犬传染性性肿瘤的诊治

随着我国养犬业和小动物临床事业的快速发展,犬传染性性肿瘤的发病率逐年上升,使犬的外观及繁殖力受到严重影响。犬传染性性病阴道肿瘤可分为良性肿瘤和恶性肿瘤,其中良性肿瘤占70%-80%。笔者就临床上一例松狮犬阴道肿块病例进行诊断与治疗,经过流行病学调查、肿块性状观察和触诊检查,初步诊断为犬传染性性病阴道肿瘤。经过手术和术后护理,病犬得到痊愈,取得了很好的效果,为临床犬传染性性肿瘤的诊治提供参考。     

一例犬传染性性肿瘤的诊治

随着我国养犬业和小动物临床事业的快速发展,犬传染性性肿瘤的发病率逐年上升,使犬的外观及繁殖力受到严重影响。犬传染性性病阴道肿瘤可分为良性肿瘤和恶性肿瘤,其中良性肿瘤占70%~80%。笔者就临床上一例松狮犬阴道肿块病例进行诊断与治疗,经过流行病学调查、肿块性状观察和触诊检查,初步诊断为犬传染性性病阴道肿瘤。经过手术和术后护理,病犬得到痊愈,取得了很好的效果,为临床犬传染性性肿瘤的诊治提供参考。     

国产狂犬病疫苗免疫抗体监测试验报告

试验选用6月龄以上,5岁以内的成年健康犬65条,分别接种2种国产减毒狂犬疫苗,并对一免后6个月和8个月的犬及22条第2次加免犬进行了血清抗体监测。免疫接种1次后6个月,28.57％的犬血清抗体高于0.5IU/mL(狂犬病血清抗体在0.5IU/mL以上,犬达到保护水平);8个月时,有5.71％的犬血清抗体在0.5IU/mL以上;半年后进行第2次免疫,81.82％的犬血清抗体高于0.5IU/mL。     

雄性滩羊血清T3含量的季节性变化

雄性滩羊血清三碘甲腺原氨酸(T3)含量的放射免疫测定表明,其年平均含量为1.108 ng/mL±0.188ng/mL.冬季平均含量最高(1.455 ng/mL±0.159ng/mL),极显著地高于其他三个季节(P＜0.01).春季平均含量为1.218ng/mL±0.090 ng/mL,也极显著地高于夏、秋两季(P＜0.01).秋季平均含量为0.922ng/mL±0.089mg/mL,也显著高于夏季的平均含量(0.835ng/mL±0.303ng/mL,P＜0.05).     

HPLC法测定犬血浆中伊曲康唑浓度

应用高效液相色谱法（HPLC）测定犬血浆中伊曲康唑的浓度。选用6条健康犬,以4mg／kg体重背部皮下注射给药,采用HPLC测定犬血浆中伊曲康唑浓度（ITZ）,应用3p97软件处理数据,计算药代动力学参数。结果表明血浆ITZ线性范围为10～1000ng／mL,伊曲康唑血浆添加浓度10、100、500ng／mL的平均回收率分别为86．9％、88．4％、89．2％,RSD分别为2．8％,1．2％,0．2％。说明HPLC法简便,准确可靠,适用于伊曲康唑在犬体药动学中血药浓度测定。     

双抗体夹心ABC-ELISA检测弓形虫循环抗原方法的建立

为检测弓形虫循环抗原,以实现弓形虫急性感染的早期诊断,本研究建立了基于ABC(avidin biotin-peroxidase complex)放大系统的双抗体夹心ELISA方法。通过制备弓形虫排泄分泌抗原(ESA)并免疫动物,经3种抗原的筛选以获得抗循环抗原(CAg)的单抗,以方阵滴定法确定最佳多抗包被浓度和单抗工作浓度,利用夹心法和ABC放大系统建立检测弓形虫循环抗原的夹心ABC-ELISA方法,用该方法对人工感染犬血清和其他阳性血清样本进行检测以确定该方法的检出时间和准确性,并应用于临床样品的检测。结果:获得了3株针对不同抗原表位的单克隆抗体,并对CAg有较高特异性。双抗体夹心ABC-ELISA反应条件:兔多抗包被浓度为3.7μg/mL,生物素标记3A5、3E5和10F5-3单抗在混合工作液中的浓度分别为0.1、0.13和0.12μg/mL。该ELISA方法对ESA最低检测限为11.9 ng/mL,并与隐孢子虫早期感染牛血清、血吸虫尾蚴早期感染牛血清、艾美耳球虫早期感染鸡血清、犬瘟热急性感染早期血清、犬细小病毒急性感染血清无交叉反应。用该ELISA方法检测人工感染的犬,于感染后2 d血清即显示阳性,该方法能明显区分标准阳性血清和阴性血清。用该方法检测68份猪临床血样(其中包括2份标准阳性血清),检测结果与Nest-PCR结果一致。表明该双抗体夹心ABC-ELISA方法特异性强、敏感性高,可用于弓形虫急性感染的早期或活动期的诊断。     

Ki-67在犬乳腺肿瘤的表达与分析

本试验通过免疫组化的方法,检测了从中国农业大学教学动物医院收集到的6个正常乳腺组织和135例乳腺肿瘤组织(良性30例,恶性105例)Ki-67的表达率。结果犬乳腺肿瘤组织中的Ki-67蛋白表达率明显高于正常乳腺组织(P0.05);犬恶性肿瘤组织中的Ki-67蛋白表达率明显高于良性肿瘤(P0.05)。表明Ki-67在恶性肿瘤里高表达,可以作为犬乳腺肿瘤疾病诊断的指标。     

一例犬子宫肌瘤的手术治疗

犬子宫肌瘤属子宫肿瘤的一种。犬子宫肿瘤较为少见,其中以平滑肌瘤最为常见[1]。肿瘤又分为良性肿瘤与恶性肿瘤。良性肿瘤由于生长缓慢,又属膨胀式生长,与周围健康组织一般有明显分节,且无转移和较少发生并发症,故当其体积很小,且位于机体生命活动的非重要部位时,一般影响不大。总的来说,体积较大的良性肿瘤对机体的影响主要是局部压迫、阻塞以及功能障碍等。部分良性肿瘤可偶发并发     

河西绒山羊血清中甲状腺素浓度季节性变化规律及其与山羊绒生长的相关性分析

试验选用20只(公母各半)6月龄、平均体重15.21 kg±0.61 kg的河西白绒山羊,用放射免疫法测定血清中甲状腺素浓度.结果表明:被测公、母羊甲状腺素浓度分别为5.52 ng/mL±1.83 ng/mL、5.42 ng/mL±2.09 ng/mL,性别间无显著差异(P>0.05).绒山羊血清T3浓度呈现季节性变化,从2月开始上升,至9月达到最高峰值(7.52 ng/mL±1.24 ng/mL),而后又逐渐下降,至翌年2月达最低值3.77 ng/mL±0.85 ng/mL;而后开始回升,完成一个分泌周期.冬季最低,春秋季次之,夏季最高;且夏季极显著高于冬季( P<0.01).绒毛生长的高峰期8、9、10、11、12月5个月的T3浓度平均值与其绒毛增长量呈正相关(r=0.955,P=0.011).说明甲状腺素是参与山羊绒萌发和生长的重要激素之一.     

一例犬卵巢支持细胞瘤的诊疗

正在犬的生殖系统疾病中常见的肿瘤主要有三种,即支持细胞瘤、精母细胞瘤和间质细胞瘤。其中支持细胞瘤是犬常见的睾丸肿瘤之一,主要患病犬为公犬,未见母犬发病的报道。笔者在2015年3月份遇到一例母犬卵巢支持细胞瘤,该病例十分罕见,特报道如下。1发病情况病犬为昆明犬,雌性,3.8岁,体重25 kg,发育正常,精神状态良好,每年定期进行疫苗免疫接种和药     

44例宠物犬肿瘤病理诊断及分析

收集北京地区2015~2016年宠物医院的部分宠物犬肿瘤病例56例,采用组织病理学方法进行病理诊断,并对患病动物的品种、发生部位、年龄和性别与肿瘤发生关系进行了统计分析。结果发现,56个病例中有44例确诊为肿瘤,其中良性肿瘤21例,包括肛周腺瘤、皮脂腺瘤和肥大细胞瘤等;恶性肿瘤23例,包括乳腺癌、鳞状上皮细胞癌和肛周腺癌等。本次采集的病例中,大型犬与小型犬发病率持平,皮肤、肛周与乳腺部位肿瘤的发生率较高;7岁以后是肿瘤高发期;雌性犬皮肤和乳腺肿瘤的患病率高于雄性,雄性宠物犬肛周腺肿瘤的发生率高于雌性,肿瘤总患病率雄性与雌性持平。本研究为今后宠物犬肿瘤的流行病学及诊断提供了新的参考资料。     

NLRP3炎症小体及其下游炎症因子在犬乳腺肿瘤组织中的表达

本研究旨在明确NLRP3炎症小体及下游炎症因子在犬乳腺肿瘤中的表达及临床意义。采用RT-qPCR方法检测45例犬乳腺肿瘤组织(15例良性肿瘤和30例恶性肿瘤)以及16例肿瘤旁正常乳腺组织中的NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18 mRNA的表达水平,并分析NLRP3与肿瘤临床病理学特征的关系(肿瘤大小、肿瘤类型、组织恶性分级和预后)。结果显示,与肿瘤旁正常乳腺组相比,NLRP3炎症小体及下游炎症因子mRNA在肿瘤组织中均存在不同程度的表达上调,且恶性肿瘤的NLRP3(P=0.006)和Caspase-1(P=0.048)相对表达量均显著高于良性肿瘤。在恶性肿瘤中,NLRP3炎症小体的转录表达在肿瘤类型(P=0.029)和恶性等级(P=0.049)中存在显著差异。本研究提示,NLRP3炎症小体的表达上调可能导致犬乳腺组织发生肿瘤化和肿瘤恶变,是疾病诊断和恶性特征评估的重要指标之一。     

犬口服国产米尔贝肟片的相对生物利用度研究

本研究旨在建立犬血浆中米尔贝肟的LC-MS/MS检测方法,评价国产米尔贝肟片在犬体内的相对生物利用度。对12条比格犬采用开放、随机、交叉、单剂量给药,口服国产米尔贝肟片、进口米尔贝肟片。LC-MS/MS测定犬血浆中米尔贝肟的浓度,3p97药动学计算软件处理血浆药物-时间数据。该方法低浓度(5ng/mL)回收率高于85%,最低定量限为5ng/mL;健康犬口服进口和国产米尔贝肟片的药物动力学最佳数学模型均为一级吸收一室模型。本研究中建立的HPLC-MS/MS检测方法可用于口服给药后犬血浆中米尔贝肟含量的测定;口服国产米尔贝肟片与进口米尔贝肟片的相对生物利用度为99.07%。     

应用微量补体结合试验诊断犬传染性肝炎的研究

以犬传染性肝炎病毒(ICHV)及其免疫血清分别作为已知抗原和抗体,应用微量补体结合试验(MCFT),检测急性期病犬血清、腹水或肝浸液中的ICHV抗原,或恢复期犬血清中的ICHV抗体,以确定诊断。结果,在ICHV抗原检测中,被检的35例实验感染犬和2例自然病犬的20份血清、18份腹水和36份肝浸液以及3份ICHV犬肾细胞培养物,除1份血清判为疑似外,其余均为ICHV抗原阳性。而健康对照犬的30份血清、8份腹水和20份肝浸液以及大细小病毒(CPV)、犬轮状病毒(CRV)和大瘟热病毒(CDV)的细胞培养物各3份,均为ICHV抗原阴性。在抗体检测中,被检的20份自然和实验感染犬早期血清均为阴性,30份临床健康犬血清中20份具有8～64~×的ICHV抗体效价。 MCFT的特异性和敏感性都比较好,可以用于ICHV的临床诊断和流行病学调查。