氧化石墨烯-DNA纳米荧光探针用于检测牛奶中的三聚氰胺

为探索建立高灵敏度、高选择性,适合快速现场筛选的三聚氰胺检测方法,利用氧化石墨烯(GO)纳米材料独特的猝灭效应,根据修饰近红外荧光染料的DNA分子链和三聚氰胺分子同氧化石墨烯间作用力的不同,设计出一种简单快速、选择性好的三聚氰胺纳米荧光探针。该探针在三聚氰胺存在的情况下,可检测到被猝灭荧光信号的恢复。该探针使用的激发和发射荧光光谱,在近红外波段具有低的样品基质背景干扰,灵敏度高,线性范围为90～1 500 nmol/L,检测下限达30 nmol/L,可用于牛奶中三聚氰胺的检测。     

使用酶联免疫吸附法测定饲料中三聚氰胺的研究

<正>三聚氰胺[C3N3(NH2)3]是一种有机化工原料,俗称"蛋白精",常温下为一种无毒无味的白色结晶粉末。三聚氰胺添加到饲料中可以冒充蛋白质,少量添加即可大大提高蛋白含量。因为每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子,而在原料的粗蛋白检测过程中,用浓硫酸消化这一过程可以将三聚氰胺分解掉,这样在最后的计算中,三聚氰胺中的氮原子即可拉高粗蛋白的比率,造成蛋白含量虚假增高。在饲料中添加三聚氰胺是属于违规行为。     

蒽醌-2-磺酸钠探针快速测定牛奶中三聚氰胺方法的研究

为快速检测牛奶中三聚氰胺含量，基于三聚氰胺（MA）和蒽醌-2-磺酸钠（AQ）分子探针结合后电流的降低值与三聚氰胺含量成线性的原理，建立了以蒽醌-2-磺酸钠（AQ）为分子探针检测牛奶中三聚氰胺含量的方法。该方法的最低检出限可以达到5.00＆#215;10-9 M（0.6μg/ml），整个检测过程可以在30min内完成。     

饲料中三聚氰胺的检测

三聚氰胺简称三胺，学名三氨三嗪，是重要的氮杂环有机化工原料，在饲料工业中作为粘合剂使用。目前国际上通常采用凯氏定氮法测定饲料中粗蛋白质的含量，即求出氮的含量，再乘以一定的换算系数（通常用6．25系数计算）得出蛋白质含量。由于三聚氰胺分子中含有大量氮元素，每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子，而在原料的粗蛋白检测过程中，用浓硫     

饲料中三聚氰胺测定方法的比较

对饲料中三聚氰胺的两种测定方法即高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱质谱联用法(GC-MS)进行比较分析.采用HPLC法测定三聚氰胺在1.0～50μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2=0.9999),平均回收率为98.9%,RSD为0.4%.采用GC-MS法测定三聚氰胺在0.05～1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(r2-0.9965),回收率为91.0%,RSD 1.7%.结果表明,采用HPLC法测定操作简便,结果更精确,但易出现假阳性:采用GC-MS法测定操作复杂,但是确证法且定量限更低.     

三聚氰胺IgG型单克隆抗体的制备及鉴定

采用改进的重氮法合成三聚氰胺免疫抗原(三聚氰胺-BSA)和三聚氰胺包被抗原(三聚氰胺-OVA),以三聚氰胺-BSA免疫BALB/c小鼠,选取间接ELISA测定效价达8000以上的BALB/C小鼠进行融合,用HAT和HA选择性培养基筛选后,得到一株稳定分泌抗三聚氰胺抗体的杂交瘤细胞株命名为3G4,经多次传代培养和反复冻存复苏后能够稳定分泌抗体,在BALB/C小鼠体内诱生腹水,用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水。用间接ELISA方法测定杂交瘤培养上清效价为1:1600,腹水效价为1:2.048×10~6,抗体亚类为IgG2b。     

应用酶联免疫吸附法测定饲料中三聚氰胺的研究

三聚氰胺（C3N3（NH2）3）是一种有机化工原料,俗称“蛋白精”,常温下为一种无臭无味的白色结晶粉末。三聚氰胺添加到饲料中的最大“好处”就是可以冒充蛋白质,少量添加即可大大提高饲料氮含量,因为每个三聚氰胺分子中都含有6个氮原子。而在原料的粗蛋白质检测过程中,用浓硫酸消化这一过程可以将三聚氰胺分解掉,这样在最后计算氮含量时,三聚氰胺中的氮原子即可拉高饲料氮的比率,造成蛋白质含量虚假增高。     

添加三聚氰胺对高粗料日粮短期人工瘤胃发酵理化指标的影响

为研究三聚氰胺对瘤胃微生物发酵的影响,试验采集西门塔尔×鲁西黄牛瘤胃液,以高比例粗饲料为底物,采用短期人工瘤胃发酵产气装置,分析评价了不同剂量三聚氰胺(0、6、18、54、162、486 mg/kg)对氨态氮、氨基酸态氮、干物质产气量、挥发性脂肪酸、气体组分的影响。结果表明:三聚氰胺可减少高粗料日粮瘤胃发酵总挥发性脂肪酸的产生,并且有提高乙酸与丙酸比值的趋势(P>0.05)。高浓度的三聚氰胺(486 mg/kg)能显著提高氨态氮的浓度(P<0.05)。三聚氰胺的添加对干物质产气量影响不大,但可使甲烷产量提高8.0%～41.7%。综上所述,以高粗饲料日粮为发酵底物时,三聚氰胺添加对瘤胃的发酵并没有产生显著不利影响,但可提高甲烷产生量,从而降低饲料能量的转化效率。     

检测牛乳中三聚氰胺的间接竞争ELISA方法的建立

利用戊二醛法合成的三聚氰胺—钥孔匙锥蓝蛋白(KLH)为免疫原制得三聚氰胺的多克隆抗体,并在此基础上以重氮法制备的三聚氰胺—牛血清白蛋白为包被抗原建立了检测三聚氰胺的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,理想的包被抗原质量浓度为0.8mg/L,抗三聚氰胺抗血清的稀释倍数为1:400,最适检测范围为0.03-10mg/L,最小检测量为0.01mg/L,批内与批间变异系数分别为1.952%和6.673%,回归方程为y=-0.4239-0.0933。本实验建立的三聚氰胺含量的间接竞争酶联免疫吸附试验(ci-ELISA)方法可用于牛乳样品中三聚氰胺残留的检测。     

三聚氰胺单克隆抗体的制备与鉴定

本实验利用三聚氰胺类似物与血蓝蛋白、卵清蛋白偶联制备免疫抗原和包被抗原,免疫Balb/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,经免疫、融合、筛选和克隆等,得到了抗三聚氰胺单克隆抗体。该抗体亚类为IgG1,制备的单克隆抗体腹水效果评价达10-7,与其他三聚氰胺结构类似物无交叉反应。三聚氰胺单克隆抗体的获得为进一步研发三聚氰胺药物残留检测试剂盒的研制奠定了基础。     

7-氨基头孢烷酸分子印迹聚合物的制备及结合性能评价

以头孢类药物的母核7-氨基头孢烷酸为模板分子、4-乙烯基吡啶为功能单体在一定条件下合成7-氨基头孢烷酸分子印迹聚合物,用平衡结合实验研究了聚合物的结合性能。并研究了7-氨基头孢烷酸分子印迹聚合物对头孢类药物的选择性。结果表明,7-氨基头孢烷酸分子印迹聚合物对头孢类药物有很好的选择性,能够作为畜禽食品中头孢类药物萃取净化的分离材料。     

雌二醇分子印迹聚合物的合成及其吸附性能研究

采用表面分子印迹技术和溶胶-凝胶技术,以3-氨基丙基三乙氧基硅烷为功能单体,四乙氧基硅烷为交联剂,合成了以雌二醇为模板的分子印迹聚合物。研究了该聚合物的合成条件,并用平衡结合实验研究了该聚合物的识别性能。结果表明,在所研究的浓度范围内,雌二醇分子印迹聚合物的饱和吸附容量为6.689 mg/g,而非模板聚合物的饱和吸附容量为4.491 mg/g。二者相比,雌二醇分子印迹聚合物表现出很高的吸附容量。     

分子印迹聚合物及其在药物分离中的应用研究进展

简述分子印迹聚合物的起源、基本原理、特点和制备方法,同时总结分子印迹聚合物在药物分离中的应用现状及其存在的问题和发展趋势。分子印迹聚合物具有高度的特异性和稳定性,在固相萃取等分离技术领域具有广阔的应用前景。     

环丙沙星分子印迹聚合物自组装体系的分子模拟

以环丙沙星（CIP）为印迹分子,甲基丙烯酸（MAA）、4-乙烯基吡啶（4-Vpy）为功能单体,运用量子化学密度泛函理论（DFT）的LC—WPBE方法和6—31G（d,P）基组,模拟CIP印迹分子与MAA、4-Vpy两种功能单体分子印迹聚合物自组装体系的构型,讨论了其稳定复合物的成键作用位点及数目、NBO电荷的转移及反应的结合能,探讨了CIP与两种功能单体之间相互作用的原理及分子印迹中溶剂的影响。模拟计算结果表明,CIP印迹分子哌嗪环上的N、喹啉羧酸上的H和O与两种功能单体均通过氢键作用形成在化学基团及空间结构上相互匹配的有序复合物;两种功能单体中MAA与CIP印迹分子间的相互作用更强,且在印迹比例为1：6,以甲苯为溶剂时,合成的复合物能量最低,对CIP的吸附性和识别能力更强。该分子模拟试验可为CIP分子印迹聚合物的进一步研究提供理论参考。     

MWCNT-MIP技术在兽药残留分析前处理中的应用进展

在总结表面接枝分子印迹聚合物（MIP）和多壁碳纳米管（MWCNT）各自特性及其在兽药残留分析中的应用基础上,着重阐述了MWCNT接枝MIP技术及其在兽药残留分析前处理中的应用情况,并对该技术的优势与存在的问题进行了探讨,为深入研究MWCNT—MIP的合成及在复杂基质中药物残留分析提供参考。     

恩诺沙星分子印迹聚合物的制备及表征

为了制备恩诺沙星分子印迹聚合物,以恩诺沙星（ENRO）为模板分子,甲基丙烯酸（MAA）为功能单体,采用沉淀聚合法合成了ENRO分子印迹聚合物（MIPs）纳米微球,优化了模板与功能单体的比例、溶剂种类及溶剂用量,并对MIPs进行了表征。结果表明,MIPs微球粒径（190—290nm）大于非印迹聚合物（NIPs）微球粒径;同时Scatchard分析表明,在研究的浓度范围内MIPs存在两个不同的结合位点,其离解平衡常数Kd-0最大表观结合量Qmax分别为Kd1=0．2313g／L,Qmax1=34．7540mg／g,Kd2=0．5841g／L,Qmax2=57．4298mg／g;与环丙沙星和氧氟沙星相比,MIPs对ENRO表现出更强的特异性吸附能力。     

分子印迹技术在兽药残留检测方面的研究进展

分子印迹技术由于具有特异识别性和实用性的特点，近十几年来研究较多。文章综述了分子印迹聚合物作为固相萃取材料用于兽药残留分离、作为传感器的敏感元件用于兽药残留快速检测的研究进展，并对该技术的应用前景进行了展望。     

Quantification of melamine absorption, distribution to tissues, and excretion by sheep

Eight D?hne Merino rams were used to quantify apparent absorption, distribution to tissues, and excretion of dietary melamine in sheep. Two batches of concentrate pellets were made; one (CON) contained corn gluten meal with no detectable melamine and the other (MEL) contained corn gluten meal that was previously found to be highly contaminated with melamine at 15,117 mg/kg. The MEL pellets contained 1,149 mg/kg of melamine. During a 10-d adaptation period, all the animals received a forage-based diet supplemented with 600 g/d of the CON pellets. This was followed by an 8-d collection period during which 6 of the animals received MEL pellets and 2 received CON pellets. Melamine intake of sheep that received MEL pellets was 0.69 g/d. Blood samples were taken before first ingestion of MEL pellets on d 1 and again on d 3, 6, and 8 of the collection period for melamine and serum creatinine analyses. Feces and urine were collected quantitatively over the 8 d for proximate and melamine analyses. All the animals were slaughtered at the end of the trial, and samples of the LM, liver, kidneys, and abdominal fat were taken for melamine analysis. Data of the 2 sheep that received CON pellets for the duration of the trial confirmed that no melamine was detected in any of the samples, and no statistical analyses were performed on these data. The apparent digestibility or efficiency of absorption of ingested melamine was 76.7%. Melamine was detected in the urine, blood, muscle (LM), and fat tissue of all the sheep that received MEL pellets. Serum melamine concentrations reached 5.4 mg/kg on d 8 of the collection period, and the meat (LM) contained 9.6 mg/kg of melamine. Calculations on the partitioning of ingested melamine suggested that urine is the major excretion route accounting for 53.2%, whereas feces accounted for 23.3% of ingested melamine. Approximately 3.5% of the ingested melamine was detected in muscle. It was concluded that ingested melamine is highly absorbable from the small intestine and that a pathway exists for the distribution of dietary melamine to meat.     

饲料中添加三聚氰胺对吉富罗非鱼生长、免疫指标及肌肉残留量的影响

将三聚氰胺分别按0、500、2 0005、000、10 000 mg/kg的比例添加于基础饲料中,喂养初始体重为(30.14±0.22)g的吉富罗非鱼28 d。通过测定罗非鱼的增重率、血清免疫指标和三聚氰胺在肌肉中残留量等指标,研究三聚氰胺对罗非鱼生长、免疫功能及肌肉残留量的影响。结果显示:饲料中添加不同剂量的三聚氰胺会降低吉富罗非鱼的增重率,在第21 d和第28 d,10 000 mg/kg组吉富罗非鱼的增重率显著低于同期对照组(P<0.05);三聚氰胺对吉富罗非鱼血清中的LZM活力、SOD活力无显著影响(P>0.05),但对AKP活力有影响,三聚氰胺对吉富罗非鱼血清中的AKP活力的影响呈先升高后降低趋势,第7 d和14 d各试验组较对照组有所提高,但影响不显著(P<0.05);在第21 d和第28 d,所有试验组吉富罗非鱼的AKP活性低于同期对照组,5 000 mg/kg和10 000 mg/kg显著低于同期对照组(P<0.05)。从第7 d开始,4个试验组吉富罗非鱼肌肉中均能检测到三聚氰胺残留,三聚氰胺在吉富罗非鱼肌肉中的残留量与三聚氰胺在饲料中的添加剂量成正相关关系。