不同储藏时间及温度对猪尿中沙丁胺醇快速检测的影响研究

为了研究不同储藏时间及温度对猪尿中沙丁胺醇快速检测的影响,试验向阴性猪尿中添加沙丁胺醇标准品配制成5μg/L、50μg/L、500μg/L 3个不同浓度后,分别在常温(室温)、冷藏(4℃)、冷冻(-20℃)条件下储藏,于1,4,7,18,21,28天分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法和胶体金免疫层析法进行快速检测。结果表明:所有猪尿样本均呈阳性,且可检测到起始浓度为5μg/L的样本随时间延长检测值降低,但无论采用何种保存方式,沙丁胺醇均会随时间发生大幅度的降解,因此为保证检测结果的准确性,收集猪尿样本后宜尽快初筛检测。     

饲料中沙丁胺醇酶联免疫前处理方法的探究

为探讨酶联免疫法(ELISA)检测饲料中沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的前处理方法,试验对提取液的pH、离子强度、有机溶剂浓度及样品稀释倍数等条件进行了考察,选取最适宜的提取液条件对2种不同类型的饲料样本进行提取,用ELISA测定样品中沙丁胺醇的残留量。结果表明,沙丁胺醇标准曲线的IC₅₀值为0.606 ng/mL,线性范围为0.221～1.658 ng/mL,R²=0.9998,提取液的pH为7.5,PBS缓冲液最优浓度为0.06 mol/L,稀释倍数为10倍,2种不同类型的饲料样本的检测限(LOD)为5.0 ng/mL。当沙丁胺醇的添加浓度为5、10 μg/kg时,该方法的添加回收率为77%～110%,变异系数<8%。     

应用ELISA方法检测猪尿中莱克多巴胺残留量

为了验证ELISA方法检测猪尿中莱克多巴胺残留量的可行性,采用ELISA方法对试剂盒的校正曲线、检测限、加标回收率试验等方面进行了验证。结果为试剂盒校正曲线的线性相关系数为0.9913;样品的定性检出限为0.087ng/mL,定量检出限为0.29ng/mL;添加1.1ng/mL、2.2ng/mL、4.4ng/mL、6.6ng/mL和11.0ng/mL的莱克多巴胺标准液时,变异系数分别为3.06%、8.55%、4.41%、9.92%、8.19%;平均回收率分别为93%、113%、103%、96%、91%。结果表明,应用ELISA方法检测猪尿中莱克多巴胺残留量符合要求,适合检测猪尿中莱克多巴胺残留量的初筛。     

ELISA方法检测猪尿中克伦特罗的方法验证

为了验证ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量的可行性,采用ELISA方法对试剂盒的校正曲线的线性相关关系、检测限、重复性和样品加标回收率进行了验证.结果为,试剂盒的校正曲线的线性相关系数为0.985;定性检出限为0.147ng/mL,定量检出限为0.490ng/mL;添加0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL的克伦特罗标准液时,变异系数分别为2.29%、6.97%、2.73%,平均回收率分别为91.8%、102.4%、99.7%.结果表明应用ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量符合实验室质量控制规范的要求,适合检测猪尿中克伦特罗残留量的初筛.     

三种方法检测克伦特罗确保猪肉食用安全

本篇文章主要提出用三种方法:试剂条法、ELISA法、液相串联质谱法做为检测克伦特罗的重要手段。我们利用6个尿样和6个组织样品分别做了添加回收。用试剂条法检测6份添加浓度分别是3μg/L、6μg/L猪尿样品,其结果显示是阳性。用ELISA法对添加浓度分别是100ng/kg、300ng/kg的6份组织样品进行检测,回收率是98.9%～99.4%,液相串联质谱法检测猪肉组织中添加浓度为50ng/kg,100ng/kg,300ng/kg,500ng/kg的组织样品,检测回收率为99.4%～103.4%,验证结果证明三种方法均能满足实际检测的需要。     

克仑特罗CLEIA试剂盒与ELISA试剂盒的检测效果比较

经克仑特罗CLEIA试剂盒与ELISA试剂盒检测效果比较。结果表明,CLEIA试剂盒检测时间为33 min,而ELISA试剂盒则需要50 min,采用CLEIA试剂盒方法检测比ELISA试剂盒方法更加节省时间;CLEIA试剂盒IC50为40 ng/L,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为20.1 ng/L和90.7 ng/kg,而ELISA试剂盒IC50则为125.2 ng/L,对猪尿和猪肉的最低检测限分别为23.5 ng/L和99.3 ng/kg,CLEIA试剂盒方法检测灵敏度高于ELISA试剂盒方法。     

液相色谱串联质谱内标法与外标法检测生鲜乳中黄曲霉素M1含量的比较

为了比较液相色谱串联质谱内标法与外标法的不同,试验采用牛奶样品经甲醇-水溶液提取,过免疫亲和柱净化和富集后,液相色谱串联质谱法进行检测,分别用同位素内标法、目前平台已建立的外标法进行定量分析。结果表明:采用同位素内标法,黄曲霉素M1在0.05~5 ng/m L范围内线性相关系数为0.999 2,检出限为0.005μg/kg,定量限为0.015μg/kg;采用外标法定量,黄曲霉素M1在0.1~10 ng/m L范围内线性相关系数为0.999 4,检出限为0.002μg/kg,定量限为0.005μg/kg。在0.1~1 ng/m L加标浓度范围内,内标法的回收率在89.9%~104.7%之间,相对标准偏差(RSD)不大于5.2%;而外标法的回收率在81.0%~107.5%之间,RSD不大于9.0%。说明检测生鲜乳中黄曲霉素M1时,内标法的准确度和精密度均优于外标法,但检测结果差异不显著(P0.05)。     

ELISA测定猪尿液中β-受体激动剂残留的准确性评价

本研究建立克伦特罗间接竞争ELISA检测方法,对检测条件进行了优化确定,并利用猪尿液进行添加回收试验。结果显示:ELISA反应CLE-OVA包被抗原和CLE单抗的最适浓度分别为1:40 000和1:20 000,间接竞争ELISA的线性范围为0.016 l^8.520 0 ng/mL。该方法对克伦特罗、溴氯特罗、马布特罗和溴布特罗均有交叉反应。对冷冻储存半年以上的猪尿进行ELISA测定时,发现检测限可达58.848 3 ng/mL,药物添加回收率为85.19%~5 173.25%,变异系数为4.78%~96.79%;而经过MCX固相萃取柱净化处理后,检测限为0.076 ng/mL,添加回收率在101.21%~119.10%之间,变异系数为6.05%~18.38%。结果表明,SPE净化处理后,可有效去除尿液中的色素、蛋白等基质,提高了该法的灵敏度和准确性。     

猪尿中沙丁胺醇残留的检测方法介绍

沙丁胺醇是一种用于人上呼吸道疾病治疗的短效β2-激动剂,在猪日粮中添加能起营养再分配作用,加快猪体内蛋白质的合成,但是沙丁胺醇能在猪可食性组织中蓄积并通过食物链引起食品安全问题。本文简述了近年来使用的猪尿中沙丁胺醇残留的各种检测技术:高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、酶联免疫吸附法、胶体金免疫法,以期为食品药品安全部门检测沙丁胺醇提供科学参考。     

酶联免疫吸附法检测猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留

以莱克多巴胺单克隆抗体间接竞争酶联免疫吸附（ELISA）法测定猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留。该法对莱克多巴胺的检测限为0.8ng/mL（g）,在空白组织中的添加回收率为80.4%～109.5%,变异系数为5.8%～12.6%。     

酶联免疫吸附法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物效果探讨

目的:本文探讨酶联免疫吸附法(ELISA)测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物的效果。方法:在鸡蛋中添加10、20、30ng/g的氟喹诺酮类药物,利用ELISA法测定回收率。结果:结果显示,在0~8.1ng/g范围内,氟喹诺酮类药物酶联免疫试剂盒的相关系数r为0.997 6,50%抑制浓度(IC50)分别为0.306~0.351ng/g;鸡蛋中氟喹诺酮类药物的回收率在90.0%~102.0%之间,精密度在4.4%~10.5%之间,最低检测限为3.2ng/g。结论:酶联免疫吸附法检测鸡蛋中氟喹诺酮类药物特异性强、灵敏度高,检测结果相对可靠、稳定,能够满足初检筛选要求,值得在基层检测部门推广使用。     

α-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及CiELISA检测方法的建立

为了建立快速、简便、灵敏的检测动物性食品中α-玉米赤霉烯醇(α-Zearalenol,α-ZOL)残留的方法,试验利用活性酯法将α-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联鉴定后常规免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠。经筛选,获得1株稳定分泌抗α-ZOL单克隆抗体的杂交瘤细胞(1D4),利用1D4获得的抗α-ZOL单克隆抗体建立了检测α-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(Ci ELISA)方法。结果表明:该检测方法在1~1 000 ng/m L范围内线性良好,标准曲线方程为y=0.280 2x+0.025 6(R2=0.990 1),半数抑制浓度为76.32 ng/m L。牛奶加标回收试验显示,α-ZOL的回收率在81.29%~117.53%之间,变异系数在4.42%~9.33%之间。试验建立的Ci ELISA检测方法可用于牛奶中α-ZOL残留的定量检测。     

微波消解ICP-MS测定猪肉中9种金属元素

对采用微波消解ICP-MS测定猪肉中砷、镉、铅、镍、铬、铜、汞、锑和锌9种金属元素的含量进行了研究。结果表明,方法测定的线性范围在0~50 ng/m L,检出限为1.2~22.5 ng/m L,精密度在0.28%~4.39%之间,猪肉样品添加回收率为81.5%~112.6%。该方法操作简便、快速、准确,大大提高了检测时效。     

猪尿中沙丁胺醇的常用检测方法及其进展

沙丁胺醇(Salbutamol,SAL),是一种人工合成的肾上β2-受体激动剂,医学上可以用于治疗支气管炎或支气管哮喘所导致的支气管痉挛,在饲料添加中可有效提高瘦肉率,而人食用含沙丁胺醇较高的动物组织后会出现肌肉颤动、肌痛、头痛,甚至恶心、呕吐等中毒症状。鉴于沙丁胺醇在尿液中存在的时间较长,尿样易于采集,本文综述了猪尿中沙丁胺醇的检测技术及进展,以期为监管部门检测沙丁胺醇提供理论依据和操作参考。     

两种包被方法在克仑特罗ELISA检测试剂盒中应用的比较

通过对50%抑制浓度(IC50)、回收率和变异系数的测定,对比了常规法和微波法包被的酶联板在克仑特罗ELISA检测试剂盒中的应用.检验结果表明:常规法与微波法包被的酶联板的IC50分别为1.08和0.96μg/L,添加1μg/L克仑特罗猪尿的回收率分别为90%和86%.两种方法包被的酶联板的板内变异系数均小于8%,板间变异系数均小于12%.试验证明,在ELISA试验中,微波法包被具有常规法包被相当的应用效果.     

不同酶解条件对绵羊尿液中沙丁胺醇含量测定的影响

为了优化尿液中沙丁胺醇检测前处理过程中的酶解条件,以绵羊沙丁胺醇阳性尿液为研究对象,利用单因素试验,通过比较酶解及不同酶解条件(温度、时间、酶使用量)下沙丁胺醇含量测定结果,确定最佳酶解条件。结果表明:酶解是尿液中沙丁胺醇检测前处理的必要环节,其最优条件为温度37℃,酶解16 h,60μL添加量。在此条件下酶解效率最高,稳定性较好。     

动物尿液中沙丁胺醇残留检测试纸条的研制

为了制备可用于检测动物尿液中沙丁胺醇(SAL)残留的试纸条,试验采用胶体金免疫层析方法,首先将小分子SAL进行改造,并在此基础上制备SAL抗原和抗SAL抗体,进而制备得到胶体金标记抗体,然后将其喷涂于胶体金结合垫,并与样品垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸及塑料底板组装,得到SAL检测试纸条。结果表明:试纸条对猪尿、牛尿、羊尿中SAL的检测限为3.0μg/L,检测时间为5 min,特异性高,重复性良好,与仪器检测方法结果一致,可用于动物尿液中SAL的现场快速检测和筛选工作。     

免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗

制备出抗沙丁胺醇的抗血清，提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱，针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400ng／mL基质和416ng／mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取，经免疫亲和色谱柱纯化，再用GC／MS检测，即为IAC-GC／MS法。对沙丁胺醇的检测限为0．5ng／g，定量限为2ng／g，对克伦特罗的检测限为0．8ng／g，定量限为2．5ng／g。空白组织按照1、5、10、20ng／g的浓度添加药物，沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78．4％～106．9％，克伦特罗的添加回收率为77．1％～102．9％。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC／MS法乃国内首次报道。     

液相色谱—串联质谱法测定猪尿中苯乙醇胺A

建立了一种超高效液相色谱—串联质谱法测定猪尿中苯乙醇胺A的方法。猪尿样品以莱克多巴胺—D3为内标,尿液经酶解提取后经MCX固相萃取柱净化,超高效液相色谱—串联质谱法测定。苯乙醇胺A监测离子为m/z344.7>149.5和m/z344.7>326.7。结果表明在1~100ng/mL范围内苯乙醇胺A呈良好的线性关系,高中低浓度相对回收率在98.8%~118.0%,变异系数小于10%,定量限为0.2ng/mL。该方法用同位素内标法定量准确,适用于猪尿中苯乙醇胺A的残留测定。     

规模牧场牛奶中达氟沙星残留检测方法的研究

本研究选择乳中β-羟基丁酸的测定值小于1mmol/L的奶牛个体,以达氟沙星(DFLX)为对象,以先期制备的兔源达氟沙星抗体和包被原为基础,建立间接竞争ELISA检测方法。该方法的最低检测量为27.29ng/m L,回归方程为y=-18.776x+93.634(R2=0.9918),在0.5~2000ng/m L范围内样品添加平均回收率为91.47%。结果表明,该方法可用于乳中β-羟基丁酸的测定值小于1mmol/L的奶牛个体所产牛奶中达氟沙星药物残留的筛选检测。