饲用葡甘露低聚糖的酶法制取

葡甘露低聚糖是一种重要的双歧因子,近年来已被作为一种功能性饲料添加剂,成为动物营养研究的新方向。试验通过对黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶酶解魔芋粉制备甘露寡糖进行条件研究,获得了以葡甘露低聚糖为主的酶解产物。酶解条件为:用煮沸的pH值3.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制180 g/l的魔芋粉溶液,加酶量按30 IU/g魔芋粉计算,酶解水浴温度为65℃,酶解时间为4 h。酶解结束后,将酶解液进行高温灭菌并接种酿酒酵母进行发酵,发酵温度为30℃,摇床转速200 r/min,发酵20 h后将发酵液离心,所得上清液即为不含单糖的葡甘露低聚糖,得率可以达到35.73%(以魔芋粉计)。     

酶解法提取肠膜肽工艺条件的优化

试验以肝素加工废水为原料,利用水解蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶及水解-风味复合酶提取肠膜肽,以水解度表征其反应程度。研究表明,风味-水解复合酶组效果最优,最佳酶解条件为:温度50℃、pH值5.0、酶总浓度3%、风味蛋白酶:水解蛋白酶为1:1、酶解时间2h。在此条件下水解度为17.45%。     

植酸酶体外酶解不同饲料原料的研究

为了评价植酸酶对饲料原料的水解效果,进行了体外酶解试验。采用7种植酸酶:编号1-7号。预试验显示上述酶有相似的最适水解参数:料水比为1∶10,pH 5.5,温度37℃和时间5h。在此参数下,添加植酸酶10U/g饲料原料进行体外酶解。结果显示:以无机磷增长率为指标,6号对蛋白类饲料原料的效果最佳,而对能量饲料原料的作用效果与其他无显著差异。     

组合酶改善菜籽粕营养品质效果的研究

以菜籽粕为原料,采用已筛选出的组合酶酶解菜籽粕,设置不同水分梯度和酶添加量,在37℃下酶解24 h,以酸溶蛋白质、无机磷、粗纤维含量和体外消化率为指标对组合酶作用进行评定,水分添加量15％和组合酶添加量0.05％酶解24 h达到较好改善菜籽粕营养品质的效果.     

用酶法制备藏羊血食用蛋白粉的研究

采用四因素三水平正交试验,对藏羊血制备食用蛋白的工艺进行了分析。经分析食用蛋白粉水解最佳条件为：酶解用酶量4.5g,酶解温度为46℃,酶解时间为7.5h,酶解的pH值为10.5,活性炭作用于水解液时由室温升至80℃所需最佳时间为6～8min。     

大豆虾粉肽适宜酶解好条件的研究

为了筛选生产大豆虾粉肽的适宜蛋白酶及酶解条件,试验采用单因素试验设计,以水解度为检测指标,按酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间逐一分别对3种微生物发酵产生的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜酶解条件进行筛选.试验结果表明:酶解体系中的酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间均显著影响3种蛋白酶对脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的酶解效果.在3种蛋白酶中,酸性蛋白酶的酶解效果最好,其次是碱性蛋白酶,中性蛋白酶的酶解效果最差.酸性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜条件为:酶浓度为2000 U/g,底物浓度为9%,pH值3.5,酶解时间为3.5 h,温度50℃.     

单环刺螠(Urechis unicinctus)酶解及酶解产物功能研究

采用碱性蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶对单环刺螠体壁进行酶解,以水解度为指标。结果表明,三种酶中胃蛋白酶在4 h达到最高水解度38.5%。比较三种酶解产物的抗氧化、总还原力和降血糖功能,中性蛋白酶酶解5 h的产物其亚铁离子螯合力最高,可达50%;DPPH自由基清除能力最高可达51.5%,为胃蛋白酶酶解3 h的产物;胃蛋白酶酶解4 h产物的总还原力最高;胃蛋白酶酶解2 h的酶解产物其DPP-4抑制率最高,可达41.3%。本研究为单环刺螠的综合利用提供了参考。     

棕榈油体外酶解的研究

利用脂肪酶催化油脂水解成脂肪酸和甘油,从而得到脂肪酸产品是一种温和的油脂水解方法。为了提高脂肪酶酶解效率,研究了棕榈油酶解时反应温度、p H值、水和棕榈油摩尔比及脂肪酶用量对水解效果的影响。试验结果表明,当缓冲液/棕榈油摩尔比为40︰1,加入4%的脂肪酶,在40℃下水解7h,水解率可达98.29%,水解较彻底。     

大豆油体外酶解的研究

利用脂肪酶催化油脂水解成脂肪酸和甘油,从而得到脂肪酸产品是一种温和的油脂水解方法。为了提高脂肪酶酶解效率,研究了大豆油酶解时反应温度、pH值、水和大豆油摩尔比及脂肪酶用量对水解效果的影响。试验结果表明,当缓冲液和大豆油摩尔比为40∶1,加入4%的脂肪酶,在40℃下水解7h,水解率可达96.02%,水解较彻底。     

响应面法优化玉米黄粉抗氧化肽的制备工艺

以玉米黄粉醇溶蛋白为原料,选用碱性蛋白酶酶解制备玉米黄粉抗氧化肽,以加酶量(E/S)、p H、温度和时间作为研究对象,以酶解液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率为评价指标,在单因素试验的基础上。采用Design-Expert软件,通过Box-Behnken进行3因素3水平分析,得到的最佳酶解条件是加酶量(E/S)为8.00%,p H为9.30,温度为52℃,酶解时间为4 h,在这个条件下,DPPH自由基清除率可达到83.06%。     

悬浮培养生产口蹄疫病毒灭活工艺研究

采用单独使用二乙烯亚胺（BEI）灭活剂30℃、26℃灭活以及二乙烯亚胺-甲醛（BEI-FA）联合灭活3种方法对悬浮培养生产的猪口蹄疫O型ZK/93病毒液进行灭活,考察和评价各种方法对该毒株146S的影响及灭活安全性。根据对3批口蹄疫病毒灭活后检测结果来看,单独使用BEI 26℃灭活方法虽然对146S的损失率小,但存在一定的安全隐患,未经过大量试验证实及确认之前不应使用。而经BEI-FA联合灭活方法获得的抗原安全性检验符合规定,但该方法对口蹄疫抗原146S的损失率较高,不宜推广和使用。与上述两种方法相比,用BEI灭活剂30℃灭活28 h仍是最佳的灭活方法。     

紫花斜茎黄芪腋芽茎尖组织培养和植株再生研究

通过对紫花斜茎黄芪 (Astragalusadsurgens)进行组织培养和植株再生 ,着重对培养基和培养条件等方面进行了筛选和研究 ,结果表明 ,紫花斜茎黄芪腋芽和茎尖作为外植体的组织培养和继代增殖培养 ,最适宜培养基为MS + 1mg/LBA + 0 .1mg/LNAA和MS + 0 .5mg/LBA + 0 .1mg/LNAA。培养温度 2 0～ 2 6℃ ,光照每天 10h ,光照强度 15 0 0Ix。生根培养最适宜的培养基为MS + 0 .1mg/LNAA ,培养温度 2 0～ 2 5℃ ,光照每天 10h ,光照强度仍为 15 0 0Ix。     

不同样品保存液和保存条件对动物细胞体外培养的影响

本研究取矮脚油鸡7日龄胚胎作为试验材料,用MEM、全培养基和PBS 3种不同的液体对鸡胚组织进行保存,同时在不同保存温度条件下按不同保存时间梯度,采用组织块贴壁培养法进行体外细胞培养。对细胞的保存液变化,细胞形态、细胞生长等情况进行研究,分析样品保存条件对细胞体外培养和细胞系构建的影响。结果发现,4 ℃保存的组织块培养效果明显优于室温保存;无论在4 ℃或常温,基础培养基保存的组织块培养效果明显优于保存液,全培养基效果最好。常温保存48 h以内3种保存液培养效果差别甚微,48 h后培养效果均急剧下降,96 h后保存在PBS中的组织失活,未长出细胞。本研究结果为建立细胞系采集样品的保存提供了一定的参考。     

奶牛乳房内灌注头孢噻呋钠的消除动力学研究

在奶牛乳房内灌注头孢噻呋钠后,采用超高效液相色谱一串联质谱法测定牛乳中头孢噻呋的浓度,对其消除动力学进行了研究。3头实验奶牛按每个乳房0．3g头孢噻呋灌注,牛乳中药物达到的最高浓度Cmax=107．89μg／mL,达峰时间Tmax=8h,药物半衰期T1/2=13．97h。在乳房内用药后的最初56h内,头孢噻呋浓度快速下降;最后一次给药88h后,所有乳腺中头孢噻呋的浓度都低于允许限量（0．1μg／mL）。故建议头孢噻呋在牛奶中的休药期为4d。     

内蒙古白绒山羊附睾精子冷冻效果的研究

本试验把不同温度下的样品分成3个处理组,通过检测精子与繁殖力有关的重要指标研究3个处理组的冷冻效果,结果显示, 在3个不同的环境下收集附睾,室温下(19 ℃)收集附睾精子(处理1组)的冷冻效果最好,解冻后活率为(55.0±3.4)%;4 ℃下收集的精子(处理2组)冷冻解冻后的活率为(35.0±2.5)%;37 ℃下收集的精子(处理3组)的冷冻效果较差,解冻后活率为(23.0±2.5)%。通过对处理组中冷冻和解冻后两个阶段的精子指标的测定,研究了精子活率与其他指标的关系,得出白绒山羊附睾精子能够成功的保存。     

燕麦属牧草根尖组织染色体观察方法的优化研究

针对通常采用的燕麦属牧草染色体观察的去壁低渗法,对该方法中的预处理和解离等环节进行了优化,即预处理用对二氯苯在20℃下处理4h,固定,酸解离用1mol／LHCl在60℃下处理10min,酶解离用20g／L纤维素酶溶液在25℃下处理20min,最后染色压片。通过研究发现优化后试验步骤简化,成本降低,且观察效果良好。     

家蚕幼虫体黄酮类化合物的提取及测定方法

为推进家蚕幼虫体的药用开发,研究了家蚕幼虫体黄酮类化合物含量的测定方法。将家蚕幼虫粉过80目筛,选用80%乙醇为溶剂,原料质量浓度按00333g/mL在60℃下抽提4h,重复抽提3次,可高效地提取家蚕幼虫体黄酮类化合物。以NaNO2Al(NO3)3显色,用紫外分光光度计于510nm波长下比色,可精确、稳定地测定出家蚕幼虫体中黄酮类化合物含量。家蚕幼虫体富含黄酮类化合物,其质量比达23770mg/g左右。     

支原体检验用培养基的研究

水质和血清对比试验结果表明：以水质电导率低于0．5μs／cm、猪血清总蛋白不低于49g／L、胆固醇不高于1．66mmol／L为标准制备的改良Frey培养基和支原体培养基活菌滴度均达10^9CCU／mL。对滑液支原体GX11-T株及猪鼻支原体BTS-7株1—5代对数生长期培养物检测,均达10^9CCU／mL。改良Frey培养基与支原体培养基经反复冻融8次;或改良Frey培养基经37℃保存24h;支原体培养基37℃保存8h均不影响灵敏度。改良Frey培养基在鸡胚成纤维细胞及鸡胚尿囊液中最小检测量分别为4CCU／mL和2CCU／mL;支原体培养基在BHK：,细胞中最小检测量为8CCU／mL。改良Frey培养基和支原体培养基4℃有效期为1个月,-20℃为12个月。     

早春短命植物绵果荠愈伤组织诱导相关因素研究

 绵果荠是分布在新疆北部准噶尔荒漠中的十字花科一年生早春短命植物。本研究为探讨绵果荠愈伤组织诱导条件,以无菌苗子叶为外植体,研究了不同苗龄、培养基种类、蔗糖浓度和培养条件对愈伤组织的诱导及其生长的影响。结果表明,１）愈伤组织诱导的最佳条件为：苗龄１４ｄ、培养基为ＭＳ＋１．０ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＢＡＰ、含糖量３％、温度２５℃和光照为黑暗。２）愈伤组织生长的适宜条件是光照１６ｈ／ｄ和温度２５℃。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药

建立了鸡肉和牛肉中五种常用抗球虫药物残留检测的超高效液相色谱-串联质谱方法（UPLC—MS／MS）。样品用乙腈提取,吹干后用50％甲醇溶解,正己烷去脂后,供液相色谱-串联质谱法分析。液相色谱条件为：色谱柱为WatersBEHC18柱（50mm×2．1mm,1．7μm）;流动相为乙腈-20mmol／L乙酸铵水溶液,梯度洗脱;柱温30℃;流速0．3mL／min;进样量10μL。质谱条件为：电喷雾离子源（ESI’）,多反应监测（MRM）方式采集。结果表明：在10～500μg／L的系列浓度范围内,五种抗球虫药物的相关系数R2〉0．990;方法检测限为5μg／kg,定量限为10μg/kg;从100、200、500μg／kg三个添加浓度检测结果可以看出,方法的平均回收率为75．4％～109％,批内、批间RSD均〈15％。本方法简便快捷、定性准确,可以满足兽药残留分析的求。