浅谈血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）影响因素及应用

血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）是目前兽医实验室常用的检测方法，作为血清诊断技术之一，是利用某些病毒具有凝集红细胞的特性，且这种特性能被特异性抗血清抑制的原理，用于已知病毒检查血清中相应抗体状态和已知血清鉴定未知病毒的一种兽医实验室最常用的实验方法。HA和HI试验具有特异性好、操作方便、可同时进行大量样本试验、对试验环境要求不高等优点，     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱的研究

用家兔A型魏氏梭菌培养液处理的6株鸡传染性支气管炎病毒,以方阵试验分别与人O型红细胞及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、麻雀、小鼠等8种动物的红细胞作血凝试验,结果证明,鸡传染性支气管炎病毒H_(120)株和M_(41)株均能凝集人O型以及羊、猪、兔、鸡、鸭、鹌鹑、小鼠的红细胞,而不能凝集麻雀的红细胞;GIBV株和Connecticut株能凝集人O型以及免、鸡、鹌鹑、麻雀的红细胞,而不能凝集猪、羊、鸭、小鼠的红细胞;Gray株能凝集兔、鸡、鹤鹑的红细胞,不能凝集人O型以及猪、羊、鸭、麻雀、小鼠的红细胞;而经家兔A型魏氏梭菌培养液处理的T株和未经处理的6株病毒对人O型以及8种动物的红细胞都没有凝集性。试验还证明,M_(41)株和H_(120)株对人O型及8种动物的血凝活性水平有差异。     

马病毒性动脉炎血凝及血凝抑制试验研究与应用

在RK-13细胞上培的马动脉炎病毒在4℃、室温和37℃条件下，用各种动物的红细胞进行血凝试验，证实病毒在不同温度下均可凝集小鼠和鸡的红细胞，但不能凝集牛、绵羊、山羊、马、猪、豚鼠、仓鼠、兔及鹅红细胞，病毒用吐温-80和乙醚处理后，血凝活力会显著增强，其血凝滴度比未经处理的病毒高4-8倍，且血凝像更加清晰，最适处理条件是病毒在冰、浴状态下用终浓度0.06%-0.125%(V/V)二温-80振荡处理15min-60min，再加50%（V/V）乙醚振荡作用5min-15min。用EAV免疫SPF豚鼠，4周后采血做HI和NT试验，显示HI抗体和NT抗体产物成正相关，对550份来自新西兰、吉尔吉斯、内蒙古、新疆的马血清做EAV的抗体检测，比较两个试验，二者符合率为97.8%，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关，但抗体效价略低于后者。     

血凝与血凝抑制试验4单位病毒抗原配置与标定

为了解决基层兽医实验室检测人员在血凝与血凝抑制（HA和HI）试验中4单位病毒抗原的配置和标定问题的困扰，本试验对GB/T 18936-2020《高致病性禽流感诊断技术》中规定的4单位病毒抗原的配置和标定方法进行了探讨，试验结果表明，通过标定调整的4单位病毒抗原准确性高，从而减少血凝抑制实验的误差。     

鹅类新城疫病毒的血凝特性研究

对鹅类新城疫病毒的血凝特性研究表明，该病毒能凝集禽类、两栖类和某些哺乳动物的红细胞，不凝集驴红细胞首次从病科分离的鸭胚毒不凝集多种动物的红细胞，但经数次传代后，对红细胞的凝集价可达２＾４，该病毒与鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的血凝试验无明显差别。本病毒为快解脱型，于５６℃４５分钟失去血凝活性，与ＮＤＶ有相近的血凝抗原。     

浅析影响血凝和血凝抑制试验的因素

血凝和血凝抑制试验是化验室中进行动物疫病诊断和免疫监测最常用的试验方法之一，如禽流感、口蹄疫等疫病的化验室诊断或免疫监测在基层多使用这种试验方法。今年在我国其它省市发生多起禽流感等重大动物疫病威胁我省我市的情况下，省、市、县等各级畜牧兽医部门都对禽流感进行了大量的化验室监测，运用和准确掌握血凝和血凝抑制试验对禽流感等重大动物疫病的诊断和免疫监测就显得尤为重要。但血凝和血凝抑制试验方法在操作中常有较多的影响因素，容易造成试验结果偏差，甚至误判。现将这种实验方法操作中影响因素浅析如下。     

浅谈影响血凝和血凝抑制试验结果的因素

血凝和血凝抑制试验是兽医实验室常用的检测方法之一。该方法具有经济、快速、可靠等多种优点，但在实际操作过程中常受多种因素影响，容易造成偏差，甚至误判。本文以禽流感的血凝和血凝抑制试验操作为例，将影响试验结果的几个主要因素进行汇总、分析，以供大家参考。     

中山病毒的血凝和血凝抑制试验

中山（Chuzan)病毒能凝集包括牛在内多种动物的红细胞，对牛红细胞的血浆（HA）活性依赖于NaCl克分子浓度，当该浓度为0．6M时最强，但与PH和温度无关，从2头母牛和库蒙中分离到2株中山病毒，其HA抗原性难以区分，所有感染该病毒的牛的血凝抑制HI抗体 价都升高，其变化与中和试验（NT）抗体效价相似，HI和NT抗体的相关性很高，抗体可保持1年以上，因此，HA试验可代替NT试验用于检测牛的中山病毒感染。     

影响血凝试验结果的主要因素

血凝和血凝抑制试验是新城疫、禽流感等疾病的诊断和研究工作中普遍应用的方法。某些病毒（如禽流感病毒和新城疫病毒）能凝集禽类的红细胞,这个现象称为病毒的血凝,可以用来检测样品中病毒的有无和含量的多少,并排特异性反应。因此,血凝和血凝抑制试验可用于鉴定病毒,流行病学调查,检测血清中抗体效价．动物群体疫情的监测等。     

鸡产蛋下降综合症病毒的血凝特性测定

本试验旨在探讨ＥＤＳ病毒血凝反应的最佳反应条件,观察病毒对各种动物红细胞的凝集谱,测定各种因素对病毒血凝素的影响,结果表明,血凝反应宜采用１％的鸡红血球,稀释液用ｐＨ７的生理盐水,室温作用３５ｍｉｎ（分钟）后观察表明,该病毒能凝集鸡,鸭,鹅红细胞,而不能凝集哺乳动物红细胞,耐热,５６℃１ｈ不影响其血凝性,对胰酶和浓度大于０．４％的甲醛敏感;反复冻融８次对血凝效价无影响。     

血凝抑制试验的影响因素

血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面，在基层工作中微量血凝抑制试验（HI）最常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测。尽管此法操作简便、快速、准确、实用，但在实践中也常常由于某些因素的影响，从而使试验结果不精确，有时甚至无法判定结果。下面笔者就试验中遇到的问题及采取的解决方法总结如下，希望与大家共同探讨。     

Lyophilization of Mycoplasma synoviae hemagglutination antigen

Two hemagglutination (HA) antigens produced from Mycoplasma synoviae isolates WVU-1853m and FMT grown in Frey's mycoplasma broth were lyophilized for HA preservation. Some increase in the HA titer occurred following lyophilization.     

Indirect hemagglutination test in equine infectious anemia.

An indirect hemagglutination was developed for the diagnosis of equine infectious anemia using sheep red blood cells coated with group specific virus antigen which had been highly purified by affinity chromatography. The presence of indirect hemagglutination antibodies was demonstrated in horses with equine infectious anemia since the cells were specifically agglutinated by all the serum samples obtained from experimentally infected horses. Antibodies appeared within 35 days after inoculation, and development of which coincided well with that of precipitating and complement fixing antibodies. Titer of indirect hemagglutination antibodies were ten to 320 times greater than those of precipitating antibodies. Test results could be read more clearly by the indirect hemagglutination test especially in weakly positive cases. Ninety-six samples from suspected field cases collected from every region of Japan which were positive on the immunodiffusion test were also positive on indirect hemagglutination test. Serum samples from 420 horses in one race track were examined by both the indirect hemagglutination and immunodiffusion tests to determine the reliability of the indirect hemagglutination test for diagnosis of equine infectious anemia. The same result was obtained on both tests. Based on this evidence, the indirect hemagglutination test can be employed as a very sensitive serological test for the diagnosis of equine infectious anemia.