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相似文献
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1.
鸭瘟病毒属疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科,病毒粒子呈球形,有囊膜的线状双股DNA,与蛋白缠绕形成病毒核心,大小约为150 kb,两端为末端重复序列,中间有内部重复序列.衣壳为对称的二十面体,外观呈六角形,它由162个相互连接呈放射状排列且有中空轴孔的壳粒组成.核衣壳外为外膜,其绕以囊膜形成成熟的病毒粒子.囊膜蛋白为病毒的主要保护性抗原,介导病毒进入细胞,促进病毒的成熟与释放.文中对病毒形态结构、蛋白特性等方面进行论述,以期为更清楚地认识该病毒的特性提供参考资料.  相似文献   

2.
鸭2型疱疹病毒的分子生物学依据   总被引:3,自引:0,他引:3  
鸭2型疱疹病毒,是一种可侵害番鸭、半番鸭等不同品种鸭的疱疹病毒科新成员,经生物学特性测定、血清学试验及致病性试验表明该病毒不同于鸭瘟病毒。采用SDS-PAGE分析表明该病毒的结构蛋白带有14条,主要结构蛋白带有7条,其分子量分别为310、163、95、79、69、39、15KD,不同于鸭瘟病毒。依据鸭瘟病毒UL6基因的序列,设计了一对引物,经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳表明只有鸭瘟病毒核酸提取物可扩增出大约420bp的DNA片段,而鸭2型疱疹病毒核酸提取物、鸡传染性喉气管炎病毒核酸提取物和正常细胞培养物均未扩增出目的基因片段,可见鸭2型疱疹病毒与鸭瘟病毒在DNA分子水平上也存在差异。本研究揭示了该病毒与鸭瘟病毒在结构蛋白和核酸水平上的差异,进一步表明该病毒不同于鸭瘟病毒,为该病毒的确切分类提供了分子生物学依据。  相似文献   

3.
鸭瘟的防治     
鸭瘟又名鸭病毒性肠炎,是鸭、鹅、雁的一种急性败血性传染病.用疫苗预防能取得较好的效果,但近几年由于一些养殖户麻痹大意,不注重免疫预防,鸭瘟又时有发生.鸭感染发病后,表现为体温升高,脚软,下痢,流泪和部分病鸭头颈部肿大,食道粘膜有小出血点,并有黄褐色假膜覆盖或溃疡,泄殖腔粘膜充血、出血、水肿和坏死. 1病原 鸭瘟的病原是鸭瘟病毒属于疱疹病毒科疱疹病毒属中的滤过性的病毒.病毒粒子呈球形,直径为120~ 180nm,有囊膜,病毒核酸型为DNA.病毒在病鸭体内分散于各种内脏器官、血液、分泌物和排泄物中,其中以肝、肺、脑含毒量最高.本病毒对禽类和哺乳动物的红细胞没有凝集现象,毒株间在毒力上有差异,但免疫原性相似.  相似文献   

4.
一种新型鸭瘟病原的分离鉴定及其特性   总被引:2,自引:0,他引:2  
从2000年起.山东省的潍坊、临朐、昌乐、昌邑、沂源等饲养肉鸭集中的地区发生一种同鸭瘟症状、剖检变化相似的疾病.但该病主要侵害1月龄以下的雏鸭.成年鸭发病率较低。从自然感染该病典型病死鸭脏器中获得1株病毒,病毒粒子直径80~200nm,呈圆形.有囊膜。进一步试验鉴定,该病毒核酸类型为DNA,ELD50为10^-3.46/0.2mL,对樱桃谷鸭胚、番鸭胚、麻鸭胚及SPF鸡胚的致死率分别为100%、90%、20%和0%。该病毒对氯仿、乙醚、酸碱处理敏感,56℃ 30min能使病毒灭活,该病毒无血凝活性.不能凝集“O”型人、鸡、鸭、鹅、猪、小鼠、豚鼠、绵羊等的红细胞。血清学试验表明,该病毒与鸭肝炎病毒阳性血清、雏番鸭细小病毒阳性血清、小鹅瘟阳性血清之间无中和作用,而能部分中和鸭瘟病毒阳性血清,表明该分离株与传统鸭瘟病毒呈部分相关性。初步确定该病毒为疱疹病毒属疱疹病毒科成员。鉴于该病用传统的鸭瘟疫苗不能预防.故现暂定名为“新型鸭瘟”。  相似文献   

5.
四川省鸭瘟病原的分离鉴定   总被引:8,自引:0,他引:8  
用9~10日龄鸭胚和血清交叉中和试验从四川省七个疑似鸭瘟发病片区分离鉴定了七株鸭瘟病毒。经测定,这七个毒株与鸭瘟标准强毒AV1221F16代的血清型、抗原性一致,没有血凝特性,对氯仿敏感,属于DNA病毒;鸭胚半数致死量DELD50为10^-4.59~10^-5.92/0.2mL;本动物回归使四川麻鸭在3~7天死亡;电镜下观察成熟病毒粒子呈球形成近似球形,带有囊膜,直径150~160nm,具有疱疹病毒的典型形态结构。  相似文献   

6.
疱疹病毒是一类具有相同形态和较大囊膜的双链DNA病毒,它不仅能引起原发性感染,还能引起潜伏性感染和复发性感染.此外,某些疱疹病毒是哺乳动物和禽类等动物肿瘤的病原因子,因此防制此病毒病不容忽视.疫苗的免疫接种是预防、控制该病毒病的主要手段.文章在简单介绍动物疱疹病毒常规疫苗的基础上对动物疱疹病毒基因工程疫苗进行了综述,并对动物疱疹病毒基因工程疫苗今后的发展方向进行了总结,以期为动物疱疹病毒基因工程疫苗的深入研究提供借鉴.  相似文献   

7.
鸭瘟病毒的TK基因是非常保守的毒力基因,编码胸苷激酶,参与病毒DNA的合成。同时又是病毒复制的非必需基因,缺失TK基因不影响鸭瘟病毒的增殖,因而建立在TK基因缺失基础上的鸭瘟缺失疫苗或标记疫苗,或活载体疫苗成为了当前研究的重点。本文对国内有关鸭瘟病毒TK基因的研究及应用进行了综述。  相似文献   

8.
PCR检测鸭瘟病毒的研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
根据鸭瘟病毒DNA聚合酶基因序列,设计、合成了1对引物,以1株鸭瘟病毒疫苗株DNA为模板,进行:PCR扩增,扩增出预期563bp的目的DNA片段。将扩增出的DNA片段克隆到pMDl8—T载体,经Amp/IPTG/X-gal平板筛选,HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定,获得阳性重组质粒。对重组质粒进行序列测定,与参考序列比较,二者同源性为99.3%。小鹩瘟病毒、鸭肝炎病毒、鹅副黏病毒:PCR扩增均为阴性。用此方法检测人工感染和自然感染鸭瘟的组织(脑、肝、脾),均能检测到鸭瘟病毒DNA。PCR检测鸭瘟病毒具有高度的特异性、敏感性,能够用于鸭瘟急性及亚临床感染的检测与诊断。  相似文献   

9.
为了快速、准确诊断鸭瘟病毒,根据Gen Bank中登录的鸭瘟病毒基因(UL51)序列,设计合成1对特异性引物,以鸭瘟疫苗株病毒基因组DNA为模板进行PCR扩增;优化PCR扩增程序中的延伸时间、退火温度、循环次数,并对方法的敏感性和特异性进行验证。结果表明:PCR方法经优化后可扩增得到916 bp的目的条带,同预期相符;该方法的最低检出浓度为1.041μg/m L,对其他7种常见鸭易感性病原体的检测结果均为阴性。说明该诊断方法的特异性好、灵敏度高,同时操作快速、简单,可应用于实验室快速诊断鸭瘟病毒。  相似文献   

10.
SYBR Green Ⅰ实时定量PCR快速检测鸭瘟病毒的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
根据GenBank中鸭瘟病毒(DPV)UL6和UL7基因的保守序列,设计了一对特异性引物,扩增位于UL6和UL7基因第891~991位长度为101bp片断。以DPV标准强毒株DNA为模板,建立了SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测鸭瘟病毒的方法,用该方法检测鸭瘟标准强毒、疫苗毒及野毒株均为阳性,检测其他受试的非鸭瘟病毒DNA均为阴性,对鸭瘟强毒和疫苗毒人工感染鸭胚尿囊液的检出率均为100%,对6个临床送检样本的检出率为6/6,与病毒分离鉴定结果一致;最小检出量为1.57×104拷贝/ul。  相似文献   

11.
为了建立重组鸭瘟病毒技术,构建了鸭瘟病毒转移质粒。在对鸭瘟强毒和弱毒株TK基因进行测序分析后,将鸭瘟病毒TK-UL24DNA片段克隆于pUC18载体中,构建了质粒pTK;将PCR扩增的GFP真核表达盒插入pTK质粒的TK基因内部,获得转移载体质粒pTK-GFP。鸭瘟病毒TK-UL24测序分析表明鸭瘟强、弱毒株TK基因序列完全相同;转移载体携带Pcmv-GFP-SV40pA表达盒,测序验证其序列与源序列一致。pTK-GFP在脂质体介导下,转染鸭胚成纤维细胞和鸭肾细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。质粒转染细胞后,绿色荧光蛋白得到了有效的表达,为进一步开展重组鸭瘟病毒的研究和构建具有遗传标记的鸭瘟疫苗奠定了基础。  相似文献   

12.
Yang FL  Jia WX  Yue H  Luo W  Chen X  Xie Y  Zen W  Yang WQ 《Avian diseases》2005,49(3):397-400
Duck enteritis virus (DEV) is a herpesvirus that causes an acute, contagious, and fatal disease. In the present article, we introduce a quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) assay for DEV DNA using TaqMan technology and a two-step protocol. It was confirmed to be rapid, sensitive, and specific for DEV detection. The primers and probe were designed and directed to the DNA polymerase gene of DEV. The method will provide a valuable tool for rapid laboratory diagnosis of DEV infection. By virtue of its high-throughput format and its ability to accurately quantify the viral DNA, the method may be useful for large epidemiological surveys and clarification of pathogenesis, such as latency and reactivation of the virus.  相似文献   

13.
The UL49.5 gene of most herpesviruses is conserved and encodes glycoprotein N. However, the UL49.5 protein of duck enteritis virus (DEV) (pUL49.5) has not been reported. In the current study, the DEV pUL49.5 gene was first subjected to molecular characterization. To verify the predicted intracellular localization of gene expression, the recombinant plasmid pEGFP-C1/pUL49.5 was constructed and used to transfect duck embryo fibroblasts. Next, the recombinant plasmid pDsRed1-N1/glycoprotein M (gM) was produced and used for co-transfection with the pEGFP-C1/pUL49.5 plasmid to determine whether DEV pUL49.5 and gM (a conserved protein in herpesviruses) colocalize. DEV pUL49.5 was thought to be an envelope glycoprotein with a signal peptide and two transmembrane domains. This protein was also predicted to localize in the cytoplasm and endoplasmic reticulum with a probability of 66.7%. Images taken by a fluorescence microscope at different time points revealed that the DEV pUL49.5 and gM proteins were both expressed in the cytoplasm. Overlap of the two different fluorescence signals appeared 12 h after transfection and continued to persist until the end of the experiment. These data indicate a possible interaction between DEV pUL49.5 and gM.  相似文献   

14.
实时荧光定量PCR快速检测鸭病毒性肠炎标准方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据GenBank(登录号:EF417996)中鸭病毒性肠炎病毒U31基因的序列,设计了1对特异性引物及TaqMan探针,扩增片段长度为76 bp.以鸭病毒性肠炎弱毒疫苗株DNA为阳性标准品模板,建立了实时荧光定量PCR检测鸭病毒性肠炎病毒的方法.该方法能在鸭病毒性肠炎病毒DNA样本中检出荧光信号,定量范围为:2.1×109~2.1×100个拷贝数,最小检出量为2.1×100个拷贝;用该方法对人工感染试验的4只鸭组织器官、粪便、血液等样品重复测定3次,病毒模板DNA的检出率为100%,对鸭正常组织、巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门菌和鸭病毒性肝炎、鹅源禽流感H5毒株、新城疫、小鹅瘟病毒等DNA检测不出现特异性荧光信号.经过重复性和实际临床样本检验证实,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过4 h,不仅实现了对鸭病毒性肠炎的快速诊断,也实现了对该病毒DNA由定性到定量的检测.  相似文献   

15.
鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus, DEV),又称为鸭瘟病毒,是一种只感染雁形目禽类的疱疹病毒。DEV具有基因组大、非必需基因多、能插入外源基因的容量大、遗传稳定等优点,其庞大而复杂的基因组为外源基因提供了诸多可插入位点,以DEV为载体,成功表达了禽流感病毒HA蛋白[1]、鸭病毒性肝炎病毒VP0蛋白[2]、鸭坦布苏病毒E基因[3]以及鹅细小病毒VP2蛋白[4]。构建重组DEV的重要一步是将报告基因插入到基因组中,目前常用的报告基因有绿色荧光蛋白(GFP)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、红色荧光蛋白(RFP)以及LacZ报告基团。本研究用RFP报告基团插入DEV UL2基因中,获得表达红色荧光的重组病毒,一步生长曲线表明,RFP对DEV的生长无影响;连续传代12代,RFP能够稳定表达,为DEV载体研究奠定基础。  相似文献   

16.
Identification and characterization of duck enteritis virus dUTPase gene   总被引:3,自引:0,他引:3  
Zhao LC  Cheng AC  Wang MS  Yuan GP  Jia RY  Zhou DC  Qi XF  Ge H  Sun T 《Avian diseases》2008,52(2):324-331
Deoxyuridine triphosphatase (dUTPase) is a ubiquitous and important enzyme that hydrolyzes dUTP to dUMP. Many viruses encode virus-specific dUTPase, which plays an essential role in maintaining the integrity of the viral DNA both by reducing the dUTP levels and by providing the substrate for the thymidylate synthase. A 1344-bp gene of duck enteritis virus (DEV) homologous to herpesviral dUTPase was first reported in this paper. The gene encodes a protein of 477 amino acids, with a predicted molecular mass of 49.7 kDa. Multiple sequence alignment suggested that DEV dUTPase was quite similar to other identified herpesviral dUTPase and functioned as a homotrimer. The five conserved motifs of DEV dUTPase with 3-1-2-4-5 arrangement have been recognized, and the phylogenetic analysis showed that DEV dUTPase was genetically close to the avian herpesvirus. Furthermore, RNA dot blot, western blot, and immunofluorescence analysis indicated that the enzyme was expressed at early and late stages after infection. Immunofluorescence also confirmed that DEV dUTPase localized in the cytoplasm of DEV-infected duck embryo fibroblasts as early as 4 hr postinfection (hpi). Later, the enzyme transferred from cytoplasm to nucleus at 8 hpi, and then reached its expression peak at 12 hpi, both in the cytoplasm and nucleus. The results suggested that the DEV dUTPase gene might be an early viral gene in DEV vitro infection and contribute to ensuring the fidelity of genome replication.  相似文献   

17.
甲型疱疹病毒亚科的疱疹病毒宿主广泛,能感染哺乳类、两栖类和禽类,主要侵害宿主的皮肤、黏膜和神经组织,病毒还会在宿主神经组织潜伏感染,一经感染,难以清除。gC是甲型疱疹病毒亚科的病毒囊膜糖蛋白之一,在病毒感染复制过程中发挥了重要作用。gC与细胞上受体结合帮助病毒吸附至宿主细胞表面、介导低pH条件下病毒入侵上皮细胞、影响病毒基因组的复制。此外,gC帮助病毒逃避补体和抗体的中和,促进病毒的吸附入侵。本文就gC影响病毒感染复制的相关功能进行综述,旨在为研究gC和深入了解甲型疱疹病毒亚科病毒的生命周期,以及gC亚单位疫苗和mRNA疫苗的研究提供参考。  相似文献   

18.
Latency sites and reactivation of duck enteritis virus   总被引:16,自引:0,他引:16  
Shawky S  Schat KA 《Avian diseases》2002,46(2):308-313
Duck virus enteritis (DVE) is a contagious disease caused by herpesvirus in waterfowl populations. Recovered birds become carriers and shed the virus periodically. Reactivation of latent duck enteritis virus (DEV) has been implicated in outbreaks of DVE in domestic and migrating waterfowl populations. In this study, the sites for virus latency were determined in white Pekin ducks infected with the DEV-97 strain. At 3 wk postinfection, infectious virus was not detectable in tissues or cloacal swabs (CSs). At 7 and 9 weeks postinfection, the viral DNA was detected by polymerase chain reaction in the trigeminal ganglia (TG), suggesting that the virus is latent. Viral DNA was detected in the peripheral blood lymphocytes (PBL), spleen, thymus, bursa, and CSs only after in vitro cocultivation. In vivo virus reactivation was demonstrated when dexamethasone or a combination of dexamethasone and cyclophosphamide was inoculated in latently infected ducks. The reactivation of DEV occurred without any clinical evidence of the disease, but the virus was detected in PBL and CSs. We conclude from this study that DEV establishes latency in TG and lymphoid tissues including PBL.  相似文献   

19.
从感染驴白细胞的马传贫驴白细胞弱毒疫苗株前病毒DNA中克隆了编码跨膜蛋白主要免疫决定区(TMIR)的基因,并在大肠杆菌中进行了表达。所表达的融合蛋白有一部分是可溶的,其氨基端带有6个组氨酸的标签,因此可以用固定化金属离子亲和层析法在非变性条件下进行纯化。在间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验中,重组的TMIR蛋白可与马传贫阳性血清样品发生反应,而与健康马血清无任何反应。这表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性,可用于马传贫弱毒疫苗株在体内外复制、接种马体内免疫应答及马传贫诊断的研究。  相似文献   

20.
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