龙岩市猪流行性乙型脑炎的流行病学调查

为了解福建省龙岩市猪乙型脑炎病毒(JEV)的隐性感染情况和使用疫苗后的血清抗体水平,采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对龙岩市2011—2014年规模化猪场和农村散养户共858份猪血清样本进行了JEV的抗体水平检测,并对临床疑似猪乙型脑炎的41个病例进行了聚合酶链式反应(PCR)检测。结果表明:已免疫规模猪场和农村散养户JEV的血清抗体阳性率分别为72.17%和57.72%,规模场JEV的免疫合格率要好于散养户(P0.01);免疫猪群JEV的血清抗体阳性率(69.71%)与未免疫猪群JEV的血清抗体阳性率(68.89%)相比差异不显著(P0.05);2011—2014年检测规模猪场和农村散养户JEV血清抗体水平总体上差异不显著(P0.05);PCR检测41个疑似猪乙型脑炎病例,确诊阳性21份,阳性率为51.22%,其中农村散养户猪只的JEV核酸阳性率显著高于规模场(P0.01)。说明龙岩市JEV的免疫效果不理想,JEV感染仍较严重,应引起重视。     

某规模化猪场猪繁殖障碍性疫病ELISA及六重PCR的检测分析

为了解贵州省某规模化猪场6种繁殖障碍性疫病的感染状况,试验采用ELISA试剂盒对送检的血清样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)抗体水平的检测,同时对送检的组织病料进行六重PCR检测。结果表明:CSFV、PRRSV、PCV-2、JEV、PRV和PPV的抗体阳性率分别为93.2%、52.7%、49.4%、83.8%、87.3%和78.8%,其中PRRSV免疫效果较差;另外,该猪场未免疫PCV-2疫苗,但是其抗体阳性率相当高,血清学检测结果显示,该猪场很可能存在PRRSV和PCV-2感染;送检的组织病料经六重PCR检测结果显示,该猪场存在PRRSV和PCV-2野毒感染。说明该猪场应加强猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病的预防工作。     

某规模化猪场主要猪繁殖障碍性传染病抗体检测及分析

为了解某规模化猪场猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)的抗体水平以及猪伪狂犬病野毒感染情况,研究应用ELISA检测技术对该场307份血清进行了CSFV、PRRSV抗体检测,63份血清进行了PRV-gB、PRV-gE蛋白抗体检测,猪群总体CSFV抗体阳性率为81.11%;PRRSV抗体阳性率为90.23%;PRV-gB蛋白抗体阳性率为95.24%;PRV-gE蛋白抗体阳性率为69.84%,并对不同类别猪群的抗体水平做出具体分析。该结果为了解该猪场3种常见传染病的整体免疫水平,进一步制定合理的免疫程序和防治措施提供参考。     

广西某地区猪伪狂犬病血清学调查

采用乳胶凝集试验对广西某地区的68个养猪场和10个自然村40个散养的1 307头免疫和非免疫猪的血清进行伪狂犬病(PR)抗体检测,结果共有739头份血清抗体阳性,阳性率为56.54%,其中伪狂犬病疫苗免疫猪和非免疫猪的血清抗体阳性率分别为66.73%和18.47%.未免疫的规模猪场和散养户的血清抗体阳性率分别为21.43%和16%.结果表明,部分免疫猪的PRV抗体水平较低,应及时进行强化免疫;部分未免疫猪的血清抗体呈阳性,存在PRV感染现象,而且规模猪场感染程度比散养户严重,应及时采取必要的防控措施.     

吉林地区规模化猪场不同猪群繁殖与呼吸综合征的血清学调查

本试验应用ELISA法对吉林地区8个PRRS未免疫猪场和9个PRRS免疫猪场的后备母猪、生产母猪和5～10周龄的断奶仔猪三个猪群进行了PRRSV抗体检测。结果表明:吉林地区8个PRRS未免疫猪场均受到PRRSV感染,猪场抗体阳性率为100%,猪群抗体阳性率在50%～75%之间,平均阳性率为62.26%;吉林地区9个PRRS免疫猪场猪群PRRSV抗体阳性率在70%～100%之间,平均阳性率为87.78%。PRRS未免疫猪场与PRRS免疫猪场猪群抗体平均阳性率相比,差异极显著(P<0.01)。     

吉林地区规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的血清学检测

本试验应用ELISA法对吉林地区8个猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)未免疫猪场和9个PRRS免疫猪场的后备母猪、生产母猪和5~10周龄的断奶仔猪3个猪群进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体检测,结果表明:吉林地区8个PRRS未免疫猪场均受有PRRSV感染,猪场抗体阳性率为100%,猪群抗体阳性率在50%~75%之间,平均阳性率为62.26%;吉林地区9个PRRS免疫猪场猪群PRRSV抗体阳性率在70%~100.00%之间,平均阳性率为87.78%。PRRS未免疫猪场与PRRS免疫猪场猪群抗体平均阳性率相比,差异极显著(P<0.01)。     

贵阳市猪传染性胸膜肺炎的血清学凋查

采用间接血凝试验对2007年和2008年贵阳市免疫与非免疫、不同饲养规模以及不同生产阶段的猪群进行猪传染性胸膜肺炎(PCP)血清抗体检测.结果:免疫猪群PCP血清抗体阳性率为63.6%和78.5%,非免疫猪群为50.3%和38.0%;在非免疫猪群中,规模养猪场的PCP阳性血清检出率,为60.2%和52.6%,农村散养户为25.0%和12.5%;在不同生产阶段非免疫猪群中,育肥猪群PCP血清抗体阳性率为62.2%和47.4%,断奶仔猪群,为30.3%和23.5%.调查结果表明,贵阳市不同猪群中已普遍存在猪传染性胸膜肺炎感染.     

某规模化猪场主要疫病免疫抗体水平的评估与分析

为了评估某规模化猪场主要疫病免疫效果,并进一步优化免疫程序,采用商品化的抗体检测试剂盒对猪场的母猪群、公猪群及各年龄段的商品猪群进行了猪伪狂犬病毒(PRV)gB、猪伪狂犬病毒(PRV)gI、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪O型口蹄疫病毒(FMDV)的抗体检测,对抗体水平与猪群状况进行统计分析。结果表明:PRV gB、PRV gI抗体阳性率分别为98.04%和0,说明该猪场伪狂犬病(PR)防控效果较好,未检出野毒感染抗体;PRRSV抗体阳性率为67.97%,整体抗体水平不高;SCFV和FMDV总体抗体阳性率分别为76.47%和84.97%,虽然种猪群的抗体阳性率较高,但仔猪、保育猪和育肥猪抗体阳性率相对较低,应该加强免疫。     

甘肃省部分规模场猪PCV-2抗体检测与分析

[方法]采用间接ELISA方法,对采自21个规模养猪场的629份血清,进行PCV-2抗体检测。[结果]8个PCV-2免疫场抗体阳性率母猪为82.93%,生长猪为82.22%,育肥猪为86.21%;13个未免疫场中抗体阳性率为69.23%。猪群抗体阳性率依次为母猪69.79%,保育猪34.91%,肥育猪97.30%,仔猪16.67%。[结论]母猪、生长猪和育肥猪免疫抗体阳性率之间没有明显差异。未免疫场不同生长阶段的猪均存在较为普遍的感染,阳性率呈先下降后上升的趋势,其中以肥育猪群感染最为严重,仔猪感染率最低。不同生长阶段PCV-2感染抗体阳性率存在明显差异。     

安徽省部分规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征血清学调查

在安徽部分地区采集了14个猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)免疫猪场和13个非PRRS免疫猪场不同猪群血清样品743份,应用ELISA方法检测PRRSV抗体.结果显示,未免疫猪场PRRSV抗体平均阳性率为31.17%,猪场阳性率为76.92%;免疫PRRS猪场抗体平均阳性率为62.99%.通过SPSS3.0软件数据分析表明,PRRS免疫猪场与未免疫猪场PRRS抗体阳性率差异极显著(P<0.01),提示安徽省规模猪场存在PRRSV隐性感染.     

检测猪乙型脑炎病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用

以乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗株作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立了检测猪乙型脑炎病毒血清抗体的间接ELISA方法。应用该法检测从江苏、安徽、山东、浙江4省部分地区收集到的1089份血样,对华东地区猪乙型脑炎血清流行病学进行初步调查。结果JEV抗体阳性率为68.2%,其中,种猪JEV抗体阳性率为82.1%,商品猪JEV抗体阳性率为62.6%。从中随机抽取135份血样与国产商品化试剂盒进行比较,间接ELISA方法的特异性和敏感性分别为92%和96.4%,2种方法的符合率为95.6%;与NS1蛋白包被建立的ELISA比较,两者的符合率为97.7%;同时,本法的阳性检出率显著高于临床普遍使用的乳胶凝集试验结果。由此表明,本试验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,适于大规模猪乙型脑炎血清流行病学调查。     

规模化猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

运用ELISA、LAT和IHA对湖北省2006年度规模化猪场猪伪狂犬病(PR)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪细小病毒病(PP)、猪瘟(HC)、猪圆环病毒病(PCV-2)及弓形体病进行了血清学检测。分析调查结果发现PR、PRRS、JE、PP 、HC ５种疾病的免疫抗体平均阳性率分别为84.3%、78.3%、84.7%、58.0%、79.7%。非免PRRSV和PRV野毒的平均感染率分别为55.1%和17.7％,表明PRRSV感染情况比较严重。对58场次发病猪场的541份血清进行PRV、PRRSV、PCV-2混合感染情况的调查发现,规模化猪场中普遍存在二重或三重感染,从而使疾病更加复杂化,给防疫工作带来更大的困难。     

Detection and Analysis of Antibodies of Porcine Reproductive and Respiration Syndrome Virus and Porcine Circovirus Type 2 in Southern Regions of Henan Province

In order to investigate antibody levels of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and porcine circovirus type 2 (PCV2) in porcine serum, we randomly collected from different sizes of farms in southern regions of Henan province, these pigs had or had not been vaccinated with PRRS and PCVD vaccine. The antibody levels of PRRSV and PCV2 were detected by ELISA in this article. The results showed that average qualification rates of antibodies of PRRSV and PCV2 were 68.8% and 58.7% in vaccinated farms,respectively,the larger farm, the higher qualified rate, which 200 to 500 sow pigs farm was the highest (76.8% and 77.4%,respectively) and under 50 sow pigs farm was the lowest (48.3% and 44.2%, respectively), which sow pig was highest and finishing pig was lowest. The results showed that average positive rates of PRRSV and PCV2 antibodie were 55.6% and 65.3% in no vaccinated farm, respectively, which average positive rate of PRRSV antibody in 100 to 200 sow pigs farm was lowest (46.5%), under 50 sow pigs farm was highest (68.8%), and growing pig and finishing pig were both more than 71%, which average positive rate of PCV2 antibody, the larger farm, the lower positive rate, 200 to 500 sow pigs farm was 41.4%, 50 to 100 sow pigs farm and under 50 sow pigs farm were 78.6% and 78.9%,respectively, and female and male sow pigs were lowest (37.5% and 40.4%,respectively), and growing pig and finishing pig were higher (82.2% and 79.5%, respectively). This research reflected the situation and the rule of the antibody levels of PRRSV and PCV2, these pigs had or not been vaccinated with PRRS and PCVD vaccine, and provided theoretical bases and guidances for prevention and control of PRRS and PCVD in southern regions of Henan province.     

检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用

以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。     

Serological evidence for Japanese encephalitis and West Nile viruses in domestic animals of Nepal

A regional survey was conducted in Nepal for antibody to Japanese encephalitis virus (JEV) in domestic animals. Sera from pigs, and limited numbers of ducks and horses were collected from 16 districts in 2002-2003 and subjected to three serological tests. Of 270 porcine sera tested by C-ELISA, 55% were found positive for the presence of antibodies against Japanese encephalitis virus. Additional testing for IgM antibody to JEV revealed less than 2% of C-ELISA positive sera had evidence of recent JEV infection. Plaque reduction neutralisation tests (PRNT) using JEV, Murray Valley encephalitis (MVEV) and Kunjin (KUNV) viruses implicated JEV as the flavivirus associated with the observed antibody response in most sero-positive pigs. However, eight porcine sera with predominant neutralising antibody for KUNV (an Australasian subtype of West Nile Virus) provided evidence for the circulation of West Nile virus in Nepal.     

乙脑病毒非结构蛋白NS1的原核表达及重组蛋白间接ELISA方法的初步建立

克隆表达乙脑病毒非结构蛋白NS1,并以其作为包被抗原,建立间接ELISA诊断方法。用此方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)及猪圆环病毒(PCV)阳性血清各3份,以及33份健康非免疫仔猪血清和205份乙型脑炎灭活疫苗免疫的猪血清,评价NS1-ELISA方法的特异性。取54份乙脑病毒感染的猪血清进行NS1-ELISA检测,评价该方法的敏感性。NS1-ELISA检测的特异性为95%,敏感性达90.7%。与商品化试剂盒比较,其符合率达到96.0%。在重复性试验中,NS1-ELISA检测方法重复性较好。本试验为进一步研究不同感染时期NS1抗体水平的差异奠定基础。     

伪狂犬病gG-ELISA鉴别诊断方法的建立及其应用

利用gG基因表达产物建立了gG-酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴别诊断方法，以该方法检测100份猪血清，结果表明该方法可显著区分gG基因缺失疫苗免疫猪和野毒感染猪，且特异性强、敏感性高。临床应用表明，该方法结果与其它临床诊断结果符合率高。以该方法在部分使用gG基因缺失疫苗的猪场做流行病学调查，共检测842份血清，检出242份阳性，阳性率为28.74％。     

The Development and Application of the Latex Agglutination Test to Detect Serum Antibodies against Japanese Encephalitis Virus

The attenuated SA14-14-2 strain of Japanese encephalitis virus (JEV) was cultured in BHK-21 cells. The viral supernatant was purified and concentrated with PEG (MW 20 000). A suitable concentration of JEV antigen was used to sensitize latex to prepare the latex antigen. The specificity, sensitivity and stability of the antigen were assessed. A latex agglutination test (LAT) was developed for rapidly detecting antibody against JEV infection. The LAT and haemagglutination inhibition (HI) assay were compared by simultaneously testing 35 porcine serum samples from five farms. Ninety per cent (20/23) of the samples were seropositive by both assays. No significant difference was found between the two methods (p > 0.05). Furthermore, when 1613 porcine sera from 120 farms were tested by LAT, the number of positive sera was 652, while that of negative sera was 961, ranging from 20% to 50% positive throughout the year. These results indicate that LAT is an appropriate candidate method for epidemiological surveys for and diagnosis of Japanese encephalitis.     

2014-2018年广西6种猪主要病毒性繁殖障碍疫病流行病学调查

试验旨在了解广西猪主要病毒性繁殖障碍疫病的发生态势,为预防和控制此类疫病提供科学依据。采用RT-PCR/PCR方法对2014年3月至2018年2月采自广西的349份流产胎儿样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)及猪乙型脑炎病毒(JEV)6种主要病毒性繁殖障碍疫病病原的检测并分析其阳性检出率在不同年份、季节之间的差异及病原混合感染情况。结果显示,2014-2017年,6种病原的猪场阳性率从高到低依次为JEV(36.00%)、PRRSV(16.00%)、PCV2(9.00%)、PRV(7.00%)、PPV(6.00%)和CFSV(5.00%),样品阳性检出率从高到低依次为JEV(27.06%)、PRRSV(6.18%)、PRV(5.88%)、PCV2(3.82%)、CSFV(2.35%)和PPV(2.35%)。季节因素对6种病毒性繁殖障碍疫病的发生有一定影响:JEV在夏季、秋季检出率较高,春季、冬季检出率较低;PRRSV一年四季检出率均较高,且无明显差异;PCV2在春季检出率较高,其次是夏季和冬季,秋季检出率较低;PRV在春季、冬季检出率较高,夏季、秋季检出率均为0;PPV在夏季检出率较高,其次是春季和秋季,冬季检出率为0;CSFV在冬季检出率最高,其次是夏季,春季和秋季检出率均为0。流产胎儿以单一感染为主,6种病毒均存在不同程度单一感染情况,单一感染率JEV最高(23.82%)、PCV2最低(0.59%);混合感染以双重感染为主,其中以2016年双重感染情况较多,且感染组合多样;三重感染情况较少、仅在2016年送检样品中发现1例,未发现四重及四重以上感染情况。调查结果表明,2014-2017年,JEV均有较高的阳性检出率,已成为广西部分猪场母猪流产最主要病毒性病原。PRRSV和PRV仍是目前引起广西猪场母猪流产的主要病毒性病原。     

2020年新疆地区规模化猪场猪PCV2抗体检测与分析

为了解新疆地区2020年规模化猪场猪圆环病毒2型的免疫抗体水平,选择新疆地区6个规模化猪场,针对不同日龄段的猪采集血清样品333份,采用猪圆环病毒2型ELISA抗体检测方法进行抗体检测分析。结果发现,2020年新疆地区规模化猪场猪圆环病毒2型平均抗体阳性率为77.78%（259/333）,平均抗体阳性率符合国家标准。但各猪场免疫效果参差不齐,抗体阳性率最高的为A场,阳性率达100.00%;阳性率最低的为C场,仅48.78%,低于（70%）的国家标准。不同日龄段的猪抗体水平也存在一定的差异,抗体阳性率最高为种公猪,达96.30%;而保育阶段猪抗体水平最低,仅有47.92%,低于国家标准。