豫北地区猪源大肠杆菌耐药性及基因多态性分析

为了解豫北地区规模化养殖场猪源大肠杆菌的耐药性及基因多态性,对分离的21株猪源大肠杆菌进行药物敏感实验,采用PCR技术对其耐药基因进行检测,RAPD技术进行基因多态性分析。结果表明:豫北地区规模化养殖场分离的猪源性大肠杆菌菌株对常见16种抗生素存在不同情况的耐药性。其中对四环素、红霉素、麦迪霉素、阿莫西林、磺胺异恶唑、环丙沙星、新生霉素、复方新诺明、恩诺沙星、甲氧苄啶的耐药率均为100%,对庆大霉素、洛美沙星的耐药率为85%以上,对其他药物的耐药率相对较低;PCR检测得到8种耐药基因的条带;对菌株进行RAPD分析得到7种不同的基因型。大肠杆菌极易产生耐药性,耐药基因广泛存在于耐药菌株中,但耐药表型与耐药基因之间无绝对相关性。豫北地区猪源大肠杆菌感染多重耐药十分严重,严重影响了该地区猪源大肠杆菌病的诊治和预防。     

四川省部分地区大肠杆菌的耐药性监测

采用常规方法对87份采集于四川省部分地区规模化养猪场病料样品(51份),健康鸡(28份)和野生白鹭(8份)粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,并采用K irby-Bauer法对大肠杆菌分离株的26种抗菌药物耐药性进行检测。结果表明,分离鉴定的51株猪源大肠杆菌、28株鸡源大肠杆菌和8株白鹭源大肠杆菌均存在不同程度多重耐药性,3重及3重以上耐药菌株占总菌株数88.51%:其中对青霉素G(100%)、强力霉素(89.66%)、复方阿莫西林(85.20%)、四环素(82.76%)、头孢氨苄(63.22%)、头孢噻吩(52.87%),氨苄青霉素和复方新诺明(51.72%)的耐药性较强;8株野生白鹭大肠杆菌多重耐药性远低于猪源和鸡源大肠杆菌分离株多重耐药性,对受试喹诺酮类、复方新诺明等多种药物高度敏感。     

雏鸭大肠杆菌分离鉴定与药敏试验

为给鸭场治疗大肠杆菌病提供依据,通过对南宁周边某养殖场病死雏鸭肝脏采集,采集病料10份,分离鉴定出9株大肠杆菌。在分离出的9株大肠杆菌中,采用K-B法对23种药物进行药敏试验。分离鉴定结果表明:该养殖场存在较为严重的大肠杆菌感染,分离出的9株大肠杆菌均有致病性,44.4%菌株对小白鼠具有强毒力,33.3%菌株具有低毒力。药敏试验结果表明,9株大肠杆菌对23种抗生素均有不同程度的耐药,耐药性差异性很大,最为敏感的抗生素是头孢拉啶、头孢哌酮2种药物。     

鸭源大肠杆菌分离株药物敏感性测定

自永定肉鸭养殖场分离到17株大肠杆菌,对其进行了常用抗生素敏感性测定。结果显示所检测的25种抗生素中,无高敏药,中敏药物仅为阿米卡星、头孢类药物。由此表明鸭大肠杆菌分离菌株的耐药性在不断增强、耐药谱在拓宽。     

2019年湖南省部分地区鸡、鸭、猪源大肠杆菌耐药性调查

旨在调查2019年湖南省部分地区不同来源的大肠杆菌对抗生素的耐药水平,为养殖合理用药提供参考。从4个市畜禽养殖场采集猪、鸡和鸭粪便285份,使用麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝培养基对大肠杆菌筛选,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,采用微量肉汤稀释法检测16种抗生素对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。共分离出203株大肠杆菌(鸡源146株、鸭源20株和猪源37株),对四环素和氨苄西林耐药率最高,分别达到89.2%和84.7%;对头孢他啶、奥格门丁、黏菌素耐药率较低,分别为2.5%、2.0%和0.5%;所有菌株均对美罗培南敏感。抗3种及以上抗生素的菌株数目占比为87.7%,而仅5.42%的菌株对所有检测的抗生素敏感。另外,来源于减抗示范养殖场的大肠杆菌对大部分抗生素的耐药率,与来源于非减抗养殖场大肠杆菌相比未见显著差异。上述结果表明,湖南省动物源大肠杆菌的耐药水平仍处在较高水平,重视兽药使用管理并持续开展对大肠杆菌的耐药性监测十分必要。     

大肠杆菌耐药性及氟苯尼考耐药基因floR的研究

本实验对某地养殖场猪源和鸡源大肠杆菌的耐药性及氟苯尼考耐药基因flo R进行分析,旨在了解我国大肠杆菌的耐药现状,以降低对养殖业的危害,减少菌株耐药性的传播,为兽医临床用药及兽药管理提供科学依据,为新型抗菌药物的研制奠定理论基础。采用国标法分离鉴定大肠杆菌,肉汤微量稀释法进行药敏实验,PCR法检测氟苯尼考flo R基因,膜过滤法进行转化接合实验。结果表明:共分离大肠杆菌293株,分离率为73.3%,其中猪源157株,鸡源136株;大肠杆菌对磺胺类、四环素类和氨基糖苷类药物的耐药性相对严重,对氯霉素类、氟喹诺酮类和β-内酰胺类药物相对敏感;与欧盟EUCAST标准相比,该地区大肠杆菌的MIC分布出现明显右移现象;80%以上的大肠杆菌均为多重耐药菌株,以8重和9重耐药菌株为主;氟苯尼考耐药基因flo R携带率为61.2%,flo R基因可以在菌株间相互转移。样品采集地区养殖场大肠杆菌污染严重,耐药种类逐渐增多,多重耐药现象严重,质粒介导的耐药基因可以在菌株间相互转移。     

死亡仔猪脏器中致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从送检的死亡猪组织病料中分离到1株病原菌,经病原菌的分离、生化试验、动物致死试验、药物敏感性试验和PCR扩增及测序,对该菌株进行了鉴定。结果表明:该病原菌为致病性大肠杆菌;药敏试验表明在检测的17种抗生素中该菌株仅对阿奇霉素和克林霉素药物敏感;对强力霉素、多粘菌素B药物中敏;对杆菌肽、氯霉素和多粘附素E等耐药。说明该猪死亡前感染了耐药性较强的致病性大肠杆菌。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果,本研究对河南部分地区采集的样品(50份)进行分离鉴定、生化试验及致病性试验,对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测,将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验,并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示,采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性,且23株菌均为致病性大肠杆菌;通过耐药性检测,23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性,其中试验菌株对甘草耐药率最高(82.6%),其次为生地(78.2%),而对黄柏(17.3%)和白头翁(21.7%)耐药性较低,具有一定的敏感性;体外抑菌试验结果发现,中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果,其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性,还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果，本研究对河南部分地区采集的样品（50份）进行分离鉴定、生化试验及致病性试验，对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测，将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验，并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示，采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性，且23株菌均为致病性大肠杆菌；通过耐药性检测，23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性，其中试验菌株对甘草耐药率最高（82.6%），其次为生地（78.2%），而对黄柏（17.3%）和白头翁（21.7%）耐药性较低，具有一定的敏感性；体外抑菌试验结果发现，中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果，其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性，还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

长春地区猪源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了解吉林省长春地区猪源大肠杆菌的耐药情况,于2013年采集318份猪源样品,分离鉴定大肠杆菌275株。以氨苄西林、头孢噻肟等15种药物进行了药物敏感性实验,多重 PCR 方法进行系统进化分群。结果表明,大肠杆菌分离株对四环素、氨苄西林和磺胺甲基异恶唑耐药最严重（83.63%、52.72%、51.27%）,全部菌株对美洛培南、多粘菌素敏感,其中176 株菌表现为对3类以上抗生素的多重耐药（64.00%）。从仔猪腹泻样品分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗生素、喹诺酮类抗生素、四环素、氯霉素及磺胺甲基异恶唑的耐药率显著高于健康猪和猪肉样品分离株的耐药率。大肠杆菌分离株主要为 A 群和 B1群。研究获得了吉林长春地区猪源大肠杆菌耐药性的基本流行病学数据,为指导养殖业的临床用药及耐药性监测提供了依据。     

对规模化猪场大肠杆菌耐药性的调查

为了调查猪致病性大肠杆菌的耐药性，从重庆市荣昌和江津两地采集了220份仔猪黄白痢病料进行细菌分离和生化鉴定，结果分离到大肠杆菌201株，其中致病性大肠杆菌186株。对150株致病性大肠杆菌进行了16种抗生素敏感试验，发现分离菌株对16种药物有不同程度的耐药：青霉素G对其完全没有抑制作用，阿米卡星抑制作用最强（76％），其次为头孢唑肟（72％）。150株菌中，多数为8耐以上。占供试菌株的70．6％。因此，猪场应定期对大肠杆菌进行抗生素敏感性的监测，选择最有效的药物来控制仔猪腹泻性大肠杆菌病，或根据具体情况交替使用不同的抗生素，减少耐药性的发生。     

泉州地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定血清型检测与耐药性分析

为了解泉州地区猪源致病性大肠杆菌流行血清型分布及耐药性,无菌采集的患病仔猪肝脏、肛拭子和粪便等病料组织样品87份,通过细菌的分离鉴定得到了42株大肠杆菌,其中,30株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测30株猪源致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性。结果显示,30株猪源致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型中,定型的猪源致病性大肠杆菌分离株27株,定型率为90%(27/30),2株未鉴定出来,占分离菌菌株的64.3%(27/42),以O147和O141为该地区流行的优势血清型;30株猪源致病性大肠杆菌分离株对新霉素、环丙沙星、恩诺沙星等5种药物的耐药率在80.0%~100%之间,对克林霉素、多西环素、丁胺卡娜霉素等5种药物的耐药率在60.0%~73.3%之间;对其他的药物耐药率在33.3%~53.3%之间,且呈现多重耐药性。本研究为该地区的猪源致病性大肠杆菌病的防治提供了重要的参考价值。     

平邑地区猪源大肠杆菌敏感药物筛选试验

本研究采用纸片扩散法，检测从平邑7家生猪养殖场分离的21株大肠杆菌对庆大霉素、恩诺沙星、阿莫西林、氟苯尼考、多四环素、黏菌素6种抗生素的敏感性。结果显示，平邑7家生猪养殖场的21株猪源大肠杆菌对恩诺沙星的耐药率为14%，敏感率为57%；对庆大霉素的耐药率为14%，敏感率约为72%；对阿莫西林的耐药率为100%；对氟苯尼考的耐药率为71%，敏感率为0；对多四环素的耐药率为43%，敏感率为29%；对黏菌素的敏感率100%。不同生猪养殖场猪源大肠杆菌耐药性不同，个别养殖场猪源大肠杆菌耐药性很高，出现了多重耐药性（对5种抗生素耐药）。建议该养殖场根据药敏结果，采用精准用药和轮换用药方式来防治猪源型大肠杆菌疾病，避免抗生素乱用，进一步推进兽用抗菌药减量化使用和兽用抗菌药综合治理。     

江苏、山东部分地区禽致病性大肠杆菌流行病学调查

禽大肠杆菌病是造成家禽高发病率和死亡率的重要疾病,该病是由禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)感染引起的细菌性疾病。通过对2015~2016年分离自江苏和山东部分地区的173株禽大肠杆菌的血清型、致病性、耐药性等流行病学特征进行调查,结果表明:定型菌株135株,未定型菌株38株,定型率为78.03%;优势血清型有O78(21%)、O24(12%)、O1(10%),其余定型菌株涉及31种血清型;55个进行1日龄易感鸡致病性试验的分离株中,高致病性菌株39个,中度致病性菌株5个,低致病性菌株11个,其中80%分离株具有高中致病力;耐药性检测结果表明,APEC普遍存在耐药性,所有分离株对10种以上的抗生素耐药。调查结果为该地区禽大肠杆菌病的防控提供参考。     

淄博地区猪源产ESBL大肠杆菌的多重耐药分析

为了解淄博地区猪源产ESBL大肠杆菌耐药特点,本研究于2016年4月对淄博地区3个养猪场采集猪粪便棉拭子,分离猪源产ESBL大肠杆菌,14种抗生素药敏片进行药敏检测。共收集236份猪粪便棉拭子样本,通过产ESBL确证试验获得94株产ESBL大肠杆菌,占猪源大肠杆菌的39.8%。所有产ESBL大肠杆菌菌株耐药性较强且呈现多重耐药,对碳青霉烯类药物敏感率较高。猪源产ESBL大肠杆菌分离率高且耐药谱广,给临床中应用抗生素的治疗猪源大肠杆菌病带来很大的障碍。     

种公鸭精液中大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

本研究从莆田某蛋鸭养殖场无菌采集种公鸭精液进行细菌分离鉴定,并对其分离菌株进行了药敏试验和血清型鉴定。分离鉴定结果表明,分离鉴定了6株鸭大肠杆菌分离株;药敏试验结果表明,6株鸭大肠杆菌分离株对对22种抗生素的敏感程度存在一定的差异,而且存在着多重耐药性,对先锋V、头孢曲松、卡那霉索、壮观霉素、多粘菌素B等5种抗生素敏感;O血清型鉴定结果表明,6株鸭大肠杆菌分离株中4株属于O78血清型,2株属于O1血清型。     

雁源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对养殖场雁源大肠杆菌进行分离培养,开展耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对20种抗生素的敏感性。结果表明:雁源大肠杆菌各分离株对各抗生素的敏感性不同。对氨苄西林、四环素、氯霉素和复方新诺明的耐药率均在80%以上,对头孢他啶、阿米卡星和亚胺培南敏感率均在70%以上。     

鸡大肠杆菌区域性实时药敏动态检测

本试验采集了泰安及周边地区疑似大肠杆菌病、死鸡的肝脏、心脏等样品63份,按照不同时间段将其分成3组。经过细菌分离培养、染色镜检、生化试验鉴定证明均为致病性大肠杆菌。按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的判定标准,对分离得到的63株大肠杆菌对12种常用抗生素进行药敏试验,结果表明,63株病菌对常用抗生素表现出不同程度的耐药性,耐药范围较广,不同菌株间存有较大差异,但该地区大多数菌株对克林沙星、丁胺卡那霉素高敏,而磷霉素钠和头孢噻肟产生了广泛耐药性。不同时间段分离菌的耐药结果变化不大。     

湖南省多抗性猪源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性检测

笔者从湖南省不同地区采集病料并进行生化及形态学鉴定,共从46猪病原菌株中共分离出27株大肠杆菌。用32种临床常用抗菌药物对上述菌株进行耐药鉴定,结果表明:27株临床分离的猪源大肠杆菌菌株中无一敏感株,其中1株对32种抗生素全部耐药,大多数菌株呈不同程度的耐药,仅少量菌株对多粘菌素B敏感。标准质控菌株对所测试的抗生素均敏感。     

38株鸭源大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

本研究通过对山东某大型养殖场的病料采集,分离鉴定了38株鸭大肠杆菌。利用玻片凝集试验和试管凝集试验对分离菌进行了O血清型鉴定,用菌液涂布法对分离菌进行了药敏试验,结果表明,该养殖场存在较为严重的大肠杆菌感染,分离的38株大肠杆菌均有致病性,分属7种血清型,分别是Ｏ2、Ｏ21、Ｏ83、Ｏ119、Ｏ139、Ｏ73和Ｏ78,占分离菌株的86.84%;另有5株未能定型。药敏试验结果表明,38株鸭大肠杆菌对21种抗生素均有不同程度的耐药,并以多重耐药为主,耐药性差异较大,最为敏感的抗生素是磷霉素和阿米卡星2种药物。