不同方法提取卵黄抗体效果的比较

为了优化卵黄抗体提取工艺以及产业化生产提供技术参考,从众多方法中初步筛选了较为适宜的水稀释法、辛酸法、乙酸-乙酸钠法、酚沉淀法和海藻酸钠法,并比较了5种方法的提取工艺、生产成本、卵黄抗体提取量及其效价。试验结果表明,辛酸法的提取液体回收率最高,达到171％;辛酸法提取蛋白的浓度最高,为6．6mg／mL;辛酸法和海藻酸钠法提取卵黄抗体的凝集价最高,为1：128。综合各种因素考虑,辛酸法是提取卵黄抗体较为理想的方法。     

卵黄抗体三种提取方法的比较研究

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。     

鸡新城疫卵黄抗体提取方法筛选研究

卵黄抗体(IgY)是指禽类(鸡、鸭、鹅)卵黄中存在的抗体,有凝集细菌、中和病毒等功能,均一性好,对热、酸和碱稳定性好,产量高,成本低等利于生产、产生有效免疫反应所需抗原量小、免疫检测时有较高的敏感性、无副作用、性质稳定等优点,因此在动物疾病诊断、防治上具有重要作用。目前文献报道的卵黄抗体提取方法有多种,提取效果各不相同。本文通过对三种方法的比较,发现它们各有公有优缺点。     

卵黄抗体不同提取方法的比较

卵黄抗体(egg yolk antibodies,IgY)是指鸡、鸭、鹅等蛋禽卵黄中存在的抗体,也称卵黄免疫球蛋白(egg yolk immunoglobulins,IgY)[1].从含高效价抗体的禽蛋黄中提取、制备的IgY在人类和动物疾病的防治中具有特效作用.IgY具有均一性好,对热、酸和碱稳定性好等优点.蛋黄含有丰富的营养物质,是细菌生长的良好培养基,易使蛋黄抗体腐败变质.因此,精制蛋黄抗体的大规模工业化生产必须解决提取纯化这一关键难题.试验比较了4种成本低和提取率高的提取方法,以期得到理想的IgY提取方法,为今后的生产实践提供科学的依据.     

卵黄抗体的提取方法

自从 18 93年Klemperer首次报道鸡蛋中存在抗体以来 ,科学家们对各种抗原 (细菌、病毒等 )引起的产蛋鸡产生特异性抗体 ,并可被选择性转移到卵黄中进行了许多研究。结果发现蛋黄中抗体以IgG占优势 ,而IgM和IgA的含量很少。现已证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体的最方便、最廉价的来源。1　卵黄抗体的性质IgY的命名一直是一个有争议的问题。在 2 0世纪 6 0年代 ,Tenenhouse曾认为正常鸡IgG与哺乳动物IgA相似。但随着科学研究发展 ,Leslie等分析了鸡体内免疫球蛋白的成分。鸡卵黄免疫球蛋白G抗体是一种TS球蛋白 ,命名为IgY。目前…     

抗小鹅瘟卵黄抗体脱脂方法研究

通过对产蛋母鸡免疫接种小鹅瘟JS1株油乳荆灭活苗,从而获得含高效价小鹅瘟病毒抗体的鸡蛋.采用聚乙二醇6000和泊洛沙姆进行脱脂试验,并优化脱脂条件.结果表明,聚乙二醇6000和泊洛沙姆对鸡卵黄具有良好的脱脂作用,其中聚乙二醇6000价格低廉,更适合大规模工业化生产.     

蛋黄抗体三种不同提取方法的比较

利用氯仿、辛酸和苯酚三种溶剂采用不同提取方法,分别对经禽流感H5和H9亚型疫苗免疫的鸡蛋黄液进行YAb提取,并对提取的YAb用AIH5和AIH9抗原进行HI测定,结果显示：三种溶剂提取的YAbHI效价均低于原蛋黄液,HI抗体损耗率分别是氯仿法为26．30％～44．72％,辛酸法为5％-16．87％,苯酚法为66．02％。三者中辛酸法提取的抗体含量最高,其次是氯仿法,苯酚法最低。三种方法提取的YAb均为澄清透明,分别带有各提取试剂的味道。将提取液3mL～5mL肌注鸡只,均无不良反应,表现安全。提取液保存8个月,仍澄清透明,无菌污染。     

鸡传染性法氏囊高免卵黄IgY抗体不同提取方法的比较

本试验旨在提高鸡传染性法氏囊卵黄抗体防制鸡传染性法氏囊的效果,比较不同提纯方法对鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体效价的影响。制备高免蛋并测定其效价,在实验室通过直接离心法、酸化水提取法、氯仿提取法、聚乙二醇法4种方法分别对高免卵黄抗体提取及抗体效价检测。试验结果表明,自制卵黄抗体效价为1:64;直接离心法的抗体效价为1:128,酸化水提取法的抗体效价为1:16,氯仿提取法抗体效价为1:256,聚乙二醇法的抗体效价是1:32。试验结果显示,使用氯仿提取法后检测的抗体效价最高,是临床提取抗体的常用方法。     

3种处理方法检测禽流感卵黄HI抗体的比较

将同一份卵黄分别采用氯仿、8%枸橼酸钠和生理盐水处理,在相同条件下进行禽流感卵黄HI试验,并与其相对应的血清HI试验进行对比。结果发现氯仿处理法所测得的结果和相应血清差异最小,且重复性好,但繁锁、费时;枸橼酸钠法次之,但简便易行,费时少,更适合基层应用;生理盐水处理法所得结果误差较大,一般不宜采用。     

采用改良的水稀释法提取卵黄抗体的试验

以鼠伤寒沙门氏菌免疫产蛋鸡后，收集卵黄液，用水稀释法提取卵黄抗体(IgY)。实验中所用的水稀释法，即将释释倍数和稀释时的pH值均重新调整，且采取关键性的滤纸过滤，再盐析和柱层析，最后得到IgY的纯度为90％以上，表明改良的水稀释法可以较好的提纯卵黄抗体，避免了常规方法中除脂不彻底的弊端。     

卵黄抗体的特性及其在仔猪腹泻防治上的应用

仔猪腹泻是困扰养猪业的一大难题,早期断奶仔猪腹泻尤其严重.过去这一问题的解决通常是依赖抗生素或高免血清,但由于安全性和价格等因素影响了它们在养猪业的应用.卵黄抗体作为一种价格低廉、安全高效的新型兽药,在防治仔猪腹泻上展现出良好的应用前景.本文介绍了IgY的形成、分子结构、特点、吸收和转运以及IgY在防治仔猪腹泻上的应用.     

抗鸡白痢沙门氏菌病卵黄抗体粉饲料添加剂的研制

采用吉林市郊区数家鸡场分离鉴定的致病性鸡白痢沙门氏菌,经固体增菌培养纯化后甲醛灭活,制成油佐剂灭活抗原免疫健康蛋鸡;用平板凝集试验检测卵黄抗体效价,当抗体效价达到1:320倍时,收集免疫鸡蛋分离卵黄,减压低温干燥制成卵黄抗体细粉并进行效价测定和安全检测。最后将卵黄抗体细粉以不同比例加入雏鸡饲料,对试验雏鸡进行预防量饲喂后强毒菌攻毒试验、强毒菌攻毒后治疗量的饲喂试验及小区域雏鸡饲喂试验。结果表明,卵黄抗体粉预防添加量为3%和卵黄抗体治疗添加量为6%时,攻毒保护率、治愈率分别为77.50%和72.50%;饲料添加组较同期普通饲养组总发病率降低7个百分点,抗生素用量降低33%,增重率提高6%。     

猪流行性腹泻病毒及其卵黄抗体研究进展

猪流行性腹泻病毒是引起仔猪病毒性腹泻甚至死亡的关键诱因,而安全高效的抗猪流行性腹泻病毒卵黄抗体具有降低仔猪腹泻率、死亡率等优点已应用于生猪养殖。本文总结了近年来猪流行性腹泻病毒的致病机理及其卵黄抗体的制备与应用效果的研究进展,为卵黄抗体在防治猪流行性腹泻上的应用提供理论基础和技术指导。     

卵黄抗体和微生态制剂在仔猪生产中的应用

本文介绍了卵黄抗体、微生态制剂防制仔猪腹泻的作用机理和效果及二者在应用中存在的问题。     

绿头鸭卵黄硒含量与禽流感新城疫病毒抗体滴度关系探讨

绿头鸭(Anas platyrhynchos)是大庆龙凤湿地的优势物种,为研究绿头鸭卵黄硒含量与病毒抗体之间的相关关系,采用血凝抑制试验及原子荧光光谱法(AFS)检测105枚绿头鸭卵黄内硒含量及H1、H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)抗体。结果表明,卵黄硒含量为0.48μg/g±0.15μg/g;卵黄内H1、H5、H9亚型AIV和NDV抗体阳性率分别为:100%、59.05%、71.43%、68.57%;其评价抗体滴度分别为:6.17log2、2.89log2、3.34log2、4.22log2。经相关分析结果表明,卵黄内H1、H5、H9亚型AIV和NDV抗体滴度与卵黄硒含量的相关系数分别为:0.077、0.714、0.690、0.611。由此可见,龙凤湿地绿头鸭种群卵黄硒含量与相关病毒抗体之间呈明显的正相关,说明硒元素对动物机体抗病毒能力起到一定的增强作用。     

阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验

为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA(cELISA)抗体检测方法。通过对60份牛、羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率(PI)临界值为60%;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1颐128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验(SNT)检测结果(1颐64);批内和批间变异系数(CV)在0.54%~5.27%和0.3%~9.3%之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国IDVET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76%,可以替代进口同类产品。本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查。     

The effects of carotenoids in quail breeder diets on egg yolk pigmentation and breeder performance

The effects of supplementation of 10?mg/kg (i) apoester, (ii) canthaxanthin, (iii) 3% clover extract, (iv) paprika oleoresin and (v) aztec marigold extract pigments to a wheat-based non-pigmented feed on hatchery performance and egg yolk pigmentation in quail breeders were investigated. At six weeks of age a total of 432 Japanese quail breeders were randomly divided into 6 treatments, each of which was replicated 3 times, with 24 birds (18 female:6 male) per replicate. Hatchability was significantly better in the apoester treatment compared to the control, canthaxanthin, clover extract and paprika oleoresin treatments (p?p?>?.05). Total carotenoids concentration, YCF score, yellowness (b*) and redness (a*) of egg yolk were significantly higher in pigment-supplemented treatments compared to the control treatment (p?a*) were highly correlated in all treatments (0.94; p?相似文献   

鱼糜漂洗水中鱼蛋白的提取研究

以鱼糜漂洗液为原料,通过等电点沉淀法和凝聚剂沉淀法对漂洗水中蛋白质进行提取。其中的等电点沉淀法,用磷酸处理的结果优于乙酸,提取率高达83.33%;而分别用三氯化铁、氯化铝、明矾3种絮凝剂沉淀法其最高提取率只有79.86%。可见等电点沉淀法的提取率要普遍高于凝聚剂沉淀法,且适用于实际生产。     

Effect of chicken egg yolk antibody against adipose tissue plasma membranes on carcass composition and lipogenic hormones and enzymes in pigs

Chicken egg yolk antibody against pig adipose tissue plasma membranes (AIgY) was raised and used in the present experiment to evaluate the effect of dietary AIgY supplementation on pig growth and carcass composition. 160 crossbred (Duroc–Jersey × Landrace·Meishan) pigs, with initial live body weight of 27.5 ± 2.4 kg, were treated with AIgY or non-immunized control egg yolk powder (NIgY) at the inclusion level of 75 mg/kg diet. Following a 104-day trial, the pigs were slaughtered for analyzing the carcass and meat quality traits. The perirenal, mesenteric and subcutaneous fat depots were weighed and the diameter of adipocytes from different fat depots was measured with histological methods. Serum concentrations of insulin and leptin as well as the activities of malic enzyme (ME) and lipoprotein lipase (LPL) in adipose tissue were measured. Dietary supplementation of AIgY enhanced average daily gain and feed efficiency by 13.03% (P < 0.01) and 7.49%, respectively, with no influence on feed consumption. AIgY increased the lean mass by 10.3% (P < 0.01) without affecting the dressing percentage. Backfat thickness at 6th–7th rib and the weights of perirenal, mesenteric and subcutaneous fat depots were reduced by 24.14% (P < 0.01), 27.27% (P < 0.05), 20.42% (P < 0.01) and 29.21% (P < 0.01), respectively. Dietary supplementation of AIgY reduced the size of adipocytes in all the three fat pads (P < 0.05). The meat color was improved whereas the marbling score, the intramuscular fat content, and pH₄₅ of the longissimus muscle remained unaffected. Serum concentration of non-esterified fatty acids (NEFA) was significantly increased (P < 0.01) while urea-N content was reduced (P < 0.05). No alterations were detected for the serum levels of triacylglycerides (TG) and glucose. Serum concentrations of insulin and leptin were decreased by 26.19% (P < 0.05) and 26.53% (P < 0.05), respectively. LPL activity in adipose tissue was depressed significantly (P < 0.05) without affecting ME activity. This study demonstrates that dietary supplementation of AIgY can effectively improve growth and carcass composition of pigs and the changes of serum insulin and leptin levels as well as the tissue LPL activity may be involved in the acting mechanism.     

~(60)Co射线对高免卵黄液中霉形体杀灭作用的研究

用60Co射线处理高免卵黄液,研究了不同剂量、剂量率对霉形体的灭活效果和对卵黄抗体的影响。结果表明,60Co射线可以完全杀灭高免卵黄液中的霉形体,霉形体在卵黄液中的灭活剂量为6.0kGy;10.0kGy以下的辐照剂量不影响卵黄液中蛋白质含量、pH值和活性氧自由基,同时不影响抗体效价。