鹅副粘病毒强毒YNG-1株的分离及人工感染试验

采用鸡胚接种法从云南省某鹅场发生烈性传染病的鹅群中分离到一株病毒，经HA，HI试验，鸡胚接种试验，血清中和鸡胚接种试验，确定所分离病毒为副粘病毒，鸡胚半数致死量（ELD50）为10^-8.57/0.1ml。参照国际上规定的新城疫病毒毒力制定标准及其方法，测定该分离株的鸡胚是小致死量致死鸡胚的平均时间（MDT）54h,1日龄雏鸡脑内接种致病指灵敏（ICPI）为1.71,6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）为2.36。表明该分离株具有与新城疫病毒速发型相类似的毒力，为强毒株，命名为YNG-1株。人工感染试验结果表明该分离株对6日龄鹅及16日龄鸡致死率均为100%，对6日龄肉鸭无致病性。     

鸭瘟的流行及临床与病理变化

1病原学 病原为鸭瘟病毒,属于疱疹病毒属中的滤过性的病毒.病毒在病鸭体内分散于各种内脏器官、血液、分泌物和排泄物中,其中以肝、肺、脑含毒量最高.本病毒对禽类和哺乳动物的红细胞没有凝集现象,毒株间在毒力上有差异,但免疫原性相似.病毒能在9～12胚龄的鸭胚绒毛尿囊上生长,初次分离时,多数鸭胚在接种后5～9天死亡,继代后可提前在4～6天死亡.此病毒也能适应于鹅胚,但不能直接适应于鸡胚.只有在鸭胚或鹅胚中继代后,再转入鸡胚中,才能生长繁殖,并致死鸡胚.此外病毒还能在鸭胚、鹅胚和鸡胚成纤维单层细胞上生长,并可引起细胞病变,最初几代病变不明显,但继代几次后,可在接种后的24～40小时出现明显的病变,细胞透明度下降,胞浆颗粒增多、浓缩,细胞变圆,最后脱落.经过鸡胚或细胞连续传代到一定代次后,可减弱病毒对鸭的致病力,但保持有免疫原性.病毒对外界抵抗力不强,温热和一般消毒剂能很快将其杀死;夏季在直接阳光照射下,9小时毒力消失;病毒在56℃环境10分钟即可将其杀死;在污染的禽舍内(4～20℃)可存活5天;对低温抵抗力较强在零下5～7℃经3个月毒力不减弱,对乙醚和氯仿敏感,5％生石灰溶液作用30分钟亦可灭活.在零下10～20℃约经1年仍有致病力.     

鸡鸭鹅新城疫病毒毒力及生物学特性的研究

为了测定鸡、鸭、鹅新城疫病毒的毒力强弱。测定其血凝价、血凝素热稳定性试验、血凝解脱试验、氯仿敏感性试验、耐酸性试验,并对3株病毒进行理化特性测定;测定其1日龄雏鸭脑内接种致病指数、6周龄鸭静脉接种致病指数和对13日龄非免疫鸭胚的半数感染量(EID_(50))。结果鸡、鸭、鹅新城疫病毒的血凝价依次为2~9、2~8、2~8;血凝素热稳定性指数分别为5、15、15 min;血凝均为快速解脱型;对氯仿敏感;对p H值3.0、p H值5.0均敏感;1日龄雏鸭脑内致病指数分别为0.59、0.84、1.04;6周龄静脉接种致病指数均为0;对13日龄鸭胚的半数感染量(EID_(50))分别为:10~(-5.31)/0.1 m L、10~(-6.5)/0.1 m L,10~(-7.79)/0.1 m L。表明鸡新城疫为中等偏弱毒力毒株,而鸭、鹅新城疫病毒均为中等毒力毒株。     

鹅副粘病毒不同分离株的血凝特性及LD50比较

用分离鉴定的11株鹩副粘病毒分别在SPF鸡胚传代至2-11代后，用鸡、鸭、鹅、鸽、鹌鹑五种禽类的红细胞作血凝试验，证明11株病毒均不同程度地凝集五种禽类的红血球。同时，10株病毒LD50在10^-8-10^-10之间。     

鸡新城疫强毒株的分离及其人工感染试验

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病鸡群中分离到一株病毒，经HA、HI试验及知清中和接种鸡胚试验，确定为新城疫病毒。参照国际上规定的新城疫病毒力判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚是小致死量平均死亡时间（MDT）、1日龄鸡脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为44h、1．74和2．39。表明该分离株具有与新城疫病毒发型相类似的毒力，属强毒力毒株。用该分离株对16日龄的鸡、鹅、鸭分别进行了人工试验感染，其发病率均为100％，而死亡率为分别为40％－80％、40％－60％和0。     

雏鸭病毒性肝炎的研究

１９９１年从云南某地疑似鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的病雏鸭肝脏分离到一株病毒，经鸡胚染试验，电镜形态观察，中和试验鉴定，证明为鸭病毒性肝炎病毒１型（ＤＨＶ－Ｉ）毒株。该病毒对鸡胚高度适应，传递至８０代对雏鸭无致病力，经易感雏鸭连传代毒力无反强现象，故命名为ＤＨＶ－ＫＭ６０株。鸡胚测试其滴度为ＬＤ５０１０６－７．３２／０．２ｍｌ。采用ＤＨＶ－ＫＭ６０制备疫苗，经口服免疫，对１日龄雏鸭的安全性高，免疫原性     

鸭副粘病毒强毒株的分离和鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病肉鸭群中分离到一株病毒。该素株对鸡红细胞具有凝集性，并可被康复鸭鸭血清和NDV阳性抗血清所抑制，而不能被禽流感标准阳性血清抑制，结合血清中和鸡胚接种试验，病毒回归试验和免疫防治效果的研究结果，确认为鸭副粘病毒。参照国际上规定的新城疫病毒毒力判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间（MDT），1日龄鸡及脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为48.9h,1.80和2．45。表明该鸭副粘病天线离株具有新城疫病毒（NDV）速发型相类似的毒力，属强毒力毒株，并定名为WF00D株。     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒强毒株的培育

用腺胃病变形鸡传染性支气管炎病毒分离株IBV－D971株接种1日龄SPF鸡，连续传10年代，培育出了腺胃病变型鸡传染性支气管炎强毒株IBV－D971J株。IBV－D971J10对SPF鸡胚的致病力为10^-6.45ELD50/0.2mL,对1日龄SPF鸡的致病力为10^-1.5LD50/1mL，从死亡鸡的心，肝，脾，肺，肾，腺胃，肌胃，法氏囊等均能分离到IBV，IBV－D971J10不含鸡新城疫，禽流感，鸡马立克氏病，鸡传染性法氏囊炎，网状内皮组绢增殖病等外源病毒，对SPF鸡可引起典型的腺胃炎，肌胃炎，间质性肾炎等是变化。     

鸭疱疹病毒Ⅱ型（暂定名）的分离鉴定

自1990年以来，在福建、浙江和广东等省发生一种以双翅羽毛管淤血呈紫黑色、断裂和脱落以及皮下、脏器（肝脏、胰脏）和肠道（十二指肠、直肠和盲肠）出血为主要特征的新的鸭传染病，暂定名为鸭出血症。我们对从自然感染该病典型病死番鸭脏器中获得的1株含2种病毒粒子（直径大小分别为30－40mm和80－120mm)的分离物，以Ⅰ型雏鸭病毒性肝炎标准阳性血清进行连续4代中和后接种番鸭胚，收集死亡番鸭胚胚液进行病毒纯化、负染、电镜观察和SPF鸡胚接种试验证明获得单一病毒分离株（定名为鸭出血症病毒）。该病毒为不耐酸、不耐碱、不耐热、对氯仿处理敏感、核酸类型为双股DNA的有囊膜病毒，直径为80－150nm；对番鸭胚、鹅胚、麻鸭胚、半番鸭胚、北京鸭胚和SPF鸡胚的致 死率分别为100％、100％、78．3％、60％、82．1％和0％；对10－11日龄番鸭胚的ELD50为10^-7.78/0.2ml；无血凝活性，不凝集“O”型人、鸭、鸡、鹅、家兔、小鼠，豚鼠、猪和绵羊红细胞；经血清中和试验证明该病毒与Ⅰ型雏鸭肝炎病毒、雏番鸭细小病毒、雏鹅细小病毒、鸭瘟病毒无血清学相关性。据以上结果可将该病毒确定为疱疹病毒科成员，但鉴于其与鸭瘟病毒（鸭疱疹病毒Ⅰ型）无血清学相关性，则暂定名为鸭疱疹病毒Ⅱ型，此为国内外首次报道。     

鹅副黏病毒的分离与鉴定

从鹅体内分离到一株副黏病毒（DG01株），该病毒具有血凝活性且血凝活性能被新城疫标准阳性血清和鹅副黏病毒阳性血清所抑制，能使SPF鸡胚、非免疫鸭胚和鹅胚100％死亡。电镜观察见病毒颗粒呈多形性，多为圆形有囊膜，直径在200nm左右；ELD50为10^8.6／ml，MDT为56h，ICPI为1．94。对DG01株通过RT-PCR方法，扩增出F基因，鉴定为基因Ⅶ强毒株，测序结果与CH2000同源率为91．8％，因此确定DG01株属于禽副黏病毒Ⅰ型（APMV-1）的基因变异强毒株。动物接种试验表明DC01株对鸭无致病性，对鹅、鸡、鸽具有100％的发病率和致死率。     

重庆部分地区鹅副黏病毒的分离鉴定及血清学调查

从重庆部分地区规模化鹅场收集以肝、脾肿大瘀血,肠黏膜出血、坏死为主要病理变化的病死鹅,无菌取其肝脏、脾脏组织,进行病毒的分离培养、血清学试验和动物回归试验,分离鉴定出一株鹅副黏病毒;并做了鸡、鸭、鹅的鹅副黏病毒和鸡新城疫病毒HI抗体检测,以了解该地区鸡、鸭、鹅群中副黏病毒的流行情况,结果表明,鸡的阳性率分别为70.1%、83.9%,鸭分别为1.7%、6.8%,鹅分别为61.2%、55.4%。证实鹅副黏病毒在这些地区感染比较严重,同时与鸡新城疫病毒存在交叉免疫原性。应引起当地养鹅专业户的高度重视。     

鹅副粘病毒对鸡胚及雏鸡致病性的初步研究

鹅副粘病毒是一种引起多种家禽疾病的病毒,通过人工感染鸡胚和雏鸡试验,其结果表明本病毒主要以呼吸系统、消化系统病变为主要临床症状和特征,并且可导致10日龄的鸡胚100％死亡,对雏鸡的致死率为85％。因此,可见其致死率高,广大养殖户应重视鹅副粘病毒的预防。     

禽腺病毒QU分离株的致病性及细胞适应性研究

QU分离株是一株类似产蛋下降综合征病毒,属于鸭腺病毒1型病毒。通过人工感染和细胞增殖试验,结果显示QU分离株接种无特定病原雏鸡未出现临床病症及生长发育障碍,不致死鸡胚,对鸭胚的致死率明显比引起产蛋下降的HS株低。QU株在鸡胚肝细胞、鸭胚成纤维细胞及鸡胚成纤维细胞上生长良好,产生典型细胞病变,且在鸡胚肝细胞上的增殖滴度最高,但不适应鸡胚肾细胞。这些数据说明QU株系对鸡具有低毒力的腺病毒,有可能用作禽用基因疫苗或基因治疗的候选病毒载体。     

鹅源禽副粘病毒GPMV/QY97-1株的生物学特性

对新近分离到的鹅源禽副粘病毒ＧＰＭＶ／ＱＹ９７－１株的生物学特性进行了研究。结果表明,该病毒粒子在电镜下呈球形,直径１２１～２５０ｎｍ,表面有纤突,能凝集鸡的红细胞,血凝反应能被Ｉ型禽副粘病毒阳性血清所抑制,由此初步判定该病毒属于Ｉ型禽副粘病毒,该病毒人工感染１、１４、２８、４８日龄的鹅,发病率均为１００％。致死率分别为１００％、８７．５％、６２．５％、１２．５％;人工感染２５日龄的鸡,发病率和致     

鹅副粘病毒YF株的分离鉴定与生物学特性研究

从辽宁省某鹅场病死鹅中分离到1株禽Ⅰ型副粘病毒.应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集、红细胞凝集抑制试验、血清中和试验、动物回归试验、免疫保护试验进行了研究,并进行了最小致死量平均死亡时间(MDT)、脑接种致病指数(ICPI)、静脉内接种致病指数(IVPI)三项毒力指标的测定.参照新城疫病毒毒力判定的标准及其方法,分别测定该分离株的鸡(鹅)胚MDT、1日龄鸡(鹅)ICPI和6周龄鸡(鹅)IVPI为51.6/68.6 h、1.75/1.70和1.68/1.72.结果表明,该分离株为鹅副粘病毒强毒株,命名为YF株.应用YF毒株制备的油乳剂灭活苗免疫实验鸡和雏鹅,结果表明有良好的保护率.     

Emergence of Salmonella enterica serovar Potsdam as a major serovar in waterfowl hatcheries and chicken eggs

Salmonellosis is a common food-borne illness in humans caused by Salmonella-contaminated poultry and their products. In hatcheries, 110 Salmonella isolates were identified, mostly from first enrichment, and few from delayed enrichment. The Salmonella prevalence in goose and duck hatcheries was higher when measured by four multiplex PCR methods than by traditional culture (73.8% vs. 44.35%, P < 0.05); 97.3% of 110 isolates were Salmonella Potsdam of serogroup C1 and other isolates were Salmonella Montevideo of C1 and Salmonella Albany of C2. Plasmid and pulsed field gel electrophoresis genetic analysis revealed that isolates from duck hatcheries were more diverse than those from goose hatcheries. In Salmonella Potsdam, host species-specific genotypes were observed in geese for genotypes 3, 4, and 5 and in ducks for genotypes 7, 8, and 9, suggesting that Salmonella Potsdam may evolve into goose- and duck-specific isolates. An examination of 1121 eggs found that only Salmonella Potsdam was identified in 1.8% (7/591) of eggs from chickens fed on the ground, not housed in cages, and in egg content (6/7) as well as eggshell membrane (1/7). In conclusion, Salmonella Potsdam may be a major Salmonella infection in waterfowl and chicken eggs.     

水禽StAR基因克隆、表达及其对睾丸发育的影响

旨在获取水禽StAR基因的结构和组织表达规律，初步了解其对水禽睾丸发育的影响。本研究选取山麻鸭和狮头鹅的下丘脑和睾丸组织为材料，克隆StAR基因，并采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在山麻鸭和狮头鹅不同组织中的表达规律，并进一步比较该基因在不同时期鹅睾丸组织中的表达差异。本试验克隆获得鸭StAR基因3个转录本（dSTAR-A、dSTAR-B和dSTAR-C），dSTAR-A和dSTAR-B编码序列相同，编码283个氨基酸，而dSTAR-C编码238个氨基酸；获得鹅STAR基因两个转录本（gSTAR-A和gSTAR-B），均编码283个氨基酸。比对分析发现，鸭和鹅StAR氨基酸序列与其他禽类的同源性较高，在物种间的保守性高。StAR基因在鸭和鹅的各个组织中均有表达，其中在睾丸中表达量最高，在腹脂、胸肌和腿肌也有较高的表达水平。比较不同时期公鹅的睾丸，发现该基因在3岁龄时表达水平极显著高于1和52日龄（P<0.01），且在成年公鹅繁殖期的表达水平极显著高于休产期（P<0.01）。结果表明，StAR基因可能是鹅睾丸发育所必需的关键基因，并参与成年公鹅繁殖性能的调控。     

致病性鹅源新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞的致病变特性

选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染细胞形成大量合胞体,到84～144h时,CEF单层彻底破坏;鸡源和鸽源MDV接种CEF后也在24h左右开始有病变产生,最初病变与鹅源毒株导致的病变相似,但病变进展迅速,细胞显著裂解并导致单层的严重破坏,60～84h时细胞单层即彻底破坏。对病毒接种后不同时间段培养物上清血凝(HA)效价的测定结果表明,鹅源NDV接种后84～120h培养物上清HA效价达到高峰,为5～8 log2,鸡源和鸽源NDV接种后60～84h HA效价即可达到高峰,但其最高效价只有4 log2。     

Goose haemorrhagic hepatitis caused by a new subtype duck hepatitis type 1 virus

Duck hepatitis type 1 virus (DHV-1) causes a fatal disease in ducklings but there is no report of DHV-1 isolation from goose. Recently, cases of a new disease in overfeeding geese were reported from China. The cases were characterized by haemorrhagic hepatitis lesions on liver after post mortem examinations. The flocks showed about 20-40% morbidity and less than 5% mortality. The histopathological lesions showed destroyed structure of hepatocytic tissue, severe vacuolation and necrosis of hepatocytes. Viral antigen could be detected by monoclonal antibody against duck hepatitis type 1 virus (DHV-1) in the cytoplasm of positive hepatocytes. PCR amplified viral sequences with primers specific for recent Korean-like duck hepatitis type 1 virus (DHV-1C). Alignment of the complete sequence demonstrated that the isolated JT strain from goose exhibiting 95.9% identity to DHV-1C AP-03337 strain, and only 75.3% to classical DHV-1 virus. 80% goslings developed haemorrhagic hepatitis after infection with JT strain. This is the first report on the involvement of a DHV-1 virus in goose.