氟化钠对附睾形态结构及紧密连接相关基因表达的影响

为了研究氟对小鼠附睾结构形态及紧密连接相关基因的影响,将60只健康雄性小鼠随机分成4组,对照组饮用蒸馏水,3个氟处理组分别饮用含氟化钠（NaF） 25、50和100 mg/L的蒸馏水。染氟60 d,取小鼠股骨,采用氟离子选择电极法测其氟含量;取右侧附睾制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构观察;左侧附睾提取RNA,采用实时荧光定量PCR技术（qRT-PCR）检测紧密连接相关基因的表达。结果显示,与对照组相比,氟处理组小鼠股骨氟含量随摄氟剂量的增加呈剂量依赖性,其中50、100 mg/L剂量组差异极显著（P<0.01）;氟处理组附睾尾管腔厚度极显著增厚（P<0.01）;紧密连接相关基因Claudin-2 mRNA表达量极显著下降（P<0.01）,100 mg/L剂量组ZO-1 mRNA表达量显著下降（P<0.05）。摄入过量NaF影响附睾形态及其紧密连接相关基因的表达,从而可能对血-附睾屏障造成损伤。     

氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶和精液质量的影响

试验旨在研究有机磷农药氧化乐果对雄性小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)和精液质量的影响作用。将40只健康昆明雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高3个染毒组和对照组,其中染毒组分别灌胃1.0、2.0、4.0 mg/kg氧化乐果,对照组灌胃生理盐水,采用等容量灌胃法(0.2 mL/10 g体重),连续灌胃14 d。随着氧化乐果染毒剂量的逐渐增加,小鼠睾丸琥珀酸脱氢酶(SDH)活力、精子密度、存活率均明显降低,与对照组相比差异显著(P＜0.05);小鼠体重、睾丸重、附睾及其脏器系数与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。氧化乐果对小鼠精子密度和精子存活率有一定的损伤作用,对睾丸琥珀酸脱氢酶有明显的抑制作用。     

棉酚对雄性小鼠的生殖毒性作用

为了观察棉酚对雄性小鼠的生殖毒性,将48只雄性小鼠随机分成4组。对照组(羧甲基纤维素钠)、低剂量组(30 mg/kg·d)、中剂量组(60 mg/kg·d)和高剂量组(240 mg/kg·d)。连续灌胃给药20 d。第21天处死,取睾丸称重并计算脏器指数,将睾丸进行病理组织学观察。结果:前两周,高剂量组体重显著下降(P0.05),对照组体重显著上升(P0.05),第3周高剂量组体重差异极显著(P0.01);与对照组相比,低剂量组睾丸脏器指数差异极显著(P0.01),中剂量组差异显著(P0.05),高剂量组差异不显著(P0.05);睾丸组织进行H.E.染色,对照组无明显病理变化,低、中剂量组病变轻微,高剂量组正常结构遭到破坏,结构松散。结论:棉酚能够抑制小鼠体重的增长,不同浓度的棉酚对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤,60 mg/kg·d和240 mg/kg·d棉酚对雄性小鼠有致死作用。     

氟暴露小鼠睾丸形态计量学研究

为了观察小鼠氟中毒睾丸形态变化特点,研究氟对睾丸的毒性影响,选用45只健康性成熟雄性昆明系小鼠,随机分为对照组、低氟组(25 mg/L Na F)、高氟组(100 mg/L Na F),连续饲喂60 d,制作睾丸石蜡组织切片,H.E.染色后,显微镜下观察曲细精管形态变化,通过定量分析方法探讨氟对睾丸的毒性影响。结果表明,与对照组相比,低氟组和高氟组曲细精管半径、面积以及曲细精管管腔半径、面积均无显著性差异(P0.05);高氟组小鼠曲细精管细胞层数和厚度极明显低于对照组(P0.01);形态学观察显示,25 mg/L氟中毒小鼠睾丸生精细胞减少,100 mg/L Na F可导致生精细胞排列紊乱、各级生精细胞减少等。本试验可为氟的雄性生殖毒性研究提供直观、科学的参考。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠附睾的影响

试验旨在研究还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对氟中毒小鼠附睾的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,分别为对照组和4组染氟组。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别供给含100mg/L NaF的蒸馏水,自由饮水30d。之后在染氟组中选择3组每日分别灌胃200、400和800mg/(kg·只)GSH,同时各组小鼠再自由饮含氟水30d。试验结束后,摘取小鼠附睾进行活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、GSH含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测,同时制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100mg/L NaF组精子密度、精子活力、GSH含量、GPx和GR活性均显著下降(P0.05),而GSH添加组较100 mg/L NaF组均有所升高;100 mg/L NaF组精子畸形率、ROS和MDA含量较对照组均显著升高(P0.05),而GSH添加组较100mg/L NaF组均降低,其中800mg/kg GSH组效果明显。与对照组相比,100mg/L NaF组附睾头、附睾体及附睾尾管腔厚度升高,管腔内精子数量下降;GSH添加组附睾头、附睾体及附睾尾的管腔厚度与管腔内精子数量都有所恢复,其中800mg/kg GSH组效果较好。综上所述,添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,附睾组织形态结构一定程度上有所恢复,对附睾有一定的改善作用。     

磺胺二甲嘧啶对小鼠亚慢性毒性、骨髓细胞微核及精子畸形的影响

试验选取昆明种小鼠,采用经口灌胃法,研究磺胺二甲嘧啶对小鼠亚慢性毒性、骨髓细胞微核和精子畸形的影响。结果显示,亚慢性毒性试验中,高、中剂量组小鼠体重与对照组和低剂量组差异极显著(P＜0.01);高剂量组雄性小鼠心脏的脏器系数与对照组和低剂量组差异显著(P＜0.05);高剂量组雄性小鼠肾脏的脏器系数显著低于对照组(P＜0.05),雌性小鼠肾脏的脏器数显著低于对照组与低剂量组(P＜0.05);小鼠骨髓细胞微核试验中高剂量组与空白对照组差异显著(P＜0.05),高、中、低剂量组间无显著差异;小鼠精子畸形试验中,高、中剂量组与空白对照组差异极显著(P＜0.01),低剂量组与空白对照组差异显著(P＜0.05),高剂量组与中、低剂量组差异显著(P＜0.05)。结果表明,高剂量的磺胺二甲嘧啶对小鼠的心脏和肾脏及微核发生率有一定影响;中剂量的磺胺二甲嘧啶对雌性小鼠的微核发生率具有一定影响;高、中、低剂量的磺胺二甲嘧啶对精子畸形率均具有一定影响。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠附睾的影响

试验旨在研究还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）对氟中毒小鼠附睾的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,分别为对照组和4组染氟组。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别供给含100 mg/L NaF的蒸馏水,自由饮水30 d。之后在染氟组中选择3组每日分别灌胃200、400和800 mg/（kg·只）GSH,同时各组小鼠再自由饮含氟水30 d。试验结束后,摘取小鼠附睾进行活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、GSH含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽硫转移酶（GSTs）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测,同时制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100 mg/L NaF组精子密度、精子活力、GSH含量、GPx和GR活性均显著下降（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均有所升高;100 mg/L NaF组精子畸形率、ROS和MDA含量较对照组均显著升高（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均降低,其中800 mg/kg GSH组效果明显。与对照组相比,100 mg/L NaF组附睾头、附睾体及附睾尾管腔厚度升高,管腔内精子数量下降;GSH添加组附睾头、附睾体及附睾尾的管腔厚度与管腔内精子数量都有所恢复,其中800 mg/kg GSH组效果较好。综上所述,添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,附睾组织形态结构一定程度上有所恢复,对附睾有一定的改善作用。     

液态甲醛对雄性小鼠生殖毒性的研究

为研究液态甲醛对雄性昆明鼠的生殖毒性效应,选用雄性昆明鼠16只,分成4组,采用腹腔注射染毒的方法,各组浓度分别为2 mg/kg(低)、20 mg/kg(中)和200 mg/kg(高),给药量为每只鼠0.1 mL,对照组腹腔注射等体积的生理盐水,每天上午10:00注射1次,持续3周.处死并剖检试验鼠,取其睾丸和附睾处理,计算小鼠睾丸的脏器系数,精子总数及精子存活率,并观察精子畸形数和睾丸组织的病理改变.与对照组比较,随着染毒剂量的增加,睾丸的脏器系数减小,精子总数和存活率明显下降,低剂量组与对照组差异显著(P＜0.05)；中、高剂量组与对照组比较差异极显著(P＜0.01)；中、高剂量组的精子畸形数量显著增多；各染毒组小鼠的睾丸组织均具有明显的病理改变和损伤.说明甲醛对雄性小鼠的生殖器官具有明显的毒害作用.     

亚硒酸钠对雌鼠生殖系统毒性作用的研究

为探讨高硒亚急性中毒对雌鼠生殖系统的毒性作用。将40只6周龄雌性小鼠随机分为对照组(0.00mg/kg体重.d)、低剂量组(0.135mg/kg体重)、中剂量组(0.54mg/kg体重)、高剂量组(2.16mg/kg体重),连续灌胃30d,研究亚硒酸钠对雌性小鼠的生长发育、生殖系统脏器指数、生殖系统超微结构、组织硒含量、谷胱甘肽过氧化物酶的影响。结果显示,第30天时染硒组小鼠体重极显著小于对照组(P<0.01),体重增幅随染硒剂量增加而降低;对照组的卵巢指数与高剂量组差异极显著(P<0.01),对照组子宫指数与中剂量组差异极显著(P<0.01),与其他两组差异显著(P<0.05),随着染毒剂量增加,卵巢指数下降,而子宫指数先升高后降低;对照组卵巢、子宫细胞发育良好,染硒组卵巢、子宫细胞均有不同程度的变性坏死,呈现凋亡细胞的典型特征;染硒组卵巢、子宫硒含量和对照组卵巢、子宫硒含量差异显著(P<0.05),其硒含量随染硒剂量增加而增加,表现出弱蓄积性;染硒组小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活性极显著高于对照组(P<0.01),与给硒剂量有明显负相关趋势。表明亚硒酸钠染毒可阻碍小鼠的生长发育,作用于生殖系统且有一定毒性作用,呈剂量效应关系。高硒状态下谷胱甘肽过氧化物酶活性与给硒剂量有明显负相关趋势。     

不同水平钙对氟中毒大鼠肾脏功能损伤的影响

研究不同水平钙对氟中毒大鼠肾脏损伤的影响,为探索有效防治氟中毒患者的钙制剂剂量的选择提供理论依据。选用健康的21日龄Wistar雄性大鼠50只,随机将其分成5组,每组10只,分为对照组、高氟组(含150mg·kg-1 F-)、高氟低钙组(含150mg·kg-1 F-+2%CaCO3)、高氟中钙组(含150mg·kg-1 F-+3%CaCO3)、高氟高钙组(含150mg·kg-1 F-+4%CaCO3)。试验进行60d后,取各组大鼠血液测血清钙(Ca)、磷(P)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)的含量;然后取出肾组织称重并计算脏器指数,测定肾组织中乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、碱性磷酸酶(ALP)的含量;采用免疫组织化学法检测大鼠肾组织CD11及TNF-α蛋白的表达。结果显示:与对照组相比,高氟组体质量显著降低(P<0.01),血清P含量显著升高(P<0.05),高氟组肾脏中LDH、SDH、ALP含量增加(P<0.01),TNF-α及CD11蛋白表达显著升高(P<0.01);与高氟组比较,高氟低钙组和高氟中钙组体质量上升(P<0.05),血清Ca和P含量显著降低,LDH、ALP及SDH含量显著降低,在高氟低钙组中TNF-α及CD11蛋白表达显著降低(P<0.01);与高氟组比较,高氟高钙组大鼠脏器指数变化无明显差异(P>0.05),BUN、SCr含量显著升高(P<0.05),酶含量无明显变化(P>0.05),LDH、ALP及SDH含量无显著差异,TNF-α及CD11蛋白表达差异不显著(P>0.05)。结果表明,高剂量的氟可造成肾脏功能的多方面损伤,低中剂量的钙可以不同程度地减轻氟对肾脏的毒性作用,对肾组织具有一定程度的保护作用,但过量的钙不但没有缓解氟对肾脏的毒性作用,反而加剧肾脏功能的损伤。     

Effects of Sodium Fluoride on the Morphological Structure of the Epididymis and the Expression of Tight Junction Genes

The purpose of this study was to examine the effects of fluoride on epididymal morphological structure and mRNA expression of tight junction genes.60 healthy male mice were divided into four groups randomly, including control group (distilled water) and 25,50,100 mg NaF/L groups, respectively. After 60 days, the thighbones were collected and fluoride contents were determined by fluorine ion selective electrode method. Paraffin slides of right epididymis with HE stain were produced to evaluate epididymal morphological structure under light microscope. The left epididymis were collected to isolate total RNA and detect the mRNA expression of tight junction genes by qRT-PCR. The results showed that the fluoride contents of thighbones increased in a dose-dependent manner, and were extremely significantly higher in 50 and 100 mg/L groups than those in control group (P<0.01).NaF extremely significantly increased the thickness of cauda epididymal pipe wall in fluoride groups (P<0.01) and the Claudin-2 mRNA expressions in fluoride groups were extremely significantly decreased (P<0.01) and the ZO-1 mRNA expression in 100 mg/L group was significantly decreased (P<0.05) as compared with control group. In conclusion, excessive NaF ingestion adversely affected epididymal morphological structure and mRNA expressions of Claudin-2 and>ZO-1,which might contribute to the damage of blood-epididymal barrier.     

芝麻素对氟暴露斑马鱼生长性能及肠组织形态学的影响

为探讨芝麻素对氟暴露斑马鱼生长性能及肠组织形态学的影响，本试验将720尾斑马鱼随机分为6组，分别为对照组（CK）、芝麻素Ⅰ组（1 g，S1）、芝麻素Ⅱ组（2 g，S2）、80 mg/L氟暴露组（F）、80 mg/L氟暴露+芝麻素Ⅰ组（1 g，FS1）、80 mg/L氟暴露+芝麻素Ⅱ组（2 g，FS2），每组3个重复，每个重复40尾。并在试验第45、90天测量各组斑马鱼体长、体重、增长率（LGR）、增重率（WGR）、特定生长率（SGR），组织学法观察各组斑马鱼的肠组织结构，用Imageproplus图像软件系统测量肠道绒毛高度。结果发现，第45天时，与CK组相比，F组斑马鱼体重显著下降（P<0.05），添加芝麻素（FS1和FS2组）对其有一定改善作用但差异不明显（P>0.05）。试验第90天时，与CK组相比，F组斑马鱼体重和体长显著下降（P<0.05），添加芝麻素（FS1和FS2组）可一定程度上改善这种负作用，但效果并不显著（P>0.05）。在45和90 d时，F组LGR、WGR、SGR较对照组均下降，而FS1和FS2组较F组呈上升趋势。斑马鱼肠道组织切片观察发现，芝麻素还可在一定程度上改善氟暴露对斑马鱼肠道组织造成的负面效应。综上所述，芝麻素可对氟致斑马鱼生长及肠道组织的毒性效应产生一定缓解作用。     

氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响

本试验探讨了氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响,为氟的生殖毒性研究与检测提供依据。选取8周龄性成熟雄性昆明小鼠20只,随机分为4组,对照组小鼠饮用蒸馏水,低、中和高氟组小鼠分别饮用含25、50和100 mg/L氟化钠的蒸馏水,于45 d后断颈处死小鼠,取小鼠附睾尾,经2.5%戊二醛固定后,采用透射电镜观察小鼠附睾中成熟精子的超微结构变化。与对照组相比,低氟组小鼠精子头部质膜断裂,部分脱落,个别线粒体肿胀、形态模糊;中氟组精子头部质膜脱落,顶体部分缺失,线粒体形状不规则,嵴间腔扩大;高氟组精子头部质膜脱落,线粒体排列不规则,出现空泡化,嵴结构模糊。结果表明,氟暴露小鼠附睾中成熟精子头、尾部中段均有不同程度的结构改变,尤以线粒体出现较明显的异常,且氟浓度越高,精子超微结构损伤越严重。     

Establishment of the Rex Rabbit Fluorosis Model and Detection of the Fluoride Content in Organs

In order to study the influence of different doses of sodium fluoride on rex rabbit,rex rabbit fluorosis model was established and the fluorine contents of blood,bone,liver,kidney and other organs in rex rabbit were examined to provide a theoretical reference for the further research. Rex rabbits (age (30±5) days,weight (1.1±0.2) kg) were divided into three groups:Control group,test group Ⅰ (10 mg/(kg·d) NaF group) and test group Ⅱ (20 mg/(kg·d) NaF group). The tests lasted 100 d. The results showed that,on the 100th day,fluoride contents of bone and tooth were significantly different (P<0.05),and they were positively correlated with the time and intake of fluoride;The fluoride contents of kidney and liver were slightly different (P>0.05),and they were not significantly different between both test groups (P>0.05).The fluoride contents of blood were not significantly different between group Ⅰ and group Ⅱ (P>0.05),but both had no significant changes compared with control group (P<0.05). Sodium fluoride as a fluoride source could be used to simulate the natural state of rex rabbit fluorine poisoning. The fluoride accumulating ability in bone and tooth were stronger while the ability in blood,liver and kidney were weaker.     

铅对哺乳期雄性小鼠睾丸损伤的研究

为研究哺乳期染铅小鼠雄性生殖系统的发育状况,通过饮水染铅法,给小鼠不同剂量的醋酸铅(100,300 mg/L和500 mg/L),记录睾丸脏器指标,并采用石墨炉原子吸收光谱法测定血铅水平。结果显示,染铅组小鼠血铅含量均高于对照组,其中300 mg/L和500 mg/L染铅组小鼠血铅水平显著高于对照组。各染铅组小鼠睾丸重量显著低于对照组。说明铅易被机体吸收,并且对生殖系统早期发育有毒性作用。     

不同硒浓度日粮对小鼠肝脏和睾丸组织中部分硒蛋白mRNA水平的影响

选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8 mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P<0.05);②Ⅰ组谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPx1)的mRNA相对表达量明显低于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),且Ⅱ、Ⅲ组在肝脏中差异显著(P<0.05),在睾丸中差异不显著(P>0.05);③Ⅰ、Ⅲ组肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)的mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),但均显著低于Ⅱ组(P<0.05),而各试验组间在睾丸中差异均不显著(P>0.05);④随着日粮中硒添加量的增加,肝脏和睾丸中硫氧还蛋白还原酶2(thioredoxin reductase 2,TrxR2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。因此,在肝脏和睾丸组织中,饲喂低硒饲料能显著降低硒的沉积量和GPx1、GPx4、TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05);而饲喂高硒饲料能显著降低GPx1的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著增加TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05)。提示,硒对GPx1、GPx4和TrxR2 mRNA相对表达量的调节存在组织差异性。     

家蚕雄蛾活性肽增强小鼠抗疲劳能力的试验

利用制种交配后的家蚕雄蛾制备蛋白活性肽,通过小鼠负重游泳存活时间及血乳酸、血尿素氮、肝糖元等指标的测定,研究家蚕雄蛾活性肽增强小鼠抗疲劳能力的功效。结果表明,家蚕雄蛾活性肽对小鼠体重和基本表现状态无显著影响(P>0.05),但对小鼠具有明显的增强运动耐力和抗疲劳能力,中、高剂量组小鼠负重游泳存活时间分别为(744.0±233.9)s、(816.6±270.4)s,比对照组(482.3±136.6)s显著延长(P<0.01);中、高剂量组小鼠的生化指标中,血尿素氮浓度分别为(8.54±0.42)mmol/L、(9.04±0.81)mmol/L,比游泳对照组的(10.34±0.64)mmol/L显著降低(P<0.05、P<0.01),肝糖元质量比分别为(7.91±0.65)mg/g、(7.82±0.73)mg/g,比游泳对照组的(5.85±0.60)mg/g显著增加(P<0.01)。     

增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍保护作用的研究

为评价增精宝对雄性动物生精作用的影响,采用环磷酰胺致小鼠生精障碍为动物模型,考察不同剂量增精宝对环磷酰胺致小鼠生精障碍的保护作用。结果显示,高剂量组对小鼠的附睾、睾丸、储精囊和前列腺均有较显著的促进作用;低剂量组精子总密度和精子活率均差异显著(P<0.05);高剂量组精子活率差异显著(P<0.05);对小鼠睾丸各倍体生精细胞比例的影响,高剂量组小鼠睾丸生精小管较为饱满,管腔内存在大量精子,生精上皮较厚,可见各级生精细胞排列整齐,界膜明显,睾丸间质细胞排列整齐。结论表明,增精宝两种剂量均能够显著促进环磷酰胺导致小鼠生精障碍的保护作用,高剂量组对雄性小鼠的作用尤为显著。