用PCR检测副溶血性弧菌耐热溶血基因

根据副溶血性弧菌的耐热血素基因设计了２对引物、经聚合酶链式反应检测，所有１８株神奈川试验阳性副溶血血性弧菌均呈阳性反应，而６株神奈川试验阴性副溶血性弧菌呈阴性反应，其中９种弧菌和８株其他革兰氏阴性菌也呈阴性反应。     

猪溶血性链球菌的分离鉴定及防治试验

猪链球菌病(streptococcicosis suume)是由多种链球菌感染引起不同临床症状的疾病,常见的有败血症型、脑膜炎型、化脓性淋巴结炎型和关节炎型。     

猪链球菌2型江苏分离株溶血素基因检测及序列分析

根据猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2）溶血素基因（sly）设计和合成了一对可扩增其完整阅读框的引物，对HA9801等6株猪链球菌2型江苏分离株，1株德国分离株SS2-D及猪链球菌C群参考株ATCC35246的核酸进行PCR扩增，结果显示HA9801等6株江苏分离株及德国株SS2呈阳性．ATCC35246呈阴性。HA9801株PCR产物纯化后测序．序列分析表明该DNA片段与猪链球菌2型1933株的sly基因同源性为99％。     

东莞市屠宰厂环境及屠宰猪体内溶血性链球菌的分离与鉴定

为了解东莞市屠宰厂场地及屠宰猪的链球菌污染情况,从东莞市各镇街屠宰厂采集猪扁桃体样品共320份,污水水样共96份,环境空气样品共160份,屠宰用具、工作台、地板等涂抹拭子共96份,进行溶血性链球菌的分离与鉴定。结果共分离出溶血性链球菌276株,检出率为41.1%。其中停乳链球菌96株,阳性率14.3%;豕链球菌13株,阳性率1.9%;犬链球菌5株,阳性率0.7%;无乳链球菌13株,阳性率1.9%;猪链球菌1型43株,阳性率6.4%;猪链球菌2型106株,阳性率15.8%。扁桃体中溶血性链球菌的阳性率最高,为67.8%;其次是污水和器具的链球菌含量,为22.9%;而空气中溶血性链球菌的含量最低,为9.4%。结果表明东莞市屠宰猪及屠宰厂环境、污水中溶血性链球菌污染率较高,应当引起监管部门的重视。     

用PCR检测副溶血性弧菌耐热溶血素基因

根据副溶血性弧菌的耐热溶血素基因（ｔｄｈ）设计了２对引物，经聚合酶链式反应（ＰＣＲ）检测，所有１８株神奈川试验阳性副溶血性弧菌均呈阳性反应，而６株神奈川试验阴性副溶血性弧菌呈阴性反应，其他９种（３４株）弧菌和８株其他革兰氏阴性菌也呈阴性反应。检测敏感性可达２ＣＦＵ的副溶血性弧菌。     

猪源链球菌的分离与鉴定

从浙江地区98例发病样品猪猪体共分离到56(57％)株猪源链球菌，对12株典型分离株进行培养特性、生化特性及血清型的鉴定，多数具α或β溶血，其中C群链球菌8株。L群链球菌1株，2型猪链球菌2株。未定群1株。小鼠对12株分离株的敏感性有一定的差异。结果表明：浙江地区分离到的猪链球菌已不是单一的C群链球菌，且C群中也不是以往的马链球菌兽疫链球菌亚种。而是停乳链球菌似马亚种。并首次分离到猪链球菌2型。     

食品中A族乙型溶血性链球菌的PCR检测

为了建立食品中 A 族乙型溶血性链球菌的 PCR 检测方法，本试验根据 A 族乙型溶血性链球菌（GAS）DNA 酶B 相对保守基因的引物，用乙型溶血性链球菌CMCC32210S（2）为试验菌株，扩增目的DNA 片段，再用市售面包、灭菌乳为模拟样品进行乙型溶血性链球菌添加后的PCR检测。结果均扩增出808 bp的目的DNA片段，证明PCR检测方法特异性强，敏感性好，最低检测限为83.8 pg/μL。     

猪源性链球菌分离鉴定及药敏试验

2005年春季,从吉林省某猪场病、死猪中分离出猪链球菌疑似菌株,经革兰氏染色镜检、生化反应和特异性诊断血清的玻片凝集,均鉴定为Ⅱ型猪链球菌。上述Ⅱ型猪链球菌分离株对氨苄西林、利福平、万古霉素、头孢拉定、罗红霉素等5种抗生素敏感,但对庆大霉素等6种抗生素耐药。采取饲养环境和饲料消毒、发病猪隔离、氨苄西林和利福平配合治疗等措施,有效地控制了疫情,未发生人的感染。     

猪源性链球菌分离鉴定及药敏试验

从病、死猪中分离出猪链球菌疑似菌株,经革兰氏染色镜检、生化反应和特异性诊断血清的玻片凝集,均鉴定为Ⅱ型猪链球菌。上述Ⅱ型猪链球菌分离株对氨苄西林、利福平、万古霉素、头孢拉定、罗红霉素等5种抗生素敏感,但对庆大霉素等6种抗生素耐药。采取饲养环境和饲料消毒、发病猪隔离、氨苄西林和利福平配合治疗等措施,有效地控制了疫情,未发生人的感染。     

猪大肠杆菌和链球菌的分离鉴定及耐药性分析

猪大肠杆菌病和链球菌病是养猪业的多发病症,而且常与其他细菌性或者病毒性病症并发,给养猪业带来严重的经济损失。本文就猪大肠杆菌和链球菌的分离鉴定及耐药性做进一步探讨与分析,旨在为临床药品的合理选用,猪大肠杆菌病及链球菌病的防治提供科学依据。     

猪源多杀性巴氏杆菌的生物学鉴定与荚膜PCR分型

从表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离出13株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),采用Pm种特异性的KMT1-KMT2引物进行PCR扩增,结果与传统的生化反应鉴定完全一致。基于对甘露醇、卫茅醇、山梨醇、海藻糖的发酵能力和产生鸟氨酸脱羧酶的特性,Q_1、Q_3、Q_6、Q_7、Q_(10)、Q_(13)和C_(48-1)鉴定为Pm多杀亚种(Pm subsp.multocida);Q_2、Q_4、Q_5、Q_8、Q_9、Q_(11)、Q_(12)鉴定为Pm败血亚种(Pm subsp.septica)。对13株Pm分离物采用A型、B型和D型引物进行PCR扩增,8株鉴定为A血清型(61.5%);5株鉴定为D血清型(38.5%);没有发现B血清型的菌株。同时对金黄色葡萄球菌抑制试验、中性吖啶黄沉淀试验与荚膜PCR分型的相关性进行了讨论。     

羊源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力基因检测

为了调查内蒙古通辽市某羊场发病羊死亡的原因,对疑似致病菌进行分离、鉴定及部分生物学特性研究.对病死羊进行剖检,无菌条件下采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏等组织脏器进行细菌分离培养;对分离菌进行小鼠致病性试验、细菌生化检测、16S rDNA基因扩增及同源性比对分析和药物纸片扩散法敏感性试验.结果显示,分离菌株符合肺炎克雷伯菌生...     

狐狸源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力检测

从濒死期蓝狐肺脏中分离到1株革兰阴性短杆菌,并对分离菌株进行形态学观察、16S rRNA鉴定、全自动细菌生化鉴定仪鉴定及khe基因鉴定,在此基础上,完成了分离菌株的分型、人工感染小鼠试验、药敏试验及毒力基因检测等。最终鉴定结果显示,该分离菌株为K20型肺炎克雷伯菌,命名为SWKp17;同时,Vitek细菌鉴定仪鉴定该菌为肺炎克雷伯菌。人工感染试验和药敏试验结果表明,该细菌有致病性和多重耐药性。其对小鼠的半数致死量(LD₅₀)为2.9×10~7 CFU;对三代头孢菌素类、氯霉素类、喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、磺胺类耐药,但对亚胺培南和多黏菌素敏感。该菌株具有fim、ureA、mrkD及wabG毒力基因,但不具有rmpA、kfu、alls、iroNB、ybtA、uge、iucB等毒力基因。结果表明,引起本次狐狸肺炎的致病菌为非K1、K2、K3、K5、K20、K54及K57型肺炎克雷伯菌,本研究为临床治疗由该菌引起的狐狸肺炎提供参考依据。     

猫源弓形虫虫株的分离与鉴定

将猫的心、脑、舌用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理后接种小白鼠，经连续传代分离弓形虫虫株，用特异PCR方法对所分离的虫株进行了鉴定。分别从24只猫的样品中分离出8株弓形虫虫株，用弓形虫种特异的PCR方法对8个虫株进行鉴定。均得到弓形虫的特异条带；测序证明所扩增出的DNA片段确为弓形虫的核糖体DNA第一 内转录间隔区（ITS1）部分序列。研究结果表明，将动物组织用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理后接种小白鼠是一种分离弓形虫虫株较为理想的方法．特异PCR方法能准确、快速地鉴定弓形虫虫株。     

鸡源圣雷利气单胞菌(Aeromonas sanarellii)的分离鉴定及致病性研究

对1例鸡鼻炎样病例进行细菌学诊断,从病鸡鼻腔中分离到1株革兰阴性杆菌,编号为ZY17105,对其进行形态学、生理生化、分子生物学鉴定,对其致病性和耐药性进行分析,同时探讨gyrB基因在气单胞菌鉴定中的意义。16S rDNA进化分析显示ZY17105与圣雷利气单胞菌模式菌株LMG24682同源性为99.4%;gyrB基因进化分析显示ZY17105与各圣雷利气单胞菌株形成同一进化支,与圣雷利气单胞菌模式菌株LMG24682和A2-67之间的同源性为分别为97.8%和98.2%。根据形态学、生理生化特性、16S rDNA和gyrB基因进化分析,将分离株ZY17105鉴定为圣雷利气单胞菌,分离株ZY17105对小鼠和鸡有较强致病性;另外,进化分析表明gyrB基因在气单胞菌属各种间的区分能力高于16S rDNA。本研究首次从中国大陆分离到圣雷利气单胞菌,并证实gyrB基因可替代16S rDNA用于气单胞菌属各菌种间的进化分析鉴别。     

一株血清7型致病性猪链球菌的分离鉴定

为确定2007年11月黑龙江省五常市某猪场发病猪的病原,本研究将病猪迫杀,采取脑和关节液在血平板培养基上划线进行细菌分离培养,结果显示在血平板培养基上形成灰色、半透明、边缘整齐的有草绿色狭窄溶血环的光滑型圆形小菌落,镜检观察到散在排列的革兰氏阳性短链球菌,经生化反应、PCR反应及血清学试验鉴定为7型猪链球菌,并命名为07WC11株,其毒力基因型为cps7H+、gdh+、mrp+、ef和sly.以纯化的该分离菌株对斑马鱼和仔猪进行动物感染试验均能够导致斑马鱼和仔猪发病,表明该菌株具有一定的致病性,其毒力比国际标准菌株R735株和8074株更强.     

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定、耐药性分析及毒力基因检测

为确定屠宰场发病猪死亡原因,本研究对从死亡猪内脏中分离到的细菌,进行革兰染色镜检、生化鉴定和16SrRNA基因测序鉴定,并进行药敏试验、毒力基因检测及小鼠攻毒试验.结果显示,革兰染色镜检为细小或中等短杆状或丝状革兰阴性杆菌;生化试验特性分析及16SrRNA基因测序鉴定为奇异变形杆菌,命名为GZ2-2株.药敏试验结果显示...     

猪源粪肠球菌的分离、鉴定及应用

通过培养特征、形态观察、生理生化鉴定、16SrDNA序列分析和种特异性片段扩增等方法,从健康猪直肠内容物中分离到3株粪肠球菌,其中菌株NA14对常见病原微生物具有较强的拮抗能力;进一步研究表明该菌株具有较强的耐受人工胃液和耐胆汁的能力,能够耐受60℃、30min;动物试验表明饲料中添加该粪肠球菌能够降低仔猪腹泻,改善仔猪生产性能,增强猪瘟疫苗的免疫效果;因此该菌株作为动物益生菌具有好的应用前景。     

鸡霉形体的分离鉴定

从沈阳地区 2个鸡场的 6只病鸡取样 ,进行了霉形体的分离鉴定。通过培养特性、生化特性及血清学特性鉴定 ,分离出鸡败血霉形体 4株 ,分别命名为Sy1 株 ,Sy2 株 ,Sy4 株 ,Sy5株     

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

对从内蒙古海拉尔区某规模化兔场病死仔兔肺脏中分离到的1株病原菌进行了培养特性观察、革兰染色、生化试验与PCR鉴定,鉴定结果显示该分离菌株为支气管败血波氏杆菌。为进一步了解该菌株的耐药情况,对其进行了药敏试验及部分耐药基因的检测,结果表明分离菌株对青霉素G、阿莫西林、头孢拉啶等β-内酰胺类抗生素耐药严重,其次为四环素类抗生素,对卡那霉素、诺氟沙星等氨基糖苷类与喹诺酮类抗生素高度敏感。耐药基因检测筛选到bla TEM与tet B两种耐药基因,与分离菌的耐药表型相符。实验结果对兔波氏杆菌病的临床合理用药具有重要的指导意义。