蛋鸡非典型新城疫一例及其病原鉴定

１９９７年３月下旬，上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫，通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果：感染鸡群产蛋下降的幅度可高达５０％；新城疫ＨＩ抗体滴度高达１２ｌｏｇ２或以上；用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒（ＮＤＶ），初代尿囊液的ＥＬＤ５０为１０－７．５（０．２ｍＬ），１日龄ＳＰＦ鸡胚脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）分别为１．７２５和２．３２，其毒力接近标准毒株—ＮＤＶ北京株Ｆ４８Ｅ９。     

鸽新城疫病毒野毒PB9601株的致病性研究

用不同方法测试了从新城疫患鸽分离到的新城疫病毒（ＮＤＶ）野毒ＰＢ９６０１株的致病性。结果,该毒株对１日龄ＳＰＦ雏鸡的脑内接种致病指数为２．００,对６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数为０．００;该毒株对６周龄左右鸽有很强的致病性,有的血清中已有一定量的抗鸽ＮＤＶ抗体;经ＳＰＦ鸡胚传１３代的尿囊液病毒对鸽的半数致死量约为１２个ＴＣＩＤ５０。由此认为,ＰＢ９６０１株ＮＤＶ是对鸡致病性很弱但对鸽呈高度致病性的毒株,可作为国内鸽ＮＤＶ强毒的参考株。     

鹅副粘病毒的分类地位初探

对从病鹅体分离的禽副粘病毒（ＧＶＰ）ＹＧ９７株，经红细胞凝集（ＨＡ）和红细胞凝集抑制（ＨＩ）试验证明，与新城疫病毒（ＮＤＶ）存在着极大的相关性。参考ＮＤＶ的３个毒力指标－最小致死量致病鸡胚平均死亡时间（ＭＤＴ）、１日龄雏鸡内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）对ＹＧ９７株进行测定，表明其有与ＮＤＶ速发型类似的毒力，属强毒力的毒株。应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对Ｆ基因重要功能区片段扩增后进行序列测定，并与多株已报道的ＮＤＶ相应片段进行序列比较，经遗传进化树分析后，初步判定其为禽副粘病毒－Ⅰ型，属基因Ⅶ型ＮＤＶ。     

企鹅新城疫强毒的分离鉴定

从某动物园送诊的病死小企鹅肝脏分离到一株病毒,经血凝抑制试验（ＨＩ）和电镜观察确定为新城疫病毒。采用ＳＰＦ鸡胚和ＳＰＦ鸡测定其致病指数分别为：ＭＤＴ＝６２．１小时,ＩＣＰＩ＝２．４８,ＩＶＰＩ＝１．６７,属于强毒株。动物病试验表明该毒株经滴鼻／点眼途径可在９６小时内致死６周龄ＳＰＦ鸡,并出现典型的新城疫症状和病变。初步试验表明经静脉注射途径可致死７日龄北京雏鸭。     

鸡副粘病毒毒力特性研究

按照新城疫病毒毒力判定的标准方法进行了鸡副粘病毒分离株ＣＮ９８Ｆ８,Ｔ９９Ｆ４,Ｙ９８Ｆ９致病性试验,结果３株病毒的最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间（ＭＤＴ）分别为７０．８,６１．４,６４．８,１日龄雏鸡脑内按种致病指数（ＩＣＰＩ）分别为１．８９,１．８１和１．８１,６周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）分别为２．６２,２．６２和２．６０,表明这３株鸡副粘病毒均具有与新城疫病毒速发型相类似的     

鸽新城疫野毒株的分离及生物学特性研究

对分离的Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３３株鸽新城疫病毒进行了电镜检查、致病性指数测定、血凝试验（ＨＡ）,与鸡新城疫Ｌａｓｏｔａ毒株的交叉血凝抑制试验（ＨＩ）、致病性试验。测得鸡胚半数感染量（ＥＩＤ５０）分别为１０－８．４１,１０－７．５３,１０－７．８３;鸡胚最小致死量（ＬＤ）均为１０－４;鸡胚平均致死时间（ＭＤＴ）分别为８０ｈ,９０ｈ,９６ｈ;１日龄雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）分别为１．６０,１．５０,１．５５;分离毒株与Ｌａｓｏｔａ毒株和其相应血清的交叉凝集抑制试验有明显差异。将分离毒株分别接种１月龄鸽各３只,４～１０ｄ全部出现典型神经症状,１５ｄ内死亡。结果表明所分离的３株病毒为鸽新城疫病毒,在抗原性上与鸡新城疫病毒存在一定差异,对鸡也有一定致病力。为制定防制措施,研制鸽新城疫疫苗,控制新城疫流行提供了科学依据。     

鸡新城疫病毒ICPI的测定

本中心对部分鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）毒株,尤其是Ｌａｓｏｔａ株的１日龄雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）作了多次测定,测定的结果与厂家介绍或有关资料上的数值基本一致,现将检测方法与部分检测结果报道如下。１检测方法ＮＤＶ分离毒或冻干疫苗经ＳＰＦ鸡胚增殖后,无菌...     

鸽I型副粘病毒的分离和鉴定

用分离的对鸽有致病性的４株禽副粘病毒通过电镜观察、病毒中和试验和动物回归试验结果显示,病毒粒子呈球形,直径１００￣４５０ｎｍ,表面有纤突;能凝集鸡红细胞,血凝反应能被新城疫病毒（ＮＤＶ）和鸽Ｉ型副粘病毒（ＰＰＭＶ－１）阳性血情所抑制;接种１月龄乳鸽能使其发病,出现明显症状和病变并有死亡,接种１月龄ＳＰＦ鸡不发病;能在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦｓ）上生长,并能产生细胞病变（ＣＰＥ）;对高温敏感,在５５℃     

肉鸡新城疫强毒感染的诊断

取某大型肉鸡场疑似新城疫的病死鸡的脑组织和泄殖腔粘膜病料，接种于１０日龄左右ＳＰＦ鸡胚，记录其死亡时间和ＨＡ滴度，并取其尿囊液进行１日龄ＳＰＦ雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）测定。结果，鸡胚平均死亡时间（ＭＤＴ）在４８ｈ左右，其ＩＣＰＩ为１．５１，对照于中监所标准强毒株为１．３６。其尿囊液ＨＡ效价在２．９左右，并可被标准阳性血清阻断，血凝完全被抑制。以琼扩试验排除了禽流感，证明该鸡场发病为新城疫强毒所致。即急性典型新城疫，可发生于免疫过的肉鸡群。     

鸽新城疫病毒的分离及鸽群自然感染状况的调查

将在北京某信鸽群采集的两只具神经症状的病鸽脑组织悬液接种ＳＰＦ鸡胚后，分离出二株病毒分离物ＰＢ９６０１和ＰＢ９６０２，通过对鸡红血球的血球凝集试验，用已知鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）高免血清任务在球凝集抑制试验（ＨＩ）及２～３月龄鸽的攻毒试验，证明这两个毒株为对鸽呈高致病性的ＮＤＶ。交叉ＨＩ试验表明，鸽ＮＤＶ分离株与鸡ＬａＳｏｔａ株间有很高的血清交叉反应，但也存在着一定抗原性差异。对扬州地区若鸽群中２－     

七彩山鸡新城疫病毒的分离及生物学特性测定

用SPF鸡胚从疑似七彩山鸡新城疫病鸡群中分离到1株病毒，经HA和HI试验及病毒中和试验证明该分离毒为七彩山鸡新城疫病毒。动物回归试验表明，分离毒肌肉注射非免疫七彩山鸡能使之发病、死亡，出现与自然病例一致的症状与病变，但肌注SPF鸡只能感染，不出现临床症状。其生物学特性：NHAT为快、HOT为8min、ICPI为1．46、IVPI为1．6、MDT为76．8h，与鸡新城疫病毒相比，表现出不同的特性。     

鸵鸟新城疫病毒野毒株的分离及其生物学特性

用鸡胚从疑似鸵鸟新城疫的送检病料中分离到 2株病毒。 2株病毒均能凝集鸡红细胞 ,且能被抗新城疫病毒 ( NDV)阳性血清抑制 ;用抗 NDV单抗 PEG夹心 ELISA测定 2株分离毒均为阳性。对其中 1株作进一步生物学特性鉴定 ,按照国际上规定的 NDV毒力判定标准测定的该毒株最低致死量致死鸡胚的平均死亡时间 ( MDT)为 54h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数 ( ICPI)为 1 .88,6周龄雏鸡静脉接种致病指数 ( IVPI)为2 .75。结果表明 ,本分离株为鸵鸟新城疫病毒强毒     

七彩山鸡新城疫病毒的分离及生物学特性测定

用SPF鸡胚从疑似七彩山鸡新城疫病鸡群中分离到一株病毒，经HA及HI试验以及病毒中和试验结果表明，该分离毒为七彩山鸡新城疫病毒，动物回归试验表明，分离毒肌肉注射非免疫七彩山鸡能使之发病，死亡，出现与自然病例一致的症状与病变，但肌注SPF鸡只感染，不出现临床症状，其生物学特性为：NHAT为快，HOT为8分钟，ICPI为1.46,IVPI为1.6,MDT为76.8小时。     

新城疫病毒强毒株的分离与鉴定

从发病率为１００％、病死率为９７％的鸡群中分离到１株病毒。该病毒凝集鸡红细胞的作用可被新城疫标准阳性血清所抑制,证明所分离的毒株为新城疫病毒。鸡胚半数致死量、最小致死量致死鸡胚的平均时间、１日龄雏鸡脑内致死指数、６周龄雏鸡静脉致死指数、血凝解脱及血凝素热稳定性等试验表明,分离毒为新城疫病毒强毒株,其毒力比标准强毒Ｆ４８Ｅ８株还强。血凝抑制试验和中和试验表明,分离毒的血凝性与Ｆ４８Ｅ８相同,但中和特性与Ｆ４８Ｅ８有较大差异     

鹅副粘病毒YF株的分离鉴定与生物学特性研究

从辽宁省某鹅场病死鹅中分离到1株禽Ⅰ型副粘病毒.应用鸡胚传代、电镜形态学观察、红细胞凝集、红细胞凝集抑制试验、血清中和试验、动物回归试验、免疫保护试验进行了研究,并进行了最小致死量平均死亡时间(MDT)、脑接种致病指数(ICPI)、静脉内接种致病指数(IVPI)三项毒力指标的测定.参照新城疫病毒毒力判定的标准及其方法,分别测定该分离株的鸡(鹅)胚MDT、1日龄鸡(鹅)ICPI和6周龄鸡(鹅)IVPI为51.6/68.6 h、1.75/1.70和1.68/1.72.结果表明,该分离株为鹅副粘病毒强毒株,命名为YF株.应用YF毒株制备的油乳剂灭活苗免疫实验鸡和雏鹅,结果表明有良好的保护率.     

鸽Ⅰ型融粘病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚，从病死鸽的脑组织中分离到一株病毒。该病毒能使鸡红细胞发生凝集，而且这种凝集能被鸡新城疫标准阳性血清所抑制。通过进一步对该病毒进行回归试验。MDT，ICPI，IVPI及其他生物学特性试验，证实该分离株为鸽Ⅰ型副粘病毒（PMV-Ⅰ）中等毒力毒株。     

鸭副粘病毒强毒株的分离和鉴定

采用鸡胚接种法从安徽凤阳某患病肉鸭群中分离到一株病毒。该素株对鸡红细胞具有凝集性，并可被康复鸭鸭血清和NDV阳性抗血清所抑制，而不能被禽流感标准阳性血清抑制，结合血清中和鸡胚接种试验，病毒回归试验和免疫防治效果的研究结果，确认为鸭副粘病毒。参照国际上规定的新城疫病毒毒力判定的标准及其方法，测定该分离株的鸡胚最小致死量平均死亡时间（MDT），1日龄鸡及脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉内接种致病指数（IVPI）分别为48.9h,1.80和2．45。表明该鸭副粘病天线离株具有新城疫病毒（NDV）速发型相类似的毒力，属强毒力毒株，并定名为WF00D株。     

鸭源新城疫病毒的生物学特性

用鸡胚尿囊腔传代法从23个鸭泄殖腔拭子中分离到1株病毒，经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验鉴定为新城疫病毒。该毒株ELD50为5．85log10，鸡胚平均致死时间(MDT)为92．5h，1日龄鸡脑内致病指数(ICPI)为0．5，6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)为0．3，属于中等偏弱毒力的毒株。该毒株不引起6周龄雏鸡发病。结果表明家鸭也能感染NDV。     

病死孔雀中新城疫病毒的分离和鉴定

从疑似患新城疫的病死孔雀中分离出1株病毒,该病毒具有血凝活性,在血凝试验和血凝抑制试验中,能凝集鸡的红细胞,且血凝活性能被新城疫阳性血清所抑制.通过试验测定鸡胚最小致死量（EMLD）,鸡胚平均致死时间（MDT）,血凝素热稳定性,脑内接种致病指数（ICPI）及静脉接种致病指数（IVPI）,结果表明,该分离病毒为新城疫嗜内脏速发型毒株.     

鸽副黏病毒Ⅰ型(川沙株)的分离与鉴定

利用SPF鸡胚培养法从上海川沙某具有典型新城疫症状和病理变化的高死亡率发病鸽场的死亡鸽体内分离到一株病毒.对该病毒E5代尿囊液进行病原学鉴定、RT-PCR鉴定、理化特性测定、致病指数、病毒血清学试验及鸽体致病性试验,结果显示该病毒具有血凝性,且血凝特性可被新城疫病毒参考阳性血清所抑制,而不能被减蛋综合征病毒、禽流感病毒（H5、H9和H7）阳性血清抑制;该病毒对氯仿、乙醚和酸敏感;致病指数分别为：最小致死量鸡胚平均死亡时间为55.2 h,1日龄雏鸡脑内致病指数为1.8,6周龄雏鸡静脉致病指数为2.39.经鉴定,该分离毒株为鸽副黏病毒Ⅰ型强毒株,将其命名为鸽副黏病毒Ⅰ型（川沙株）.