富铬酵母发酵条件优化的研究

 利用酵母菌具有较强的富集微量元素的特性,试验对产朊假丝酵母富集微量元素铬的条件进行了优化。从6株酵母菌中筛选出耐铬能力和富集铬能力均较强的CJ2作为试验菌株。试验结果表明：500 mL三角瓶中装入75 mL发酵培养基,采用一次性加铬的方式,适宜的CrCl₃·6H₂O浓度为50 μg/mL,pH值为5.5,接种量为6%,摇床转速180 r/min,28~30 ℃下培养24 h,获得的富铬酵母生物量能达到1.30 g/100 mL,铬含量能达到2 000 μg/g左右,转化率能达到50%左右。同时CJ2菌株发酵罐培养,铬酵母生物量能达到1.80 g/100 mL,铬含量能达到2 500 μg/g左右。并对普通酵母和富铬酵母中的氨基酸组成了分析。     

富铜酵母发酵条件优化的研究

利用酵母菌具有较强的富集微量元素的特性,试验研究了酵母菌富集微量元素铜的条件优化。从6株酵母菌中筛选出耐铜能力和富集铜能力均较强的J5作为试验菌株。试验结果显示:500ml摇瓶中装入50ml培养基,pH值为4.0～5.5,接种量为4%,30℃条件下摇床培养,最适宜的无机铜源为氯化铜,适宜氯化铜浓度120μg/ml。在此条件下培养所得酵母菌体生物量能达到1.00g/100ml以上,有机铜含量能够达到5000μg/g左右。     

酵母富集微量元素锌的研究

酵母能够将无机态微量元素锌转化为有机态的微量元素。采用富集培养方法,从22株酵母菌株筛选出2株富集高含量锌的菌株,并对酵母菌在不同锌离子浓度条件下最适生长条件、pH、含锌化合物的筛选进行研究。结果表明,锌含量为4000～5000mg/kg,适宜的含锌化合物为硫酸锌,锌离子添加浓度为60～120mg/kg。     

利用甘蔗糖蜜生产饲料酵母发酵条件的研究

以甘蔗糖蜜为碳源发酵生产高生物量饲料酵母,通过单因素正交试验设计,确定优化的培养条件为:温度28℃,pH5.0,装液量200mL/500mL,摇床转速180r/min,培养时间84h。在优化的培养条件下酵母菌株的总蛋白质含量可达到6.01g/L。     

利用产朊假丝酵母生产铬酵母发酵工艺的研究

对利用产朊假丝酵母生产富铬酵母进行了研究。通过在培养基中添加Cr3＋的方法制备富铬酵母,测定富铬酵母生物量及铬含量。对培养条件进行了优化,确定了最优培养条件为培养温度30℃、培养基铬添加量100μg/mL、接种量体积分数为4%～6%（V/V）、培养起始pH值为5.0、培养时间20h。在该优化条件下获得的富铬酵母生物量可达1.83g/100mL,有机铬含量可达2210μg/g。试验结果可以为富铬酵母的生产开发奠定一定的技术基础。     

酵母菌发酵有机米糠富锗的条件优化

试验以有机米糠为发酵底物,研究酵母菌对锗的生物富集作用,通过对富锗酵母生物量以及锗含量的测定,对此发酵试验的条件进行优化。试验结果显示:令初始p H值自然,米糠添加量32 g/250 ml、装液量80 ml/250 ml、接种量10%、时间60 h、温度30℃、GeO_2添加量为100 mg/l时,优化培养条件所得的富锗酵母菌发酵的有机米糠的有机锗生产水平为11.83 mg/kg。     

多抗性保加利亚乳杆菌的诱变和筛选

通过紫外诱变和硫酸二乙酯诱变,筛选出抗生素抗性(头孢氨苄和氨苄西林)的保加利亚乳杆菌,同时模拟人体胃酸环境(pH1.5～4.5)和十二指肠高胆酸盐环境(0.1g/100mL～0.4g/100mL)对诱变后的保加利亚乳杆菌的抗性进行了研究。结果表明,保加利亚乳杆菌突变株可抗头孢氨苄和氨苄西林(均为2mg/mL),并且在pH2.5～4.5时具有较强的生存能力,培养4h活菌数仍达108cfu/mL以上,在pH1.5条件下仍有部分存活。在0.1g/100mL～0.3g/100mL胆酸盐条件下培养4h,活菌数仍达106cfu/mL以上,且能在0.4g/100mL胆汁盐中存活。     

发酵性接合酵母的富硒能力分析与发酵条件优化

本试验以实验室保存的发酵性接合酵母为出发菌株,采用3,3’-二氨基联苯胺盐酸盐法测定不同发酵条件下酵母菌的硒含量,并通过单因素试验和正交试验研究了发酵时间、装液量、硒浓度、接种量对酵母菌富硒能力的影响。结果表明:酵母发酵的最佳条件为发酵时间36 h,装液量60 m L/250 m L,接种量12%(V/V),加硒时间8 h。此条件下富硒酵母的生物量可达5.96 g/L,总硒含量达10.10 mg/L。     

发夫酵母利用淀粉水解液发酵合成虾青素的研究

发夫酵母269菌株能够直接发酵玉米淀粉或马铃薯淀粉水解液进行虾青素的生物合成。淀粉水解液的主要成分为葡萄糖,另外还有少许二糖和极限糊精,在添加适量其它营养物质后,可被269菌株利用生产虾青素。摇瓶实验结果表明,培养72h后,发夫酵母的生物量为12.5g/l,虾青素的体积产率为11.86mg/l;在10L罐分批发酵实验中,72h后发夫酵母的生物量可达17.5g/l,色素的体积产率达19.5mg/l;在10L罐恒pH补料发酵实验中,128h后发夫酵母的生物量可达49.5g/l,色素的体积产率达54.3mg/l。     

发酵性结合酵母菌的富硒能力的研究

以试验室保存的发酵性结合酵母菌为出发菌株,初步对该酵母菌进行耐硒范围的测定,并采用3,3'—二氨基联苯胺盐酸盐法测定不同发酵条件下酵母菌的硒含量。通过单因素试验和正交试验研究发酵时间、装液量、不同硒质量浓度及不同接种量对酵母菌富硒能力的影响。结果表明:酵母发酵的最佳条件是发酵时间48 h,装液量80 m L/250 m L,接种量12%(体积/体积),加硒时间8 h,富硒酵母的生物量可达6.04 g/L,总硒含量达10.2 mg/L。     

富硒酵母液体深层发酵条件的研究

试验对经含硒麦芽汁平板驯化得到的AS15菌株在含硒(Se4+)麦芽汁培养基中液体发酵条件进行研究,试验结果表明,AS15菌株在含Se4+的液体培养基中生物量和硒转化率均高于出发菌株;在AS15菌株对数生长期添加亚硒酸钠,AS15菌株生物量及硒转化率优于其它添加方式;AS15菌株发酵罐培养采用恒定pH值发酵,生物量有了明显的提高,达32.5g/l;在AS15菌株发酵罐培养22h后进行定时加入Se4+,所得到的AS15酵母细胞内的硒含量较摇瓶发酵有所提高,达2081μg/g,硒的转化率达84.5%。     

富铬酵母培养条件的优化

研究了富铬酵母的培养方法,采用二苯胺基脲法测定富铬酵母中的铬含量,研究发现,培养基的组成、加铬量、发酵液的pH都对富铬酵母的产量有很大影响,加尿素的麦芽汁培养基能显著提高富铬酵母的产量和铬含量。优化后的富铬酵母培养条件为:麦芽汁加5‰尿素培养基,培养pH为5.0,发酵液中铬浓度为100mg/l,培养时间为24h,培养温度为30℃,接种量为10%。在此条件下,富铬酵母的产量为0.7461g/100ml,铬含量为1673μg/g。     

含锌酵母的培养试验研究

以酵母菌 IFO2 346菌株为菌种 ,在基础培养基中加入适量的锌离子 ,经发酵试验获得高锌酵母产品。对该株酵母的最适生长条件进行了初步研究。结果表明 :该菌在无机锌浓度为40 0 μg/ m L、接种量为 10 %、最适 p H值为 6左右、碳源为蔗糖、氮源为磷酸二氢铵的培养条件下 ,干酵母含锌量达 80 mg/ g,该研究取得了较为满意的结果     

西农萨能奶山羊瘤胃产蛋白酶酵母菌的筛选研究

试验旨在从西农萨能奶山羊瘤胃液中分离出产蛋白酶的酵母菌株,并对其产酶能力进行测定。以蛋白酶的活性进行筛选,得到高产蛋白酶酵母菌,对其产酶条件进行优化。经形态学观察及26S rDNA序列分析鉴定出5株产蛋白酶酵母菌,分别对各菌株产酶条件进行优化,在最佳产酶条件下,菌株库德毕赤酵母Y1(时间48 h、接菌量3%、温度30℃、pH值9)产酶活力达229.89 U/mL,东方伊萨酵母Y5(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达212.63 U/mL,马克斯克鲁维酵母Y16(时间48 h、接菌量3%、温度37℃、pH值9)产酶活力达208.44 U/mL,近平滑假丝酵母Y20(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达211.74 U/mL,单孢酿酒酵母Y21(时间48 h、接菌量4%、温度30℃、pH值9)产酶活力达209.96 U/mL。同时对五株酵母菌产水解酶的效果进行了探究,发现库德毕赤酵母Y1、马克斯克鲁维酵母Y16、单孢酿酒酵母Y21具有较高的植酸酶活性,达到14.38、15.34、15.63 U/mL;五株菌株均表现出较高的果胶酶活性,其中单孢酿酒酵母Y21显著高于其他菌株(P0.05),达到15.18 U/mL;五株菌株均表现出较高的纤维素酶活性,均超过180 U/mL,其中近平滑假丝酵母Y20显著高于其他菌株(P0.05),达到199.08 U/mL。试验成功分离出5株产蛋白酶菌。库德毕赤酵母Y1、马克斯克鲁维酵母Y16、单孢酿酒酵母Y21具有较高的植酸酶活性。五株菌株均表现出较高的果胶酶活性、纤维素酶活性。     

醇母细胞自溶条件的研究

研究NaCl添加量、pH、温度及时间等条件对酵母培养物液体摇瓶的自溶效果的影响,确定其最佳自溶条件不添加NaCl,pH 5.0,温度50℃,自溶40h,自溶后样品中游离氨基酸含量从初始0提高到1.068g/100mL,可溶性蛋白含量从初始0提高到1.237g/100mL,分别比单因素条件下自溶时提高2.96倍和1.15倍.     

酵母细胞自溶条件的研究

研究NaCl添加量、pH、温度及时间等条件对酵母培养物液体摇瓶的自溶效果的影响,确定其最佳自溶条件：不添加NaCl,pH5.0,温度50℃,自溶40h,自溶后样品中游离氨基酸含量从初始0提高到1.068g/100mL,可溶性蛋白含量从初始0提高到1.237g/100mL,分别比单因素条件下自溶时提高2.96倍和1.15倍。     

椰子水中甘露醇产生菌的筛选及发酵条件的初步优化

为了研究自然发酵椰子水中的甘露醇产生菌,试验对不同发酵时间的椰子水进行连续分离培养,得到31株不同的微生物;通过液体纯培养,利用分光光度法测定发酵液中甘露醇的含量,筛选得到1株甘露醇产量最高的菌种,同时对该菌株的培养条件进行了初步优化。结果表明:该菌株发酵液中的甘露醇含量最高,达1.5 mg/mL,果糖转化率为63.2%,初步鉴定为酵母菌;当果糖和葡萄糖配比为2︰1时,果糖浓度为0.04 g/mL;在32℃条件下经过96 h的静置培养后,该菌株发酵液中的甘露醇含量最高,果糖转化率也大大提高。     

枯草芽孢杆菌诱变株发酵羽毛工艺条件的研究

通过对枯草芽孢杆菌紫外线和亚硝酸钠复合诱变菌株FUN30.2的发酵培养基及发酵条件的优化,得到最优的发酵培养基成分为:羽毛粉5.5%,青贮玉米秸秆粉0.8%,K+浓度0.018mol/L,Mg2+浓度0.065mol/L,Ca2+浓度0.072mol/L,Fe2+浓度0.010mol/L,Na+浓度0.088mol/L。最优的发酵条件为:培养温度33℃,培养时间72h,摇床转速170r/min,接种量6%,装液量100mL/500mL,菌体生长适宜的培养基初始pH值是7.0,菌体产酶的最适宜pH值为7.5～8.0。60h菌体产酶活力最高达1.267U/mL;发酵时间72h,羽毛降解率为69.61%;发酵液的氨基酸含量达22.66mg/mL。     

富硒酵母液体发酵条件的研究

本文对经含硒YPD平板驯化得到的YS1菌株在含硒4+(Se4+)YEPD培养基中液体发酵条件进行研究。试验表明YS1菌株在含Se4+的液体培养基中生物量和Se4+转化率高于出发菌株。在YS1菌株生长成熟期添加亚硒酸钠,YS1菌株生物量及硒转化率优于其他添加方式。采用恒pH补料分批培养,YS1菌株生物量有了明显的提高,达13.41g/L。在YS1菌株培养30h后进行定时加入Se4+,所得到的YS1总硒含量较摇瓶发酵有所提高,达3158.53μg/g,Se4+转化率达84.71%。     

紫外线诱变选育富铬酵母菌株的研究

采用紫外照射法对一株产朊假丝酵母进行诱变处理,结果表明:在紫外灯功率为15W,照射距离为20cm,诱变时间为30s的条件下,致死率可达到72.10%。通过初筛和复筛得到5株酵母菌,其中C-11号菌株经测定其生物量达到13.1g/L,酵母细胞中有机铬的含量达到628.1μg/g,较诱变前提高了40.90%,且稳定性好,确定其为适于生产所需的强聚铬能力菌株。