免疫亲和色谱-气相色谱/质谱法(IAC-GC/MS)检测猪肝中的沙丁胺醇与克伦特罗

制备出抗沙丁胺醇的抗血清，提取、纯化IgG制备免疫亲和色谱柱，针对沙丁胺醇与克伦特罗的动态柱容量分别为400ng／mL基质和416ng／mL基质。猪肝样品匀浆后用稀盐酸提取，经免疫亲和色谱柱纯化，再用GC／MS检测，即为IAC-GC／MS法。对沙丁胺醇的检测限为0．5ng／g，定量限为2ng／g，对克伦特罗的检测限为0．8ng／g，定量限为2．5ng／g。空白组织按照1、5、10、20ng／g的浓度添加药物，沙丁胺醇在空白肝中的添加回收率为78．4％～106．9％，克伦特罗的添加回收率为77．1％～102．9％。本研究建立的检测猪肝中沙丁胺醇与克伦特罗的IAC-GC／MS法乃国内首次报道。     

同位素内标GC/MS法测定猪尿和猪肝中克伦特罗

建立了同位素内标法定量测定猪尿和猪肝中克伦特罗的方法。猪尿和猪肝用乙酸乙酯、盐酸溶液提取，再经SCX固相萃取柱净化、N，O-双三甲基硅基-三氟乙酰胺（BSTFA）衍生化，定容后用气相色谱-质谱（GC／MS）测定，并以D9一克伦特罗为内标定量。猪尿和猪肝中克伦特罗的检出限分别为0．3ng／mL和0．3ng／g，克伦特罗的测定在5．0～400ng／mL范围内具有良好的线性关系，猪尿和猪肝中的平均回收率分别为100．3％和97．2％，批内变异系数分别为2．1％～4．8％，3．4％～6．4％，批间变异系数分别为2．5％～5．1％，2．7％～6．0％。通过与外标法比较，该方法定量准确可靠，更加适宜用作猪尿和猪肝中克伦特罗的定量测定。     

ELISA测定猪尿液中β-受体激动剂残留的准确性评价

本研究建立克伦特罗间接竞争ELISA检测方法,对检测条件进行了优化确定,并利用猪尿液进行添加回收试验。结果显示:ELISA反应CLE-OVA包被抗原和CLE单抗的最适浓度分别为1:40 000和1:20 000,间接竞争ELISA的线性范围为0.016 l^8.520 0 ng/mL。该方法对克伦特罗、溴氯特罗、马布特罗和溴布特罗均有交叉反应。对冷冻储存半年以上的猪尿进行ELISA测定时,发现检测限可达58.848 3 ng/mL,药物添加回收率为85.19%~5 173.25%,变异系数为4.78%~96.79%;而经过MCX固相萃取柱净化处理后,检测限为0.076 ng/mL,添加回收率在101.21%~119.10%之间,变异系数为6.05%~18.38%。结果表明,SPE净化处理后,可有效去除尿液中的色素、蛋白等基质,提高了该法的灵敏度和准确性。     

GC/MS离子法测定猪尿中瘦肉精残留的研究及应用

GC／MS离子法测定猪尿中盐酸克伦特罗的残留，具有很好的分离度，特征离子与谱库检索一致，匹配度高。浓度10-200ng／mL范围呈良好的线性关系（R=0．9947）；仪器检出限为5—10ng／mL；回收率范围为69．7％-97．6％；批内变异系数≤6．1％。批间变异系数≤3．2％。检测60批猪尿中盐酸克伦特罗的残留。检出率为0。本方法对确证猪尿中盐酸克伦特罗残留具有重要意义。     

莱克多巴胺多克隆抗体的制备

采用多元酸酐法活化盐酸莱克多巴胺，用混合酸酐法将活化的莱克多巴胺与载体蛋白（KLH，BSA）偶联，制备了莱克多巴胺免疫原KLH-Rac和包被抗原BSA-Rac。以KLH-Rac免疫新西兰白兔获得了莱克多巴胺多克隆抗体，以BSA-Rac为包被抗原，采用间接ELISA检测抗血清，其效价达到1：6000，间接竞争ELISA测得抗血清的IC50值约为5ng／mL，其与克伦特罗、沙丁胺醇、特布它林的交叉反应性小于0．01％。     

酶联免疫吸附法检测猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留

以莱克多巴胺单克隆抗体间接竞争酶联免疫吸附（ELISA）法测定猪肉和猪尿中莱克多巴胺残留。该法对莱克多巴胺的检测限为0.8ng/mL（g）,在空白组织中的添加回收率为80.4%～109.5%,变异系数为5.8%～12.6%。     

ELISA方法检测猪尿中克伦特罗的方法验证

为了验证ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量的可行性,采用ELISA方法对试剂盒的校正曲线的线性相关关系、检测限、重复性和样品加标回收率进行了验证.结果为,试剂盒的校正曲线的线性相关系数为0.985;定性检出限为0.147ng/mL,定量检出限为0.490ng/mL;添加0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL的克伦特罗标准液时,变异系数分别为2.29%、6.97%、2.73%,平均回收率分别为91.8%、102.4%、99.7%.结果表明应用ELISA方法检测猪尿中克伦特罗残留量符合实验室质量控制规范的要求,适合检测猪尿中克伦特罗残留量的初筛.     

抗IVM多克隆抗体检测牛组织中IVM残留的研究

用自制的抗伊维茵素（IVM）多克隆抗体检测牛肌肉和肝脏中IVM的残留,将IVM以5．0ng／g、10．0ng,g、20．0ng／g和40．0ng／g的量分别添加至经处理的各空白组织中,用竞争ELISA法测得IVM在肌肉和肝脏中的回收率为93．9％～98．3％,变异系数为2．1％～5．1％,最低检测限为0．94ng／g。     

磺胺类药物多克隆抗体的制备与ELISA检测方法的初步研究

模拟磺胺母核结构合成了3种人工免疫原,免疫新西兰白兔,用间接竞争ELISA方法监测免疫效果。选择抑制效果较好的2组多抗血清建立磺胺类药的ELISA检测方法,绘制竞争标准曲线,并进行添加回收试验。结果表明：A组多克隆抗体对6种常用磺胺药SMD、SMM、SMZ、SDM、SDM、SD的IC10分别为0．010、0．046、0．010、0．100、0．067、0．019μg／mL,低于最高残留限量（0．10μg／mL）;C组多克隆抗体对SMD、SMM、SMZ、SDM、SQ、SD、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪的IC10分别为0．0091、0．051、0．058、0．088、0．020、0．010、0．014、0．011μg／mL,亦低于最高残留限量。2组多克隆抗体对磺胺药的回收率为54．5％～111．8％和54．2％～130．3％,变异系数为3．6％～10．9％和3．7％～5．9％。     

抗莫能菌素多克隆抗体检测鸡组织中莫能菌素残留的研究

本文用自制的抗莫能菌素多克隆抗体检测肉鸡肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织中莫能菌素的残留。将莫能菌素以30．0、60．0、120．0μg／kg分别添加到经处理的各空白组织中，用竞争ELISA法测得莫能菌素在肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织中的回收率为78．7％～104．3％，变异系数为4．2％～18．0％，检测极限为5．0～8．51μg／kg。     

猪肺疫与猪附红细胞病继发感染治疗

猪肺疫又被称为猪巴氏杆菌病,是由致病性巴氏杆菌感染引发的一种急性呼吸道疾病,具有很高发病率和致死率。该种传染性疾病可以危害不同年龄、不同性别、不同品种的猪,一年四季均可发生,但以每年早春和晚秋季节发病率最高。猪附红细胞体病又被称为附红体、血虫病或红皮病,是由血液原虫所引发的一种以贫血、黄疸、发热为主要症状的体内寄生虫病。猪肺疫和猪附红细胞体病混合感染给疾病诊断工作带来很大难度。该文主要结合一个养殖场的实际发病经过,分析猪肺疫与猪附红细胞体病继发感染的治疗过程。     

非洲猪瘟与典型猪瘟的诊断与防控

2018年8月,我国首例非洲猪瘟疫情在辽宁省沈阳市被确诊,该病的确诊以及原先存在的典型猪瘟必然会对我国养猪业健康发展造成冲击和影响。对非洲猪瘟和典型猪瘟的病原学、流行病学、诊断技术和防控4个方面进行了综述,以期为非洲猪瘟和典型猪瘟的有效综合防控提供参考。     

非洲猪瘟与猪瘟的特征及临床鉴别

文章介绍了非洲猪瘟与猪瘟在病原、临床症状、流行病学方面的特征和差异,以帮助基层兽医人员在临床上能够初步鉴别,有针对性地快速采取防控措施,防止疫情扩散,减少养殖户损失。     

Prevalence and Characteristics of Staphylococcus aureus in Connecticut Swine and Swine Farmers

This study explores the characteristics of Staphylococcus aureus (S. aureus) in swine and their human handlers in a convenience sample of 35 farms in Connecticut. Husbandry practices are clearly different from better‐known concentrated animal feeding operations (CAFOs) with less intensive rearing conditions. Nasal samples were collected from 263 pigs and nine humans on 35 farms during the 2010 rearing season. Samples were analysed using established microbiology methods, and resulting methicillin‐sensitive (MSSA) and resistant (MRSA) isolates were typed by pulsed‐field gel electrophoresis (PFGE) and spa typing. PCR was used to detect the presence of the Panton‐Valentine Leukocidin (PVL) gene, a cytotoxin usually associated with CA‐MRSA infection. A farm assessment form and questionnaire were used to obtain the information about husbandry practices and human exposure risk, respectively. Staphylococcus aureus colonized swine and humans were found in 51% (18/35) of the farms sampled at a rate of 30% (85/259) and 22% (2/9), respectively. Eight pigs and two humans were MRSA positive on five farms. MRSA in swine was related to healthcare‐associated (HA), community‐associated (CA) or livestock‐associated (LA) MRSA strains, whereas humans were colonized with HA‐MRSA. On the basis of spa typing, there was evidence of human–animal transmission thereby signifying humanosis/reverse zoonoses. The PVL gene was found in 88% (7/8) of MRSA swine isolates, the first time this gene has been seen in colonized pigs sampled on US farm. MSSA isolates belonged to six spa types: t337 (41%), t034 (12%), t334 (12%), t4529 (12%), t8760 (18%) and t1166 (6%) including LA strains. This is the first time spa type t8760 has been reported and the only MSSA with the PVL gene. In summary, MRSA including LA strains (LA‐MRSA) can be found on small farms with different husbandry practices from CAFOs, suggesting that preventive measures for zoonotic MRSA infection should address a range of animal production.     

一例猪瘟和猪小袋纤毛虫混合感染的诊断与治疗

猪瘟是由披盖病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒引起猪的一种流行性广、传染性强的疫病,可表现为急性、亚急性、不典型或不显症状的病程。病猪在临床上主要表现为精神萎顿、被毛松乱、两眼无神,初期结膜发红、后期苍白,体温呈现稽留热,初期便秘、后期下痢,排粪稀烂恶臭,并附有灰白色粘性渗出物,有时带血。剖检时淋巴结病变比较特殊,具有临床诊断意义。     

母猪的饲养管理

在规模化猪场中,以种猪群体水平考察与评估生产经营状况观点是正确的.我国规模化猪场起步较晚,发展却很迅速,但大多数养猪生产者的饲养管理仍停留在重视个体忽视群体的观念上,这必然影响养猪生产规模优势的发挥,进而影响养猪生产的经济效益.本文拟就种母猪的饲养管理提出一些看法,仅供同仁参考.     

猪流行性感冒

猪流感（Swine infl uenza,SI）是由猪流感病毒（Swine infl uenza virus,SIV）引起的一种猪的高度接触性、急性的具有传染性的群发性猪呼吸道疾病,该病毒属于正黏病毒科A型流感病毒属。该病的主要特征为突然发病、呼吸困难、咳嗽、发烧、疲劳倦怠及传播迅速、康复快、死亡率低。由于传播速度快、发病急,如果在一个发病初期治疗不及时,容易继发支气管炎、肺炎、胸膜炎、副猪嗜血杆菌感染等疾病,导致猪的死淘率增高,给养猪场户造成比较大的经济损失。文章将根据猪流感病毒的相关知识,从其病原学、临床症状等方面做出综述,并针对其特点讨论治疗及防控方法。     

猪流感

猪流感病毒是目前最常见的猪呼吸道病致病因子之一。常由于与其它病原的混合感染而给猪场造成一定的损失，并且该病毒易发生变异，对人和其它动物健康有深刻的影响。 １ 病原 猪流感病毒为单股负链ＲＮＡ病毒，属正粘病毒科流感病毒属Ａ型流感病毒。病毒粒子多数呈球形，直径约为 ８０－１２０纳米。该病毒在初分离时，时常呈长短不一的丝状体。在体外培养传代后变成球形。该病毒有囊膜。囊膜上有糖蛋白纤突，呈棒状者为血凝素（ＨＡ）．呈蘑菇状者为神经氨酸酶（ＮＡ）。ＨＡ含有中和抗体所作用的主要表位，能与细胞表面的唾液酸受体结合，…     

猪布氏杆菌病的血清学调查

采取试管凝集的方法对西宁市某种猪场的741头种猪进行了猪布氏杆菌病的血清学调查。结果表明：该猪场布氏杆菌病的试管凝集反应的阳性率为0．54％。