黄瓜枯萎病病株残茬对黄瓜的化感效应

采用生长速率法、孢子萌发法、胚根生长抑制法、电导率法等方法,研究不同发病程度的黄瓜残茬腐解物对黄瓜枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发、黄瓜种子萌发、胚根生长、根部细胞膜通透性、苗期生长性状以及苗期枯萎病的影响.结果表明,黄瓜枯萎病发病越重,其残茬腐解物对黄瓜枯萎病菌孢子的促进作用越强,高浓度健株、轻病株和重病株残茬的产孢量分别比对照增加了27.29%、50.05%和44.88%;健株残茬可使黄瓜枯萎病病菌孢子萌发率提高15.91%～38.94%;不同浓度黄瓜残茬腐解液可影响黄瓜胚根生长,并减少须根6.15%～27.10%;重病株不同浓度残茬腐解液可使黄瓜幼苗细胞膜透性增加76.03%～89.96%;高浓度重病株残茬腐解物可使黄瓜出苗率降低53.15%,同时枯萎病病株率增加55.11%.     

粉红螺旋聚孢霉与枯草芽胞杆菌共培养发酵滤液生防与促生活性

粉红螺旋聚孢霉是一种重要的植病生防真菌。本文研究了不同营养条件下粉红螺旋聚孢霉67-1与枯草芽胞杆菌B006共培养发酵滤液的生物活性和生防作用。采用平板培养测定共培养发酵滤液对大豆菌核病菌菌核形成,以及甘蓝枯萎病菌和西瓜枯萎病菌菌丝生长的影响;采用6孔组织培养板测定对根结线虫2龄幼虫的抑杀活性;通过平皿测定和温室盆栽试验研究发酵滤液对黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,不同营养条件下粉红螺旋聚孢霉与枯草芽胞杆菌共培养发酵滤液能够显著降低立枯丝核菌菌核数量和尖孢镰孢菌生物量,其中对甘蓝枯萎病菌生长的抑制率提高40%以上,葡萄糖/硫酸铵培养基中发酵滤液抑菌率比粉红螺旋聚孢霉67-1和枯草芽胞杆菌B006分别提高了86.6%和62.7%。共培养发酵滤液杀线活性显著提高,玉米粉/豆粕粉和葡萄糖/硫酸铵培养基中真菌-细菌共培养无菌滤液处理后线虫死亡率达到65%以上,分别比菌株67-1发酵滤液提高了37.0%和50.8%,比菌株B006提高79.1%和94.7%。黄瓜种子浸种后活力指数、幼苗株高及地上部鲜重增加7.4%~30.4%。本研究为提高粉红螺旋聚孢霉防病效果、研发高效生防新产品提供了新思路。     

应用尖孢镰刀菌毒素滤液鉴定大豆品种抗病性初探

引起大豆根腐病的尖孢镰刀菌粗毒素不仅能使大豆根部产生类似病菌侵染引起的症状,而且能抑制大豆幼根的生长和对大豆幼苗具有致萎作用;用毒素滤液处理大豆胚根和幼根,测定大豆不同品种抗病性,用盆栽土壤作对照,试验结果基本一致。利用毒素滤液测定不同品种对大豆根腐病的抗病性,可应用于大量的初筛工作。     

大豆毛口壳叶斑病菌产毒素的研究

 针对目前生产上新发现的大豆毛口壳叶斑病菌（Aristastoma sp.）产生的毒素进行了研究。该病菌的Czapek培养液经乙酸乙酯萃取可获得毒素粗提物。通过对该菌产毒条件的研究表明,pH 7的改良Richard培养液产生毒素生物活性最强,培养温度25℃、黑暗条件下持续振荡培养20 d最有利于该病菌毒素的产生。毒素活性测定表明,毒素对大豆叶片产生与病菌作用相同的褪绿症状,对种子胚根生长有抑制作用,对幼苗有致萎作用,说明毒素是大豆毛口壳叶斑病病菌侵染过程中的主要致病因子。     

万寿菊根的提取物对西瓜枯萎病反应的抗性研究

 本文研究了万寿菊根的提取物对西瓜枯萎病菌和西瓜幼苗的影响。结果表明,万寿菊根的提取物对供试的西瓜枯萎病菌菌丝生长有明显的抑制作用;同时,经对西瓜幼苗根和叶的酶活性测定和过氧化物同工酶电泳分析的结果表明,该提取物能诱导西瓜保护酶如超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性提高,减轻西瓜枯萎病菌粗毒素对西瓜幼苗的毒害作用。     

儿茶素在棉苗对枯萎病抗性中的作用

 分析了枯萎病菌接种后棉苗组织内儿茶素含量的变化以及儿茶素对枯萎病菌及其多聚半乳糖醛酸酶活性的影响。健康棉苗组织中儿茶素含量随着棉苗的生长而增加。枯萎病菌接种后,病苗组织中儿茶素含量显著高于健康对照,而且抗病品种棉苗儿茶素含量的增加明显高于感病品种。经氟乐灵预处理的棉苗接种枯萎病菌后,儿茶素含量增加更快,增幅更大。说明儿茶素是品种抗性和氟乐灵诱发棉苗对枯萎病诱导抗性的机理之一。儿茶素可抑制枯萎病菌的菌丝生长、产孢及孢子萌发,对培养液中病菌的多聚半乳糖醛酸酶(PG)有抑制作用。儿茶素化学制品及棉苗组织提取液经TLC分离后获得的含儿茶素组分提取液对初步纯化的PG活性有明显的抑制作用。这些结果表明:儿茶素可能通过抑制病菌的菌丝生长、产孢以及其PG活性而在棉花对枯萎病的抗病性中起到作用。     

农抗120防治西瓜枯萎病的机制

研究了农抗120对西瓜枯萎病菌和西瓜幼苗的作用。结果表明,农抗120对西瓜枯萎病菌孢子的萌发和菌丝的形态无明显影响,对孢子的形成和菌丝生长有一定抑制作用,能够提高西瓜幼苗抗枯萎病菌毒素致萎的能力和幼苗体内过氧化物酶活性。说明农抗120的防病机制是通过抑制病原菌和提高植株抗病性而起作用的。     

枯草芽孢杆菌Bs-15产嗜铁素条件及其对甜椒的防病促生效应

研究了不同培养条件对枯草芽孢杆菌Bs-15嗜铁素产量的影响。结果表明,以改良MM培养基为基础培养基,以葡萄糖为碳源,以色氨酸为外源氨基酸,在pH 7.2、装液量100 mL/250 mL、37℃、200 r/min下培养,可获得较高产量的嗜铁素。盆钵试验结果表明:若同时接种 Bs-15和枯萎病菌,Bs对枯萎病菌的防效为44.44%;若施用Bs-15 2 d后再接种枯萎病菌,防效可达56.94%。说明Bs-15可能通过产生系统诱导抗性增强了对枯萎病的防效。研究结果还表明,Fe离子可大大降低Bs-15对枯萎病的防治效果,防效仅为12.50%和23.43%。另外,经Bs-15浸种处理播种后第14,21,28和40 d的甜椒苗比对照增高27.24% ~54.53%;与对照相比,处理组中有50%的甜椒开花时间提前了17.26 d,平均单果重和单株产量分别提高36.92%和49.68%。表明枯草芽孢杆菌Bs-15在甜椒枯萎病防治及生长促进作用方面具有较好的效果。     

木霉对黄瓜幼苗生理特性及枯萎病防治效果的影响

黄瓜枯萎病是一种土传真菌病害,在设施黄瓜栽培中最为常见且危害严重,应用生物防治技术防治该病害对黄瓜安全生产具有重要意义。本研究通过平板对峙试验筛选出3株对黄瓜枯萎病菌抑制率在74%以上的拮抗木霉,分别为棘孢木霉Trichoderma asperellum525、哈茨木霉T.harzianum610和拟康氏木霉T.pseudokoningii 886,研究了3种木霉对黄瓜生理特性和幼苗生长作用效应及对黄瓜枯萎病的防治效果。结果表明:3种霉与黄瓜枯萎病菌同时接种的田间防治效果均达到78%以上,其中棘孢木霉T.asperellum525的田间防效达到81.5%。与只接种枯萎病原菌的对照相比,3种木霉与黄瓜枯萎病原菌同时接种或单一接种均可以显著提高黄瓜叶绿素含量、硝态氮含量、硝酸还原酶活性、根系活力、根系总吸收面积以及黄瓜株高和茎粗,其中以拟康氏木霉T.pseudokoningii 886促进效果最强,叶绿素含量、硝态氮含量、硝酸还原酶活性、根系活力、根系总吸收面积、根系活跃吸收面积和根系比表面积增加幅度分别达到38.7%~49.5%、32.1%~33.6%、29.5%~66.3%、10.8%~21.5%、19.6%~23.5%、17.9%~25.0%、4.9%~13.1%,株高、茎粗和全株鲜重增加幅度分别达到20.7%~28.8%、29.7%~35.1%、10.0%~10.70%。     

假单胞菌对香蕉枯萎病菌的抑制作用

从已感染香蕉枯萎病的果园中分离到1株对香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.cubense）抑制作用很好的菌种，命名为G1。采用固体和液体培养法从不同角度证实了G1对香蕉枯萎病菌生长的抑制作用。结果表明，G1的发酵液、无菌滤液、挥发性物质、非挥发性代谢产物的平均抑菌率分别为92.5%、27.4%、73.8%、57.7%，可见抑制作用与活菌体有直接关系，其中产生挥发性物质尤其重要。液体培养的病原菌浓度为1.0×107cfu/mL经G1作用10d后，取样镜检发现G1通过抑制病原菌菌丝正常生长以至不能产孢，从而导致菌丝消融；通过吸附在孢子的周围，融解细胞壁，造成原生质泄露致使孢子死亡。     

芝麻枯萎病病原菌致病力室内鉴定方法

 芝麻枯萎病(Sesame Fusarium wilt, SFW)是由尖孢镰刀菌芝麻专化型(Fusarium oxysporum Schl. f. sp. sesami (Zap.), FOS)引起的一种土传真菌病害, 是世界芝麻生产上的主要病害之一。为测定FOS致病力, 本文选用郑芝98N09等4个芝麻品种, 在苗期对15个FOS菌株的致病力强弱进行了室内鉴定和评价。结果表明, 采用1×10⁶个/mL分生孢子悬浮液与无菌蛭石和无菌土壤按V1∶V2∶V6比例混合接菌(即最终接菌浓度为1.4×10⁵孢子/g土壤), 在接菌后第7 d幼苗开始出现枯萎病症状, 调查菌株致病性的最佳时间为接菌后第25 d~28 d;在供试15个FOS菌株中, 对4个品种均表现为强致病力的菌株有8个(DI>50), 均表现为弱致病力的菌株有5个(DI<20);不同芝麻品种对不同菌株的抗性有一定差异。该方法可应用于芝麻枯萎病病原菌致病性测定和芝麻种质抗枯萎病特性评价, 并为后续的机理研究提供了技术支持。     

木霉不同施用方式对黄瓜幼苗质量特性及枯萎病防效的影响

黄瓜枯萎病是设施黄瓜栽培中最为常见且为害严重的土传真菌病害，应用生防菌防治黄瓜枯萎病，对黄瓜安全生产有重要意义。试验采用前期筛选的对黄瓜枯萎病菌有较好拮抗效果的3株木霉菌，即棘孢木霉Trichoderma asperellum 525、哈茨木霉T.harzianum 610和拟康氏木霉T.pseudokoningii 886，利用盆栽试验，测定了木霉菌不同施用方式对黄瓜幼苗质量及枯萎病防效的影响。3种施用方式分别为T1（木霉与病原菌同时接种）、T2（先接种木霉菌，2 d后接种病原菌）和T3（先接种病原菌，2 d后接种木霉）。结果显示，3株木霉菌对黄瓜枯萎病的防效均在64.78%以上，且以拟康氏木霉886的T2施用方式的防效最高，达到81.54%。在播种后8~14 d，所有木霉菌处理的黄瓜幼苗壮苗指数、叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、硝酸还原酶活性、根系总吸收面积均比CK1（只接种病原菌孢子悬液）显著上升，3种施用方式中以T2处理对上述6项指标的促进效果最显著，并以拟康氏木霉886在播种后14 d的6项指标增加幅度最大，该处理的黄瓜壮苗指数、叶绿素含量、根系活力、硝态氮含量、硝酸还原酶活性、根系总吸收面积的增加幅度分别达到210.06%、74.39%、37.23%、54.45%、88.00%和51.11%。本研究的3株木霉菌通过提高黄瓜幼苗生理代谢活性，增强了幼苗质量，提高了对黄瓜枯萎病的抗性，在应用中，提前施入木霉菌，有利于提高黄瓜幼苗对病害的防治效果，为后期提高黄瓜产量和品质奠定基础条件。     

Role of new bacterial surfactins in the antifungal interaction between Bacillus amyloliquefaciens and Fusarium oxysporum

The aim of this work was to investigate the major mechanisms involved in antagonism of BO7, a novel strain of Bacillus amyloliquefaciens isolated from orchard soil, against the vascular wilt fungus Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol). BO7 markedly reduced the incidence of Fol vascular wilt on tomato plants and displayed strong in vitro inhibitory activity against Fol. Scanning electron microscopy demonstrated the ability of BO7 cells to adhere to fungal hyphae and to efficiently colonize tomato roots. The low molecular weight fraction of BO7 culture filtrate displayed high antifungal activity against Fol, resulting in growth inhibition and dramatic alterations of hyphal morphology. Three structurally related surfactin lipopeptides, identified as the major components of the bioactive fraction, were assayed for their inhibitory activity against Fol. One of these compounds exerted a strong and uncommon antifungal activity for lipopeptides of the surfactin family, accounting for most of the inhibitory activity of the BO7 culture filtrate. Among a collection of Fol knockout isolates tested, mutants altered in cell wall structure showed increased sensitivity to the bacterial compounds. These results suggest that the fungal cell wall might have a key role in the sensitivity of Fol towards bacterial surfactins from B. amyloliquefaciens.     

The use of GFP<Emphasis Type="Italic">-</Emphasis>transformed isolates to study infection of banana with <Emphasis Type="Italic">Fusarium oxysporum</Emphasis> f. sp. <Emphasis Type="Italic">cubense</Emphasis> race 4

Fusarium oxysporum f. sp. cubense (Foc) is the causal pathogen of Fusarium wilt of banana. To understand infection of banana roots by Foc race 4, we developed a green fluorescent protein (GFP)-tagged transformant and studied pathogenesis using fluorescence microscopy and confocal laser scanning microscopy. The transformation was efficient, and GFP expression was stable for at least six subcultures with fluorescence clearly visible in both hyphae and spores. The transformed Foc isolate also retained its pathogenicity and growth pattern, which was similar to that of the wild type. The study showed that: (i) Foc race 4 was capable of invading the epidermal cells of banana roots directly; (ii) potential invasion sites include epidermal cells of root caps and elongation zone, and natural wounds in the lateral root base; (iii) in banana roots, fungal hyphae were able to penetrate cell walls directly to grow inside and outside cells; and (iv) fungal spores were produced in the root system and rhizome. To better understand the interaction between Foc race 4 and bananas, nine banana cultivars were inoculated with the GFP-transformed pathogen. Root exudates from these cultivars were collected and their effect on conidia of the GFP-tagged Foc race 4 was determined. Our results showed that roots of the Foc race 4-susceptible banana plants were well colonized with the pathogen, but not those of the Foc race 4-resistant cultivars. Root exudates from highly resistant cultivars inhibited the germination and growth of the Fusarium wilt pathogen; those of moderately resistant cultivars reduced spore germination and hyphal growth, whereas the susceptible cultivars did not affect fungal germination and growth. The results of this work demonstrated that GFP-tagged Foc race 4 isolates are an effective tool to study plant–fungus interactions that could potentially be used for evaluating resistance in banana to Foc race 4 by means of root colonization studies. Banana root exudates could potentially also be used to identify cultivars in the Chinese Banana Germplasm Collection with resistance to the Fusarium wilt pathogen.     

木霉菌对黄瓜幼苗生长和膜脂过氧化指标的影响及对枯萎病的防治效果

本文开展了3种生防木霉菌，包括棘孢木霉Trichoderma asperellum 525、哈茨木霉T.harzianum 610和拟康氏木霉T.pseudokoningii 886防治黄瓜枯萎病的盆栽试验，研究这3种木霉菌对黄瓜幼苗生长、膜脂过氧化指标的影响及对黄瓜枯萎病的防治效果。结果表明，木霉菌对黄瓜枯萎病的田间防治效果均达到78%以上，且以棘孢木霉525的田间防治效果最高，达到81.53%。与只接种枯萎病病原菌的对照相比，3株木霉菌单独接种或与黄瓜枯萎病病原菌同时接种均可以显著提高黄瓜幼苗株高、茎粗、叶面积、根体积、地上部鲜重、地下部鲜重，显著提高黄瓜叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、多酚氧化酶（PPO）活性，显著降低质膜透性和丙二醛（MDA）含量，其中以拟康氏木霉886单独接种促进效果最强。研究表明，3种木霉菌通过促进黄瓜幼苗生长，增强植物抗氧化酶活性，降低质膜透性和丙二醛含量，从而提高对黄瓜枯萎病的抗性。     

大豆枯萎病菌尖孢镰孢遗传多样性及大豆品种抗性

了解大豆枯萎病菌的群体遗传特征及明确大豆种质对大豆枯萎病的抗性,对抗病育种、抗性品种的合理布局以及制定更有效的病害防治策略具有重要的参考价值。本研究利用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD),对采自我国不同地区的大豆枯萎病菌—尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)进行遗传多样性分析,筛选到10个多态性随机引物,共扩增出75条RAPD条带,其中55条为多态性条带,占73.3%。利用UPGMA法对DNA扩增图谱进行聚类分析,以相似系数0.68为阈值,55个分离物可分为9个遗传聚类组,表明我国大豆枯萎病菌具有丰富的种内遗传多样性,所划分的群体与分离物来源地不相关。同时,对上述分离物进行致病性分析,发现我国的大豆枯萎病菌具有明显的致病力分化现象。进一步利用3个代表性分离物对来自我国不同大豆产区的180个大豆品种(资源)进行抗大豆枯萎病鉴定,发现皖豆28、中黄13、中黄51、中作X08076和5D034等5个品种对大豆枯萎病具有良好抗性,占供试材料的2.8%,表明不同大豆品种对枯萎病的抗性存在一定的差异。     

哈茨木霉对黄瓜尖孢镰刀菌的抑制作用和抗性相关基因表达

采用室内筛选与田间防效相结合的方法,对哈茨木霉抑制黄瓜尖孢镰刀菌的拮抗机制进行了研究。对峙培养结果显示,木霉菌和病原菌间均形成了较明显的抑菌圈,对病原菌的抑菌率达66.7%~85.8%,其中菌株TG、TM对枯萎病菌抑制作用较强。木霉菌可有效提高根系对病原菌的抗性,黄瓜植株接种枯萎病菌后,根系细胞大量死亡,而先接种木霉菌再接种病原菌后则减小了对根系的伤害。田间防效试验结果表明,TG和TM孢子悬浮液浓度在108个/mL时防效最好,分别为54.9%和49.4%。接种木霉菌植株根系抗性基因的表达量均高于对照植株,呈双峰趋势。在第6天时抗性基因表达量最高,WRKY6、MYB、PR-1、PAL、GST和GLU的表达量分别为对照的5.15、5.22、6.07、6.00、3.16、和16.15倍。表明木霉菌通过激活与胁迫相关的基因表达提高了对病原菌的抗性。     

瓜类枯萎镰刀菌拮抗菌筛选的初步研究

镰刀菌引起的瓜类枯萎病是我国瓜类生产的重要病害，为了探索其生物防治途径，我们自1994至1995年，从茄子、麦子、刀豆、玉米根际上样中，筛选对瓜类枯萎镰刀菌有桔抗作用的细菌菌株，现将这些菌株的室内平板筛选报告如下；1材料1．1供试枯萎镰刀菌菌株来源：TF89菌株：甜瓜枯萎镰刀菌；XF89菌株：西瓜枯萎镰刀菌；HF。。菌株：黄瓜枯萎镰刀菌；以上三个菌株由新疆农业大学提供。TF1菌株：我们1995年从甜瓜种子上分离。1．2待测菌株采样地点：三富村小林场和安宁渠乡6队。2方法和结果2.1抗性分离试验；将茄子、麦子、刀豆、玉米根际上…     

Impaired purine biosynthesis affects pathogenicity of <Emphasis Type="Italic">Fusarium oxysporum</Emphasis> f. sp. <Emphasis Type="Italic">melonis</Emphasis>

The vascular wilt pathogen Fusarium oxysporum f. sp. melonis causes worldwide yield losses of muskmelon. In this study, we characterized a UV-induced non-pathogenic mutant (strain 4/4) of F. oxysporum f. sp. melonis, previously identified as a potential biological control agent. During comparative analysis of vegetative growth parameters using different carbon sources, mutant strain 4/4 showed a delay in development and secretion of extracellular enzymes, compared to the wild type strain. Amendments of the growth medium with yeast extract, adenine or hypoxanthine, but not guanine, complemented the growth defect of strain 4/4, as well as secretion and partial activity of cellulases and endopolygalacturonases, indicating that the strain is an adenine auxotroph. Incubation of strain 4/4 conidia in adenine solution, prior to inoculation of muskmelon plants, partially restored pathogenicity to the mutant strain.