烟叶米根霉检测、碳源代谢表型及其对7种杀菌剂的敏感性

采用组织分离法检测了烘烤烟叶霉烂病病原菌米根霉Rhizopus oryzae，采用Biolog FF代谢板分析了其碳源代谢表型特征，并测定了其对7种杀菌剂 (多菌灵、异菌脲、咪鲜胺、氟硅唑、丙环唑、苯醚甲环唑和嘧菌酯) 的敏感性。结果表明:米根霉在田间烟叶、编烟杆和编烟绳上的检出率均为100%。米根霉能代谢和产孢的碳源分别有66和30种，主要包括核糖醇、D-阿拉伯醇和?-环式糊精等；不能代谢和产孢的碳源分别有29和65种，包括α-环式糊精、L-海藻糖和D-半乳糖醛酸等。7种杀菌剂对烟草米根霉的菌丝生长均表现出不同的抑制作用，抑菌活性最强的是氟硅唑和苯醚甲环唑，其EC₅₀值分别为8.31和9.71 mg/L；其次为丙环唑、异菌脲和咪鲜胺，其EC₅₀值分别为14.24、32.84及 > 10 mg/L；最弱的为嘧菌酯和多菌灵，其EC₅₀值均 > 100 mg/L。研究结果可为烘烤烟叶霉烂病化学防治提供参考和依据。     

四种杀菌剂对烟草灰霉病菌的毒力及对烟草灰霉病的抑制作用

为筛选防治烟草灰霉病的有效药剂,采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定氟啶胺、咪鲜胺、苯醚甲环唑及代森锰锌4种杀菌剂对烟草灰霉病菌Botrytis cinerea的毒力,同时通过离体叶片评价这4种杀菌剂对烟草灰霉病的保护和治疗作用。结果表明,氟啶胺和咪鲜胺对菌丝生长活性抑制最强,有效抑制中浓度ECjs50平均值分别为0.02、0.03 mg/L,苯醚甲环唑次之,代森锰锌最弱,EC_(js50)平均值分别为0.39、7.86 mg/L;氟啶胺对孢子萌发活性抑制最强,代森锰锌次之,有效抑制中浓度EC_(mf50)平均值分别为0.06、0.16 mg/L,咪鲜胺和苯醚甲环唑最弱,ECmf50平均值均大于25.00 mg/L。离体试验表明,氟啶胺对烟草灰霉病保护作用最强,浓度为50 mg/L时,防治效果为100.00%,咪鲜胺和苯醚甲环唑次之,防治效果分别为88.62%和76.46%,代森锰锌最弱,浓度为1 000 mg/L时防治效果仅为75.81%;氟啶胺对烟草灰霉病治疗作用最强,浓度为100 mg/L时的防治效果为85.75%,咪鲜胺和苯醚甲环唑次之,浓度为200 mg/L时的防治效果分别为85.47%和76.48%,代森锰锌最弱,浓度为1 000 mg/L时防治效果为70.24%。表明氟啶胺和咪鲜胺更适合烟草灰霉病的防治。     

六种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定了烟草赤星病菌Alternaria alternata对6种杀菌剂(氟硅唑、异菌脲、菌核净、嘧菌酯、醚菌酯及多菌灵)的敏感性。结果表明:6种杀菌剂对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发均表现出了不同程度的抑制活性。其中,对菌丝生长抑制活性最强的是氟硅唑,EC50平均值为(0.34±0.11)mg/L,其次为菌核净[(1.13±0.68)mg/L]和异菌脲[(2.08±0.24)mg/L];对分生孢子萌发抑制活性最强的是嘧菌酯协同100 mg/L水杨肟酸,EC50平均值为(0.28±0.09)mg/L,其次分别为单独处理的嘧菌酯[(5.79±2.76)mg/L]、醚菌酯[(11.93±3.93)mg/L]、菌核净[(19.95±15.94)mg/L]和异菌脲[(23.33±11.33)mg/L]。多菌灵对烟草赤星病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制活性均最差,不宜用于烟草赤星病的防治,而异菌脲、氟硅唑、嘧菌酯和醚菌酯均有必要进一步针对烟草赤星病进行田间防效试验。     

多菌灵等5种杀菌剂对烟草立枯病菌的生物活性

采用生物测定方法分析了烟草立枯病菌Rhizoctonia solani在菌丝生长、菌核形成与萌发阶段对5种杀菌剂(多菌灵、代森锰锌、菌核净、异菌脲及苯醚甲环唑)的敏感性，同时通过离体叶片法考察了5种杀菌剂对烟草立枯病的保护和治疗作用。结果表明:供试5种药剂对立枯病菌菌丝生长、菌核形成与萌发均表现出了不同程度的抑制活性，同时对烟草立枯病具有一定的保护和治疗作用。其中，对菌丝生长以及菌核形成与萌发抑制活性最强的均是多菌灵，其抑制菌丝生长的EC50平均值为(0.06 ±0.01) mg/L，0.25和20 mg/L下对菌核形成和萌发的抑制率均为100%；其次为异菌脲[EC50值为(0.35 ±0.15) mg/L，2和100 mg/L下对菌核形成和萌发的抑制率分别为(54.79 ±12.58)%和100%]、苯醚甲环唑[EC50值为(0.55 ±0.53) mg/L，5和200 mg/L下对菌核形成和萌发的抑制率分别为(97.97 ±2.64)%和100%]及菌核净[EC50值为(1.31 ±0.14) mg/L，10和100 mg/L下对菌核形成和萌发的抑制率均为100%]；最弱的均是代森锰锌，其抑制菌丝生长的EC50平均值为(6 ±0.20) mg/L，10和200 mg/L下对菌核形成和萌发的抑制率分别为(43.58 ±31.87)%和0。离体试验表明:对烟草立枯病保护作用最强的是多菌灵、异菌脲和菌核净，50 mg/L时防效均 > 99%，其次为代森锰锌(50 mg/L防效为75.83%)，最弱的是苯醚甲环唑(50 mg/L防效为39.29%)；治疗作用最强的也是多菌灵，50 mg/L防效为93.46%，其次为菌核净、异菌脲和苯醚甲环唑(200 mg/L时防效均 > 84%)，最弱的为代森锰锌(800 mg/L时防效为76.40%)。研究结果可为烟草立枯病化学防治药剂筛选提供参考和依据。     

五种杀菌剂对烟草立枯病菌的生物活性

由立枯病丝核菌引起的烟草立枯病是我国烟草苗床上危害最严重的病害之一。本研究评价了5种杀菌剂 (嘧菌酯、啶酰菌胺、氟啶胺、丙环唑和嘧霉胺) 对立枯丝核菌菌丝生长、菌核形成和萌发的影响,以及其对烟草立枯病的防治效果。结果表明:立枯丝核菌菌丝对氟啶胺和嘧菌酯的敏感性高于丙环唑和啶酰菌胺,而对嘧霉胺的敏感性较低;嘧菌酯对菌核形成的抑制作用强于丙环唑、氟啶胺、啶酰菌胺和嘧霉胺;5种杀菌剂对立枯丝核菌菌核萌发均无抑制作用。在离体烟叶的保护活性方面,12.5和50 mg/L的嘧菌酯和啶酰菌胺对立枯病的保护作用优于氟啶胺、丙环唑和嘧霉胺;在治疗活性方面,50和200 mg/L的嘧菌酯的治疗作用优于其他4种杀菌剂。因此,供试的5种杀菌剂中嘧菌酯最适合用于烟草立枯病的防治。     

不同杀菌剂对黄瓜靶斑病菌的毒力作用特性比较

为筛选防治黄瓜靶斑病的有效药剂，采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和芽管伸长法测定了19种杀菌剂对黄瓜靶斑病菌的毒力，探究了4种毒力较高杀菌剂对病原菌菌丝形态的影响。结果表明:氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素对黄瓜靶斑病菌菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长各生长发育阶段均有较强的抑制活性，其中，4种药剂抑制菌丝生长的平均EC₅₀值分别为0.516 3、1.538、1.605和0.648 2 mg/L，抑制孢子萌发的平均EC₅₀值分别为0.164 4、1.359、1.127和0.002 5 mg/L，抑制芽管伸长的平均EC₅₀值分别为0.189 6、0.144 7、0.060 4和0.001 5 mg/L；啶酰菌胺、百菌清和肟菌酯3种不同作用机制杀菌剂对黄瓜靶斑病菌孢子萌发和芽管伸长的抑制活性较强，3种药剂抑制孢子萌发的平均EC₅₀值分别为1.564、0.373 0和0.021 3 mg/L，抑制芽管伸长的平均EC₅₀值分别为0.629 5、0.233 4和0.405 0 mg/L，但对菌丝生长的抑制作用较弱，平均EC₅₀大于16 mg/L；氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素可引起黄瓜靶斑病菌菌丝不同程度的异常生长，主要表现为菌丝隔膜间距变小、菌丝节间肿大、主菌丝上二次分枝发生频繁、菌丝变形黏连、菌丝新分枝处生长受抑制或分生孢子生长变形。研究表明，氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素对黄瓜靶斑病菌具有较高的毒力，在黄瓜靶斑病的田间防治中具有较好的开发应用潜力。     

禾谷镰孢菌对氟唑菌酰羟胺敏感性基线的建立及药剂田间防效

为明确琥珀酸脱氢酶抑制剂类新型吡啶酰胺杀菌剂氟唑菌酰羟胺在中国小麦赤霉病防治中的应用潜力，分别采用菌丝生长速率法和孢子萌发法，测定了氟唑菌酰羟胺对湖北省6个地区106株禾谷镰孢菌的室内毒力、田间防效及其与多菌灵和氰烯菌酯的交互抗性。结果显示:氟唑菌酰羟胺对106株禾谷镰孢菌菌丝生长的EC₅₀值为 (0.018 0 ± 0.209 0) mg/L，平均值为 (0.072 8 ± 0.025 9) mg/L；对分生孢子萌发的EC₅₀值为 (0.052 7 ± 0.473 2) mg/L，平均值为 (0.176 0± 0.059 6) mg/mL；且其EC₅₀值频率分布均呈单峰曲线，因此可分别将菌丝生长和孢子萌发的平均EC₅₀值作为禾谷镰孢菌对氟唑菌酰羟胺的敏感性基线。初步的交互抗性测定结果表明，抗多菌灵或氰烯菌酯的菌株对氟唑菌酰羟胺均未表现出抗性。田间试验显示，氟唑菌酰羟胺有效剂量200 g/hm2处理的防效 (超过90.0%) 显著高于对照药剂氰烯菌酯600 g/hm2的防效 (78.0%)，与空白对照相比增产效果在127%~135%之间。经氟唑菌酰羟胺处理后，小麦籽粒中由禾谷镰孢菌产生的毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON) 的含量比空白对照降低了55.09%。研究表明，氟唑菌酰羟胺对禾谷镰孢菌呈现出较高的室内活性且田间防效优越，同时还能降低小麦籽粒中DON毒素的含量及提高小麦产量，因此可作为生产中防治小麦赤霉病的替代或后备药剂，同时也可考虑用作为禾谷镰孢菌对多菌灵抗性治理的替代药剂。     

啶酰菌胺等8种杀菌剂对烟草叶斑病菌的生物活性

采用生物测定方法分析了烟草叶斑病菌Didymella segeticola在菌丝生长阶段对8种杀菌剂 (啶酰菌胺、苯醚甲环唑、丙环唑、氟硅唑、多菌灵、咪鲜胺、菌核净和代森锰锌) 的敏感性,同时通过离体叶片法测定了8种杀菌剂对烟草叶斑病的保护和治疗作用。结果表明:供试8种杀菌剂对D. segeticola菌丝生长表现出不同的抑制活性,同时对其引起的病害具有一定的保护和治疗作用。抑菌活性最强的是啶酰菌胺,其平均EC₅₀值为 (0.0470 ± 0.0120) mg/L;其次依次为苯醚甲环唑[ (0.0790 ± 0.0050) mg/L]、咪鲜胺[ (0.29 ± 0.08) mg/L]、丙环唑[ (0.69 ± 0.12) mg/L]、菌核净[ (1.08 ± 0.33) mg/L]、多菌灵[ (1.22 ± 0.29) mg/L]、氟硅唑[ (1.38 ± 0.07) mg/L];代森锰锌的抑菌活性最弱[ (22.80 ± 10.51) mg/L]。进一步研究表明,氟硅唑、苯醚甲环唑、丙环唑、啶酰菌胺、菌核净和多菌灵对烟草叶斑病保护作用较强,25 mg/L药剂质量浓度处理下防效均 >82%;100 mg/L代森锰锌处理下防效为70.51%。啶酰菌胺和氟硅唑对叶斑病具有较好的治疗活性,25 mg/L下防效均 >80%;其次为咪鲜胺、苯醚甲环唑、多菌灵和菌核净;代森锰锌的治疗作用较差,100 mg/L下的防效仅为63.31%。研究结果可为烟草叶斑病防治药剂筛选提供参考和依据。     

防治牡丹根腐病的有效药剂筛选

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法，分别测定了咪鲜胺、醚菌酯、苯醚甲环唑、百菌清、多菌灵、代森锰锌等6种杀菌剂对牡丹根腐病菌的室内毒力。结果表明，6种药剂对病菌菌丝生长的EC50大小顺序为：咪鲜胺<多菌灵<代森锰锌<苯醚甲环唑<百菌清<醚菌酯，其中以咪鲜胺对牡丹根腐病病菌的菌丝生长抑制作用最强， EC50为0.200 mg/L；多菌灵、代森锰锌、苯醚甲环唑、百菌清依次减弱，醚菌酯的抑制菌丝生长的作用最小，EC50为33.98 mg/L。6种药剂对病菌孢子萌发的EC50大小顺序为：百菌清<咪鲜胺<苯醚甲环唑<多菌灵<代森锰锌<醚菌酯；其中以百菌清对牡丹根腐病菌的孢子萌发抑制作用最强，EC50为0.343 mg/L；咪鲜胺、苯醚甲环唑、多菌灵、代森锰锌依次减弱，醚菌酯抑制孢子萌发的作用最小，EC50为38.4 mg/L。     

苹果采后炭疽病的化学防治技术

多菌灵、丙环唑、休菌清、苯醚甲环唑、异菌脲、禾纹清(多菌灵 丙环唑)六种供试药剂对苹果炭疽菌的生长都具有抑制作用，其有效浓度和作用方式有所不同。多菌灵、丙环唑、休菌清、苯醚甲环唑、异菌脲和禾纹清抑制菌丝生长的EC50分别为0．034、0．015、0．918、0．115、31．865和0．491∥rnl；抑制芽管伸长的EC50分别为0．4430、0．0240、0．3173、0．0991、154．88和0．2787蜉／rnl。对孢子萌发和芽管伸长的抑制率差异显著。六种药剂对苹果炭疽病的控制结果表明：丙环唑、禾纹清和苯醚甲环唑的防治效果较好，其中丙环唑和禾纹清的防治效果可达100％，而多菌灵、休菌清和异菌脲对果实的防治效果较低。药剂防治采用浸泡果实和喷雾两种方式，浸果的防治效果明显好于喷雾。     

牛至精油及其主要成分香芹酚和百里酚对16种植物病原真菌的抑制活性

为评价牛至精油及其2种主要成分香芹酚和百里酚在植物真菌病害防治方面的应用前景，采用菌丝生长速率法和孢子萌发法测定3种物质对16种植物病原真菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性，并采用黄瓜子叶法测定其对黄瓜灰霉病的防治效果。结果表明，牛至精油在500 mg/L浓度处理下可完全抑制番茄早疫病菌Alternaria solani、黄瓜灰霉病菌Botrytis cinerea和小麦根腐病菌Bipolaris sorokiniana等12种植物病原真菌的菌丝生长，对棉花黄萎病菌Verticillium dahliae的菌丝生长抑制率也达到97.66%。牛至精油对这13种病原真菌的EC₅₀在83.09~236.58 mg/L之间，香芹酚和百里酚对这13种病原真菌的毒力均高于牛至精油，其中香芹酚对黄瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum、小麦全蚀病菌Gaeumannomyces graminis、棉花黄萎病菌和小麦茎基腐病菌Fusarium pseudograminearum菌丝生长的毒力较强，EC₅₀分别为9.09、22.45、24.28、28.40和28.80 mg/L；百里酚对黄瓜灰霉病菌和小麦全蚀病菌菌丝生长的毒力较强，EC50分别为21.32 mg/L和27.08 mg/L。香芹酚和百里酚对棉花黄萎病菌、玉米大斑病菌Setosphaeria turcica、苦瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.momordicae、黄瓜灰霉病菌和黄瓜炭疽病菌Colletotrichum orbiculare的孢子萌发亦有较强毒力，其EC₅₀为3.78~289.07 mg/L。1 000 mg/L牛至精油对黄瓜灰霉病的预防效果与400 mg/L嘧霉胺悬浮剂的预防效果无显著差异；500 mg/L百里酚对黄瓜灰霉病的预防效果和治疗效果均与400 mg/L嘧霉胺悬浮剂的效果相当，而香芹酚的治疗效果显著优于400 mg/L嘧霉胺悬浮剂。表明牛至精油及其主要成分香芹酚和百里酚的抑菌谱广且活性强，具有作为植物源杀菌剂的开发应用潜力。     

六种三唑类杀菌剂对番茄叶霉病菌的毒力及其安全性和田间防效评价

为筛选出有效防治番茄叶霉病的药剂,采用生长速率法及平板涂布法测定6种三唑类杀菌剂对番茄叶霉病菌菌丝生长及分生孢子萌发和芽管伸长的毒力,评价其对番茄植株的安全性和对叶霉病的田间防效。结果表明,己唑醇、苯醚甲环唑、戊唑醇和氟硅唑对番茄叶霉病菌菌丝生长的毒力均较高,EC_(50)分别为0.50、0.55、0.80、2.42 mg/L,其次为腈菌唑和四氟醚唑,EC50分别为6.92、15.08 mg/L。6种杀菌剂抑制病菌分生孢子萌发及芽管伸长的作用均较弱,对芽管伸长的抑制活性高于对孢子萌发的抑制活性;戊唑醇和四氟醚唑抑制孢子萌发的作用相对较强,100 mg/L处理的抑制率为60%~70%,戊唑醇、四氟醚唑和己唑醇抑制芽管伸长的作用相对较强,100 mg/L处理的抑制率均在70%以上。己唑醇和戊唑醇200 mg/L处理番茄植株,显著抑制其株高,苯醚甲环唑和腈菌唑对其影响相对较小,这4种杀菌剂对番茄植株的叶色及形态均无明显影响;且这4种杀菌剂对番茄叶霉病的田间预防效果均高于治疗效果,其中150 mg/L己唑醇的预防效果和治疗效果均最高,分别为90.67%和85.58%;苯醚甲环唑的最低,300 mg/L时预防效果为80.16%,治疗效果为71.68%。     

In vitro and In vivo Activity of Cyprodinil and Pyrimethanil on Botrytis cinerea Isolates Resistant to other Botryticides and Selection for Resistance to Pyrimethanil in a Greenhouse Population in Greece

No cross-resistance was observed between pyrimethanil or cyprodinil and the fungicides benomyl, iprodione or carbendazim + diethofencarb. In vitro, both anilinopyrimidine fungicides were effective against strains of Botrytis cinerea resistant to benzimidazoles and/or dicarboximides and against a wild type strain insensitive to diethofencarb (EC₅₀ values ranged between 0.03–0.19 and 0.006–0.054gml^–1 for pyrimethanil and cyprodinil, respectively). Preventive applications of anilinopyrimidines completely protected young cucumber plants and fruits that were inoculated with all strains of B. cinerea. The effectiveness of pyrimethanil against grey mould was studied in greenhouse grown tomatoes in relation to (a) the type of infection and the progress of the disease on different plant parts and (b) the response of the naturally occurring B. cinerea population to the selection pressure caused by eight successive applications of this fungicide. Pyrimethanil effectively controlled grey mould on leaves, fruits and stems but did not significantly reduce the number of dead plants and fruits with 'ghost spot' symptoms. The selection pressure caused by the consecutive applications of pyrimethanil resulted in reduction of its effectiveness on leaves that became apparent after the sixth application. This was correlated with a shift of the B. cinerea population (not previously exposed to anilinopyrimidines) towards reduced sensitivity, probably due to the development of a low level of resistance (R _L = 7.7). Pyrimethanil delayed the onset of the disease but it did not reduce the infection rate.     

Biological activity of the succinate dehydrogenase inhibitor fluopyram against Botrytis cinerea and fungal baseline sensitivity

BACKGROUND: Succinate dehydrogenase inhibitors (SDHIs) constitute a fungicide class with increasing relevance in crop protection. These fungicides could play a crucial role in successful management of grey mould disease. In the present study the effect of fluopyram, a novel SDHI fungicide, on several developmental stages of Botrytis cinerea was determined in vitro, and the protective and curative activity against the pathogen was determined on strawberry fruit. Furthermore, fungal baseline sensitivity was determined in a set of 192 pathogen isolates. RESULTS: Inhibition of germ tube elongation was found to be the most sensitive growth stage affected by fluopyram, while mycelial growth was found to be the least sensitive growth stage. Fluopyram provided excellent protective activity against B. cinerea when applied at 100 µg mL^?1 96, 48 or 24 h before the artificial inoculation of the strawberry fruit. Similarly, fluopyram showed a high curative activity when it was applied at 100 µg mL^?1 24 h post‐inoculation, but, when applications were conducted 48 or 96 h post‐inoculation, disease control efficacy was modest or low. The measurement of baseline sensitivity showed that it was unimodal in all the populations tested. The individual EC₅₀ values for fluopyram ranged from 0.03 to 0.29 µg mL^?1. In addition, no correlation was found between sensitivity to fluopyram and sensitivity to other fungicides, including cyprodinil, fenhexamid, fludioxonil, iprodione, boscalid and pyraclostrobin. CONCLUSIONS: The obtained biological activity, baseline sensitivity and cross‐resistance relationship data suggest that fluopyram could play a key role in grey mould management in the near future and encourage its introduction into spray programmes. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry