水稻品种抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法

为建立科学有效的水稻品种抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法,分别研究了病毒在介体体内的循回时间、接种时间、接种强度、水稻接种苗龄4个因素对鉴定效果的影响。结果显示,病毒在介体体内的循回时间为12~15天或21~24天条件下,鉴定效果优于8~11天和16~17天处理;接种48~72 h条件下,鉴定效果优于12~24 h处理;有效接种强度4~20虫/苗条件下,鉴定效果优于1~3虫/苗处理;水稻接种苗龄0.5~2.5叶龄条件下,鉴定效果优于2.5~3.5叶龄处理。由此构建了水稻抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法:循回时间为12~15天、接种时间48~72 h、有效接种强度4~20虫/苗和水稻接种苗龄0.5~2.5叶。在此条件下对不同抗性表现的水稻品种进行鉴定,其鉴定结果与重病区田间鉴定没有显著性差异,表明所建立的人工接种鉴定方法能客观地反映水稻品种对黑条矮缩病的抗性水平。     

人工饲养不同世代灰飞虱群体传播水稻黑条矮缩病毒的比较

为明确人工饲养对灰飞虱传毒能力的影响,本文利用人工饲养至第55代、23代和8代的3个无毒灰飞虱群体,研究灰飞虱携带和传播RBSDV能力的差异。每个群体经饲毒、度过循回期后,选择雌、雄成虫各50头,单头单苗接种1叶1心期健康玉米。接种4 d回收灰飞虱,利用RT-PCR检测带毒率,并调查灰飞虱死亡率;接种43~50 d后调查玉米粗缩病发病率。结果表明:人工饲养55代、23代和8代的灰飞虱群体平均带毒率分别为68.24%、58.93%和62.09%,统计分析表明差异不显著;3个群体平均传毒率分别为31.22%、20.32%和29.91%,55代和8代群体均显著高于23代(P0.05);3个群体平均死亡率分别为54.19%、65.24%和77.72%,其中55代群体极显著低于8代(P0.01),二者与23代群体差异不显著。3个群体灰飞虱的带毒率63.09%高于传毒率27.15%,差异极显著(P0.01)。结论:人工群体饲养至第55代的灰飞虱与仅饲养至第8代的灰飞虱在携带和传播RBSDV方面未发现显著差异,且均保持了较好的能力。     

玉米粗缩病抗性遗传研究

 本文选用3个抗病自交系(齐319、X178、沈137)和3个感病自交系(掖107、掖478、沈5003)按照NCII交配设计配制9套杂交组合研究了玉米抗粗缩病遗传规律。2009-2010年在曲阳、保定采用田间自然发病方法鉴定亲本、F₁、F₂群体的玉米粗缩病抗性,并采用灰飞虱人工接种方法鉴定亲本材料的抗病性。运用QGA station 软件的加性-显性-上位性(ADAA)遗传模型进行数据分析,结果表明,显性效应和加性效应是控制玉米粗缩病抗性的主要遗传组分,分别占表型变异的44.8%和13.1%,杂合显性效应表现负向杂种优势,抗病育种可加以利用。加性×加性上位性效应在玉米自交系和杂交组合抗粗缩病遗传中普遍存在,但因材料不同而表现负向或正向效应。玉米粗缩病抗性易受环境影响,显性与环境互作效应方差占表型方差的比率为39.8%,达到极显著水平。因此,培育抗粗缩病玉米品种应依据基因型选配适当的亲本材料,抗病品种宜进行多年多点鉴定筛选。     

不同播种期对玉米粗缩病发生的影响

本文通过对不同时期播种的玉米田、传毒介体灰飞虱虫量和玉米粗缩病病情的调查明确,玉米苗１０叶前感病期和传毒灰飞虱发生高峰期不相遇,玉米粗缩病就可减轻发生。调整玉米播种期等农业措施,可以减少玉米粗缩病毒的危害。     

水稻黑条矮缩病毒在灰飞虱消化系统的侵染和扩散过程

 水稻黑条矮缩病毒 (Rice black streaked dwarf virus, RBSDV) 由介体灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallén)以持久增殖型方式传播, 其编码的P9 1蛋白是形成病毒复制和子代病毒粒体装配的场所—病毒原质(viroplasm)的组分之一。为了明确RBSDV在介体昆虫体内的侵染循回过程, 本研究通过原核表达的P9 1蛋白免疫注射兔子制备P9 1抗体, 应用免疫荧光标记技术研究P9 1在饲毒后不同时期的介体灰飞虱体内的定位。共聚焦显微镜观察到饲毒后3 d, P9 1出现在介体中肠的少数上皮细胞内;饲毒后6 d, 在中肠外表的肌肉细胞分布有P9 1;饲毒后10 d, P9 1分布于中肠和后肠表面的肌肉, 同时在唾液腺也能观察到P9 1的存在。结果表明RBSDV在介体灰飞虱体内首先侵染中肠上皮细胞并复制, 随后扩散到中肠表面的肌肉细胞, 并通过环肌和纵肌扩散到中肠和后肠, 最后扩散到唾液腺。本研究首次直观地阐述了RBSDV在灰飞虱消化系统的侵染和扩散过程, 为有效阻断灰飞虱携带并传播病毒奠定基础。     

乳山市灰飞虱、玉米粗缩病发生概况及发生规律

简述近5年来灰飞虱和玉米粗缩病在乳山市的发生概况,分析灰飞虱、玉米粗缩病的发生规律及发生原因,以便有效地控制灰飞虱和玉米粗缩病的为害。     

水稻黑条矮缩病毒检测体系的优化及田间寄主检测

 玉米粗缩病20世纪50年代和90年代中后期在我国部分地区严重发生,2008年至今,该病在黄淮海地区又呈暴发趋势［1］。引起我国北方玉米粗缩病的主要是水稻黑条矮缩病毒（Rice black streaked dwarf virus,RBSDV）［2］。田间寄主植物和传毒昆虫灰飞虱（Laodelphax striatellus Fallen）的发生数量、带毒率与玉米粗缩病的发生密切相关［1］。因此,建立快速灵敏的RBSDV检测体系,明确RBSDV的田间寄主,对有效控制玉米粗缩病具有重要意义。     

调整玉米揪期对玉米粗缩病控制作用研究初报

通过罩笼接虫和自然开放式状态下试验，对不同播期的玉米粗缩病病情进行了比较，明确了玉米敏感叶龄为可见叶9叶以下，展开叶为6叶以下，研究证实，将田间灰飞虱转移迁入高峰期与玉米敏感叶龄期错开，可以减轻玉米粗缩病的发病，春玉米播期4月10－15日，夏玉米在6月10－15日，能显著控制玉米粗缩病的危害。     

我国玉米上一个水稻黑条矮缩病毒重排体的ＯＲＦ序列(英文)

 玉米粗缩病20世纪50年代和90年代中后期在我国部分地区严重发生,2008年至今, 该病在黄淮海地区又呈暴发趋势^[1]。引起我国北方玉米粗缩病的主要是水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)^[2]。田间寄主植物和传毒昆虫灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallen)的发生数量、带毒率与玉米粗缩病的发生密切相关^[1]。因此,建立快速灵敏的RBSDV检测体系,明确RBSDV的田间寄主,对有效控制玉米粗缩病具有重要意义。     

玉米种质对玉米粗缩病的抗性研究初报

采用罩笼法对6个主栽玉米品种进行粗缩病抗性鉴定,结果表明,登海3622、金海5号、农大108对粗缩病具有抗性,其中农大108的抗性还表现在灰飞虱对它的趋向性较弱上。结合不同品种的种质分析,发现不同血缘种群间存在一定的差异,以Reid种质血缘为主的品种抗性较差,含有PB种质血缘的品种则表现出抗性。     

In vitro but not in planta encapsidation of Rice gall dwarf virus core particles by the outer capsid P8 protein of Rice dwarf virus expressed in transgenic rice plants

Transencapsidation of the Rice gall dwarf virus (RGDV) inner core by the Rice dwarf virus (RDV) outer capsid P8 protein was examined in vitro and in planta. When RGDV core particles were incubated with an extract from RDV P8-transgenic rice leaf tissue, RDV P8 encapsidated the RGDV core particles to form double-shelled virus-like particles in vitro. In contrast, when RDV P8-transgenic rice plants were inoculated with RGDV, progeny RGDV particles contained RGDV P8 but RDV P8 was not detectable in the virions. No significant differences were found in acquisition by the vector insects and subsequent transmission rates between RGDV infecting nontransgenic rice plants and those infecting RDV P8-transgenic rice plants. These results indicate that mechanisms of and/or requirements for interactions between P8 and the inner core particles of phytoreoviruses differ between in vitro and in planta.     

Sequence Analysis Shows that a Dwarfing Disease on Rice, Wheat and Maize in China is Caused by Rice Black-streaked Dwarf Virus

Isolates of plant reoviruses causing severe stunting and dark leaf symptoms on wheat in Hebei province, on maize in Hubei province and on rice in Zhejiang province, China have been characterized. Four of the ten genome segments corresponding to Rice black-streaked dwarf virus (RBSDV) S7, S8, S9, S10 were amplified by RT-PCR from the Hebei and Zhejiang isolates and sequenced. Sequences of S9 and S10 were also obtained from the Hubei isolate. Sequences of corresponding segments of the Chinese isolates were very similar to each other (94.0–99.0% identical nucleotides and 96.3–100% identical amino acids) and were closer to those of a previously reported Japanese RBSDV isolate (90.0–94.9% identical nucleotides and 91.1–98.6% identical amino acids) than to those of an Italian Maize rough dwarf virus isolate (85.1–88.1% identical nucleotides and 85.5–94.3% identical amino acids). The Chinese isolates should be classified as RBSDV.     

Immunochromatographic assay for simple and rapid detection of <Emphasis Type="Italic">Satsuma dwarf virus</Emphasis> and related viruses using monoclonal antibodies

A simple and rapid immunochromatographic assay (ICA) to detect Satsuma dwarf virus (SDV) was developed using colloidal gold conjugates of anti-SDV monoclonal antibodies. Of six homogenization buffers tested, 0.1 M citrate buffer (pH 7.0) gave the best results for the ICA. In the ICA, addition of 0.1% thioglycolic acid in the homogenization buffers that have been widely used in enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) was deleterious to the reaction because of undesirable coagulation of the colloidal gold. ICA using the anti-SDV monoclonal antibodies was 8 times and 16 times more sensitive than double antibody sandwich-ELISA and ICA using the anti-SDV polyclonal antibody, respectively. The analysis is complete in only 15 min. Furthermore, ICA using the anti-SDV monoclonal antibodies could also detect SDV-related viruses.     

Immunodetection of the replicative complex of <Emphasis Type="Italic">Barley yellow dwarf</Emphasis><Emphasis Type="Italic">virus</Emphasis>-PAV <Emphasis Type="Italic">in vivo</Emphasis>

The genomic fragments of two open reading frames (ORFs) 1 and 2 of German and Canadian PAV isolates of Barley yellow dwarf virus (BYDV-PAV) were sequenced. Sequences only slightly differed from previously published sequences of this virus. Two polyclonal antisera against proteins encoded by ORFs 1 and 2 of a German ASL-1 isolate were developed using recombinant antigens expressed in E. coli as a fusion either to His₆− or thioredoxin-tags. In Western blot analysis with total protein extracts from BYDV infected plants, antisera efficiently recognized the 99 kDa fusion protein expressed from ORF1 and ORF2 (P1–P2 protein). Later in infection the P1–P2 protein disappeared and two smaller proteins, revealing sizes of 39 and 60 kDa, could be detected.     

陕西玉米病毒病及流行因素研究

 研究结果表明:陕西玉米病毒病毒原主要有玉米矮花叶病毒B株系(MDMV-B)、玉米粗缩病毒(MRDV)和大麦黄矮病毒(BYDV)。用血清鉴定225份病株样品中,MDMV-B、MRDV和BYDV侵染分别占40%、23%、4.5%。MDMV-B和MRDV复合侵染占23.5%。在田间自然条件下,MDMV-B主要通过玉米蚜和禾谷缢管蚜以非持久性传播,MRDV则由灰飞虱以持久传播。MDMV-B、MRDV和BYDV的粒子大小分别为735~755 nm×17 nm、70~75 nm和23~30 nm。随着玉米生育成熟,侵染逐渐降低,为害亦趋减轻。研究认为,玉米品种、播种期、播量、田间传毒介体数量及发生早晚和地膜覆盖等是影响玉米病毒病流行的主要因素。     

兼抗麦长管蚜和大麦黄矮病毒的小麦种质田间鉴定筛选

为鉴定筛选兼抗麦长管蚜和大麦黄矮病毒(Barley yellow dwarf virus, BYDV)的小麦种质,采用自然感蚜/感病系数法,对36个外引和远缘杂交选育的小麦种质材料进行了2年的田间鉴定,并分析了感虫性与感病性的相关关系。结果表明,2年中均兼抗麦长管蚜和BYDV的种质仅有KOKIPPCAS、KOK、Amigo-3和PI137739共4个材料,占总鉴定材料的11.11%;对二者均敏感的有98-10-35q-9、186Tm39、Tam200e12-14a、Tam200(27)7、小偃22、西农1376和小偃6号共7个材料,占19.44%。其它材料仅抗虫或仅抗病,或仅在一年中表现抗病或抗虫,如材料98-10-30和98-10-35a8抗麦长管蚜,但对BYDV敏感;材料Tam200(13)G和PIG23(2)C感蚜,但对BYDV有抑制作用。BYDV发生普遍率(发病株率)和严重度(病情指数)与有蚜株率显著相关,严重度还与感蚜指数显著相关,但感病植株的病级均值与有蚜株率无显著相关性。表明自然界长期的进化和选择使许多抗病虫基因得以保存下来,但较多抗性基因只在抗病或抗虫的某一方面表现有效,需给予更多关注。     

云芝葡聚糖对小麦黄矮病的防治

为明确云芝葡聚糖对小麦黄矮病的预防和治疗效果,初步探讨其作用机制,通过室内盆栽及大田试验测定了其对小麦黄矮病的防治效果,并测定了不同浓度处理下小麦防御酶系活性的动态变化。结果表明,室内盆栽试验中云芝葡聚糖对小麦黄矮病具有较好的预防和治疗效果,其中以云芝葡聚糖100、300倍液的预防效果最为理想,防效可达66.67%和65.41%。云芝葡聚糖对田间小麦黄矮病的发生可起到一定的预防作用,其中100和300倍液的防效分别达58.63%和57.59%,保产效果分别达22.91%和22.57%,且相比对照药剂,产量提高10%以上。同时,云芝葡聚糖可诱导小麦快速且显著提高其防御酶活性,是清水对照组的2~5倍。表明云芝葡聚糖可作为免疫调节剂诱导植物自身产生抗病反应,从而起到保护寄主植物的作用。     

我国水稻黑条矮缩病和玉米粗缩病研究进展

上世纪60年代初我国华东和华北地区分别发现了水稻黑条矮缩病和玉米粗缩病,后来都分别发生了2次大流行,同时都以病害防治为目标分别开展了研究,探明了当地病害发生规律,提出了相应的防治方法,获得了不同程度的防病效果.80年代以来,水稻黑条矮缩病的发生报道仅限于华东地区局部地市,玉米粗缩病的发生涉及华北、东北、西北、西南和华中地区13个省市.根据各地对两病病原形态、寄主及症状、介体昆虫及传病特性等方面相似性的报道,提出了我国玉米粗缩病与水稻黑条矮缩病病原异同性问题.经近10年来对两病用生物学和分子生物学方法进行比较鉴定,证明我国玉米粗缩病和水稻黑条矮缩病病原同属水稻黑条矮缩病毒(RBSDV).同时基本探明了水稻黑条矮缩病在浙江杂交稻区和华北玉米区的再次流行成灾的原因,提出了相应的防治措施,并有效地控制了病害的流行危害.     

湖南水稻上1种新矮缩病的病原研究

 Summer rice was suffered extensive damage from a new dwarf disease in Hunan Province in year 2009. In this study, the causal agent of this disease was confirmed as Southern rice black-streaked dwarf virus (SRBSDV) by nested RT-PCR, RT-PCR and PCR product sequencing.