嗜卷书虱抗气性和抗药性品系选育及抗性风险分析

嗜卷书虱Liposcelis bostrychophila Badonnel是一种发生在储粮环境中的重要害虫，其抗性问题十分突出。在实验室条件下，采用高CO2（35％CO2、21％O2、44％N2）、低O2＋高CO2（35％C02、1％O2、64％N2）、DDVP和PH3等4种不同的处理，对嗜卷书虱连续处理20代，每代处理2次，每次处理保持对成虫死亡率35％的选择压力，得到了4个不同的抗性品系HCO2-R、HCLO-R、DDVP-R和PH3-R，抗性指数分别为3．3、5．2、10．2和4．5。经过对抗性发展趋势的分析，嗜卷书虱对这几种环境胁迫都有一定的抗性潜力。对抗性品系的现实遗传力（h^2）进行分析，其h^2分别为0．388、0．155、0．341和0．594。抗性风险评估结果表明，分别采用高CO2低O2＋高CO2、DDVP和PH，处理，在50％的选择压力下，抗性增加10倍所需的代数分别为62．30、44．17、26．46和38．48代；而在90％的选择压力下，抗性增加lO倍所需的代数分别为28．1l、20．08、11．98和17．39代。因此对于采用气调处理，嗜卷书虱对低O2＋高CO2处理的抗性风险比用高CO2处理大，而采用药剂处理，嗜卷书虱对DDVP的抗性风险要比PH3处理大。     

书虱及其分子生物学研究进展

书虱（book lice）是目昆虫中有重要经济意义的一个类群,也是世界储粮保护中的常见害虫。本文在概述书虱的危害及其主要种类的基础上,从书虱近似种分子鉴定、分子系统发育、共生菌分子检测与协同进化、种群遗传结构与多态性以及书虱抗性分子机制等几个方面对国内外书虱分子生物学研究现状进行了分析,并就分子生物学技术在书虱领域的进一步研究和应用进行了初步展望。     

气调胁迫下3种中药材储藏期害虫

研究了药材甲（Stegobium paniceum）、烟草甲（Lasioderma serricorne）和咖啡豆象（Araecerusfasciculatus）3种中药材储藏期害虫谷胱甘肽转移酶的酶活性,探讨了该酶在CO2气调胁迫下的应激反应。结果表明,药材甲、烟草甲和咖啡豆象的谷胱甘肽转移酶比活力分别为（0．3392±0．0155）、（0．9660±0．2593）nmol／（min·mg）和（O．3702±0．0328）nmol／（min·mg）。CO2气调对3种昆虫GSTs的影响研究结果表明,在CO2气调处理3、6、9h时,药材甲、烟草甲和咖啡豆象成虫的GSTs酶比活力均有一定程度的升高。可见,CO2气调亚致死处理对3种实验昆虫GSTs有一定的诱导激活作用。研究结果对于储藏物害虫气调杀虫机制的分析有指导意义。     

安灭灵对几种果树害虫的药效

安灭灵对几种果树害虫的药效莱阳农学院３０％安灭灵是青岛第二农药厂“研制生产的新农药。对果树抗性害虫有较好的防治效果。１９９０～１９９４年山东莱阳农学院对苹果金纹细蛾、红蜘蛛（苹果红蜘蛛与山渣红蜘蛛混合群体）、梨木虱及苹果黄蚜（锈线葡蚜）进行药效试验，...     

不同寄主扩繁的丽蚜小蜂对粉虱的控效差异及评价

日光温室条件下,分别以温室粉虱和烟粉虱作为扩繁寄主,建立起稳定的2种丽蚜小蜂种群（分别以E1和E2表示）。对这2种不同寄主来源的丽蚜小蜂在番茄、黄瓜、菜豆、茄子上烟粉虱和温室粉虱的寄生率进行了研究与比较。结果表明,E1和E2对4种寄主植物上温室粉虱的控制作用均显著大于对烟粉虱的控制作用;E1对茄子和黄瓜上的粉虱类害虫的控制作用较好,E2对4种植物间粉虱类害虫的控制作用无显著差异。2种小蜂在4种植物上烟粉虱的寄生率,除番茄上E1（27.84%）低于E2（42.22%）,差异显著,其余3种植物上,均是E1高于E2,差异显著;2种小蜂在4种植物上对温室粉虱的寄生率,均是E1高于E2,差异显著,即对于4种植物上的粉虱类害虫的控害效果E1要相对优于E2。     

8种植物精油对嗜卷书虱的杀虫活性及香青兰精油的GC-MS成分分析

为筛选新型环保植物源仓储害虫杀虫剂，采用水蒸汽蒸馏法提取8种植物精油，滤纸药膜法、密闭空气熏蒸法测定精油对嗜卷书虱成虫的触杀、熏蒸活性，筛选出高活性植物，并用气相质谱-色谱联用仪（GC-MS）对高活性植物精油进行化学成分的分析和鉴定。结果表明：香青兰、窃衣、啤酒花精油对嗜卷书虱具有较强的触杀活性，LD₅₀分别为157.43、349.34和633.07µ；g/cm²；香青兰、蒌蒿和窃衣精油对嗜卷书虱具有较好的熏蒸活性，LC₅₀分别为0.20、0.70和1.66 mg/L。香青兰精油经GC-MS分析，检测并鉴定到23个化学成分，相对含量占总含量的84.22%，其主要成分为乙酸香叶酯（16.26%）、丁香酚（13.90%）、香叶醛（13.20%）、草蒿脑（7.89%）、丙烯酸-2-乙基己酯（8.55%）以及橙花醛（7.60%）。研究结果表明香青兰精油对嗜卷书虱的生物活性较好，值得进一步研究。     

烟粉虱细胞色素CYP6EM1基因的克隆及对吡虫啉抗性的作用

烟粉虱是一种世界性农业害虫,其防治手段以化学防治为主,新烟碱类杀虫剂吡虫啉常年用于防治烟粉虱,田间烟粉虱已经形成严重的抗药性。本研究通过分析烟粉虱吡虫啉抗性和敏感种群,发现细胞色素CYP6EM1基因在吡虫啉抗性品系中上调了4.7倍,进而克隆了其全长基因,进行了荧光定量PCR分析,发现该基因在吡虫啉抗性烟粉虱3龄若虫期和雄虫成虫期过量表达,并且在抗性成虫胸部和腹部过量表达。最后通过RNA干扰的方法使成虫的CYP6EM1基因表达量下降了54.8%,之后发现当烟粉虱暴露于吡虫啉时死亡率显著升高了39.65%,这表明CYP6EM1与烟粉虱对吡虫啉抗性的形成相关。研究结果对于揭示烟粉虱对吡虫啉产生抗性的机制有帮助,也为烟粉虱抗性水平田间监测及烟粉虱综合治理提供理论依据。     

不同书虱品系的磷化氢半数击倒时间与抗性相关性研究

参照FAO推荐方法测定了磷化氢对嗜卷书虱(Liposcelis bostrychophila(Badonnel))2个品系、嗜虫书虱(L.entomophila(Enderlein))3个品系和小眼书虱(L.paeta(Pearman))3个品系等共8个不同来源书虱的毒力和抗性系数Rf,测定了磷化氢浓度为2mg/mL条件下供试各书虱品系的半数击倒时间KT50,分析了其LC50值与KT50值的相关性。结果为:3种书虱的8个品系对磷化氢的抗性差异明显,高抗性的嗜虫书虱的磷化氢抗性比敏感的嗜卷书虱高1000倍以上,各品系书虱的KT50值与Rf值呈正相关,相应LC50值之对数与KT50值的对数呈直线相关。结果表明,磷化氢对书虱成虫的半数击倒时间KT50值可以用来判断书虱抗性大小,并可用于快速判断抗性以指导现场熏蒸。     

磷化氢熏蒸处理对嗜卷书虱不同虫态的致死作用

实验室条件下系统研究了磷化氢(PH3)对储物害虫嗜卷书虱Liposcelis bostrychophila卵、各龄若虫和成虫的致死作用,并选用PH3间歇熏蒸以及PH3与气调交替处理等措施对嗜卷书虱进行处理,比较了不同处理措施对嗜卷书虱种群的控制效果。结果表明,PH3熏蒸处理对嗜卷书虱各虫态有不同的致死效果。对卵而言,24、72和120 h熏蒸处理的LC50分别为0.137、0.045和0.035 mg/L;而24 h熏蒸处理对若虫的LC50在4.285~7.364 μg/L之间,对成虫的LC50为20.404 μg/L;采用25 μg/L的PH3进行24 h熏蒸处理,间隔10 d后再分别进行第2次和第3次熏蒸处理,可以完全控制嗜卷书虱的发生。采用PH3 (12 μg/L)和气调(体积比例为35% CO2,1% O2,64% N2)交替处理能够延缓嗜卷书虱种群抗性的发展,交替处理3~5次可以完全控制嗜卷书虱的发生。     

2006年沈阳世界园艺博览会园区发现Q型烟粉虱的危害

2006年5月到11月间？，沈阳出入境检验检疫局检疫人员在对“2006沈阳世界园艺博览会”园区进境花卉进行检疫监管期间，在园区内及附近的一串红、甘薯等植物上发现粉虱类害虫，寄主植物受害严重。实验室内初步鉴定为烟粉虱Bemisia tabaci（Germadius）。为进一步了解烟粉虱的来源及其生物型，作者利用细胞色素氧化酶i（c01）基因作为分子标记，通过同源性比较和系统发育分析，鉴定所采烟粉虱种群的生物型。该烟粉虱COI基因序列（GenBank登录号为EF608148）与我国云南Q型、浙江Q型和摩洛哥Q型烟粉虱的相应碱基序列具有极高的同源性，相似度达99％：系统发育分析表明该序列与上述Q型烟粉虱序列形成单系（monphyletie）。     

细辛醚对家蝇和淡色库蚊的生物活性

为了进一步确定细辛醚的作用谱和作用方式,测定了其对家蝇和淡色库蚊的触杀、熏蒸和忌避活性。结果表明:细辛醚对家蝇4 h的触杀LD50值为3.45 μg/头;对家蝇、淡色库蚊4 h的熏蒸LC50值分别为5.77和4.24 μL/L;对两者在LC80剂量下熏蒸处理的击倒中时(KT50)值分别为11.64和4.80 min;在1 mg/mL的浓度下,对家蝇的忌避率为81.82%。中毒家蝇依次表现出兴奋、痉挛、麻痹和死亡等症状。     

NbRbohB基因在本氏烟与疫霉菌互作中的功能分析

活性氧(active oxygen species, AOS)在植物抗病中发挥着重要作用,主要由NADPH氧化酶(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase)系统产生.为明确NADPH氧化酶NbRbohB基因在本氏烟与疫霉菌亲和与非亲和性互作中的功能,采用荧光定量PCR技术以及病毒诱导的基因沉默方法探究了NbRbohB基因在本氏烟中对2种疫霉菌抗性中的作用,并利用NADPH氧化酶抑制剂对辣椒疫霉的抗性进行了检测.结果发现:2种疫霉菌均能诱导本氏烟发生氧迸发,且NbRbohB基因可能参与了疫霉菌诱导本氏烟发生的氧迸发过程.该基因沉默后降低了本氏烟对亲和互作辣椒疫霉菌的抗性,但对非亲和互作疫霉菌的抗性没有肉眼可见的影响;NADPH氧化酶抑制剂处理本氏烟后也能降低其对辣椒疫霉的抗性.表明该基因通过介导AOS产生,参与植物对亲和性与非亲和性互作疫霉的抗病反应,在亲和互作中尤为重要.     

靶标抗性点突变基因型检测技术

杀虫剂的不合理使用导致害虫的抗药性日趋严重。抗药性是一种涉及一个或几个昆虫基因的遗传特征。靶标抗性通常与点突变相关,对抗性相关的点突变的快速检测诊断是抗性治理的基础之一。评述了5种基因型检测技术——单链构象多态性、固相微型测序、双向等位特异PCR扩增、实时荧光定量PCR和焦磷酸测序的优缺点及其在突变检测中的应用。     

银胶菊叶对苘麻和稗的化感作用

通过室内培养皿法,研究了银胶菊叶片水浸提液及其乙酸乙酯相、正丁醇相、剩余水相不同极性组分对苘麻和稗种子萌发、幼苗生长及生理生化机制的影响.结果表明,在62.5 g·L-1水浸提液处理下,苘麻和稗发芽率比对照分别降低86.7%和66.6%,对苘麻和稗幼苗根长的抑制率分别为96.4%和87.5%,大于对芽长、鲜重的抑制率,乙酸乙酯相和正丁醇相抑制苘麻和稗种子萌发的作用较强,剩余水相抑制苘麻幼苗生长的作用最强,乙酸乙酯相抑制稗幼苗生长的作用最强;在2 g·L-1浓度处理下,乙酸乙酯相生物活性最高,完全抑制苘麻和稗种子萌发,对苘麻和稗根长、芽长、鲜重抑制率分别为82.6%、90.2%、78.2%和78.8%、86.8%、69.1%;乙酸乙酯相降低了受体的根系活力,提高了其超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性和丙二醛含量.     

Acute and reproductive toxicity of Annona squamosa to Aedes albopictus

The current study involved evaluation of the toxicity of acetone soluble fraction of the ethanol extract of Annona squamosa Linn. seeds on Aedes albopictus (Skuse). Toxicity of fresh sample has been compared with that of solar radiated and heat treated aliquots of the same. Acute toxicity of fresh acetone fraction on adults was evident with LC₅₀ and LC₉₀ values of 15.21 and 60.38 μg/ml, respectively. Larvicidal bioassays recorded LC₅₀ and LC₉₀ values ranging from 0.44 to 5.97 and 1.64-43.36 μg/ml, respectively for different instars. Ovicidal bioassays yielded EC₅₀ and EC₉₀ values of 18.82 and 69.61 μg/ml. The study further revealed ovipositional deterrent and chemosterilant activities of the extract on the target mosquito. Bioassays using solar radiation and heat treated samples of the active fraction have showed toxicity levels similar to those of fresh sample. Chemical analysis of acetone soluble fraction of seed extract of A. squamosa has reveled ethyl oleate and iso-octyl phthalate as major components. Adulticidal, larvicidal, ovicidal, ovipositional deterrent and chemosterilant activities of the fraction on A. albopictus were proved. The investigation further confirmed stability of the active fraction on exposure to solar radiation and high temperature.     

鹰嘴豆象与四纹豆象的分子检测技术

结合聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和酶切方法,对鹰嘴豆象Callosobruchus analis(Fabricius)和四纹豆象Callosobruchus maculatus(Fabricius)的分子检测技术进行了研究。根据两种豆象m tDNACOⅠ基因序列的比对结果设计了2对特异性PCR引物,并筛选到2个特异性内切酶SnaⅠ和MboⅠ,通过PCR反应(最适退火温度为55℃)和PCR产物的酶切反应检测2个近缘种。可靠性检测表明,2对引物针对不同地理种群和个体以及不同DNA浓度的鹰嘴豆象和四纹豆象均能扩增出相应的目的条带。限制性内切酶验证结果表明,PCR技术具有较高的准确性和灵敏度,弥补了形态鉴定的不足。     

In vitro activity and binding characteristics of the hydroxybenzonitriles in chloroplasts isolated from Matricaria inodora and Viola arvensis

The electron transport inhibition, uncoupling, and binding of ioxynil and bromoxynil salts is compared in chloroplast fragments isolated from two weed species with contrasting responses to the hydroxybenzonitriles. Ioxynil Na was three to four times more inhibitory than bromoxynil K towards DCPIP and SiMo reduction in both Matricaria inodora and Viola arvensis. Ioxynil Na was also a more potent uncoupler of PSI-dependent electron transport from ascorbate/DCPIP to methyl viologen. Uncoupling occurred at concentrations higher than those that inhibited electron transport. Binding studies with [¹⁴C]bromoxynil K and [¹⁴C]ioxynil Na salts revealed slightly biphasic curves with no significant difference in the amounts of the two herbicides bound at a given concentration. The ratios of inhibition constant (K_i) and binding constant (K_b) were approximately one for ioxynil Na and three for bromoxynil K. Radiolabelled herbicide displacement studies revealed that ioxynil Na could partially displace bound [¹⁴C]bromoxynil K, but bromoxynil K could not displace bound ioxynil Na at biochemically active concentrations. Ioxynil Na may be a more effective inhibitor than bromoxynil K because it binds more strongly to the thylakoid membrane.     

浙江省二化螟不同种群和大螟对三唑磷的敏感性研究

于2004年用点滴法测定了浙江杭州地区(富阳和余杭)和嘉兴地区(平湖、秀城和秀洲)二化螟、杭州富阳大螟等种群4龄幼虫对三唑磷的敏感性,以及各种群体内与抗药性相关酶系(多功能氧化酶、谷胱甘肽S-转移酶、酯酶和乙酰胆碱酯酶等)的比活力。结果证实上述地区二化螟种群对三唑磷产生了21.1~218.8倍的抗性,其中以富阳和平湖种群的抗性水平较高。二化螟体内多功能氧化酶活性与三唑磷抗性水平呈显著正相关,而乙酰胆碱酯酶活性则呈显著负相关,表明二化螟对三唑磷的抗性可能与多功能氧化酶活性增强和乙酰胆碱酯酶敏感性降低有关。大螟富阳种群对三唑磷的敏感性明显高于二化螟富阳种群,其抗性机制还有待研究。     

Biological and biochemical responses of Biomphalaria alexandrina to some extracts of the plants Solanum siniacum and Artemisia judaica L.

The molluscicidal activity of cold water, boiled water, methanol, ethanol, acetone and chloroform extracts of Solanum siniacum and Artemisia judaica L. plants against Biomphalaria alexandrina snails was carried out. The tests revealed plant’s ethanol extract was more toxic to the snails than the other tested extracts. Therefore, it was tested against snails’ fecundity (M_x), reproduction rate (R₀) and their infection with Schistosoma mansoni miracidia. In addition, biochemical parameters and the activities of some enzymes in tissues of snails treated with the two tested plants were determined. As well, glucose concentration in snails’ hemolymph was evaluated. Exposure of B. alexandrina snails to plant’s ethanol extract led to a significant reduction in their survival and snails’ fecundity, reproduction rate. In addition, it caused a considerable reduction in the infectivity of S. mansoni miracidia to the snails. Also, it caused a reduction in number of cercariae per snail during the patent period and in the period of cercarial shedding. The results revealed that the glucose concentration in hemolymph and Lactate level in soft tissues of treated snails were increased (P < 0.001) while glycogen, total protein, the lipid content and the pyruvate level in snail’s tissues decreased (P < 0.001). The activities of lactic dehydrogenase (LDH), pyruvatekinase (PK) and cytochrome oxidase (CY) enzymes in homogenate of snail’s tissues were reduced (P < 0.001) in response to treatment with the two tested plants while protease (PR) activity increased (P < 0.001). It is concluded that the application of LC₂₅ of ethanol extract of S. siniacum and A. judaica L. may be helpful in snail control as it interferes with the snails’ biology and physiology.