土传黄瓜立枯病高效拮抗菌的筛选鉴定及其生物效应

采用平板对峙法从黄瓜根际土壤中分离出的400余株细菌菌株中筛选出16株对立枯丝核菌Rhizoctonia solani具有拮抗效果的菌株,抑菌带直径在0.81～1.93 cm之间。并从中选出3株抑菌带直径在1.6cm以上的菌株N33、N35和N43,结合形态、生理生化特性及16S rDNA序列比对分析,鉴定N33菌株为假单胞菌属Pseudomonas sp.,N35和N43菌株为芽胞杆菌属Bacillus sp.。通过在黄瓜育苗基质中添加选育的高效拮抗菌株,观测其对黄瓜苗生长的促进作用以及对立枯病的防治作用,3株菌株均具有促进黄瓜苗期生长和防治苗期立枯病的作用,其中N43菌株促生及防病效果均最显著,地上部鲜重比对照处理增加62.16%,防治效果达62%。     

利用真菌Laetisaria arvalis和食菌弹尾目昆虫Proisotoma minuta防治棉苗立枯病

温室试验表明,用 L.arvalis 的燕麦粉培养物拌种,可明显减轻由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)所致的棉苗立枯病.拌种处理优于直接施入土壤;用 L.arvalis 和Proisotoma minuta 混合处理的防病效果高于二者单独使用.     

枸骨内生菌No.2的鉴定及其对黄瓜立枯病的生防作用

从枸骨植物中分离到一株对立枯丝核菌Rhizoctonia solani具有抑制作用的内生真菌(编号为No.2),借助Biolog微生物自动分析仪对该真菌进行了分类鉴定,根据菌株的生理生化和形态特征,初步确定该菌株为哈茨木霉菌Trichoderma harzianum Rifai。双重培养试验表明,该哈茨木霉菌对黄瓜立枯病菌存在竞争和寄生作用;盆栽试验测定结果表明,喷施哈茨木霉菌胞外代谢产物木霉素的1 000倍液7 d后,其对黄瓜立枯病的保护和治疗效果分别为88.89%和95.83%。施药后各处理对黄瓜的株形、叶色均未产生药害症状,表明其安全性较好。     

拮抗姜瘟病内生细菌的筛选及其生防效果研究

姜瘟病是由青枯雷尔氏菌Ralstonia solanacearum引起的一种土传细菌型病害,该病害严重制约生姜产业的发展。本研究对生姜根内细菌进行分离,初步筛选出7株青枯菌的拮抗细菌,经鉴定,所得拮抗细菌属于阿氏肠杆菌Enterobacter asburiae和印度假单胞菌Pseudomonas indica。拮抗细菌表现出较强的青枯菌拮抗活性,其代谢物对青枯菌的抑制率达到90%以上。同时,拮抗细菌表现出较强的铁竞争优势,其代谢物中嗜铁素含量显著高于青枯菌代谢物。盆栽试验发现,所筛选的拮抗细菌能够在生姜根内有效定殖,并显著降低生姜根际青枯菌密度,姜瘟病发病率由90.10%降至21.43%,具有良好的生防效果。该研究为生姜地区姜瘟病防治提供重要的微生物资源。     

生防放线菌ZZ-9颗粒剂的研制及对黄瓜立枯病的防治效果

娄彻氏链霉菌Streptomyces rochei ZZ-9是一株有广谱抑菌活性的生防菌株。本研究采用菌丝生长速率法,通过对载体、稳定剂、崩解剂、粘结剂、湿润剂的筛选,确定娄彻氏链霉菌ZZ-9颗粒制剂的最佳配方：菌液与凹凸棒土比例为2:5,碳酸钙1%,氯化镁2%,聚乙烯醇1%,十二烷基苯磺酸钠0.5%。试验结果显示制备的ZZ-9颗粒剂有效活菌数为1.19×10⁸ cfu/g,粒度为93.5%,水分含量2.5%,水中崩解时间96 s,pH值6.35,硬度为10%。盆栽防病试验结果表明,制备的ZZ-9颗粒剂在施用量为3 g/盆时,对黄瓜立枯病的防治果最佳达到76.92%。对黄瓜幼苗生长的促生作用最明显,发芽率、株高、根长和鲜重分别较对照提高了9.34%、29.52%、27.54%、22.96%。     

枯草芽孢杆菌微囊剂的制备及其对番茄立枯病的防治效果

为开发环境相容性好、贮藏稳定性高的生物农药新剂型,采用喷雾干燥法制备了枯草芽孢杆菌微囊剂。通过单因素试验确定该微囊剂壁材麦芽糊精与芯材枯草芽孢杆菌发酵液(以下简称发酵液)的最佳配比;通过正交试验优化了喷雾干燥条件;通过田间试验验证了该微囊剂对番茄立枯病的防治效果。结果表明:制备枯草芽孢杆菌微囊剂时,壁材与芯材的最佳配比为m(麦芽糊精)∶V(发酵液)=1∶1;喷雾干燥的最优条件为进风温度125℃,进样流量750 m L/h,喷雾压力0.20 M Pa;所制备微囊剂常温贮存360 d后,菌体存活率仍高达91.36%,显著高于对照枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。田间药效试验表明,该枯草芽孢杆菌微囊剂用量为300 g/hm2(芽孢浓度为1.5×107cfu/m2)时,对番茄立枯病的防效最高,为72.76%。     

松烂皮病内生拮抗细菌的筛选、生防效果及华山松的生理响应

为探究内生细菌对华山松烂皮病的生防效果及其生理响应,采用平板涂布法和对峙培养法从健康华山松树皮上分离筛选抗烂皮病菌Cenangium ferruginosum的拮抗菌株,运用形态学、生理生化及分子生物学对其进行鉴定;并利用喷雾法研究其对华山松苗烂皮病的盆栽防治效果及苗木各生理指标的变化,观测其对田间发病华山松病斑的防治效果.结果显示,分离得到具有优良拮抗效果的菌株Ba4,经鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens;其发酵原液盆栽防治效果可达90.15%,稀释至10⁵防治效果也有17.77%,发病率和病情指数均下降.接种病原菌30 d后,不同浓度Ba4菌剂处理的苗木丙二醛含量均减少,木质素、可溶性蛋白和可溶性糖含量均增加;丙二醛含量与发病率和病情指数呈显著正相关,与防治效果呈显著负相关;木质素、可溶性蛋白和可溶性糖含量则与其相反.田间试验中原液和稀释倍液(10、10²和10³)的病斑治愈率均超过80%.表明菌株Ba4对松烂皮病有良好的防治效果,能调节华山松抗性物质的合成.     

立枯丝核菌融合群AG-5生防菌株筛选、鉴定及其防治效果

为探索绿色、安全的玉米纹枯病防治方法,以玉米种子为材料分离种源内生细菌,通过平板对峙法和菌丝生长抑制法筛选对玉米纹枯病病原菌——立枯丝核菌Rhizoctonia solani融合群AG-5有生防潜力的菌株,通过形态学观察和分子生物学技术鉴定生防菌株的分类地位,并测定生防菌株发酵的最佳时间、抑菌物质的热稳定性和对菌核萌发的抑制作用,利用盆栽试验测定其发酵液对立枯丝核菌融合群AG-5的防治效果。结果表明：从玉米种子中分离到11株种源内生细菌,其中有6株对立枯丝核菌融合群AG-5有拮抗作用,菌株SF-11的抑菌效果最强,抑制率为77.35%;结合形态学特征、LS-BSR及核心基因系统发育分析结果,将菌株SF-11鉴定为多黏类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa;菌株SF-11培养27 h时抑菌物质产量达到最高,对立枯丝核菌融合群AG-5的抑制率为88.10%;抑菌物质在80℃及以下稳定,且可抑制立枯丝核菌融合群AG-5菌核的萌发;施用菌株SF-11的保护效果为84.59%,显著高于其治疗效果（75.49%）,但与对照药剂井冈霉素的防治效果差异不显著。表明多黏类芽胞杆菌SF-11菌株具有开发为玉米纹枯病生物防治资源的潜力。     

烟草立枯病病菌人工诱发病害效果比较初探

采用人工接种方法,将烟草立枯病病菌菌株TRs-5接种于烟草云烟87的不同部位,观察其发病效果。研究了菌株接种体在不同接种温度和培养时间对发病效果的影响,并比较了其与稻纹枯病病菌菌株RRs08-22-2接种于水稻品种中优679的致病效果。结果表明,菌株TRs-5既能侵染烟草幼苗近地表的茎基部,导致其发病,也能侵染烟草成株苗叶面形成坏死病斑。在温度28℃环境下接种比在20℃的导致发病更严重。用培养2 d的菌丝体接种比培养4 d的导致更大的病斑。在寄主烟草上,菌株TRs-5比菌株RRs08-22-2的致病力强,但在寄主水稻上,菌株TRs-5比菌株RRs08-22-2的致病力弱。初步发现这2个病菌与2个寄主之间存在致病专化现象。     

哈茨木霉防治水稻纹枯病研究

为测定哈茨木材霉菌株ＴＣ３和ＮＦ９对水稻纹枯病的防治效果及防治过程中不同因素对防治效果原影响,于中国水稻研究所富阳基地的温室和网室内通过人工接种诱发水稻纹枯病,分别用茨木霉菌株ＴＣ３和ＢＮ和ＮＦ９进行防治。研究结果表明,菌株ＴＣ３和ＮＦ９对水稻纹枯病均具有一定的防治效果,最高防效分别为７７．５６％和８３．０９％,同时还分析了哈获准木霉防治水稻纹枯病的施用方法、施用适、施用数量及其对不同水稻品种苗期     

鸭粪中1株水稻纹枯病菌拮抗细菌的鉴定

为探索稻鸭复合生态系统抑制水稻纹枯病发生的作用机理,以从鸭粪中分离到的1株拮抗细菌A168对水稻纹枯病菌的拮抗效果进行了研究。测定了其对水稻纹枯病菌的拮抗作用及其抑菌谱;根据培养性状、形态特征、生理生化测定、扫描电镜观察及16S rDNA序列分析对其进行了鉴定;构建了包括其在内的13株相关种属菌株的系统发育树。A168菌株对水稻纹枯病有明显的拮抗作用,且对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)和油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)有抑制作用,抑菌谱广;A168菌体杆状,革兰氏染色阳性、芽孢中生、周生鞭毛、16S rDNA分析与其亲缘关系较近菌株Bacillus cereus(AJ577288.1)的同源性达99%,结合形态和生理生化特征,鉴定A168菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),其16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为GQ118339。A168为开发防治水稻纹枯病生防制剂提供了依据。     

水稻纹枯病拮抗细菌的筛选与利用

稻种是生防菌的主要来源之一,为在浙江稻区获得对水稻纹枯病具良好防治效果的生防菌,有必要明确该稻区不同栽培方式下稻种拮抗菌的分布及其特性.从3种不同栽培方式的稻种上分离并测定水稻纹枯病拮抗细菌,发现撒播稻稻种上拮抗菌比率显著高于条播和移栽稻.从1000个细菌分离物中筛选出13个拮抗能力强的菌株,经致病性测定发现S270262在水稻植株上产生病斑;对12个非致病拮抗菌进行稻种细菌化、盆栽测定和田间小区试验及Biolog鉴定,结果表明10个拮抗菌对稻苗具促生作用,2个有抑生作用;盆栽和田间防治效果好的菌株为T300363、S300265和S90132,它们分别被鉴定为Salmonella subsp.1 G、Pseudomonas aeruginosa和Pseudomonas spp..     

枯草芽孢杆菌G3菌株抑制立枯丝核菌菌核形成的影响因子分析

产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌剂在土壤中可抑制水稻纹枯病菌菌核形成。菌剂的适宜剂量为 1 1 5× 1 0 8cfu/g。温度、土壤含水量和菌剂处理的时间是影响效果的因素。 1 5～ 30℃培养 ,G3菌剂处理的菌核减退率从 35 2 %逐步上升到 77 8%。在 1 6 %～ 2 4 %土壤含水量的条件下 ,菌核减退率从 75 5%下降到 2 1 7%。接种病原真菌前施用G3菌剂比接种后效果更好。来源于湖南、山西、云南和上海的不同区域土壤对防效没有显著影响。菌剂添加豆粕粉、壳聚糖、葡萄糖和淀粉有不同程度的增效作用 ,尤其是壳聚糖 ,增效率达 2 9 2 %。     

木霉对玉米纹枯病的生物防治

为明确木霉菌在玉米纹枯病防治上的作用,研究了从雅安郊区大田玉米根际土壤中分离到的18个木霉菌株对立枯丝核菌的抑制作用及对玉米纹枯病的田间防治效果.对峙培养结果表明,这些木霉菌株对立枯丝核菌的抑制率为39.44%～84.98%;而木霉发酵滤液的抑菌作用为13.48%～85.81%.对峙培养和液体发酵滤液的抑菌测定相结合,筛选出木霉菌株T8、T2、T13,经鉴定分别为哈茨木霉Trichoderma harzianum、黄绿木霉Trichoderma aureoviride和长枝木霉Trichoderma Longibrachiatum.用这3种木霉的固体培养物作进一步的田间防治试验,防治效果分别为62.75%、64.48%、68.52%,比井冈霉素(49.68%)效果高;T13菌株的发酵滤液的防治效果仅为40.07%.3株木霉固体培养物对玉米产量影响显著,增产率依次为29.77%、43.37%、54.21%.     

拮抗内生细菌B20-006菌株对玉米主要防御酶系的影响

笔者通过对玉米纹枯病拮抗内生细菌筛选研究发现,利用拮抗内生细菌B20-006进行种子包衣处理,对玉米纹枯病的防效最高达67．9％。同时通过抗利福平B20-006突变菌株回接再分离及利用免疫胶体金银染色技术证明,B20-006菌株可通过根系侵人,具有沿维管束进行转运的能力。为进一步明确其生防机理,本文系统研究了B20—006菌株与宿主玉米相互作用过程中主要防御酶系苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶及酯酶等的比活性变化。     

铜绿假单胞菌ZJ1999对水稻纹枯病的防治及其在水稻上的定殖

利用拮抗菌铜绿假单胞菌ZJ1999产生的粗提液进行防治水稻纹枯病研究的结果表明，抑制病菌侵染的活力随着粗提液浓度提高和处理时间的延长而增强。该菌株的定殖时间与最初引进时的浓度密切相关，其最低应用浓度为10^8cfu／ml，在接种纹枯病病菌后第一天的喷施防效最佳。拮抗菌ZJ1999在发病的秧苗、成株期植株茎杆和叶片上，14d后的菌量分别维持在10^2-10^3和10^3～10^4cfu／g。     

拮抗细菌B20-006对玉米根系内生细菌种群的影响

 Treatment of corn seeds with Bacillus subtilis strain B20-006, a potential biocontrol agent, had no effect on type of endophytic bacteria on corn. However, it stimulated endophytic bacterial reproduction in the plants. B20-006 did not affect the original population of endophytic bacteria in corn roots in early stage. In late stage, population of endophytic bacteria in corn roots treated with the bacteria was significantly higher than CK. Colonization of the bacteria in corn roots would benefit the micro-ecological resistance of cultivars against the diseases. The results suggested that strain B20006 could enhance the percentage of antagonistic endophytic bacteria against Rhizoctonia solani. The percentage in the resistant cultivar, Lianyu 11 was higher than in the susceptible one, Lianyu 13.     

水稻纹枯病生防内生菌糖蜜草固氮螺菌的分离与鉴定

 本文首先对砂仁内生细菌进行分离,以水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)为靶标菌对获得菌株进行离体拮抗活性、盆栽及田间试验测定。结果表明：获得的27株内生细菌中有4株具有较好的离体抑菌活性,其中SRJ2-4抑菌效果最好,抑菌带达到18 mm;SRJ2-4的盆栽防效及田间防效分别为80.7%与79.4%,与其它菌株相比达极显著水平。SRJ2-4处理的亩产量为488.79 kg,高于其他药剂处理。对该菌株形态、生理生化及16S rDNA序列进行分析,将该内生菌鉴定为糖蜜草固氮螺菌(Azospirillum melinis)。