草鱼出血病冻干细胞疫苗与三联灭活疫苗在草鱼养殖中的应用

草鱼出血病冻干细胞疫苗与细菌性三联灭活疫苗可以有效地提高草鱼对"四病"的抵抗能力,对照试验发现,接种"四联"疫苗后,草鱼"四病"的发病率试验组比对照组低21.55%,试验组平均亩产比对照组高181.1千克/亩。试验结果证明;接种"四联"疫苗是防治草鱼"四病"的有效途径。     

应用疫苗浸泡草鱼受精卵的免疫效果

应用疫苗浸泡草鱼受精卵的方法，防治草鱼种出血病效果明显，保护率达７８％     

草鱼多联疫苗的制作及应用

草鱼多联疫苗的制作及应用草鱼易患出血、肠炎、烂鳃、赤皮病，成活率较低（一般为３０％左右），成为草鱼丰产的制约因子。因而攻克草鱼“四大病”成为水产工作者的一项重任。湖北省黄冈地区水产科学研究所，近几年来与武汉市水产科研所合作，成功地研制出了草鱼多联灭活...     

草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗的制备及其免疫效果的研究

草鱼出血病是一种病毒性疾病，而免疫防治是该病最有效的防治方法之一，因此疫苗研制对该病的防治意义重大。多年来鱼用疫苗制品为组织灭活疫苗，但它要在发病季节从自然界收集材料，因而几乎不可能大批量生产，往往冬末春初放养草鱼种期间因缺乏疫苗而错过了预防免疫时机。采用离体细胞培养法制备疫苗就能克服上述缺点。     

草鱼夏花注射疫苗养殖对比试验

针对草鱼"老三病"对养殖成活率的严重影响,探索在草鱼夏花养殖一个月后(体重8.2～9.7g)注射三联疫苗,增强其免疫力后继续养成冬片.在南昌市周边地区试验推广,池塘总面积超100hm2.2010年对南昌县蒋巷镇1.6hm2的养殖池塘进行分析,结果表明注射疫苗的草鱼,其养殖成活率平均为87.6%;未注射疫苗的草鱼,其养殖...     

草鱼出血病基因疫苗的免疫效果

为探讨含有草鱼呼肠孤病毒外衣壳蛋白VP6基因的重组基因疫苗对草鱼出血病的免疫效果,将重组基因疫苗分别配制为10、30和60μg三个梯度,同时设30μg pFastBacTMDual空载体组,均以等体积的氢氧化铝佐剂为免疫增强剂,对草鱼进行注射,以未经处理的草鱼作为对照组。定期采血测定抗体效价,最后对各组草鱼进行攻毒试验并计算死亡率和免疫保护力。结果显示：注射疫苗的三组草鱼均产生抗体,10μg组效价为1：6～1：11;30μg组为1：9-1：13;60μg组为1：11-1：17,且各组效价均在第28天测定最高,免疫保护率依次为100％、100％和95％,而空载体组和对照组为70％和0％。研究表明,疫苗能够诱导草鱼产生免疫反应,为草鱼出血病核酸疫苗的生产应用和产业化提供了重要的理论依据。     

草鱼四联佐剂疫苗的制备及特性分析

采用PHA作为非特异性免疫刺激剂与出血病毒、荧光假单胞菌、肠型点状产气单胞菌、鱼害粘球菌4种纯抗原，以最佳方式配合制成四联佐剂疫苗，同时对四联佐剂疫苗的特性进行了分析。结果表明：四联佐剂疫苗的免疫原性极强，防病效果好。     

草鱼疫苗在池塘养殖中的应用

为有效控制草鱼病毒性出血病、细菌性烂鳃、赤皮病和肠炎病这四种疾病的发生,国家大宗淡水鱼产业技术体系上海综合试验站于2016年在松江试验片立项进行《草鱼出血病冻干细胞疫苗与细菌性烂鳃病、肠炎病、赤皮病三联灭活疫苗在池塘养殖中的应用》试验,取得显著成效。     

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)特性和对鲤春病毒的敏感性

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)性腺细胞系(GCO)是中国科学院水生生物研究所在20世纪70年代开展草鱼出血病研究时建立的一株细胞系,迄今已传至300多代,在中国鱼类病毒学研究领域发挥了重要作用.本研究采用形态学观察、细胞生长曲线测定、细胞周期测定、细胞核型分析、细胞凋亡检测、电镜观察等方法,对GCO的生长特性及鲤春病毒血症病毒(SvCv)在该细胞中的增殖特性等进行了研究.结果显示,GCO细胞的最适生长温度为25℃,在M199和MEM等细胞培养液中均能较好地生长,培养液中最适的胎牛血清浓度为10％.测定了GCO细胞系对SVCV病毒的敏感性,发现与鲤(Cyprinus carpio)上皮瘤细胞系(EPC)、肥头鲤(Pimephales promelas)细胞系(FHM)、大鳞大麻哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)胚胎细胞系(CHSE-214)等世界动物卫生组织(OIE)推荐和各检测实验室常用的鱼类细胞系相比,GCO细胞系对SVCV表现出非常高的敏感性.生长盐线、电镜观察和凋亡实验显示,SVCV能引起GCO细胞系出现明显而稳定的细胞病变,引起GCO细胞系出现凋亡,并在细胞质中大量增殖.结果表明,GCO细胞系适用于SVCV病毒的分离、检测以及病毒致病性的有关研究.GCO细胞的适宜生长温度为15-28℃,这一特点将使它可以广泛地用于多种水生动物病毒的分离.     

Preparation of Chitosan/Rosemary Extract Nanoparticles and their Application for Inhibiting Lipid Oxidation in Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) during Cold Storage

This study investigated a preparation of chitosan/rosemary extract nanoparticles (CS/RE-NPs) based on the principle of ionic gelation and their application for inhibiting grass carp lipid oxidation. CS/RE-NPs were found to have a rosemary extract (RE) encapsulation efficacy of 40.33%, average particle size of 199.90 nm, and zeta-potential of 35.60 mV. Structural analysis using UV–vis spectroscopy, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), differential scanning calorimetry (DSC), and transmission electron microscopy (TEM) indicated that the RE s were well incorporated into the CS-NPs. Treatment of the CS/RE-NPs inhibited lipid oxidation of the grass carp during cold storage, and the peroxide value (PV), thiobarbituric acid-reactive substance (TBARS) value, and lipoxygenase (LOX) activity of the CS/RE-NP-treated samples were lower than those of RE and CS-NP-treated samples, respectively. CS/RE-NP-treated samples also slowed the growth of bacteria, enhanced the organoleptic quality, and prolonged the shelf life of grass carp. This study suggested that CS/RE-NPs can be used as an antioxidant delivery system to inhibit lipid oxidation and improve food quality.     

草鱼头肾发生组织学与免疫组织化学观察

为研究草鱼头肾的组织发生发育,应用组织学技术,对1 ～ 103 dph(day post hatching)的草鱼头肾进行观察分析,描述了头肾的组织结构变化及免疫球蛋白M(IgM)阳性细胞及过碘酸雪夫氏(PAS)阳性细胞的发生和分布.结果显示,6 dph,出现头肾原基,原基中原肾管分化形成的肾小管之间出现散在的干细胞.7 dph至16 dph,造血干细胞逐渐分化成不同类型的细胞,免疫细胞数量逐渐增加;17 dph至103 dph,肾小管逐渐退化至完全消失,网状内皮系统支持下的淋巴造血组织构成头肾的主要部分.40 dph肾上腺细胞团开始出现.65 dph与成鱼头肾的组织结构接近,作为淋巴-肾上腺组织存在.PAS阳性细胞最早在7 dph出现;IgM阳性细胞最早出现于17 dph;之后,IgM阳性细胞及PAS阳性细胞逐渐增多,分布于整个头肾组织.研究表明,65 dph草鱼头肾在组织上发育基本成熟;头肾作为草鱼免疫器官的早期发育可以分为3个阶段:无参与免疫反应的细胞、只具有参与非特异性免疫反应的细胞以及参与非特异性免疫反应及特异性免疫反应的细胞组织结构逐步发育完善.     

草鱼仔鱼耳石茜素络合物标记特征研究

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国主要增殖放流经济鱼种之一,探索有效的标志方法对其增殖放流的技术保障和效果评价无疑至关重要。本研究对草鱼仔鱼耳石进行了1 d茜素络合物(ALC)荧光标记,以确认该方法的可行性及适宜条件。结果显示,微耳石、矢耳石和星耳石均能被标记。标记环在可见光及荧光下均能被观察到。其中,后者使用蓝色激发光(WBS)观察效果最佳。总体上,微耳石的标记效果最好,矢耳石次之。ALC浸泡对鱼体的生存及生长无显著影响,耳石上荧光信号出现和消失与鱼体开始浸泡和结束均存在约12 h的时滞。浸泡标记过的实验鱼在经过长达60 d的恢复续养后,标记环仍清晰可见,表明ALC标记效果明显且可长期存在。该方法对草鱼仔鱼的增殖放流标记具有较强的可行性。     

草鱼和青鱼消化酶的分布特性

选择草鱼(C tenopharyngodon idellus)和青鱼(Mylopharyngodon piceus)作试验鱼,对它们消化道的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、淀粉酶以及三酰基甘油脂酶沿消化道及肝脏和胰腺中的活性分布进行了比较研究。研究表明:这些酶在消化道中呈现不同的分布规律,在肝脏和胰腺中酶的活性高于在消化道中相应酶的活性;同种鱼不同消化酶的分布有所差别;两种鱼消化组织中的各种酶活性分布规律也有差别;青鱼和草鱼的主要消化酶在不同消化器官中的分布有较大差别。     

草鱼呼肠孤病毒疫苗的研发与应用

正随着水产养殖产业的不断扩大,我国已成为世界上最大的水产品生产消费和进出口国家。2000年至2013年,水产养殖产量以每年5%~6%稳步增长,在2013年,中国水产养殖产量达4.542×10~7t,占全球水产养殖总产量的60%以上~[1]。根据世界粮农组织数据显示,2015年我国水产养殖总量达7.430×107 t。这些数据表明我国水产养殖业不仅保障了中国水产品的市场供应,也对世界水产品供     

The Effects of Chitosan Coating on Biogenic Amines Inhibition and Microbial Succession of Refrigerated Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus) Fillets

Chitosan coating and plastic wrap coating were investigated for their effects on the quality of grass carp fillets stored at 4 ± 1ºC for a period of 20 days. The fillets were divided into groups of untreated (Control), wrapped with sterile preservative film (PE), and chitosan-treated (1, 2, and 2.5% w/v corresponding to CH1, CH2, and CH2.5, respectively). The final result demonstrated that chitosan coating has positive effects on the microbial inhibition of total volatile count (TVC), lactic acid bacteria (LAB), Enterobacteriaceae, Pseudomonas, H₂S-producing bacteria (including Shewanella putrefaciens), and Staphylococcus. With regard to the results of biogenic amines (BAs), putrescine (PUT) and histamine (HIS) were the major amines, and their concentration was significantly (p < 0.05) higher in Control and PE than in chitosan-coated fillets at the end of storage. The final concentration in Control, PE, CH1, CH2, and CH2.5 was 143.7, 160.1, 83.0, 59.4, and 44.2 mg/kg for PUT and 228.0, 57.1, 4.1 3.2, and 2.9 for HIS, respectively. Chitosan coating was found to inhibit the increase of total volatile base nitrogen (TVB-N), microbial population, and total BAs and prolong the shelf life of grass carp fillets. However, sterile plastic wrap coating had little positive effect on maintaining the quality of grass carp fillets during refrigerated storage.     

Quality Evaluation of Grass Carp (Ctenopharyngodon idella) Protein Concentrate Supplemented Noodles

ABSTRACT

The aim of the present study was to evaluate the quality of wheat flour noodles supplemented with 0%, 10%, 20% and 30% grass carp protein concentrate (GCPC). Proximate composition, color analyses, cooking properties (cooking time, cooking loss, swelling index and water absorption index), texture profile analyses (TPA), and sensory evaluations were performed. Significant (p ≤ 0.05) increases in the crude protein (18.94–35.19%), crude fat (0.88–1.06%), and ash (0.89–1.02%) were recorded for GCPC supplemented cooked noodles. Brightness (L*), redness (a*) and yellowness (b*) of GCPC 10–30% fortified cooked noodles was recorded as 77.00–69.97, 1.50–2.81 and 19.08–22.25, respectively. Cooking loss (CL) and optimal cooking time were significantly (p ≤ 0.05) increased with increased level of GCPC from 0%-30%, with readings of 6.13% ?8.90% and 7.53–11.77 min, respectively. Swelling and water absorption indices showed a decreasing trend at 2.33–1.77 and 102.6–78.49%, respectively. A significant (p ≤ 0.05) decreasing trend in hardness (24.50–19.03N) was observed for cooked noodles with increased level of GCPC, while the remaining TPA parameters were significantly different at p> .05. Sensory analyses showed higher preference for control noodles and noodles fortified with 10% GCPC.     

草鱼呼肠孤病毒AH528株全基因组特征及进化分析

草鱼出血病是由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)引起的严重危害1~2龄草鱼的一种传染性疾病。本研究从安徽合肥地区患典型草鱼出血病的病鱼组织中分离到1株新的GCRV致病株,暂命名为GCRV-AH528。鱼体人工感染实验结果显示,实验鱼出现典型的出血病症状:体背发黑,鳍基部、腹部、口腔、鳃丝、肠道充血发红。全基因组特征分析显示,GCRV-AH528由11个双链RNA节段组成,节段大小在1027~3925 bp之间,AT平均含量为50.2%,GC平均含量为49.8%。与其他GCRVⅡ型毒株相比,L1节段在701~702位置缺少3个核苷酸(TAT),少编码1个酪氨基;M4节段出现突变,含2个开放阅读框,编码2个非结构蛋白NS9和NS69。所有节段两端均含有6 bp保守的末端核苷酸序列5'-GUAAU/CU…UU/GCAUC-3';另除L1、M6节段外,其余9个节段均在编码区两侧发现5~9 bp的颠倒互补序列。GCRV-AH528与其他呼肠孤病毒核苷酸平均相似度在37.1%~98.1%之间;编码蛋白平均相似度在24.3%~98.3%之间。基于VP1蛋白的聚类分析结果显示,该病毒属于水生呼肠孤病毒属,在氨基酸水平上与典型株GCRV-873株的进化关系较远。本研究结果表明,该毒株为一株新的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型致病株。     

草鱼洄游适宜流速条件与适应阈值

洄游通道的连通性及其水文条件,是制约鱼类正常洄游和产卵繁殖的关键因素,现有的生态流量相关研究更多侧重于产卵场栖息地模拟,忽略了鱼类洄游水流条件的重要性。为了探究流速条件对鱼类洄游上溯的影响,选取体长(55±5)cm的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验对象,通过搭建鱼类洄游仿真河道,营造不同的流速工况,观察不同情景方案下实验鱼群上溯洄游情况,并利用模糊逻辑法对鱼类上溯洄游率、平均上溯时间及上溯持续性等实验参数进行综合分析,探索草鱼洄游的适宜流速条件与适应阈值。结果显示,在流速0.20m/s以下时,草鱼基本无上溯行为;流速0.25～0.80m/s,70%样本在15min内完成上溯,但0.25～0.30m/s时,鱼群上溯缺乏明显的持续性;0.90～1.00m/s时,80%以上样本在5min快速完成上溯;流速超过1.1m/s时,上溯成功率明显降低。研究表明,实验草鱼洄游的适宜流速范围是0.40～1.00m/s,而刺激草鱼洄游的最小流速阈值是0.20m/s。相关结果可为河流生态水力学模拟和河流生态修复以及水利工程生态调度提供技术支撑。